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枳术丸汤剂含药血清对大鼠结肠Cajal间质细胞增殖及PI3K/Akt信号通路的影响

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中成药 2022年第4期44卷 1267-1271页

作者：施敏刘富林涂琴蓉夏旭婷湖南中医药大学湖南长沙410208 湖南师范大学附属湘东医院湖南株洲412200

目的探讨枳术丸汤剂含药血清对大鼠结肠Cajal间质细胞(ICC)增殖以及对PI3K/Akt信号通路的影响。方法 20只大鼠随机分为枳术丸汤剂组、空白血清组,每组各10只,枳术丸汤剂组灌胃枳术丸汤剂5.8 g/kg,空白血清组灌胃等量蒸馏水,每天1次,连... 详细信息

目的探讨枳术丸汤剂含药血清对大鼠结肠Cajal间质细胞(ICC)增殖以及对PI3K/Akt信号通路的影响。方法 20只大鼠随机分为枳术丸汤剂组、空白血清组,每组各10只,枳术丸汤剂组灌胃枳术丸汤剂5.8 g/kg,空白血清组灌胃等量蒸馏水,每天1次,连续7 d,取血制备血清;分别设立不同浓度血清、不同干预时间、不同浓度PI3K/Akt抑制剂LY294002作用于大鼠结肠ICC细胞,计算增殖率并筛选出最佳干预措施;将不同因素处理的大鼠结肠ICC细胞分为正常组(培养液)、模型组(正常细胞+LY294002)、空白血清组(模型组+10%空白血清)、枳术丸汤剂组(模型组+5%枳术丸汤剂含药血清),分别加入空白血清和含药血清干预;免疫荧光检测、Western blot、RT-qPCR分析药物对PI3K、Akt蛋白及基因表达的影响。结果 25μmol/L PI3K/Akt抑制剂LY294002、5%枳术丸汤剂含药血清及10%空白血清干预大鼠结肠ICC细胞24 h为最佳干预措施;免疫荧光、Western blot、RT-qPCR检测均显示,与正常组比较,模型组ICC细胞PI3K、Akt表达降低(P枳术丸汤剂组ICC细胞PI3K、Akt表达均升高(P枳术丸含药血清在一定浓度下能促进ICC细胞的增殖,其机制可能与调控PI3K/Akt信号通路相关。

关键词：枳术丸 Cajal间质细胞 PI3K Akt

枳术丸化学成分及治疗消化系统疾病的研究进展

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中成药 2022年第9期44卷 2916-2923页

作者：郑威臧彬如于颖琦李丽高慧单国顺辽宁中医药大学药学院辽宁大连116600

枳术丸是临床常用的方剂,具有治痞、消食、强胃之功,可用于治疗多种消化系统疾病,疗效显著。目前,从枳术丸中鉴定得到萜烯类、醇类、酸类、酯类、酮类、醛类、氧化物及其他烃类化合物,均为枳实、白术挥发油类化合物;还鉴定得到少量生物... 详细信息

枳术丸是临床常用的方剂,具有治痞、消食、强胃之功,可用于治疗多种消化系统疾病,疗效显著。目前,从枳术丸中鉴定得到萜烯类、醇类、酸类、酯类、酮类、醛类、氧化物及其他烃类化合物,均为枳实、白术挥发油类化合物;还鉴定得到少量生物碱类、香豆素类化合物,主要为枳实生物碱、枳实香豆素以及荷叶生物碱类化合物;此外,鉴定得到的黄酮类化合物则均为枳实中的黄酮类化合物。研究发现,枳术丸及其活性成分可通过促胃肠动力、降低内脏高敏感性、调节水通道蛋白、修复胃黏膜损伤等途径,治疗功能性消化不良、便秘、消化性溃疡、胃下垂、胃食管反流病等消化系统疾病。本文通过对枳术丸的古今文献进行检索、整理和归纳,从枳术丸的化学成分、治疗消化系统疾病的药效作用机制及临床应用进行综述,以期为更好的使用和发展枳术丸提供理论依据。

关键词：枳术丸化学成分消化系统作用机制临床应用

枳术丸汤剂中枳实不同剂量配伍对慢传输型便秘小鼠肠道菌群多样性的影响

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中国微生态学杂志 2022年第11期34卷 1275-1282页

作者：张婷刘富林谭周进夏旭婷滕广飞施敏廖陈敏中医学院湖南中医药大学医学院湖南中医药大学湖南长沙410208 中国中医科学院望京医院北京100102

目的基于攻补兼施法探讨在大剂量生白术的配伍下不同枳实剂量配伍的作用及枳术丸(ZZW)对慢传输型便秘(STC)小鼠肠道菌群的影响。方法将65只SPF级别昆明(KM)小鼠随机分为空白对照组10只与模型组50只,空白对照组正常喂养,模型组使用番泻叶... 详细信息

目的基于攻补兼施法探讨在大剂量生白术的配伍下不同枳实剂量配伍的作用及枳术丸(ZZW)对慢传输型便秘(STC)小鼠肠道菌群的影响。方法将65只SPF级别昆明(KM)小鼠随机分为空白对照组10只与模型组50只,空白对照组正常喂养,模型组使用番泻叶0.8 g/kg灌胃7 d,制成脾虚模型后禁食禁水,隔天喂食生大米,饮水0.5 h,连续8 d建立脾虚便秘模型。15 d后将模型组随机分为5组,每组10只,即模型组、西药组、ZZW低剂量组、ZZW中剂量组、ZZW高剂量组。ZZW低、中、高剂量分别为9.7 g/kg、11.6 g/kg、13.7 g/kg,西药组给予莫沙必利2.5 mg/kg。空白对照组和模型组灌胃同等量蒸馏水。治疗1周后收集肠道内容物,行16S rRNA测序,取结肠组织HE染色行病理形态学观察。结果ZZW高剂量组能够显著提高肠道推进率(P0.05)。与模型组比较,ZZW低剂量组较模型组拟杆菌门相对丰度显著降低(P枳实剂量不存在量效关系,其治疗机制可能与ZZW水煎液调整菌群丰度、多样性及菌群物种数目,恢复正常肠道生态环境有关。

关键词：枳术丸慢传输型便秘 16S rRNA 肠道菌群微生物多样性

枳术丸联用微生态制剂对脾虚型便秘患者的临床疗效及肠道菌群影响的研究

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枳术丸联用微生态制剂对脾虚型便秘患者的临床疗效及肠道菌群影响...

作者：易顺川北医学院

学位级别：硕士

目的:观察枳术丸联用微生态制剂对脾虚型便秘患者的临床疗效以及肠道菌群的影响,探讨枳术丸治疗便秘的作用机制。方法:符合纳入标准的82例脾虚型便秘病例,随机分为实验组和对照组各41例,实验组给予枳术丸联用微生态制剂口服治疗,对照组... 详细信息

目的:观察枳术丸联用微生态制剂对脾虚型便秘患者的临床疗效以及肠道菌群的影响,探讨枳术丸治疗便秘的作用机制。方法:符合纳入标准的82例脾虚型便秘病例,随机分为实验组和对照组各41例,实验组给予枳术丸联用微生态制剂口服治疗,对照组予以单用微生态制剂口服治疗。观察两组患者治疗两周后便秘症状严重度评分、粪便性状评分、中医证候疗效评分和肠道菌群数量的变化,所得数据应用SPSS26.0进行统计分析。结果:1、治疗前两组患者在一般情况、便秘症状严重度评分、粪便性状评分、中医证候疗效评分、肠道菌群数量情况,均无显著统计学差异(P>0.05),具有可比性;2、治疗后两组患者在便秘症状严重度评分、粪便性状评分、中医证候疗效评分、肠道菌群数量变化与治疗前比较,均有统计学差异(P枳术丸联用微生态制剂的疗效明显优于单用微生态制剂的疗效。6、肠道菌群数量结果:两组患者治疗后的双歧杆菌、乳酸杆菌、肠杆菌、肠球菌数量与治疗前比较均有统计学差异(P枳术丸联用微生态制剂恢复肠道微生态平衡的效果优于单用微生态制剂的效果。7、治疗结果:经治疗后实验组总有效率为92.68%,对照组总有效率为75.61%,说明两组对于改善脾虚型便秘的各种症状均有效果,枳术丸联用微生态制剂的总有效率明显高于单用微生态制剂的总有效率,治疗效果更好。结论:枳术丸联用微生态制剂治疗脾虚型便秘有显著的临床疗效,可有效改善脾虚型便秘患者的临床中医证候和便秘症状,其疗效优于单用微生态制剂,其作用机制可能与改变肠道菌群、恢复肠道微生态平衡有关。

关键词：脾虚型便秘枳术丸微生态制剂肠道菌群

枳术丸对功能性消化不良大鼠胃平滑肌收缩反应及胃促生长素受体蛋白表达的影响

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中国中西医结合杂志 2016年第2期36卷 210-215页

作者：李晓玲张声生杨成汪正芳吴震宇郁强常洁首都医科大学附属北京中医医院消化中心北京100010 北京中医药大学东直门医院北京100700

目的研究枳术丸对功能性消化不良(functional dyspepsia,FD)大鼠的治疗作用机制。方法雄性10日龄SD幼鼠30只,随机分为正常组(10只)和造模组(20只)。采用0.1%碘乙酰胺(iodoacetamide,IA)灌胃联合夹尾刺激法诱导大鼠FD模型。大鼠8周龄时... 详细信息

目的研究枳术丸对功能性消化不良(functional dyspepsia,FD)大鼠的治疗作用机制。方法雄性10日龄SD幼鼠30只,随机分为正常组(10只)和造模组(20只)。采用0.1%碘乙酰胺(iodoacetamide,IA)灌胃联合夹尾刺激法诱导大鼠FD模型。大鼠8周龄时进行模型评定,将造模成功的大鼠随机分为模型组(10只)和枳术丸组(10只)。正常组与模型组予以0.9%氯化钠溶液灌胃,枳术丸组给予枳术丸煎剂(2 mL/100 g)灌胃,持续7日。采用Power Lab生物信号采集系统记录离体大鼠胃体纵行平滑肌条的收缩活动,采用蛋白免疫印记法(Western blot)和免疫组织化学(immunohistochernistry,IHC)技术检测生长激素促分泌素受体(growth hormone secretagogue receptor,GHSR)在FD大鼠胃体的表达。结果与正常组比较,模型组大鼠胃肌条收缩平均频率和振幅变化率明显降低(P枳术丸组大鼠胃肌条收缩平均频率和振幅变化率增高(P枳术丸组GHSR蛋白表达均升高(P枳术丸对IA灌胃联合夹尾刺激法诱导的FD大鼠具有促进胃动力作用,其机制可能与上调GHSR蛋白表达有关。

关键词：功能性消化不良枳术丸生长激素促分泌素受体胃动力

枳术丸对脾虚证慢传输型便秘小鼠肠道运动及PLC-γ_1/PLC-γ_2信号通路的影响

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中国实验方剂学杂志 2019年第10期25卷 8-14页

作者：王伟松夏旭婷刘富林王文凤陈雨波滕广飞王婷涂琴蓉湖南中医药大学第一附属医院长沙410000 湖南中医药大学中医学院长沙410000 湖南中医药大学招生就业处长沙410000 湖南中医药大学第二附属医院长沙410000

目的:探讨枳术丸对脾虚证慢传输型便秘(STC)小鼠肠道传导功能的干预作用,及对小鼠结肠组织磷脂酶C-γ_1(PLC-γ_1)/磷脂酶C-γ_2(PLC-γ_2)信号通路表达的影响。方法:将无特定病原体(SPF)健康小鼠随机分为正常组与造模组。采用番泻叶灌... 详细信息

目的:探讨枳术丸对脾虚证慢传输型便秘(STC)小鼠肠道传导功能的干预作用,及对小鼠结肠组织磷脂酶C-γ_1(PLC-γ_1)/磷脂酶C-γ_2(PLC-γ_2)信号通路表达的影响。方法:将无特定病原体(SPF)健康小鼠随机分为正常组与造模组。采用番泻叶灌胃造成脾虚状态,然后控制饮食饮水的方法造成脾虚便秘的小鼠模型,造模完成后将模型组小鼠随机分为模型组、枳术丸组、莫沙必利组,枳术丸组按9. 0 g·kg^(-1)·d^(-1)给药,莫沙必利组按2. 5 mg·kg^(-1)·d^(-1)给药,模型组和正常组给予等剂量的蒸馏水,连续给药7 d,治疗完成后用印度墨水在结肠中推进的长度计算小鼠肠道推进率;用D-木糖试剂盒测定小鼠血清D-木糖含量;用苏木素-伊红(HE)染色观察小鼠结肠组织病理改变;采用免疫组化法及蛋白免疫印迹法(Western blot)检测小鼠结肠组织PLC-γ_1,PLC-γ_2蛋白的表达水平;采用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测PLC-γ_1,PLC-γ_2mRNA表达水平。结果:与正常组比较,模型组小鼠肠道推进率及血清D-木糖值均显著降低(P 枳术丸组和莫沙必利组小鼠肠道推进率及血清D-木糖含量均显著增加(P 枳术丸可有效促进脾虚便秘小鼠的肠道运动,改善便秘症状,其相关的作用机制可能与提高脾虚便秘小鼠结肠组织中PLC-γ_1与PLC-γ_2的表达有关。

关键词：枳术丸便秘慢传输型便秘磷脂酶C-γ1/磷脂酶C-γ2信号通路

枳术丸水煎液及其拆方含药血清对大鼠结肠Cajal间质细胞增殖和凋亡的影响

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中国实验方剂学杂志 2020年第19期26卷 120-126页

作者：滕广飞刘富林夏旭婷涂琴蓉王婷湖南中医药大学中医学院长沙410000 中国中医科学院望京医院北京100102

目的:探讨枳术丸水煎液及其拆方对大鼠结肠Cajal间质细胞(ICC)增殖和凋亡的影响及其分子机制,并从细胞分子层面分析中医攻补兼施法治疗慢传输型便秘可能的机制。方法:将40只大鼠随机分成白术组、枳实组、枳术丸组、空白血清组,每组10只... 详细信息

目的:探讨枳术丸水煎液及其拆方对大鼠结肠Cajal间质细胞(ICC)增殖和凋亡的影响及其分子机制,并从细胞分子层面分析中医攻补兼施法治疗慢传输型便秘可能的机制。方法:将40只大鼠随机分成白术组、枳实组、枳术丸组、空白血清组,每组10只。白术组灌以17.7 g·kg^-1·d^-1白术水煎液,枳实组灌以8.9 g·kg^-1·d^-1枳实水煎液,枳术丸组灌以26.4 g·kg^-1·d^-1枳术丸水煎液,空白血清组灌以无菌蒸馏水3 mL,每日1次,连续7 d,取血制备含药血清和空白血清。将4组含药血清分别配成5%,10%,15%,20%4个体积分数,干预24 h,观察ICC的数量、形态,用细胞增殖毒性检测试剂盒(CCK-8)检测各组细胞增殖情况,测定各组最佳干预体积分数。将大鼠结肠ICC细胞分为正常组、空白血清组、白术组、枳实组、枳术丸组,5-乙炔基-2'脱氧尿嘧啶核苷(EdU)检测各组ICC的增殖情况,流式细胞仪检测各组ICC的凋亡情况;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组ICC中X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP),增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白表达情况。结果:与正常组比较,空白血清组、白术组、枳实组最佳干预体积分数均为10%,枳术丸组最佳干预体积分数为5%。与正常组比较,所有实验中空白血清组对ICC增殖和凋亡的影响没有明显差异;与正常组及空白血清组比较,白术组、枳实组、枳术丸组ICC增殖率有显著差异(P术组和枳实组比较,枳术丸组对ICC增殖率明显增加(P枳实组比较,白术组对ICC增殖率变化不明显。与正常组及空白血清组比较,白术组、枳实组、枳术丸组ICC的凋亡率无明显差异;与正常组及空白血清组比较,白术组、枳实组、枳术丸组内的XIAP,PCNA蛋白水平均明显上调(P枳术丸、枳实、白术在一定浓度下均能通过增加XIAP,PCNA蛋白表达促进ICC的增殖,且对ICC的凋亡无明显影响;以攻补兼施法立法的方剂枳术丸能促进ICC的增殖,并且其增殖效果优于攻伐单药枳实和补益单药白术。

关键词：枳术丸 Cajal间质细胞细胞增殖细胞凋亡攻补兼施

基于HS-GC-MS技术研究炮制对枳术丸中挥发性成分的影响

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药物分析杂志 2022年第5期42卷 884-895页

作者：郑威臧彬如于颖琦李丽单国顺高慧辽宁中医药大学药学院国家中医药管理局炮制原理解析重点研究室辽宁省中药炮制工程技术研究中心大连116600

目的:采用静态顶空进样-气质联用(HS-GC-MS)结合化学计量学的方法,比较枳术丸中用生制饮片配伍及组方中单味饮片炮制对挥发性化学成分的影响。方法:建立枳术丸HS-GC-MS测定方法,色谱条件采用DB-WAX石英毛细管柱(0.25 mm×30 m,0.25μm)... 详细信息

目的:采用静态顶空进样-气质联用(HS-GC-MS)结合化学计量学的方法,比较枳术丸中用生制饮片配伍及组方中单味饮片炮制对挥发性化学成分的影响。方法:建立枳术丸HS-GC-MS测定方法,色谱条件采用DB-WAX石英毛细管柱(0.25 mm×30 m,0.25μm),在分流比10∶1,载气流速1 mL·min^(-1)的条件下,按照设定的程序升温条件运行;质谱条件采用电子轰击离子源(EI),采集方式为全扫描模式,扫描范围m/z 20~550;使用保留指数法对枳术丸及其组方饮片炮制前后挥发性化学成分进行定性分析,并运用主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘法判别分析(OPLS-DA)进一步研究枳术丸及其组方饮片炮制前后差异性化学成分。结果:首先,利用保留指数法进行化合物鉴别,分别从生枳实、麸炒枳实、生白术、麸炒白术、生白术制枳术丸和麸白术制枳术丸中鉴定出64、67、40、54、61、57个,共133个,包括烯烃类、醇类、酸类、醛酮类、酯类、含杂原子类及其他类成分。其次,通过化学计量学的方法,比较了枳术丸中用生制饮片配伍及组方中单味饮片炮制前后的化学成分组成,发现枳实经麸炒后产生18个新增成分,有15个成分在炮制过程中消失,还有7个成分含量显著增加,18个成分含量显著降低;白术经麸炒后产生22个新增成分,有8个成分在炮制过程中消失,还有5个成分含量显著增加,4个成分含量显著降低;麸白术制枳术丸较生白术制枳术丸新增8个成分,有12个成分在炮制过程中消失,还有8个成分含量显著增加,1个成分含量显著降低。结论:采用HS-GC-MS结合化学计量学,探究枳术丸及其组方饮片炮制前后挥发性化学成分变化规律,为解析枳术丸中用生制白术提供新的科学依据。

关键词：枳术丸炮制挥发性成分化学计量学顶空进样-气质联用

枳术丸汤剂含药血清对大鼠结肠Cajal间质细胞增殖及PLC-γ信号通路的影响

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中医杂志 2021年第21期62卷 1923-1929页

作者：夏旭婷王婷刘富林涂琴蓉滕广飞湖南中医药大学湖南省410208 湖北省襄阳市中医医院湖南师范大学附属湘东医院中国中医科学院望京医院

目的探讨枳术丸治疗慢传输型便秘的可能作用机制。方法20只SD雄性大鼠随机分为枳术丸汤剂组、空白组,每组10只。枳术丸汤剂组大鼠每日给予浓度为2 g/ml枳术丸汤剂5.8 g灌胃,连续7天,空白组正常饲养。末次给药后1 h腹主动脉采血离心制备... 详细信息

目的探讨枳术丸治疗慢传输型便秘的可能作用机制。方法20只SD雄性大鼠随机分为枳术丸汤剂组、空白组,每组10只。枳术丸汤剂组大鼠每日给予浓度为2 g/ml枳术丸汤剂5.8 g灌胃,连续7天,空白组正常饲养。末次给药后1 h腹主动脉采血离心制备含药血清。采用CCK8法观察磷脂酶C-γ(PLC-γ)特异性抑制剂U73122对大鼠结肠原代Cajal间质细胞的细胞抑制率来筛选药物浓度,观察5%、10%、15%、20%浓度的枳术丸汤剂含药血清对Cajal间质细胞的细胞增殖率筛选药物浓度,并分别培养12、24、48 h来筛选用药时间。取二或三代Cajal间质细胞接种至96孔板中,每孔1×10^(4)个细胞,每组重复3孔。实验分为正常组、模型组(正常细胞+筛选浓度的U73122)、空白血清组(模型组+10%空白血清)、枳术丸汤剂血清组(模型组+筛选浓度枳术丸含药血清)。干预时间为实验筛选出的时间。免疫组化法检测磷脂酶C-γ1(PLC-γ1)、磷脂酶C-γ2(PLC-γ2)阳性表达,Western blot法检测PLC-γ1、PLC-γ2蛋白表达,RT-PCR法检测PLC-γ1、PLC-γ2基因表达。结果筛选出U73122最佳实验药物浓度为30μmol/L,枳术丸汤剂组最佳用药浓度为5%,实验最佳干预时间为24 h。与正常组比较,模型组PLC-γ1、PLC-γ2平均光密度值、蛋白及基因表达均降低(P枳术丸汤剂血清组、空白血清组PLC-γ1、PLC-γ2平均光密度值、蛋白及基因表达均升高(P枳术丸汤剂血清组PLC-γ1、PLC-γ2阳性表达、蛋白及基因表达明显增多(P枳术丸汤剂可能通过激活Cajal间质细胞PLC-γ信号通路,调控细胞增殖,从而促进胃肠运动。

关键词：慢传输型便秘枳术丸 Cajal间质细胞肠道动力细胞增殖磷脂酶C-γ1/磷脂酶C-γ2信号通路