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枯草芽孢杆菌发酵复配饲料的抗氧化活性研究

饲料研究 2023年第12期46卷 71-76页

作者：韩怀磊李文王陶贺羽杨太平袁珍虎石相弘徐州工程学院江苏省食品资源开发与质量安全重点建设实验室江苏徐州222018 徐州正昌饲料有限公司江苏徐州221300 邳州市运河镇农技推广站江苏徐州221399

试验旨在研究枯草芽孢杆菌发酵复配饲料的抗氧化活性。试验以DPPH法、FRAP法等测定复配发酵饲料自由基清除率和铁离子还原能力,采用福林酚比色法、高效液相色谱法分别测定发酵饲料总酚、大豆异黄酮、山柰素含量,通过主成分分析法对抗氧... 详细信息

试验旨在研究枯草芽孢杆菌发酵复配饲料的抗氧化活性。试验以DPPH法、FRAP法等测定复配发酵饲料自由基清除率和铁离子还原能力,采用福林酚比色法、高效液相色谱法分别测定发酵饲料总酚、大豆异黄酮、山柰素含量,通过主成分分析法对抗氧化指标进行综合评价与分析。结果显示,配比为94%豆粕、4%麦麸、2%银杏叶渣的饲料发酵66 h后抗氧化性能最高;发酵样品提取液的抗氧化能力与抗氧化物质含量均显著提升;铁离子还原力从未发酵时的213.68μmol/L提高至607.68μmol/L;DPPH自由基清除的半最大效应浓度(EC50值)由4.50 g/L减少至2.23 g/L,羟自由基清除的EC50值从3.98 g/L降低至1.51 g/L,超氧阴离子清除的EC50值从2.04 g/L降低至0.76 g/L;样品提取液中大豆苷元、染料木素含量由1.16、0.59 mg/g提高至3.38、1.82 mg/g;染料木苷含量由5.89 mg/g降低至3.83 mg/g;山柰素含量由0提高至3.04 mg/g。总酚含量与超氧阴离子清除率的相关系数最大,为0.827;总黄酮含量与铁离子还原能力相关系数最大,为0.984。超氧阴离子清除率、铁离子还原能力、羟自由基清除率、DPPH自由基清除率与总酚、总黄酮含量之间存在显著的正相关关系。研究表明,枯草芽孢杆菌发酵饲料中总酚、总黄酮、大豆苷元、染料木素等抗氧化成分显著提升,抗氧化能力也随之提高。

关键词：复配饲料抗氧化活性枯草芽孢杆菌主成分分析

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枯草芽孢杆菌对马铃薯的促生防病效应

中国瓜菜 2023年第10期36卷 121-128页

作者：胡金雪樊建英相丛超贾明飞封志明李东玉张淑青石家庄市农林科学研究院石家庄050021

以中原二作区主栽品种中薯5号为材料,比较5种不同药剂处理对马铃薯种薯萌发、生长、叶绿素含量、产量和疮痂病防治效果的影响,进一步明确枯草芽孢杆菌对马铃薯促生防病的潜力。枯草芽孢杆菌可湿性粉剂处理可以促进种薯萌发,在发芽势、... 详细信息

以中原二作区主栽品种中薯5号为材料,比较5种不同药剂处理对马铃薯种薯萌发、生长、叶绿素含量、产量和疮痂病防治效果的影响,进一步明确枯草芽孢杆菌对马铃薯促生防病的潜力。枯草芽孢杆菌可湿性粉剂处理可以促进种薯萌发,在发芽势、萌芽质量、芽长等营养参数方面均优于其他处理;在收获期,株高、茎粗、叶片数、叶面积分别比对照增加了8.81%、18.45%、19.72%、12.07%,优于其他药剂处理;此外,叶片中叶绿素a、叶绿素b、总叶绿素含量比对照分别显著提高11.76%、65.90%、77.71%;马铃薯产量较对照CK增产14.51%,防治效果达到49.35%,显著优于其他药剂处理对马铃薯疮痂病的防治效果。基于PCA主成分分析结果显示,植株主茎数、叶绿素含量、萌芽鲜质量、活力指数及收获期的株高、茎粗、叶面积与产量之间呈正相关;防效越好,产量越高;疮痂病的防效与收获期株高、茎粗、叶面积之间无相关性;病薯率、病情指数与防效、产量之间呈负相关;生物防治效果优于化学防治。以上结果表明,枯草芽孢杆菌生物制剂能更好地促进马铃薯生长,增加产量,抑制马铃薯疮痂病发生,具有生产实践价值。

关键词：马铃薯枯草芽孢杆菌促生防病

枯草芽孢杆菌发酵银杏叶制备饲料添加剂的工艺研究

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中国饲料 2023年第23期 151-157页

作者：宋立立董旭芳张连水沧州师范学院生命科学系河北沧州061001 河北省水产养殖微生物菌剂技术创新中心河北沧州061001

本试验以银杏叶为主要的固态发酵基质,加入枯草芽孢杆菌为菌种,以蛋白酶活为指标,通过单因素试验探究发酵温度、发酵时间、接种量、营养液pH以及表面活性剂对发酵的影响。利用响应面分析法,优化枯草芽孢杆菌发酵的最适工艺条件,提取并... 详细信息

本试验以银杏叶为主要的固态发酵基质,加入枯草芽孢杆菌为菌种,以蛋白酶活为指标,通过单因素试验探究发酵温度、发酵时间、接种量、营养液pH以及表面活性剂对发酵的影响。利用响应面分析法,优化枯草芽孢杆菌发酵的最适工艺条件,提取并测定发酵产物中所含黄酮、多酚以及多糖的含量。同时与银杏叶粉直接提取黄酮、多酚、多糖对比,为利用银杏叶制备发酵饲料提供理论指导。结果显示:银杏叶粉直接提取黄酮、多酚、多糖,含量分别为15.43、1.37、7.2 mg/g;利用枯草芽孢杆菌发酵时,最佳发酵工艺条件为接种量9.98%、营养液pH 7.49、发酵时间50.67 h、温度37℃、表面活性剂为吐温-80,发酵产物内测得黄酮、多酚、多糖含量分别为13.94、1.2、6.26 mg/g。

关键词：枯草芽孢杆菌发酵饲料添加剂单因素试验响应面法

枯草芽孢杆菌对育肥羊生长性能、抗氧化及免疫机能的影响

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中国饲料 2023年第16期 21-24页

作者：何振虎项黎丽甘肃省临夏县畜牧发展中心甘肃临夏731800 济源产城融合示范区农业农村局河南济源459000

文章旨在研究基础日粮添加枯草芽孢杆菌对育肥羊生长性能、抗氧化及免疫机能的影响,试验将80只体重相近的育肥羊随机分为4组,每组4个重复,每个重复5只。各组育肥羊分别饲喂基础日粮+0、25、50、75 mg/kg的枯草芽孢杆菌的日粮,试验为期6... 详细信息

文章旨在研究基础日粮添加枯草芽孢杆菌对育肥羊生长性能、抗氧化及免疫机能的影响,试验将80只体重相近的育肥羊随机分为4组,每组4个重复,每个重复5只。各组育肥羊分别饲喂基础日粮+0、25、50、75 mg/kg的枯草芽孢杆菌的日粮,试验为期60 d。结果:(1)50、75 mg/kg枯草芽孢杆菌组育肥羊末重、平均日采食量显著高于0、25 mg/kg枯草芽孢杆菌组(P枯草芽孢杆菌组育肥羊平均日增重显著高于0 mg/kg枯草芽孢杆菌组(P枯草芽孢杆菌组育肥羊料重比显著高于50、75 mg/kg枯草芽孢杆菌组(P枯草芽孢杆菌组血样中总抗氧化能力、超氧化物歧化酶活性显著高于0 mg/kg枯草芽孢杆菌组(P枯草芽孢杆菌组血样中丙二醛含量显著高于25、50、75 mg/kg枯草芽孢杆菌组(P枯草芽孢杆菌组血样中免疫球蛋白A、肿瘤坏死因子-α含量显著高于0 mg/kg枯草芽孢杆菌组(P枯草芽孢杆菌组血样中免疫球蛋白G含量显著高于0 mg/kg枯草芽孢杆菌组(P枯草芽孢杆菌具有提高育肥羊生长性能、抗氧化及免疫机能的作用,从经济效益看,枯草芽孢杆菌适宜添加量为50 mg/kg。

关键词：枯草芽孢杆菌育肥羊生长性能抗氧化免疫机能

枯草芽孢杆菌对87~93 w蛋鸡生产性能、蛋品质、血清生化的影响

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中国饲料 2023年第5期 42-46页

作者：任跃昌赵恬玉李林葵朱政奇张凯瑛马璐璐张鹏飞孙作为杨维仁山东农业大学动物科技学院山东泰安271018 山东农业大学食品科学与工程学院山东泰安271018 山东玖瑞农业集团有限公司山东青岛266000 山东省莱阳市柏林庄畜牧兽医站山东烟台265200

为探究在87 w蛋鸡饲粮中添加枯草芽孢杆菌对生产性能、蛋品质、血清生化的影响,试验选取健康状况、产蛋性能相近的87 w产蛋后期海兰褐商品蛋鸡2400只,随机分为4个处理,每个处理6个重复,每个重复100只鸡。处理Ⅰ组为对照组,饲喂玉米-豆... 详细信息

为探究在87 w蛋鸡饲粮中添加枯草芽孢杆菌对生产性能、蛋品质、血清生化的影响,试验选取健康状况、产蛋性能相近的87 w产蛋后期海兰褐商品蛋鸡2400只,随机分为4个处理,每个处理6个重复,每个重复100只鸡。处理Ⅰ组为对照组,饲喂玉米-豆粕型基础饲粮,处理Ⅱ组在基础饲粮中添加0.05%博落回提取物作为阳性对照,处理Ⅲ、Ⅳ组在基础饲粮中分别添加0.2%和0.4%饲料添加剂枯草芽孢杆菌。结果显示:与对照组相比,饲粮添加0.05%博落回提取物以及0.2%和0.4%枯草芽孢杆菌组的产蛋率分别提高了1.65%、3.07%、0.97%,次蛋率分别降低17.65%、55.89%、55.88%;料蛋比显著降低(P枯草芽孢杆菌组的料蛋比最低,达到了2.23;同时蛋壳颜色红度值(a*)显著提高(P枯草芽孢杆菌可显著降低血清总胆固醇(TC)和低高密度脂蛋白(HDL)的含量(P枯草芽孢杆菌试验组的次蛋率、TC以及HDL含量显著降低(P0.05)。

关键词：蛋鸡枯草芽孢杆菌生产性能蛋品质血清生化

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枯草芽孢杆菌在肉鸡生产中的应用研究进展

饲料研究 2023年第21期46卷 165-169页

作者：刘叶青高爱琴内蒙古农业大学动物科学学院内蒙古自治区草食家畜饲料工程技术研究中心内蒙古呼和浩特010018

枯草芽孢杆菌可作为微生态制剂应用于畜禽生产中。在肉鸡生产中,饲粮中添加枯草芽孢杆菌可以提高生长性能,维护肠道屏障,调控细胞因子分泌,稳定肠道菌群,改善抗氧化能力,对肉鸡的生产性能、免疫功能和肉品质均具有积极影响。文章阐述了... 详细信息

枯草芽孢杆菌可作为微生态制剂应用于畜禽生产中。在肉鸡生产中,饲粮中添加枯草芽孢杆菌可以提高生长性能,维护肠道屏障,调控细胞因子分泌,稳定肠道菌群,改善抗氧化能力,对肉鸡的生产性能、免疫功能和肉品质均具有积极影响。文章阐述了枯草芽孢杆菌对肉鸡的影响及其作用机制,以期为枯草芽孢杆菌在肉鸡生产中的进一步应用提供参考。

关键词：枯草芽孢杆菌肉鸡生长性能抗病力肉品质

枯草芽孢杆菌体外抑菌试验及其抑菌蛋白的鉴定

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畜牧与兽医 2022年第12期54卷 57-63页

作者：尹杨燕彭昊李小宁李军李常挺白慧丽马春霞钟舒红陶立兰美益韦天超廖玉英广西大学动物科学技术学院广西南宁530004 广西壮族自治区兽医研究所广西南宁530001

旨在深入研究枯草芽孢杆菌发挥抑菌作用的相关抑菌蛋白,进一步了解枯草芽孢杆菌抑菌机制。本研究以枯草芽孢杆菌GX20200511-1株为研究对象,采用体外共培养及牛津杯法测定体外抑菌活性,低温离心和超滤法初步分离枯草芽孢杆菌的胞外蛋白,... 详细信息

旨在深入研究枯草芽孢杆菌发挥抑菌作用的相关抑菌蛋白,进一步了解枯草芽孢杆菌抑菌机制。本研究以枯草芽孢杆菌GX20200511-1株为研究对象,采用体外共培养及牛津杯法测定体外抑菌活性,低温离心和超滤法初步分离枯草芽孢杆菌的胞外蛋白,利用液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)进一步分析鉴定枯草芽孢杆菌发酵产物中的抑菌成分。结果表明枯草芽孢杆菌GX20200511-1对沙门菌、金黄色葡萄球菌和大肠杆菌均具有良好的抑菌效果,显著降低共培养24 h后的指示菌数量。经LC-MS/MS鉴定分析,共检索出455种蛋白质,通过Uniprot蛋白数据库对所有蛋白质进行分析,检测出6种可信度较高且与抑菌作用相关的蛋白质,分别是壳聚糖酶(chitosanase)、聚酮生物合成3-羟基-3-甲基戊二酰ACP合成酶PksG(polyketide biosynthesis 3-hydroxy-3-methylglutaryl-ACP synthase PksG)、伊枯草菌素合成酶(iturin synthetase)、表面活性素合成酶(surfactin synthetase)、丰原素合成酶(fengycin synthetase)和tRNA核酸酶WapA(tRNA nuclease WapA),分子量分别为31.395、46.766、296.6、402.43、48.86和173.525 kDa。本研究枯草芽孢杆菌GX20200511-1可能通过代谢产物中的多种抑菌蛋白协同发挥抗菌作用。

关键词：枯草芽孢杆菌体外抑菌抑菌蛋白超滤法液相色谱串联质谱

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枯草芽孢杆菌发酵豆渣制备多肽及其活性研究

中国酿造 2022年第1期41卷 75-79页

作者：尹乐斌李乐乐何平刘桠丽杨学为罗雪韵邵阳学院食品与化学工程学院湖南邵阳422000 豆制品加工与安全控制湖南省重点实验室湖南邵阳422000

以纤维素酶酶解后的豆渣为原料,利用枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)液态发酵豆渣制备大豆多肽,并以大豆多肽得率为响应值,通过单因素试验及响应面法对其制备工艺进行优化,并测定其抗氧化活性与抑菌活性。结果表明,枯草芽孢杆菌液态发... 详细信息

以纤维素酶酶解后的豆渣为原料,利用枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)液态发酵豆渣制备大豆多肽,并以大豆多肽得率为响应值,通过单因素试验及响应面法对其制备工艺进行优化,并测定其抗氧化活性与抑菌活性。结果表明,枯草芽孢杆菌液态发酵豆渣制备大豆多肽的最优工艺条件为:接种量3%、发酵温度37℃、发酵时间60 h。在此优化条件下,大豆多肽得率为88.12%;其对1,1二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基和2,2-联氮-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸(ABTS)自由基清除能力的半效应浓度(EC_(50))值分别为(2.36±0.05)mg/mL、(2.97±0.03)mg/mL;多肽质量浓度为25 mg/mL时,大肠杆菌(Escherichia coli)和金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)抑菌圈直径分别为(27.65±0.32)mm、(23.18±0.14)mm。结果表明,大豆多肽具有一定的抗氧化及抑菌活性。

关键词：豆渣枯草芽孢杆菌多肽得率抗氧化活性抑菌活性

枯草芽孢杆菌KRS034挥发物对葡萄采后的防腐保鲜作用及其机制初探

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枯草芽孢杆菌KRS034挥发物对葡萄采后的防腐保鲜作用及其机制初探

作者：李雪瑶河北农业大学

学位级别：硕士

鲜食葡萄(Vitis vinifera L.)作为我国葡萄产业的主体,具有丰富的营养成分和重要的保健功能。由于葡萄营养丰富、柔软多汁,采后储运过程中容易遭受病原菌侵染,引起腐败变质,使新鲜葡萄难以长期储存、运输和销售,造成重大经济损失。近年... 详细信息

鲜食葡萄(Vitis vinifera L.)作为我国葡萄产业的主体,具有丰富的营养成分和重要的保健功能。由于葡萄营养丰富、柔软多汁,采后储运过程中容易遭受病原菌侵染,引起腐败变质,使新鲜葡萄难以长期储存、运输和销售,造成重大经济损失。近年来,借助微生物对果蔬进行采后防腐保鲜成为研究热点,枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)作为最重要的生物防治微生物之一,产生的挥发性有机化合物(VOCs)具有极大的优势,但在采后葡萄防腐保鲜应用中研究较少。因此,本研究以课题组前期分离出的菌株KRS034为材料,首先对其进行菌种鉴定,测定其抑菌性、安全性及致病性,并对B.subtilis KRS034 VOCs中的抑菌成分进行鉴别。其次,对B.subtilis KRS034 VOCs处理的葡萄采后防腐保鲜效果、生理品质、防御响应诱导及基于转录组学分子层面上的差异变化进行了研究,以探明B.subtilis KRS034 VOCs对采后葡萄的防腐保鲜作用及其机制。主要研究结果如下:(1)菌株KRS034的鉴定、安全性及抑菌效果。通过形态学鉴定、生理生化特征以及16S rDNA与pta/rpoD/tpiA序列分子生物学鉴定,证明菌株KRS034为枯草芽孢杆菌(B.subtilis)。溶血性试验结果表明B.subtilis KRS034具有溶血安全性,对人及动物无致病性,可作为安全菌株应用于葡萄采后防腐保鲜。通过抑菌试验证明B.subtilis KRS034对多种致腐病原真菌具有广谱抑菌效果,证明B.subtilis KRS034 VOCs对灰葡萄孢菌(Botrytis cinerea)的抑制效果最好,抑制率达到96.58%。利用气相色谱-质谱联用技术(GC-MS)鉴定出B.subtilis KRS034中存在的可能具有潜在抑菌性的16种VOCs,包括7种酮类、5种醇类、3种酸类及1种吡嗪类化合物,体外抑菌实验表明上述化合物均对B.cinerea有不同程度的抑制效果。(2)B.subtilis KRS034 VOCs处理对采后葡萄具有较好的防腐保鲜效果,并且对果实品质无负面影响。B.subtilis KRS034 VOCs处理能够显著降低接种B.cinerea葡萄的腐烂率、伤口处病斑直径及真菌生物量。在生理品质方面,相较于接种B.cinerea后未采取保鲜措施的葡萄,B.subtilis KRS034 VOCs处理能使其保持较低的失重率,较高的可溶性蛋白、总黄酮、花青素含量。同时,B.subtilis KRS034 VOCs处理能够提高健康葡萄中的防御酶(PPO、POD、SOD、CAT)活性以及降低丙二醛(MDA)的含量,进而诱导葡萄采后过程中自身的防御响应。(3)在转录组水平上探讨了 B.subtilisKRS034 VOCs处理诱导果实防御响应并引发防御性的分子机制。基于GO功能分类与KEGG通路富集分析,表明经B.subtilis KRS034 VOCs诱导后,差异表达基因富集于与葡萄果实信号转导、环境应激以及生命活动有关的功能,以及在果实防御中起重要作用的代谢通路:MAPK信号传导、木栓质和蜡质生物合成、氮代谢、氨基糖和核苷酸糖代谢、α-亚麻酸代谢与甘油磷酸脂代谢。综上所述,B.subtilis KRS034 VOCs处理能够在采后过程中对葡萄进行防腐保鲜且效果良好,推断其防御机制可能与防御酶和多种代谢通路调节有关。

关键词：葡萄防腐保鲜枯草芽孢杆菌挥发性有机化合物防御响应