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枸杞子-丹参诱导穆勒细胞重编程治疗视网膜色素变性的实验研究

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中国中药杂志 2024年第11期49卷 3040-3049页

作者：宋厚盼欧晨熊萌蒋鹏飞曾梅艳逯晶彭俊周亚莎杨毅敬彭清华湖南中医药大学中医诊断学湖南省重点实验室湖南长沙410208 湖南中医药大学中医诊断研究所湖南长沙410208 湖南中医药大学中医学院湖南长沙410208 湖南中医药大学中医药防治眼耳鼻咽喉疾病湖南省重点实验室湖南长沙410208

探讨滋阴活血明目药对枸杞子-丹参(Lycii Fructus-Salviae Miltiorrhizae Radix, LFSMR)抑制穆勒细胞(Müller cell,MC)胶质化,促进MC重编程转分化为视网膜神经细胞治疗视网膜色素变性(retinitis pigmentosa, RP)的效应及机制。将12只C57小鼠作为正常对照组,48只转基因RP(rd10)小鼠随机分为模型组、阳性对照组和LFSMR低、高剂量组,每组12只。HE染色检测视网膜病理改变,视网膜电图检测视网膜功能,眼底光学相干断层扫描检测视网膜厚度并进行眼底照相,激光散斑灌注成像检测视网膜局部血流,数字PCR检测视网膜神经细胞相关基因表达,免疫荧光法检测视网膜神经细胞相关蛋白表达。LFSMR可明显改善rd10小鼠视网膜病理改变;LFSMR可明显增加小鼠视网膜a波和b波振幅;LFSMR可显著增加小鼠视网膜厚度;LFSMR可明显恢复RP病变过程小鼠眼底损伤;LFSMR可显著提升RP病变过程小鼠视网膜血流量;LFSMR可显著抑制RP发病过程胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein, GFAP)mRNA表达,上调性别决定域Y链蛋白2(sex determining region Y box protein 2, SOX2)、双链复合蛋白6(paired box protein 6, Pax6)、视紫红质(rhodopsin)、蛋白激酶C-α(protein kinase C-α, PKCα)、突触融合蛋白(syntaxin)、胸腺细胞抗原1.1(thymic cell antigen 1.1, Thy1.1)mRNA表达;LFSMR可显著抑制GFAP蛋白表达,提升SOX2、Pax6、rhodopsin、PKCα、syntaxin、Thy1.1蛋白表达。LFSMR可逆转rd10小鼠视网膜病理改变,改善视网膜功能和眼底表现,增加视网膜厚度,提升视网膜局部血流量,发挥治疗RP的效应。LFSMR的作用机制可能与抑制穆勒细胞胶质化,促进穆勒细胞重编程转分化为各类视网膜神经细胞有关。

关键词：枸杞子丹参视网膜色素变性穆勒细胞胶质化重编程

枸杞子结合多酚碱水解与酸水解提取工艺的比较和产物分析

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天然产物研究与开发 2024年第4期36卷 632-643页

作者：王妍曾文俊张玉婷布尔汉·洁吾海尔阿依李艳萍丁建宝李娆娆杨晋北方民族大学化学与化学工程学院国家民委化工技术基础重点实验室银川750021 宁夏五行科技有限公司银川750001 中国中医科学院中药研究所北京100700 宁夏天然药物工程技术研究中心银川750021

为了全面评估枸杞子中的酚类成分,本研究分别利用碱水解和酸水解法制备了其中的结合多酚(non-extractable phenolic compounds, NEPC)。选取Box-Behnken实验设计建立了酸或碱的浓度、水解时间和料液比等与NEPC得率之间的数学模型,并优... 详细信息

为了全面评估枸杞子中的酚类成分,本研究分别利用碱水解和酸水解法制备了其中的结合多酚(non-extractable phenolic compounds, NEPC)。选取Box-Behnken实验设计建立了酸或碱的浓度、水解时间和料液比等与NEPC得率之间的数学模型,并优化了水解工艺参数。碱水解过程中的时间对NEPC得率影响显著,而料液比对酸水解的结果影响较大;最佳工艺条件下,碱水解和酸水解获得的NEPC分别为0.65±0.05 mg/100 g和0.52±0.03 mg/100 g。利用UPLC-Q-TOF-MS,从水解产物中解析了11种化合物,主要是苯丙素衍生物。11种化合物都可在酸水解产物中被检出,而碱水解产物中仅鉴定出4种物质。研究结果表明,碱水解能得到更多的NEPC,酸水解产物则表现出良好的化合物多样性,因此制备NEPC时,应根据不同的研究目的选择水解方法。

关键词：枸杞子结合多酚碱水解酸水解工艺优化产物分析

枸杞子-菊花不同比例配伍对小鼠视网膜损伤的改善作用研究

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中国中药杂志 2024年

作者：李冰郭盛朱悦王学森魏丹丹康宏杰张文华段金廒南京中医药大学中药资源产业化与方剂创新药物国家地方联合工程研究中心/江苏省中药资源产业化过程协同创新中心/国家中医药管理局中药资源循环利用重点研究室宁夏枸杞创新中心百瑞源枸杞股份有限公司

旨在比较枸杞子-菊花不同比例配伍对小鼠视网膜损伤的改善作用差异，并揭示其作用机制。采用腹腔注射碘酸钠(NaIO3)溶液建立小鼠视网膜损伤模型，设置空白组，模型组，AREDS 2组，枸杞子-菊花1:1配伍低、高剂量组，枸杞子-菊花3:1配伍... 详细信息

旨在比较枸杞子-菊花不同比例配伍对小鼠视网膜损伤的改善作用差异，并揭示其作用机制。采用腹腔注射碘酸钠(NaIO3)溶液建立小鼠视网膜损伤模型，设置空白组，模型组，AREDS 2组，枸杞子-菊花1:1配伍低、高剂量组，枸杞子-菊花3:1配伍低、高剂量组，枸杞子-菊花1:3配伍低、高剂量组，造模后给药15 d，通过黑白箱检测小鼠视力；激光眼科诊断仪观察小鼠眼底情况，测量其视网膜厚度；HE染色法检测小鼠视网膜形态及病理变化；试剂盒检测小鼠血清及眼球组织中氧化因子水平；酶联免疫吸附测定法检测小鼠血清及眼球组织中炎症因子水平；蛋白免疫印迹法检测小鼠眼球组织中Nrf2、HO-1、NF-κB蛋白表达情况。结果显示，模型小鼠给予枸杞子-菊花各比例配伍药液后，其视网膜变薄、视网膜各层排列紊乱情况得到改善，小鼠血清及眼球组织中SOD、GSH含量升高，血清及眼球组织中MDA、TNF-α、IL-1β、IL-6含量降低，其中枸杞子-菊花1:1与1:3配伍的改善效果较好。枸杞子-菊花配伍可显著提高Nrf2、HO-1的表达水平，下调NF-κB的表达水平。以上结果表明，枸杞子-菊花各比例配伍均可改善小鼠视网膜损伤情况，减轻小鼠体内及眼球组织中氧化应激及炎症反应，其机制可能与调节眼球组织中Nrf2/HO-1及NF-κB信号通路相关。研究结果为枸杞子-菊花配伍临床应用于干性AMD提供了理论依据。

关键词：枸杞子菊花配伍视网膜损伤

枸杞子-菊花药对提取物对豚鼠光源性近视模型的影响及机制研究

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南京中医药大学学报 2024年第8期40卷 785-794页

作者：王颖异朱悦王育良郭盛宿树兰郭建明段金廒南京中医药大学中药资源产业化与方剂创新药物国家地方联合工程研究中心江苏省中药资源产业化过程协同创新中心江苏省方剂高技术研究重点实验室江苏南京 210023 南京中医药大学附属医院江苏南京 210029

目的考察枸杞子与菊花药对配伍对发育期豚鼠光源性近视发生及发展的影响.方法采用三基色荧光灯照射发育期豚鼠,建立光源性近视模型,枸杞子-菊花提取物添加饲料饲养豚鼠,利用眼科A型超声测量仪检测眼轴,HE染色观察豚鼠视网膜病理损伤,... 详细信息

目的考察枸杞子与菊花药对配伍对发育期豚鼠光源性近视发生及发展的影响.方法采用三基色荧光灯照射发育期豚鼠,建立光源性近视模型,枸杞子-菊花提取物添加饲料饲养豚鼠,利用眼科A型超声测量仪检测眼轴,HE染色观察豚鼠视网膜病理损伤,酶联免疫吸附实验(ELISA)检测豚鼠视网膜多巴胺(DA)及褪黑素(MT)含量,转录组学分析等方法探讨枸杞子-菊花对豚鼠光源性近视的影响.结果造模 6 周后,与正常组相比,模型组豚鼠眼轴显著增长(P枸杞子-菊花提取物可有效减缓模型组豚鼠晶状体加厚、玻璃体腔加深,进而延缓整体眼轴的过度增长;模型组豚鼠视网膜组织变薄,视网膜内核层及外核层的厚度及细胞数目显著降低,神经节细胞核稀疏,神经节细胞层空泡化明显,枸杞子-菊花提取物能保护视网膜细胞,视网膜内核层及外核层的厚度及细胞数目增加,神经节细胞核增多;ELISA检测显示模型组豚鼠视网膜内DA、MT水平显著降低(P枸杞子-菊花提取物能够有效提升模型组豚鼠视网膜及血清中DA含量(P枸杞子-菊花提取物能显著增加PPARγ、COL1A1 含量(P枸杞子-菊花药对具有延缓发育期豚鼠光源性近视发生及发展效用,保护视网膜细胞,改善人工光环境导致的DA分泌紊乱,参与调控眼部PPARγ水平,对光源性近视的防控具有积极意义,为临床合理用药和创制眼功能健康产品提供了科学依据.

关键词：枸杞子菊花药对近视光环境视网膜多巴胺过氧化物酶体增殖物激活受体

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宁夏道地药材枸杞子等级质量标准研究

药学学报 2024年第5期59卷 1399-1407页

作者：余钟莲李薛萍杨莉王峥涛刘文静王瑞石燕红上海中医药大学中药学院上海201203 上海中医药大学中医药国际标准化研究所上海201203 上海市中医药国际标准化研究院上海201203 上海中医药大学中药研究所中药标准化教育部重点实验室上海201203 上海市浦东新区公利医院上海200135

基于传统性状鉴别结合现代中药分析手段的综合评价模式用于宁夏道地药材枸杞子等级划分关键指标的辨识和等级质量标准的建立。本草考证和市场调查指导下,将粒径大小、表皮颜色和不完善粒作为外在性状指标;聚焦枸杞子品质评价的全面性和... 详细信息

基于传统性状鉴别结合现代中药分析手段的综合评价模式用于宁夏道地药材枸杞子等级划分关键指标的辨识和等级质量标准的建立。本草考证和市场调查指导下,将粒径大小、表皮颜色和不完善粒作为外在性状指标;聚焦枸杞子品质评价的全面性和有效性,在水分、灰分、水溶性浸出物、枸杞多糖(Lyciumbarbarum polysaccharide,LBP)和甜菜碱等药典规定指标的基础上,增加枸杞酸(2-O-β-D-glucopyranosyl-L-ascorbic acid,AA-2βG)、玉米黄质双棕榈酸酯(zeaxanthin dipalmitate,ZD)和挥发性醚浸出物为内在质量指标。并通过t检验、相关性分析和主成分分析等数理统计方法,考察不同等级枸杞子外观性状与内在质量的关联,从而进行质量等级的划分和标准的制定,最后从体外细胞水平比较不同等级枸杞子提取物的活性差异。结果表明,枸杞子主要以“粒大色红”为佳;除甜菜碱外,其余指标成分均在表皮颜色鲜红和一等枸杞子中相对偏高;表皮颜色和水分、水溶性浸出物、LBP、AA-2βG和ZD含量之间存在显著相关。综合研究结果和市场流通情况,本研究以枸杞子的粒径大小和表皮颜色为基础,同时引入LBP、AA-2βG、ZD、水溶性浸出物和水分等多指标进一步指导等级划分,建立了外观性状和内在质量关键指标相结合的宁夏道地药材枸杞子等级质量标准,体外细胞活性也初步证实了一等枸杞子具有更为显著的“滋补肝肾”活性,这为枸杞子的质量控制和优质优价的实现提供了实验依据。

关键词：枸杞子道地产区外观性状内在质量等级质量标准

枸杞子多糖的提取纯化、体外抗氧化及其抗衰老作用

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食品工业科技 2024年

作者：王聪颖黄小强徐玥玥茹国华黄河科技学院医学院河南大学药学院

目的：从枸杞子中分离纯化得到枸杞子多糖，并对其体外抗氧化活性及抗衰老作用进行研究。方法：通过水提醇沉法提取得到枸杞子粗多糖，再经过Sevage试剂除蛋白、DEAE-52纤维素离子交换树脂从粗多糖中分离纯化得到枸杞子多糖LBP。通过测... 详细信息

目的：从枸杞子中分离纯化得到枸杞子多糖，并对其体外抗氧化活性及抗衰老作用进行研究。方法：通过水提醇沉法提取得到枸杞子粗多糖，再经过Sevage试剂除蛋白、DEAE-52纤维素离子交换树脂从粗多糖中分离纯化得到枸杞子多糖LBP。通过测定LBP对DPPH自由基、羟基自由基和ABTS+自由基的清除能力，评价LBP的体外抗氧化能力，采用D-半乳糖诱导建立衰老小鼠模型，给药结束后，比较各组小鼠的体质量及脏器指数，检测血清、肝和脑组织中丙二醛(MDA)、总氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和过氧化氢酶(CAT)的水平，蛋白质印迹(Western blotting)法检测肝组织中核内因子-E2-相关因子(Nrf-2)和血红素氧合酶-1(HO-1)的蛋白表达。结果：分离纯化得到的多糖LBP含量为(86.64±2.34)%；LBP对DPPH自由基、羟基自由基和ABTS+自由基清除能力的IC50值分别为(0.2081±0.0182)、(0.7132±0.0220)和(0.3646±0.0138)mg/mL；与模型组相比，阳性组和LBP高剂量组显著提高小鼠体质量(P枸杞子多糖LBP具有较强的抗氧化能力和一定的抗衰老作用，其作用机制可能与Nrf-2/HO-1信号通路有关。

关键词：枸杞子多糖抗氧化抗衰老 Nrf-2/HO-1信号通路

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枸杞子潜在燥性反应对小鼠特性表征的影响

中国老年学杂志 2024年第6期44卷 1455-1458页

作者：张予心杨兰靳雯棋赵一名孙立伟刘芳兵长春中医药大学附属医院实验中心吉林长春130012 长春中医药大学药学院吉林长春130012 长春中医药大学东北亚中医药研究院

目的明确不同剂量枸杞子与小鼠燥性反应特性表征的关系及其对生理生化指标变化的影响。方法将40只雄性老年小鼠随机分为空白组,枸杞子高、低剂量组,并以经典热性药方干姜、附子、肉桂作为阳性药组,连续给药14 d并记录小鼠一般体征变化... 详细信息

目的明确不同剂量枸杞子与小鼠燥性反应特性表征的关系及其对生理生化指标变化的影响。方法将40只雄性老年小鼠随机分为空白组,枸杞子高、低剂量组,并以经典热性药方干姜、附子、肉桂作为阳性药组,连续给药14 d并记录小鼠一般体征变化,利用苏木素-伊红(HE)染色和免疫组化检测脾脏组织的病理学改变。同时,检测血清中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-px)、丙二醛(MDA)和过氧化氢酶(CAT)活力及相关炎症因子肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β、IL-6和CC家族趋化因子配体(CCL)2的表达变化。结果与空白组比,热性药方和高剂量枸杞子均能使小鼠出现体质量下降、摄食量减少、饮水量增多和毛发干枯等燥性反应特性的症状。枸杞子高剂量组出现脾脏异常增大、脾脏指数升高的变化,通过HE染色及免疫组化观察发现其脾脏结构发生显著变化,红髓与白髓界限模糊,脾小体结构不清晰且有炎性细胞浸润等现象。在病理学改变基础上,高剂量枸杞子和热性药方均能够显著促进TNF-α、IL-1β、IL-6和CCL2因子表达,同时显著降低CAT、SOD、GSH-px活性并显著提升MDA活性(P枸杞子高剂量组能够引起氧化应激损伤和炎症因子表达失衡,这可能是过量服用枸杞子伴随着燥性反应症状发生的原因之一。

关键词：枸杞子燥性反应氧化应激炎症因子

基于多元统计分析的不同产地枸杞子对碘酸钠诱导的视网膜变性小鼠的干预作用比较研究

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中国中药杂志 2024年第16期49卷 4521-4531页

作者：陈鑫郭盛王杰美李洁倪亮康宏杰钱大玮段金廒南京中医药大学、中药资源产业化与方剂创新药物国家地方联合工程研究中心/江苏省中药资源产业化过程协同创新中心/国家中医药管理局中药资源循环利用重点研究室江苏南京210023 南京中医药大学附属医院江苏南京210029 宁夏枸杞创新中心宁夏银川750002

基于视网膜变性(retinal degeneration diseases,RDD)小鼠模型,采用多元统计分析方法比较不同产地枸杞子的视网膜保护作用。通过腹腔注射碘酸钠(NaIO_(3))构建小鼠RDD小鼠模型,采用双门黑白箱和TUNEL测定评估视觉功能和视网膜细胞凋亡情... 详细信息

基于视网膜变性(retinal degeneration diseases,RDD)小鼠模型,采用多元统计分析方法比较不同产地枸杞子的视网膜保护作用。通过腹腔注射碘酸钠(NaIO_(3))构建小鼠RDD小鼠模型,采用双门黑白箱和TUNEL测定评估视觉功能和视网膜细胞凋亡情况;采用眼底光学相干断层扫描(OCT)检测视网膜厚度并进行眼底照相,测定血清和眼球中氧化应激、炎症和血管生成标志物的水平。采用层次聚类分析、主成分分析和偏最小二乘法判别分析进行不同产地枸杞子对小鼠RDD模型视网膜保护作用的综合比较。结果显示,不同产地枸杞子提取物均可逆转NaIO_(3)诱导的视觉及视网膜损伤和细胞凋亡,改善小鼠体内氧化应激水平及炎症因子和血管生成标志物的表达。基于17个药效学指标进行多元统计分析后发现,产于宁夏的枸杞子提取物相较于其余4个产地的受试样品呈现更好的RDD治疗效应。研究结果可为防治RDD的枸杞子优势产地选择提供科学依据。

关键词：枸杞子视神经保护视网膜变性多元统计分析

QuEChERS-UPLC-MS/MS法同时测定枸杞子中15种新烟碱类农药及代谢产物残留量

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分析试验室 2024年

作者：高萌贺凯张家萌刘潇然马玲宁夏回族自治区药品检验研究院国家枸杞产品质量检验检测中心(宁夏)宁夏药品监督管理局中药质量控制重点实验室宁夏回族自治区药品质量控制与评价重点实验室

建立了枸杞中15种新烟碱类农药及其代谢产物残留量的QuEChERS-UPLC-MS/MS分析方法。采用Agilent Zorbax HILIC色谱柱（100 mm×4.6 mm，3.5 μm），以0.1%甲酸（含5mmol/L甲酸铵）-乙腈为流动相，梯度洗脱，柱温35 ℃，流速0.3 mL/min... 详细信息

建立了枸杞中15种新烟碱类农药及其代谢产物残留量的QuEChERS-UPLC-MS/MS分析方法。采用Agilent Zorbax HILIC色谱柱（100 mm×4.6 mm，3.5 μm），以0.1%甲酸（含5mmol/L甲酸铵）-乙腈为流动相，梯度洗脱，柱温35 ℃，流速0.3 mL/min。电离方式为喷雾正离子模式（ESI+），使用多反应监测模式（MRM）进行定量分析。结果显示，15种新烟碱类农药及代谢产物在考察浓度范围内呈良好的线性关系（r＞0.996），方法检出限（LOD）为0.001～0.005mg/kg，方法定量限（LOQ）为0.003～0.020mg/kg，平均回收率为77.3%～113.6%，相对标准偏差（RSD）为3.4%～10.7%。所建立的方法能够对枸杞子中新烟碱类农药及其代谢产物残留进行定量分析。

关键词：枸杞子超高效液相色谱—串联质谱(UPLC-MS/MS) 新烟碱类农药代谢产物