检索结果-南通市图书馆

果生炭疽菌Rab蛋白家族鉴定及生物信息学分析

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

上海农业学报 2022年第5期38卷 37-46页

作者：张丽勍安海山方献平李水根张学英上海市农业科学院林木果树研究所上海市设施园艺技术重点实验室上海201403

利用已报道的酿酒酵母的11个Rab蛋白氨基酸序列及Rab数据库对果生炭疽菌全基因组数据进行比对分析,共获得果生炭疽菌Rab蛋白10个。生物信息学分析表明:这10个Rab蛋白均不含信号肽和跨膜结构域,均为亲水蛋白。CfRab1和CfRab7蛋白定位于质... 详细信息

利用已报道的酿酒酵母的11个Rab蛋白氨基酸序列及Rab数据库对果生炭疽菌全基因组数据进行比对分析,共获得果生炭疽菌Rab蛋白10个。生物信息学分析表明:这10个Rab蛋白均不含信号肽和跨膜结构域,均为亲水蛋白。CfRab1和CfRab7蛋白定位于质膜,CfRab4蛋白定位于线粒体,其余7个Rab蛋白定位于高尔基体。该Rab蛋白家族均具有保守结构域,在丝状真菌中高度保守。实时荧光定量PCR结果表明,相对于菌丝阶段,CfRab5A和CfRabX1在孢子发育阶段表达量最高,CfRab1、CfRab2、CfRab4、CfRab5B、CfRab6、CfRab7和CfRab8在果生炭疽菌侵染后48 h表达量最高。研究为探究草莓果生炭疽菌Rab家族成员的功能奠定了基础。

关键词：果生炭疽菌 Rab蛋白生物信息学进化分析

草莓果生炭疽菌LysM效应子CfLysM2的致病功能分析

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

植物保护 2023年第3期49卷 39-49页

作者：余永婷李水根方献平张昊安海山张学英张丽勍上海市农业科学院林木果树研究所上海市设施园艺技术重点实验室上海201403 中国农业科学院植物保护研究所北京100193

果生炭疽菌Colletotrichum fructicola侵染引起的草莓炭疽病是草莓生产中的重要病害。前期研究发现一个在果生炭疽菌侵染阶段高表达的含LysM结构域的候选效应子CfLysM2。为进一步研究CfLysM2的致病功能,运用同源重组方法构建CfLysM2缺... 详细信息

果生炭疽菌Colletotrichum fructicola侵染引起的草莓炭疽病是草莓生产中的重要病害。前期研究发现一个在果生炭疽菌侵染阶段高表达的含LysM结构域的候选效应子CfLysM2。为进一步研究CfLysM2的致病功能,运用同源重组方法构建CfLysM2缺失突变株ΔCfLysM2和回补菌株CfLysM2c。致病力测定结果表明,接种后15 d,ΔCfLysM2接种的草莓叶片病情指数显著下降。荧光定量PCR分析表明CfLysM2基因在果生炭疽菌接种草莓叶片后24 h相对表达量最高。利用转录组技术对野生型菌株(wild-type strain,WT)和ΔCfLysM2接种后24 h的草莓叶片样品进行比较分析,获得差异表达基因109个。CfLysM2的缺失导致宿主代谢途径尤其是次生代谢物生物合成通路的激活,说明CfLysM2可能在果生炭疽菌侵染草莓过程中通过靶向黄酮醇合成酶等代谢相关基因,抑制植物次生代谢产物合成及其介导的抗真菌免疫,保证其顺利侵染。该研究为揭示CfLysM2机理及对果生炭疽菌和草莓互作研究奠定了理论基础。

关键词：果生炭疽菌 LysM结构域致病性转录组

果生炭疽菌效应蛋白CfCE92功能及互作靶标筛选

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

果生炭疽菌效应蛋白CfCE92功能及互作靶标筛选

作者：张凇西北农林科技大学

学位级别：硕士

果生炭疽菌严重危害多种经济作物。引起金冠系苹果品种炭疽叶枯病(GLS),造成早期落叶和果实斑点,严重影响苹果产量和品质。已知炭疽菌效应蛋白可以通过影响寄主免疫反应促进寄主感病,为炭疽菌重要致病因子。但目前对果生炭疽菌致病机理... 详细信息

果生炭疽菌严重危害多种经济作物。引起金冠系苹果品种炭疽叶枯病(GLS),造成早期落叶和果实斑点,严重影响苹果产量和品质。已知炭疽菌效应蛋白可以通过影响寄主免疫反应促进寄主感病,为炭疽菌重要致病因子。但目前对果生炭疽菌致病机理目前了解很少。实验室前期从果生炭疽菌筛选鉴定出一个效应蛋白Cf CE92,本研究拟对其致病中的功能进行系统研究,取得以下主要结果:1. 用果生炭疽菌野生型和ΔCf CE92突变体分别接种嘎啦叶片,24 h后提取RNA,进行转录组测序、基因预测与注释,共获得52.41G数据,注释45116个基因。差异分析获得突变体和野生型2370个差异表达基因,其中显著上调310个基因。通过Pathway富集分析可以看出,在乙醛酸和二羧酸代谢途径、黄酮生物合成途径、半乳糖代谢途径、氨基糖和核苷酸糖代谢、甘油脂代谢和MAPK信号转导等6个通路显著富集。2. MAPK信号通路在生物体内能够介导细胞的生长发育及分裂分化等多种生理变化,并参与病理过程。在MAPK信号通路中富集到了7个基因,包括2个脱落酸受体、PR1a、PR3、丝氨酸苏氨酸蛋白激酶、类乙烯反应转录因子和WRKY29。对PR1a、PR3、WRKY29进行了q RT-PCR分析,结果表明突变体比野生型的基因表达水平均显著上调。3. 黄酮类化合物是植物体内重要次生代谢产物,在植物防御中具有重要作用。在黄酮生物合成途径中富集到3个基因:查尔酮合酶、查尔酮异构酶、类莽草酸邻羟基肉桂酰转移酶,q RT-PCR分析显示ΔCf CE92比野生型的表达水平均显著上调。4. 代谢组分析2’,3,4,4’,6’-五羟基查耳酮、7,4’-二羟基黄酮、甘草素、柚皮素、根皮素、根皮苷和乔松素等7种黄酮类化合物显著上调。体外验证显示,7种化合物在PDA培养基中对果生炭疽菌的生长均具有抑制效果,结果表明五羟基查尔酮(EC36.6 mg/L)抑制作用最高,柚皮素(143.4 mg/L)与7,4’-二羟基黄酮(150.9 mg/L)抑制作用次之。这些结果表明Cf CE92在侵染过程中可以通过抑制防御相关通路基因的表达抑制抗菌代谢产物的合成。5. 效应蛋白Cf CE92互作靶标筛选:烟草瞬时表达Cf CE92,结果显示Cf CE92定位于烟草细胞质和细胞核。用酵母双杂交技术在果生炭疽菌侵染叶片c DNA文库中进行靶标蛋白筛选,得到68个候选靶标蛋白。利用酵母体内验证显示核苷二磷酸蛋白激酶(NDPK)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)、亮氨酸拉链蛋白(GILZ)在SD/-Trp/-Leu/-His/-Ade培养基上生长且变蓝。进一步运用双分子荧光技术(BIFC)显示Cf CE92与NDPK可以在细胞核中共表达。这些结果表明,Cf CE92与植物防卫反应相关基因NDPK存在直接互作关系。本研究表明Cf CE92在侵染过程中可以通过抑制防御相关通路基因的表达,进而抑制病程相关蛋白及抗菌产生代谢产物的合成。筛选到与果生炭疽菌效应蛋白Cf CE92互作的宿主靶标蛋白NDPK。推测Cf CE92通过与NDPK互作抑制寄主防卫反应促进其致病。本研究初步揭示了效应蛋白Cf CE92的致病机理,为进一步探究果生炭疽菌致病机制奠定基础,也为开发新农药提供了靶标。

关键词：苹果炭疽叶枯病效应蛋白致病机理果生炭疽菌

油茶果生炭疽菌小分子GTP酶Rab7的功能研究

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

微生物学报 2022年第7期62卷 2509-2520页

作者：吴泳仪李琳李河中南林业科技大学南方人工林病虫害防控国家林草局重点实验室森林有害生物防控湖南省重点实验室经济林培育与保护教育部重点实验室湖南长沙410004

【目的】炭疽病是油茶的一种重要病害,果生炭疽菌是油茶炭疽病的主要致病菌。本文对果生炭疽菌小分子GTP酶Rab7进行研究,为油茶炭疽病的防控治理提供依据。【方法】构建CfRAB7基因敲除载体,通过PEG介导的原生质体转化、抗性筛选和PCR电... 详细信息

【目的】炭疽病是油茶的一种重要病害,果生炭疽菌是油茶炭疽病的主要致病菌。本文对果生炭疽菌小分子GTP酶Rab7进行研究,为油茶炭疽病的防控治理提供依据。【方法】构建CfRAB7基因敲除载体,通过PEG介导的原生质体转化、抗性筛选和PCR电泳验证获得果生炭疽菌突变体菌株△Cfrab7和互补菌株△Cfrab7/CfRAB7。进一步分析CfRAB7基因敲除突变体△Cfrab7的生长、产孢、附着孢的形成、胁迫应答、液泡融合和致病力等生物学表型。【结果】在PDA和MM培养基上,突变体△Cfrab7的菌落直径显著减小,产孢量和附着孢形成率显著降低,且不能穿透玻璃纸;在10mmol/L H_(2)O_(2)条件下,△Cfrab7生长受到明显抑制;进一步研究发现突变体△Cfrab7液泡无法正常融合,在油茶有伤和无伤的幼叶上均不发病。【结论】CfRAB7基因参与调控果生炭疽菌生长产孢、附着孢形成、H2O2胁迫应答、液泡融合和致病力。

关键词：油茶果生炭疽菌 Rab7 致病力

蛋白-O-岩藻糖基转移酶1基因CfPOFUT1在果生炭疽菌中的功能分析

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

微生物学报 2022年第10期62卷 3801-3812页

作者：朱俊子黎萍邱泽澜李晓刚钟杰湖南农业大学植物保护学院湖南长沙410128 湖南省农业有害生物预警与防控工程研究中心湖南长沙410128

【目的】蛋白-O-岩藻糖基转移酶1(protein O-fucosyltransferase 1,POFUT1)是催化蛋白质O-岩藻糖基化的关键酶,在动物和人体内被证明调控一系列的生理病理过程,然而POFUT1基因在果生炭疽菌乃至真菌中还未见报道。本研究旨在克隆果生炭... 详细信息

【目的】蛋白-O-岩藻糖基转移酶1(protein O-fucosyltransferase 1,POFUT1)是催化蛋白质O-岩藻糖基化的关键酶,在动物和人体内被证明调控一系列的生理病理过程,然而POFUT1基因在果生炭疽菌乃至真菌中还未见报道。本研究旨在克隆果生炭疽菌中CfPOFUT1基因,并分析其生物学功能。【方法】利用RT-PCR技术扩增CfPOFUT1的基因并进行生物信息学分析,构建了CfPOFUT1基因的沉默和过表达载体,通过PEG介导法将载体导入原生质体中获得CfPOFUT1基因的沉默和过表达突变体。测定了野生型菌株、CfPOFUT1沉默菌株和过表达菌株在PDA上的菌丝生长、分生孢子产生、萌发与附着胞形成、胁迫应答和致病力、杀菌剂敏感性等生物学表型。【结果】与野生型菌株相比,基因过表达突变体产孢量显著增加,致病力增强,对嘧菌酯敏感性降低,但对多菌灵和咪鲜胺敏感性增强。基因沉默突变体产孢量减少,细胞壁完整性、内质网应激敏感性提高,致病力减弱,对嘧菌酯敏感性提高,但对多菌灵和咪鲜胺敏感性降低。【结论】CfPOFUT1基因参与调控果生炭疽菌分生孢子产量,细胞壁完整性、内质网对应激和药剂敏感性,并对其致病性也具有一定的影响。

关键词：果生炭疽菌蛋白-O-岩藻糖基转移酶1 CfPOFUT1 药剂敏感性致病力

草莓果生炭疽菌效应子基因CfE4对产孢量及菌丝穿透能力的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

分子植物育种 2022年

作者：黎晓丹方献平李水根安海山张学英张丽勍上海市设施园艺技术重点实验室上海市农业科学院林木果树研究所

由果生炭疽菌引起的草莓炭疽病一直是制约草莓产业持续稳定发展的瓶颈，针对病菌效应子调控寄主免疫机制的研究能够为草莓炭疽病的绿色防控和抗病育种提供重要理论基础，也是当前植物病理学领域研究的热点。团队前期通过转录组学结合生... 详细信息

由果生炭疽菌引起的草莓炭疽病一直是制约草莓产业持续稳定发展的瓶颈，针对病菌效应子调控寄主免疫机制的研究能够为草莓炭疽病的绿色防控和抗病育种提供重要理论基础，也是当前植物病理学领域研究的热点。团队前期通过转录组学结合生物信息学分析，获得了一个在果生炭疽菌侵染草莓叶片后早期上调表达的候选效应子，将其命名为CfE4。为研究CfE4基因的生物学特性，及其是否影响果生炭疽菌致病力，本研究采用了生物信息学、基因缺失突变和互补技术及生物学测定等方法对CfE4的功能进行初步研究。针对CfE4蛋白的生物信息学结果表明：CfE4蛋白含有253个氨基酸，分子量约为29.58 kD，等电点pI为7.95，不含任何已知的结构域。N端信号肽序列含有19个氨基酸，不具有跨膜结构域。二级结果主要由α-螺旋(79%)、β股(2%)及无规则卷曲(42%)组成。构建并筛选获得了CfE4基因的突变菌株ΔCfE4和互补菌株ΔCfE4c，野生型菌株、ΔCfE4和ΔCfE4c在菌落直径及孢子形态方面无显著差异，ΔCfE4的孢子产量显著低于野生型菌株和ΔCfE4c，ΔCfE4c的孢子产量与WT无显著差异。此外，CfE4基因的缺失导致果生炭疽菌菌丝的穿透力显著降低。本研究结果为阐明CfE4效应子在果生炭疽病致病过程中的作用，进一步为草莓炭疽病的绿色防控和抗病育种提供理论支撑。

关键词：草莓炭疽病果生炭疽菌效应子 CfE4

果生炭疽菌Colletotrichum fructicola有性生殖遗传特性研究

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

果生炭疽菌Colletotrichum fructicola有性生殖遗传特性研究

作者：张玮西北农林科技大学

学位级别：硕士

炭疽叶枯病是近几年在我国苹果产区迅速蔓延的一种新病害,果生炭疽菌Colletotrichum fructicola为引起该病害主要致病菌。与大多数炭疽菌不同,果生炭疽菌可在苹果生长季节产生大量成熟子囊孢子随风进行远距离传播,导致病害的迅速蔓延流... 详细信息

炭疽叶枯病是近几年在我国苹果产区迅速蔓延的一种新病害,果生炭疽菌Colletotrichum fructicola为引起该病害主要致病菌。与大多数炭疽菌不同,果生炭疽菌可在苹果生长季节产生大量成熟子囊孢子随风进行远距离传播,导致病害的迅速蔓延流行。本研究通过对果生炭疽菌交配型基因鉴定及有性生殖遗传特性研究,阐明其有性生殖机理及控制因素,为进一步揭示炭疽叶枯病在田间发生、流行规律奠定一定的理论基础。本研究以果生炭疽菌易产有性生殖菌株ZW1104为材料,通过对其后代子囊孢子单孢菌系的遗传学、生物学、致病性等特性分析,初步明确了果生炭疽菌有性生殖产生机理及其特性。主要研究结果如下:1)通过子囊孢子单孢菌系交配试验发现,该菌可以划分为两个类型:可育型和半可育型。可育型菌株能够进行同宗配合,产生子囊壳、子囊和子囊孢子;半可育型表现为不完整同宗配合,菌株能够产生子囊壳及少量畸形子囊,不产生子囊孢子。据此,我们将果生炭疽菌Colletotrichum fructicola有性生殖归为一种非典型同宗配合。2)两种类群菌株在菌落特征,生长速率,分生孢子大小,子实体产生能力、时间,后代可育性,致病性方面均表现明显差异。可育型菌株:在PDA培养基上产生大量气生菌丝、绒毛状,菌落正面白色至浅灰色,背面灰色至青黑色;分生孢子14.2–19.3×4.6–5.5μm;培养15天后可产生子囊壳聚集体,子囊壳聚集体散生,10-20个/皿,每个聚集体含子囊壳70-100个;子囊孢子后代全部为可育型;接种嘎啦叶片,3 d发病率为92%,病斑直径约为0.7 cm;接种洋葱内表皮,在17hai形成粗壮侵染菌丝。半可育型菌株:在PDA培养基上气生菌丝较少、平铺,菌落正面灰色至黑色、背面黑色;分生孢子13.6–17.8×5.2–7.4μm;子囊壳埋生或半埋生培养基中,散生,约20个/mm2;接种嘎啦叶片,3 d发病率为77%,病斑直径约为0.4cm;接种洋葱内表皮,在20 h形成粗壮侵染菌丝。3)可育型菌株与半可育型菌株杂交,菌丝接触处可形成一条宽约5 mm的接触线,接触线上形成大量散生或聚集的子囊壳,约50个/mm2,子囊壳中产生子囊、子囊孢子。杂交后代包含可育型和半可育型菌株,可育型:半可育型整体比例约为1:1,但是单个子囊中可育型:半可育型可以表现为4:4,6:2,8:0等。两种类型杂交,在对峙培养1周左右即可形成子囊壳,其时间明显短于两个类型单独培养形成子囊壳的时间。产生子囊壳的数量也远多于每种类型单独培养产生的数量,约50个/mm2。推测两个可育性菌株类型含有一些互补的有性生殖相关基因,两个类型杂交时,更有利于子囊壳、子囊及子囊孢子的形成。4)交配型基因分析显示,可育型及半可育型交配型没有差异,二者均具有MAT1-2交配型（含有HMG domain）,都不含有MAT1-1交配型。推测果生炭疽菌可能含有一类独特的MAT1-1交配型使其能够进行同宗配合。5)培养条件对可育型、半可育型菌株生长影响存在差异:可育型菌株对温度较敏感,温度低于20℃或高于30℃时,菌落生长速率受到明显抑制;可育型菌株在pH4条件下生长速率最高,半可育型菌株在pH5条件下生长速率最高;在不同培养基培养条件下差异不明显。6)利用简单重复系列（ISSR）对果生炭疽菌可育型、半可育型进行遗传差异分析,结果发现用引物889扩增时,半可育型菌株具有一条约1000bp的特征性条带,说明两类菌株在遗传上存在差异。引物889可作为两种菌株类型区分快速鉴定的分子标记。

关键词：果生炭疽菌有性生殖可育型半可育型

导致南方梨早期落叶的果生炭疽菌致病力分化分析

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

果树学报 2020年第7期37卷 1046-1056页

作者：彭宇鸿傅敏胡红菊黄新忠洪霓王国平华中农业大学植物科学技术学院·湖北省作物病害监测与安全控制重点实验室武汉430070 湖北省农业科学院果树茶叶研究所武汉430209 福建省农业科学院果树研究所福州350013

【目的】明确我国南方梨产区造成早期落叶的果生炭疽菌(Colletotrichum fructicola)的致病力分化状况并建立其室内快速测定方法。【方法】以梨的枝条、叶片和果实为材料,采用不同方法造成伤口后接种果生炭疽菌的强致病力菌株PAFQ32,通... 详细信息

【目的】明确我国南方梨产区造成早期落叶的果生炭疽菌(Colletotrichum fructicola)的致病力分化状况并建立其室内快速测定方法。【方法】以梨的枝条、叶片和果实为材料,采用不同方法造成伤口后接种果生炭疽菌的强致病力菌株PAFQ32,通过比较各处理的测定效果筛选其室内快速测定方法,并对供试菌株的致病力进行观测和致病类型划分,分析不同菌株致病力分化与其地理来源之间的相关性。【结果】采用梨枝条、叶片和果实对果生炭疽菌致病力的观测结果显示,梨叶片经针刺后接种菌丝块的测定效果明显优于其他处理。供试菌株致病力的测定结果表明,来源于我国南方梨产区的111个果生炭疽菌菌株其致病力可划分为强、中、弱3个类型,其中强致病力菌株17个(15.3%);中等致病力菌株89个(80.2%);弱致病力菌株5个(4.5%)。不同地理来源的果生炭疽菌菌株,其致病类型的分布比例有异。【结论】果生炭疽菌的菌丝块针刺接种梨叶片的方法,可用于其致病力的室内快速测定。来源于我国南方梨产区导致早期落叶的果生炭疽菌存在明显的致病力分化,以中等致病力菌株为优势群体。

关键词：梨果生炭疽菌菌株室内测定方法致病力分化

丝裂原活化蛋白激酶基因CfMKK1调控果生炭疽菌的生长发育和致病力

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

微生物学报 2021年第1期61卷 141-151页

作者：肖宇李河南方人工林病虫害防控国家林草局重点实验室森林有害生物防控湖南省重点实验室经济林培育与保护教育部重点实验室中南林业科技大学湖南长沙410004

【目的】由果生炭疽菌引起的炭疽病是油茶的主要病害,造成油茶产量下降。本文研究果生炭疽菌中丝裂原活化蛋白激酶CfMkk1的生物学功能,旨在为解析油茶炭疽病菌的致病机理提供依据。【方法】根据同源重组原理构建CfMKK1基因敲除载体片段... 详细信息

【目的】由果生炭疽菌引起的炭疽病是油茶的主要病害,造成油茶产量下降。本文研究果生炭疽菌中丝裂原活化蛋白激酶CfMkk1的生物学功能,旨在为解析油茶炭疽病菌的致病机理提供依据。【方法】根据同源重组原理构建CfMKK1基因敲除载体片段,采用PEG介导法将载体导入原生质体中筛选获得突变体菌株DCfmkk1;PCR扩增果生炭疽菌含有启动子的CfMKK1基因回补片段,构建回补载体pYF11::CfMKK1;采用PEG介导法把回补载体转化至突变体的原生质体中,荧光筛选回补菌株ΔCfmkk1-C。测定野生型菌株、突变体菌株DCfmkk1及基因回补菌株ΔCfmkk1-C在营养生长、附着胞形成、胁迫应答和致病力等生物学表型。【结果】与野生型和回补菌株相比,CfMKK1基因敲除突变体ΔCfmkk1菌丝生长速率明显减缓;在含刚果红的PDA培养基上菌丝生长受到明显抑制,无法穿透玻璃纸,丧失了侵染寄主的能力;而且无法形成附着胞。【结论】研究结果表明CfMKK1基因参与调控油茶果生炭疽菌的生长发育、附着胞形成、致病力以及响应外界胁迫过程。

关键词：油茶果生炭疽菌丝裂原活化蛋白激酶 CfMkk1 致病力