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枳壳HPLC特征图谱及6个黄酮苷类成分含量测定

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药物分析杂志 2020年第6期40卷 1090-1096页

作者：田芳何小芳谭梓君吴孟华张英曹晖马志国暨南大学岭南传统中药研究中心广州510632 国家中药现代化工程技术研究中心岭南资源分中心广州510632 暨南大学药学院广州510632

目的:采用高效液相色谱法建立枳壳的特征图谱,并同时测定6个黄酮苷类成分的含量。方法:以新北美圣草苷、芸香柚皮苷、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷和枳属苷为指标性成分,采用Kinetex?2.6μC18 100(100 mm×4.6 mm,2.6μm)色谱柱,以乙腈为... 详细信息

目的:采用高效液相色谱法建立枳壳的特征图谱,并同时测定6个黄酮苷类成分的含量。方法:以新北美圣草苷、芸香柚皮苷、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷和枳属苷为指标性成分,采用Kinetex?2.6μC18 100(100 mm×4.6 mm,2.6μm)色谱柱,以乙腈为流动相B,0.1%甲酸为流动相A,梯度洗脱(0~10 min,15%B→15%B;10~15 min,15%B→20%B;15~20 min,20%B→25%B;20~30 min,25%B→40%B),流速1.0 mL·min-1,检测波长为283 nm,柱温30℃。结果:建立枳壳特征图谱,30 min内枳壳的主要色谱峰能够达到完全分离,同时标定6个黄酮苷类成分,对12批饮片中的6个成分进行含量测定。新北美圣草苷、芸香柚皮苷、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷和枳属苷的质量浓度分别在1.77~70.8μg·mL-1(r=0.999 8,n=5)、11.3~452.0μg·mL-1(r=1.000 0,n=5)、34.0~1 360μg·mL-1(r=0.999 9,n=5)、13.6~544μg·mL-1(r=1.000,n=5)、27.6~1 104μg·mL-1(r=0.999 6,n=5)、 14.9~596μg·mL-1(r=1.000,n=5)范围内线性关系良好,方法的平均回收率(n=6)分别为96.9%(RSD=1.8%)、104.6%(RSD=1.7%)、97.4%(RSD=1.11%)、107.4%(RSD=1.1%)、93.2%(RSD=1.1%)、107.8%(RSD=1.5%);12批枳壳中上述6个成分含量分别为0.11%~0.45%、0.17%~0.59%、4.85%~9.09%、0.37%~0.74%、3.24%~6.17%、0.05%~0.56%。结论:该方法操作简单,重复性好,并能同时测定6个黄酮苷类成分含量,可为枳壳的质量标准研究提供更加全面的依据。

关键词：枳壳高效液相色谱新北美圣草苷芸香柚皮苷柚皮苷橙皮苷新橙皮苷枳属苷黄酮苷类特征图谱

枳壳潜在燥性成分3，5，6，7，8，3’，4’-七甲氧基黄酮对正常小鼠津液及胃水通道蛋白的影响研究

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中药药理与临床 2024年

作者：辛力温佳文谢亚婷龚文慧郭静英郑郁清平欲晖张金莲江西中医药大学

目的：研究枳壳潜在燥性成分3，5，6，7，8，3’，4’-七甲氧基黄酮（3，5，6，7，8，3'，4'-heptamethoxyflavone， HMF）对正常小鼠津液及胃水通道蛋白的影响，建立药性科学内涵研究的新策略。方法：将雄性C57BL/6小鼠随机分为正常对... 详细信息

目的：研究枳壳潜在燥性成分3，5，6，7，8，3’，4’-七甲氧基黄酮（3，5，6，7，8，3'，4'-heptamethoxyflavone， HMF）对正常小鼠津液及胃水通道蛋白的影响，建立药性科学内涵研究的新策略。方法：将雄性C57BL/6小鼠随机分为正常对照组，枳壳4 g/kg组，HMF0.4、0.8、1.6 mg/kg组。分别测定各组24 h饮水量、摄食量、2 h排便率及粪便含水量、唾液分泌量、小肠推进距离、胃及颌下腺等组织含水量；采用HE染色观察HMF对胃组织病理形态的影响并进行病理损伤评分；采用免疫组化（IHC）法测定胃组织中水通道蛋白3（AQP3）、水通道蛋白5（AQP5）、水通道蛋白7（AQP7）的表达。结果：与正常对照组相比，HMF 0.8、1.6 mg/kg组饮水量显著增高（P＜0.01），HMF 0.8 mg/kg组及枳壳4 g/kg组摄食量显著增加（P＜0.01），HM F0.4、0.8、1.6 mg/kg及枳壳4 g/kg组唾液量、2 h排便率、粪便含水量均显著减少（P＜0.01），HMF0.8 mg/kg组小肠推进长度明显减少（P＜0.05），HMF 0.4 、1.6 mg/kg组及枳壳4 g/kg组极显著减少（P＜0.01），给药各组颌下腺组织含水量明显减少（P＜0.05或 P＜0.01），与唾液量趋势相同，胃组织存在一定的病理损伤（水肿、炎症、坏死等），HMF各剂量组小鼠胃组织损伤评分显著增加（P枳壳4 g/kg和HMF 0.8、1.6 mg/kg组小鼠胃组织AQP5表达显著增加（P＜0.01），HMF 0.8、1.6 mg/kg组小鼠胃组织AQP7表达显著增加（P＜0.01）。结论：枳壳与HMF的“燥性”可影响小鼠颌下腺分泌，胃津液代谢失常，其机制可能与上调胃组织AQP3、AQP5、AQP7表达相关。

关键词：枳壳燥性 3,5,6,7,8,3',4'-七甲氧基黄酮水通道蛋白水通道蛋白3 水通道蛋白5 水通道蛋白7

基于UPLC-Q-TOF-MS代谢组学技术的枳壳适宜采收期研究

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中国中药杂志 2022年第12期47卷 3175-3184页

作者：王慧黄友荪梁燕青张昕宇谢欢张寿文江西中医药大学江西南昌330004 新干县赣枳中药材有限公司江西吉安331300 南昌医学院江西南昌330004

以枳壳GAP基地的不同采收期样品为研究对象,运用UPLC-Q-TOF-MS代谢组学技术检测其次级代谢产物种类,结合多元统计分析找出差异代谢物,分析差异代谢物含量随采收期不同的变化规律,最后对各差异代谢物之间进行相关性分析,确定不同成分的... 详细信息

以枳壳GAP基地的不同采收期样品为研究对象,运用UPLC-Q-TOF-MS代谢组学技术检测其次级代谢产物种类,结合多元统计分析找出差异代谢物,分析差异代谢物含量随采收期不同的变化规律,最后对各差异代谢物之间进行相关性分析,确定不同成分的适宜采收期。该实验找到16个差异代谢物,随着采收时间延后,黄酮苷类成分柚皮苷、新橙皮苷、枸橘苷、芸香柚皮苷、橙皮苷的含量逐渐降低,建议以黄酮类成分为主要功效的枳壳原料适宜采收期为7月18—25日(大暑前后1周内);川陈皮素、桔皮素、柚皮黄素、7-羟基-4′,3,5,6,8-五甲氧基黄酮、橙黄酮、异橙黄酮、5,6,7,4′-四甲氧基黄酮和异橙皮内酯的含量先下降后上升再下降,建议以此类成分为主要功效的枳壳原料适宜采收期为7月18日;橙皮内酯、柠檬苦素、3,5,6,7,8,3′,4′-七甲氧基黄酮的含量变化规律各有特点,结合生产实际,建议其适宜采收期分别为6月27日、7月11日、7月25日。结果表明不同采收期枳壳的化学成分含量存在差异,根据不同化学成分含量差异确定其适宜采收期,为不同功效的中成药产品对枳壳原料的采购提供科学依据。

关键词：枳壳 UPLC-Q-TOF-MS 代谢组学化学成分适宜采收期

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中药枳壳中一个新的色原烷苷衍生物

中国中药杂志 2013年第1期38卷 60-63页

作者：彭文文闫合谭宁华中国科学院昆明植物研究所植物化学与西部植物资源持续利用国家重点实验室云南昆明650201 中国科学院大学北京100049

目的:研究中药枳壳Citrus aurantium甲醇提取物的化学成分。方法:中药枳壳甲醇提取物的乙酸乙酯部位经硅胶、RP-18和HPLC等色谱技术分离纯化,根据理化常数和波谱数据鉴定化合物的结构。结果:从中药枳壳中分离得到3个化合物,分别鉴定为ci... 详细信息

目的:研究中药枳壳Citrus aurantium甲醇提取物的化学成分。方法:中药枳壳甲醇提取物的乙酸乙酯部位经硅胶、RP-18和HPLC等色谱技术分离纯化,根据理化常数和波谱数据鉴定化合物的结构。结果:从中药枳壳中分离得到3个化合物,分别鉴定为citrauranoside(1),limonexin(2),柠檬苦素(3)。结论:化合物1为一个新的色原烷苷衍生物。

关键词：芸香科枳壳色原烷苷衍生物 citrauranoside

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枳壳细菌污染状况及溯源分析

药物分析杂志 2023年第2期43卷 324-333页

作者：霍晓菲刘卫德刘绪平章红江西省药品检验检测研究院、国家药品监督管理局中成药质量评价重点实验室江西省药品与医疗器械质量工程技术研究中心南昌330029 江西中医药大学南昌330004

目的:考察枳壳果实、药材、饮片的微生物污染水平,并对其污染细菌进行分离鉴定、溯源。方法:参考2020年版《中华人民共和国药典》通则1108《中药饮片微生物限度检查法》,对枳壳中的需氧菌总数、霉菌和酵母菌总数、耐热菌总数以及控制菌... 详细信息

目的:考察枳壳果实、药材、饮片的微生物污染水平,并对其污染细菌进行分离鉴定、溯源。方法:参考2020年版《中华人民共和国药典》通则1108《中药饮片微生物限度检查法》,对枳壳中的需氧菌总数、霉菌和酵母菌总数、耐热菌总数以及控制菌进行检查,采用PCR技术、RP技术对枳壳中检出的细菌进行菌株鉴定并通过BN软件溯源。结果:各阶段的微生物数量需氧菌总数及霉菌和酵母菌总数排序均为切片饮片、果实、麸炒饮片、药材。10批检出耐胆盐革兰氏阴性菌,但均未超过1×10^(4)cfu·g^(-1),未检出大肠埃希菌和沙门菌。共鉴定菌株50株,其中芽孢杆菌是该药材中的优势菌种,检出条件致病菌阪崎克罗诺肠杆菌、恶臭假单胞菌、肺炎克雷伯菌等。结论:为降低饮片中微生物负载,可尝试通过控制润药工艺参数如温度、水活度等方法防止微生物大量繁殖。果实到药材假单胞菌存在有同源性,而该类菌可能因为不耐热在饮片中并未分离到;阪崎克罗诺肠杆菌仅在饮片中存在,且占比高达50%,该菌可能是加工过程中由生产设备或环境或水体污染所致;另外,值得注意的是麸炒后的3批饮片中均存在条件致病菌肺炎克雷伯菌,应注意控制该类微生物污染,以保障枳壳质量安全。

关键词：枳壳微生物限度检查同源性分析 Ribo Printer微生物基因指纹系统 16S rDNA

利用信息熵计算指纹图谱相似度识别江枳壳道地性

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中药材 2015年第6期38卷 1180-1182页

作者：吴璐杨华生江西中医药大学江西南昌330004

目的:以枳壳为模型药物,从信息熵的角度计算指纹图谱的相似度以研究中药的道地性。方法:采用高效液相色谱法分析不同来源枳壳药材指纹图谱;利用信息熵计算指纹图谱相似度识别枳壳道地性并与传统方法进行比较。结果:与传统方法相比较,利... 详细信息

目的:以枳壳为模型药物,从信息熵的角度计算指纹图谱的相似度以研究中药的道地性。方法:采用高效液相色谱法分析不同来源枳壳药材指纹图谱;利用信息熵计算指纹图谱相似度识别枳壳道地性并与传统方法进行比较。结果:与传统方法相比较,利用信息熵计算指纹图谱相似度的方法能明显提高对"江枳壳"药材道地性的识别效果。结论:该法为枳壳道地性识别提供了科学的参考依据。

关键词：枳壳信息熵指纹图谱道地性

种植年限对枳壳根际微生物群落和土壤性质的影响

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土壤学报 2024年第6期61卷 1729-1740页

作者：吴微微韩雪王继朋孙年喜李勇西南大学资源环境学院重庆400715 重庆市中药研究院重庆400065

根际微生物影响土壤养分的有效性与转化,和植物的生长及健康密切相关。探讨不同种植年限枳壳根际微生物和土壤性质的变化,可为枳壳的田间管理提供科学依据。采集重庆市种植4、20和40a的枳壳根际土壤,高通量测序技术分析不同种植年限土... 详细信息

根际微生物影响土壤养分的有效性与转化,和植物的生长及健康密切相关。探讨不同种植年限枳壳根际微生物和土壤性质的变化,可为枳壳的田间管理提供科学依据。采集重庆市种植4、20和40a的枳壳根际土壤,高通量测序技术分析不同种植年限土壤细菌和真菌多样性和群落结构变化规律,进一步研究微生物群落与土壤性质的相关性。结果表明,连续种植40 a枳壳的土壤有机质、全氮、碱解氮、有效磷和速效钾含量显著高于4 a和20 a,而土壤pH则显著降低(P枳壳根际土壤细菌和真菌群落结构和组成与其他年限显著不同。在门水平上,优势细菌门为变形菌门、酸杆菌门、放线菌门和芽单胞菌门,占总丰度的61.07%~87.79%;优势真菌门为子囊菌门和担子菌门,占总丰度的64.70%~85.75%。在属水平上,随种植年限的增加,40年枳壳根际土壤有益细菌和真菌属丰度较第4年的显著减少(P枳壳长期种植会改变根际微生物群落结构和组成,随着种植年限增加,真菌的多样性指数显著增加,有益的根际细菌和真菌属丰度减少,而潜在的致病菌属丰度增加,这可能是枳壳长期栽培长势变差和病害逐渐加重的主要原因。

关键词：枳壳种植年限土壤养分高通量测序微生物群落

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不同栽培品种枳壳HPLC指纹图谱研究

中草药 2008年第3期39卷 430-432页

作者：罗光明陈岩李霞杨雅琴张晓云谭小辉杨世林江西中医学院江西南昌330004

目的采用HPLC法建立江西枳壳药材指纹图谱。方法Eclipse XDB-C18柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-0.1%磷酸水,采用梯度洗脱,以1.0mL/min的体积流量于320nm波长处进行检测。结果通过对江西省道地产区10批酸橙及香橙枳壳指纹图谱的分... 详细信息

目的采用HPLC法建立江西枳壳药材指纹图谱。方法Eclipse XDB-C18柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-0.1%磷酸水,采用梯度洗脱,以1.0mL/min的体积流量于320nm波长处进行检测。结果通过对江西省道地产区10批酸橙及香橙枳壳指纹图谱的分析,共检出13个分离度良好的共有峰;并进行了不同品种枳壳指纹图谱的分析。结论本方法可以用于枳壳药材质量控制,还可以作为研究枳壳种质资源的有效手段。

关键词：枳壳指纹图谱质量控制种质资源

农杆菌介导转化法构建转CTV-cp的枳壳植株

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中国中药杂志 2001年第1期26卷 21-23页

作者：贺红韩美丽李耿光广州中医药大学中药所广东广州510405 广西林业科学研究院广西南宁530001 中国科学院华南植物研究所广东广州510650

目的 :采用农杆菌介导法 ,将能抑制病毒侵染的外壳蛋白基因转入枳壳 ,为通过基因转化进行枳壳的抗病育种提供依据和方法。方法 :以枳壳实生苗上胚轴为材料 ,农杆菌菌株为EHA10 1,含有质粒载体 pGA482GG。质粒上插入了 35s启动子驱动的... 详细信息

目的 :采用农杆菌介导法 ,将能抑制病毒侵染的外壳蛋白基因转入枳壳 ,为通过基因转化进行枳壳的抗病育种提供依据和方法。方法 :以枳壳实生苗上胚轴为材料 ,农杆菌菌株为EHA10 1,含有质粒载体 pGA482GG。质粒上插入了 35s启动子驱动的外源目的基因———柑桔衰退病病毒外壳蛋白基因 (CTV cp)及GUS ,NPTⅡ基因。结果 :枳壳转化试验中 ,抗菌素采用头孢霉素较好 ,浓度为 30 0mg·L-1;以卡那霉素作为选择试剂 ,浓度为 5 0mg·L-1;转化获得的抗性植株 ,GUS检测结果 ,70 .0 %的植株呈阳性反应 ;Southern杂交分析 (Southernblot)鉴定证明外壳蛋白基因已整合到枳壳植株的核基因组中。结论 :通过农杆菌介导的转化法 ,成功地获得了转外壳蛋白基因的枳壳植株。

关键词：枳壳外壳蛋白基因植物转化中药