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中国免疫学杂志 2024年第8期40卷 1625-1633页

作者：许静郭健罗永贵李大星唐英娄宝佳彭淼郑永贵州省骨科医院骨内五病区贵阳550000

目的:探讨微重力介导果蝇双翅边缘缺刻同源基因1(Notch1)信号调控巨噬细胞极化对骨稳态的影响。方法:以尾吊法(HLS)模拟微重力环境构建动物模型。动物分组为Control组、HLS组、HLS+NC组、HLS+si组、HLS+rhNF-κB组,ELISA检测大鼠血清中T... 详细信息

目的:探讨微重力介导果蝇双翅边缘缺刻同源基因1(Notch1)信号调控巨噬细胞极化对骨稳态的影响。方法:以尾吊法(HLS)模拟微重力环境构建动物模型。动物分组为Control组、HLS组、HLS+NC组、HLS+si组、HLS+rhNF-κB组,ELISA检测大鼠血清中TNF-α和IL-1β的含量;TUNEL染色检测骨组织的细胞凋亡;免疫荧光检测骨组织中巨噬细胞的极化。以旋转壁式生物反应器模拟微重力环境构建大鼠成骨细胞CP-R091微重力模型;细胞实验分为Control组、HLS组、HLS+NC组、HLS+si组、HLS+rhNF-κB组;CCK-8实验检测各组细胞的增殖活性,AO实验检测各组细胞的凋亡率;PCR检测骨组织和细胞中成骨相关基因的表达;Western blot检测各组骨组织和细胞中Notch1、发状分裂相关增强子-l(HES-1)、Notch通路配体1(Jagged1)的表达。结果:与Control组相比,HLS组大鼠血清中TNF-α和IL-1β的含量、细胞凋亡率、M1样巨噬细胞比例明显升高;与HLS组相比,HLS+si组能明显部分逆转上述参数变化趋势,而HLS+rhNF-κB组则使上述参数值变化更显著。与Control组相比,HLS组细胞的增殖活性明显降低,细胞凋亡率明显升高;与HLS组细胞相比,HLS+si组能明显部分逆转上述参数变化趋势,而HLS+rhNF-κB组则使上述参数值更为显著;微重力环境下骨组织和细胞中成骨相关基因Ⅰ型胶原蛋白(COL1)、骨钙素(OCN)以及成骨分化基因Runt相关转录因子2(RUNX2)表达明显降低,而Notch-1、Hes-1和Jagged1的表达明显升高,差异均具有统计学意义(均P<0.05)。结论:微重力介导Notch1信号调控巨噬细胞M1/M2样极化,参与骨组织细胞增殖与凋亡,影响骨稳态的进展。

关键词：微重力果蝇双翅边缘缺刻同源基因1 巨噬细胞极化骨稳态

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白藜芦醇纳米粒对原发性免疫性血小板减少性紫癜大鼠Treg/Th17免疫平衡的改善作用及其机制

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免疫学杂志 2022年第11期38卷 990-998页

作者：金娜王晟吕世琴袁钊郭宁红南昌大学第二附属医院临床试验研究中心 330008 江西省精神病医院精神科南昌330008

目的探讨白藜芦醇纳米粒(resveratrol nanosuspensions,Res-NPs)对原发性免疫性血小板减少性紫癜(primary immune thrombocytopenia,ITP)大鼠调节性T细胞(regulatory T,Treg)/Th17免疫平衡的改善作用以及其对Notch1信号的调节作用。方法提取芯片数据集GSE46922和GSE23754,分析Notch1在ITP的表达。采用腹腔注射含整合素的牛血清白蛋白溶液构建ITP模型。实验大鼠随机分为正常组(Normal)、模型组(ITP)、ITP+Notch1过表达组(ITP+pc)、ITP+Res-NPs组(ITP+Res-NPs)以及ITP+Res-NPs+Notch1过表达组(ITP+Res-NPs+pc)。然后用Western blot检测脾组织中Notch1和Notch配体(Jagged1)的表达,HE染色检测病理变化,细胞计数检测各组大鼠外周血中的血小板的数目,ELISA检测血清中TNF-α、IL-6、IL-17A、TGF-β1的含量,流式细胞术检测脾单细胞悬液中Treg和Th17的百分比。结果数据集统计分析结果显示Notch1在ITP中的表达升高,Western blot结果显示Notch1过表达质粒能有效上调Notch1的表达、并能调节Jagged1的表达。白藜芦醇纳米粒能显著改善ITP模型大鼠的血小板数目,抑制血清中TNF-α、IL-6、IL-17A的释放,改善脾组织中Treg和Th17细胞的平衡,降低脾组织中Notch1和Jagged1的表达。上调Notch1则加重ITP模型鼠的上述指标恶化,联合处理组则显示上调Notch1可以部分阻断白藜芦醇纳米粒对ITP大鼠的改善效应。结论白藜芦醇纳米粒能明显升高ITP大鼠血清中血小板计数,缓解动物脾和脊髓的组织病理损伤,改善其Treg/Th17免疫平衡,这与调控Notch1信号有关。

关键词：白藜芦醇纳米粒原发性免疫性血小板减少性紫癜果蝇双翅边缘缺刻同源基因1 调节性T细胞 Th17细胞

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