检索结果-南通市图书馆

胶原诱导性关节炎大鼠滑膜组织醛缩酶A表达及痹肿消汤的干预效应

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国临床康复 2006年第47期10卷 103-106页

作者：何国雄梁清华杨波蔡颖谢薇中南大学湘雅医院中西医结合研究所湖南省长沙市410008

目的:观察胶原诱导性关节炎大鼠滑膜组织醛缩酶A表达及痹肿消汤干预的影响。方法:实验于2005-05/2005-07在中南大学湘雅医院中西医结合研究所实验室、卫生部肿瘤蛋白质组学重点实验室完成。选用51只健康SD大鼠,以随机数字表法选出36只造... 详细信息

目的:观察胶原诱导性关节炎大鼠滑膜组织醛缩酶A表达及痹肿消汤干预的影响。方法:实验于2005-05/2005-07在中南大学湘雅医院中西医结合研究所实验室、卫生部肿瘤蛋白质组学重点实验室完成。选用51只健康SD大鼠,以随机数字表法选出36只造模,采用皮下注射牛Ⅱ型胶原与完全福氏佐剂诱导SD大鼠实验性关节炎)模型,另15只作为正常对照组,注射等量生理盐水。成模大鼠30只以随机数字表法分为模型组和痹肿消汤组,各15只。痹肿消汤组于初次免疫7d后开始灌服痹肿消汤(痹肿消汤由白花蛇舌草、肿节风、苡米、络石藤、丹参、骨碎补等15味中药组成,体表面积比换算关系,大鼠用药为70kg成人临床用药3倍,药材从中南大学湘雅医院中药房一次性选购,两次水煎取药液备用),相当于生药62.1g/(kg·d),每只约1.5mL,2次/d灌服;模型组与正常组同体积生理盐水。观察大鼠一般情况,并定期对其进行关节炎指数评分。按0～4级进行评分,0分:无关节炎;1分:有红色斑点后轻度肿胀;2分:关节部位中度肿胀;3分:关节严重肿胀;4分:关节严重肿胀且不能负重。采用免疫印迹法(Westernblot)检测正常组、模型组及痹肿消汤组大鼠在不同时间点滑膜组织醛缩酶A的表达,运用ImageTool3.0灰度扫描软件对结果进行半定量分析。结果:纳入实验的51只大鼠,造模不成功被淘汰6只,最终痹肿消汤组15只、模型组15只、对照组15只,共45只大鼠进入结果分析。①各组大鼠关节炎指数比较:模型组大鼠关节炎指数于免疫后25d左右达到高峰,30d后呈下降趋势;痹肿消汤组大鼠亦于25d左右达高峰,但较模型组低。②各组大鼠滑膜组织醛缩酶A的表达:模型组醛缩酶A表达在25,35,45d递增(P醛缩酶A表达在各时间点明显低于同时间模型组及正常组(P醛缩酶A表达增加,且随免疫时间延长而逐渐上调。痹肿消汤能下调关节炎大鼠滑膜醛缩酶A表达,这可能是其阻抑类风湿关节炎骨质侵蚀的重要机制之一。

关键词：关节炎实验性/中药疗法果糖-二磷酸醛缩酶关节炎类风湿免疫印迹法

N-乙酰-D-神经氨酸醛缩酶基因的克隆与表达

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

浙江大学学报（医学版） 2010年第1期39卷 57-63页

作者：杨蕴刘饶娆沈健冯磊中科院上海植物生理研究所上海200032 浙江医学高等专科学校浙江杭州310053 浙江大学医学院浙江林学院健康管理系浙江杭州310058

目的:为了获得N-乙酰-D-神经氨酸醛缩酶基因表达的两重组菌。方法:以大肠杆菌C600染色体DNA为模板,通过引物设计和PCR扩增,克隆获得编码Neu5Ac醛缩酶基因(nanA)的片段;以pET28b构建的nanA基因重组质粒pRY1转化***21(DE3),然后将nanA基... 详细信息

目的:为了获得N-乙酰-D-神经氨酸醛缩酶基因表达的两重组菌。方法:以大肠杆菌C600染色体DNA为模板,通过引物设计和PCR扩增,克隆获得编码Neu5Ac醛缩酶基因(nanA)的片段;以pET28b构建的nanA基因重组质粒pRY1转化***21(DE3),然后将nanA基因片段组入到pDR540载体的Ptac启动子下游,所得重组菌***5α/pRY3的nanA基因在tac启动子控制下呈组成型表达。结果:DNA序列测定证明,该基因的开放阅读框(open read ing frame,ORF)大小为894 bp,编码298个氨基酸组成的酶蛋白;SDS-PAGE显示,纯化的目的蛋白为33 kD的单一条带。以pET28b构建的nanA基因重组质粒pRY1转化***21(DE3),在得到的转化子***21(DE3)/pRY1中,nanA基因受lac启动子控制,无需IPTG或乳糖所诱导。在N-乙酰-D-神经氨酸醛缩酶固定化酶的催化下合成N-乙酰-D-神经氨酸的合成效率为78.3%,结晶回收率为90.2%,总回收率为70.6%。全波长扫描分析表明:本实验室结晶品与Sigma公司商品的全波长扫描图谱有相同的特征。结论:所构建的诱导型产酶菌株***21(DE3)/pRY1和组成型表达菌株***5α/pRY3都可较多量的产酶。合成的结晶品具有N-乙酰-D-神经氨酸的特征。

关键词： N-乙酰神经氨酸/遗传学果糖-二磷酸醛缩酶大肠杆菌/遗传学聚合酶链反应克隆,分子重组,遗传转染遗传载体基因表达重组蛋白质类

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

血清醛缩酶在肝移植术中动态变化规律及意义

重庆医学 2011年第6期40卷 547-549页

作者：邓小玲韩星梅陈辉重庆医科大学附属第一医院检验科 400016 重庆医科大学检验系 400016

目的探讨肝移植术中和术后血清醛缩酶(ALD)的动态变化及意义。方法收集肝移植术前、中、后不同时间点的血清,用全自动生化分析仪测定ALD,并与丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)等进行比较分析。结果... 详细信息

目的探讨肝移植术中和术后血清醛缩酶(ALD)的动态变化及意义。方法收集肝移植术前、中、后不同时间点的血清,用全自动生化分析仪测定ALD,并与丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)等进行比较分析。结果肝移植术中,ALD等4种酶活力均呈进行性上升趋势,且ALD活力与ALT、AST、LDH活力呈正相关,相关系数分别为0.901、0.777、0.975(P酶活力在肝移植术后第2天均明显升高达峰值,然后缓慢下降,术后ALD活力与ALT、AST、LDH活力也呈正相关,相关系数分别为0.967、0.905、0.893(P<0.01)。结论 ALD可以作为肝移植术中和术后肝功能评价及监测的实验室指标。

关键词：果糖-二磷酸醛缩酶肝移植肝功能试验

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

醛缩酶A在肠易激综合征患者结肠黏膜的表达

中华临床医师杂志（电子版） 2011年第12期5卷 3513-3517页

作者：张春燕杨云生郭旭孙刚王巍峰海军总医院干部综合科北京100048 解放军总医院消化病中心

目的研究醛缩酶A(ALDOA)在肠易激综合征(IBS)患者结肠黏膜的表达情况,探讨IBS发病的新机制,为未来研究提供新的思路。方法应用Western blot和免疫组织化学等方法,观察ALDOA在腹泻型肠易激综合征(IBS-D)及便秘型肠易激综合征(IBS-C)患者... 详细信息

目的研究醛缩酶A(ALDOA)在肠易激综合征(IBS)患者结肠黏膜的表达情况,探讨IBS发病的新机制,为未来研究提供新的思路。方法应用Western blot和免疫组织化学等方法,观察ALDOA在腹泻型肠易激综合征(IBS-D)及便秘型肠易激综合征(IBS-C)患者结肠黏膜的表达情况。结果 ALDOA在IBS-D组乙状结肠、IBS-C组乙状结肠及IBS-D组盲肠表达量明显少于健康对照组的相应部位,差异有统计学意义。结论 ALDOA在IBS患者结肠的表达异常提示着IBS-D、IBS-C患者结肠存在能量代谢异常。

关键词：肠易激综合征果糖-二磷酸醛缩酶肠黏膜