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林蛙卵油的提取、成分分析及抗氧化活性研究

食品工业科技 2020年第11期41卷 60-65页

作者：韩子晗孙尧杨富雅高冷长春工业大学化学与生命科学学院吉林长春130012

以林蛙卵为原料,采用超临界CO2提取法提取林蛙卵中的林蛙卵油,研究其成分含量和抗氧化活性。采用气相色谱-质谱法(GC-MS)联用对林蛙卵油的成分进行检测分析,确定成分及含量,并进行DPPH自由基清除能力试验、羟基自由基清除试验和超氧阴... 详细信息

以林蛙卵为原料,采用超临界CO2提取法提取林蛙卵中的林蛙卵油,研究其成分含量和抗氧化活性。采用气相色谱-质谱法(GC-MS)联用对林蛙卵油的成分进行检测分析,确定成分及含量,并进行DPPH自由基清除能力试验、羟基自由基清除试验和超氧阴离子自由基清除试验确定林蛙卵油的抗氧化能力。通过单因素实验和正交试验确定最佳提取工艺为提取压力35 MPa,提取温度60℃,CO2流量10 L/h,提取时间150 min,此时林蛙卵油的提取率为34.26%。GC-MS结果显示林蛙卵油中含有34种脂肪酸,其中饱和脂肪酸和不饱和脂肪酸相对含量分别为31.95%和68.05%。体外抗氧化试验结果表明林蛙卵油对DPPH自由基的IC50值为0.897 mg/mL,对羟基自由基的IC50值为1.392 mg/mL,对超氧阴离子的IC50值为1.687 mg/mL。林蛙卵油具有较强的体外抗氧化活性,在天然抗氧化剂和保健食品中有一定的开发利用价值。

关键词：林蛙卵油超临界二氧化碳提取法气相色谱-质谱法高级脂肪酸成分测定抗氧化活性

微波辅助提取林蛙卵油的工艺优化及脂肪酸组成分析

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食品科学 2017年第22期38卷 263-268页

作者：赵超叶海青侯萍萍杨扬周欣慧钟姝凝张铁华吉林大学食品科学与工程学院吉林长春130062

以林蛙卵为原料,以无水乙醇为提取剂,研究微波法对林蛙卵油提取率的影响。在单因素试验的基础上,进行响应面优化试验,研究料液比、浸泡时间、微波功率对林蛙卵油提取的影响。结果表明,提取最佳工艺条件为料液比1∶9.82(g/mL)、浸泡时间3... 详细信息

以林蛙卵为原料,以无水乙醇为提取剂,研究微波法对林蛙卵油提取率的影响。在单因素试验的基础上,进行响应面优化试验,研究料液比、浸泡时间、微波功率对林蛙卵油提取的影响。结果表明,提取最佳工艺条件为料液比1∶9.82(g/mL)、浸泡时间3.33 h、微波时间30 min、微波功率600 W;林蛙卵油的提取率可达到(20±0.67)%。与其他林蛙卵油提取方法比较,微波法辅助提取林蛙卵油具有得率高的优点。对得到的林蛙卵油采用气相色谱-质谱分析检测出27种脂肪酸,不饱和脂肪酸质量分数54.98%,其中以亚油酸、二十碳二烯酸、二十碳三烯酸、二十碳四烯酸、亚麻酸、棕榈反油酸、二十二碳五烯酸含量较高。

关键词：林蛙卵油微波辅助提取率响应面分析脂肪酸含量

林蛙卵油通过影响Bcl-2蛋白质家族抑制卵巢凋亡的机制

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中国老年学杂志 2013年第18期33卷 4503-4504页

作者：高锐苑春莉孙连坤王玲康劲松吉林大学第一医院妇产科吉林长春130021 吉林大学白求恩医学院病理生理学教研室

目的观察Wistar大鼠卵巢中Bcl-2和Bax的表达水平,分析林蛙卵油的卵巢保护作用机制。方法乙醇萃取法提取林蛙卵精油,初生期予雄激素制造动物模型,分为高剂量组、中剂量组、低剂量组和模型组四组,并设置正常对照组。成年后给予治疗组相应... 详细信息

目的观察Wistar大鼠卵巢中Bcl-2和Bax的表达水平,分析林蛙卵油的卵巢保护作用机制。方法乙醇萃取法提取林蛙卵精油,初生期予雄激素制造动物模型,分为高剂量组、中剂量组、低剂量组和模型组四组,并设置正常对照组。成年后给予治疗组相应剂量林蛙卵油灌胃后处死大鼠,Tunnel检测凋亡比率,Western印迹法检测各组Bcl-2和Bax的蛋白质表达水平。结果 Tunnel染色显示模型组的凋亡指数较正常对照组升高,给予林蛙卵油灌胃后,凋亡指数降低。正常对照组与模型组之间有显著差异,中剂量组和大剂量组与模型组比较有显著差异,小剂量组与模型组比较无显著差异。Western印迹实验显示:Bcl-2在模型组的表达较正常对照组低,给予林蛙卵油后,低、中、高剂量组表达有升高趋势,与模型组比较差异显著;Bax在模型组的表达较正常对照组高,给予林蛙卵油后,低、中、高剂量组表达有降低趋势,与模型组比较差异显著。结论林蛙卵油可以通过影响Bcl-2蛋白质家族抑制卵巢细胞的凋亡,发挥保护卵巢的作用。

关键词：林蛙卵油凋亡 Bcl-2 Bax 卵巢

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林蛙卵油和深海鱼油中脂肪酸组份的研究

中国公共卫生 2002年第5期18卷 580-581页

作者：蔡云平常健金莉莉王秋雨刘宁赵东新辽宁省分析测试研究中心沈阳110015 辽宁大学生命科学系辽宁省疾病预防控制中心沈阳市和平区卫生防疫站

目前林蛙卵油和深海鱼油在中国医药市场很畅销,不仅已用于临床防治高血脂、高血压、血栓性疾病、心脏病等[1～6],而且还用于人脑的发育和提高免疫功能,因此做为药品和保健品已得到广泛的应用.本文主要阐述采用GC/MS法对中国林蛙卵油及... 详细信息

目前林蛙卵油和深海鱼油在中国医药市场很畅销,不仅已用于临床防治高血脂、高血压、血栓性疾病、心脏病等[1～6],而且还用于人脑的发育和提高免疫功能,因此做为药品和保健品已得到广泛的应用.本文主要阐述采用GC/MS法对中国林蛙卵油及深海鱼油脂肪酸组份的研究的结果.

关键词：林蛙卵油深海鱼油脂肪酸组份食品检验

林蛙卵油灌胃对雄激素预处理大鼠卵巢凋亡的影响

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中国老年学杂志 2010年第17期30卷 2451-2452页

作者：苑春莉盛辉孙连坤康劲松吉林大学第一医院吉林长春130021 吉林大学白求恩医学院病理生理学教研室

目的研究初生大鼠注射雄激素后,在成年期给予林蛙卵油灌胃,对于卵巢凋亡的影响,分析林蛙卵油的卵巢保护作用机制。方法乙醇萃取法提取林蛙卵精油,初生期给予雄激素制造卵巢凋亡大鼠模型,分为4组:高剂量组、中剂量组、低剂量组和模型组,... 详细信息

目的研究初生大鼠注射雄激素后,在成年期给予林蛙卵油灌胃,对于卵巢凋亡的影响,分析林蛙卵油的卵巢保护作用机制。方法乙醇萃取法提取林蛙卵精油,初生期给予雄激素制造卵巢凋亡大鼠模型,分为4组:高剂量组、中剂量组、低剂量组和模型组,同时设正常对照。大鼠成年后给予各剂量组林蛙卵油灌胃后处死,TUNEL检测凋亡比率。结果 TUNEL染色显示模型组的凋亡指数较正常组升高,给予林蛙卵油后,凋亡指数降低(P0.05)。结论林蛙卵油可能通过抑制大鼠卵巢细胞的凋亡,发挥保护卵巢的作用。

关键词：林蛙卵油凋亡卵巢

林蛙卵油灌胃对于雄激素预处理大鼠妇科内分泌的影响

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中国实验诊断学 2010年第2期14卷 196-198页

作者：苑春莉孙连坤康劲松吉林大学第一医院妇产科吉林长春130021 吉林大学白求恩医学院病理生理学教研室吉林长春130021

目的研究初生大鼠注射雄激素后,在成年期给予林蛙卵油灌胃,对于妇科内分泌激素水平的影响。方法乙醇萃取法提取林蛙卵精油,初生期给予雄激素制造动物模型,分为四组:高剂量组、中剂量组、低剂量组和模型组,同时设置正常对照。成年后给予... 详细信息

目的研究初生大鼠注射雄激素后,在成年期给予林蛙卵油灌胃,对于妇科内分泌激素水平的影响。方法乙醇萃取法提取林蛙卵精油,初生期给予雄激素制造动物模型,分为四组:高剂量组、中剂量组、低剂量组和模型组,同时设置正常对照。成年后给予治疗组林蛙卵油灌胃后处死大鼠,子宫和卵巢称重,血清放免法检测各组雌二醇、FSH、孕酮水平。结果模型组子宫及卵巢重量明显低于正常组(P林蛙卵油各剂量均可明显增加子宫及卵巢的重量(P林蛙卵油高剂量组增加的最为明显。模型组卵巢体重之比明显低于正常组(P林蛙卵油各剂量均可明显增加卵巢体重之比(P林蛙卵油高剂量组增加的最为明显。而林蛙卵油各剂量组对子宫体重之比没有明显影响。模型组大鼠血清中FSH、雌二醇、孕酮的含量与正常对照组相比明显降低(P林蛙卵油各剂量组均能明显提高大鼠体内FSH、雌二醇的含量,其中林蛙卵油中剂量对体内FSH含量增加最明显,而林蛙卵油大剂量对体内雌二醇含量增加最为明显,林蛙卵油各剂量组对体内孕酮含量的改变不明显。结论初生期雄激素注射通过影响卵巢发育对于成年内分泌系统造成影响,林蛙卵油可以发挥保护卵巢的作用,进而调节妇科内分泌功能。

关键词：林蛙卵油雌激素卵巢

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林蛙卵油提取及降血脂活性的研究

林蛙卵油提取及降血脂活性的研究

作者：赵文萱吉林农业大学

学位级别：硕士

本论文采用索氏提取响应面分析法以及超临界二氧化碳萃取正交分析法对林蛙卵油提取效果进行了对比分析;同时,林蛙卵油经过甲酯化后,采用筛选出的最佳甲酯化方法,利用气-质联用仪测定了林蛙卵油脂肪酸的种类;通过对高脂模型大鼠灌胃林蛙... 详细信息

本论文采用索氏提取响应面分析法以及超临界二氧化碳萃取正交分析法对林蛙卵油提取效果进行了对比分析;同时,林蛙卵油经过甲酯化后,采用筛选出的最佳甲酯化方法,利用气-质联用仪测定了林蛙卵油脂肪酸的种类;通过对高脂模型大鼠灌胃林蛙卵油,检测血清中甘油三酯、总胆固醇、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白的含量变化,确定了林蛙卵油的降血脂活性;最终采用微囊包埋的方法对林蛙卵油进行包埋研究,取得了良好的效果,并计算其包埋率,测定其水溶性。主要研究结果如下:1.用索式提取法对林蛙卵油进行提取,所得结果通过统计学分析,筛选出最优提取条件,在最优提取条件(萃取温度为60.62℃、萃取时间为3.16h、林蛙卵油与萃取剂比率1:8.91)下,获得的林蛙卵油的含量为19.3%。2.应用超临界二氧化碳萃取法对林蛙卵油进行提取。所得的结果通过分析,筛选出最优条件,在最优提取条件(萃取温度为36℃、萃取时间2h、萃取压力20MPa、林蛙卵粒度40目)下,获得的林蛙卵油的含量为15.19%3.对林蛙卵油中的脂肪酸进行分析,应用酸催化法、碱催化法以及三氟化硼-甲醇催化法对林蛙卵油甲酯化的程度进行比较,筛选出最佳反应条件,并对3种甲酯化反应进行对比,最终选择14%三氟化硼-甲醇方法进行甲酯化;最后通过气质联用的方法检测到林蛙卵油中含有19种脂肪酸。4.建立大鼠高血脂模型,将高血脂模型大鼠随机分为4组,林蛙卵油组、辛伐他汀组、蜂蜜组、自愈组,连续14天进行不同药物灌服,验证林蛙卵油对大鼠血清中的甘油三酯、总胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇的降低作用,结果显示林蛙卵油组与蜂蜜组、自愈组的降血脂活性差异显著,与辛伐他汀组差异不显著,说明林蛙卵油具有降血脂功效,且其效果与辛伐他汀相似,故林蛙卵油可作为降血脂保健品为广大高血脂人群应用。5.将超临界二氧化碳提取法所得的林蛙卵油用明胶进行包埋,在最优包埋条件(明胶质量分数为4.5%,芯壁比为1:5,乳化剂单甘脂浓度0.3,温度50℃)下,所获得的包埋率为79.42%;并通过林蛙卵油微胶囊的水溶性分析,得知林蛙卵油微囊粉的水溶性良好。

关键词：林蛙卵油脂肪酸降血脂活性保健品包埋

林蛙卵油提取和去除胆固醇条件优化及降脂活性研究

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林蛙卵油提取和去除胆固醇条件优化及降脂活性研究

作者：赵超吉林大学

学位级别：硕士

本研究隶属于吉林省科学技术厅成果转化项目(20130727074YY)。林蛙卵油具有药用和食用价值,对人体起到调节血脂、抗焦虑、调节内分泌、保护卵巢和肝损伤、抑制中枢神经和抗惊厥作用,有广阔的市场前景。本论文对超声波法和微波响应面分... 详细信息

本研究隶属于吉林省科学技术厅成果转化项目(20130727074YY)。林蛙卵油具有药用和食用价值,对人体起到调节血脂、抗焦虑、调节内分泌、保护卵巢和肝损伤、抑制中枢神经和抗惊厥作用,有广阔的市场前景。本论文对超声波法和微波响应面分析法提取林蛙卵油的提取率进行对比研究,并利用硅胶吸附、活性炭吸附、β-环糊精(β-CD)包埋、联合沉淀、接枝β-CD脱除林蛙卵油中胆固醇,研究脱除胆固醇后林蛙卵油不饱和脂肪酸的变化。通过动物实验,研究林蛙卵油对大鼠高脂模型的作用效果。主要研究结果如下:(1)在超声波法和微波法辅助提取林蛙卵油方面,从提取率和成本等方面考虑,微波法辅助提取林蛙卵油是最佳的方法。最佳提取条件是:浸渍时间3.33 h,料液比1:9.82(g/m L),微波功率600 W,保持30 min;卵油提取率可达到(20±0.67)%。油脂颜色为黄色,澄清无杂质。(2)通过硅胶吸附、活性炭吸附、β-CD包埋、联合沉淀、接枝β-CD的方法脱除林蛙卵油中胆固醇。确定联合沉淀法是去除林蛙卵油中胆固醇最有效的方法。胆固醇去除率会随着林蛙卵油乙醇溶液料液比浓度的增大,β-CD浓度的增加、反应温度的增加先增大后减小。加热时间对去除林蛙卵油中胆固醇的含量没有明显影响(P>0.05)。确定其最佳工艺条件:林蛙卵油乙醇溶液料液比为1:3(g/mL),β-CD浓度30%,反应时间3 h,反应温度40℃,胆固醇脱除率高达76%。脱除胆固醇后的林蛙卵油不饱和脂肪酸相对含量无变化,其中亚麻酸、花生四烯酸、DHA、二十二碳五烯酸相对含量增加。单不饱和脂肪酸相对含量从4.96%增加到29.12%。饱和脂肪酸从36.49%减少到19.48%。(3)对高脂血症大鼠喂食林蛙卵油和植物甾醇,其结果揭示植物甾醇组、林蛙卵油组、林蛙卵油植物甾醇组(低、中、高)能够显著降低大鼠甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇(P林蛙卵油植物甾醇组随着给药剂量的增加,其低密度脂蛋白胆固醇水平越低。单独喂林蛙卵油与高剂量林蛙卵油植物甾醇组效果接近。因此林蛙卵油对预防高血脂症有良好的作用,林蛙卵油与植物甾醇混合有降低血脂的作用,单独喂林蛙卵油降脂效果优于林蛙卵油与植物甾醇混合。

关键词：林蛙卵油脂肪酸胆固醇降血脂活性

中国林蛙卵油对高脂血症家兔相关基因的表达研究

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中国林蛙卵油对高脂血症家兔相关基因的表达研究

作者：李毅喆东北农业大学

学位级别：硕士

林蛙卵油具有降、清除自由基、调节血脂、降低血栓形成等多种功效，是新型的绿色保健品。根据中国林蛙卵油的成分，并且鉴于目前高血脂病人的高发情况，本研究通过建立高脂血症模型家兔，灌胃不同剂量林蛙卵油，确定其发挥药效的最适剂... 详细信息

林蛙卵油具有降、清除自由基、调节血脂、降低血栓形成等多种功效，是新型的绿色保健品。根据中国林蛙卵油的成分，并且鉴于目前高血脂病人的高发情况，本研究通过建立高脂血症模型家兔，灌胃不同剂量林蛙卵油，确定其发挥药效的最适剂量，同时利用Real timePCR技术分析载脂蛋白E基因（ApoE）、低密度脂蛋白受体基因（LDL-R）、ATP结合盒转运子A1基因（ABCA1）在家兔脾组织中的时空表达规律，探讨林蛙卵油发挥药效的可能分子机制。主要研究结果如下： 1.保健组在持续灌胃林蛙卵油40天内，脾组织中ApoE基因表达量不同程度升高。以灌胃林蛙油3.25g/kg，连续灌胃至30天时脾组织中ApoE基因表达量最大。造模组在持续灌胃不同剂量林蛙卵油的30天内，降血脂组和强化降血脂组脾组织中ApoE基因表达量不同程度的升高。从整体来看，降血脂组和强化降血脂组均以灌胃林蛙卵油3.25g/kg，连续灌胃至20天时脾组织中ApoE基因表达量最大。 2.保健组在持续灌胃林蛙卵油40天内，脾组织中LDL-R基因表达量不同程度升高。以灌胃林蛙油3.25g/kg，连续灌胃至20天时脾组织中LDL-R基因表达量最大。造模组在持续灌胃不同剂量林蛙卵油的30天内，降血脂组和强化降血脂组脾组织中LDL-R基因表达量不同程度的升高。从整体来看，降血脂组以灌胃林蛙卵油3.25g/kg，连续灌胃至20天时脾组织中LDL-R基因表达量最大，与对照组比较差异极显著（P林蛙卵油40天内，脾组织中ABCA1基因表达量不同程度升高。以灌胃林蛙油3.25g/kg，连续灌胃至30天时脾组织中ABCA1基因表达量最大。造模组在持续灌胃不同剂量林卵蛙油的30天内，降血脂组和强化降血脂组脾组织ABCA1基因表达不同程度的升高。从整体来看，降血脂组和强化降血脂组均以灌胃林蛙卵油3.25g/kg，连续灌胃至20天时脾组织中ABCA1基因表达量最大，降血脂组与对照组比较差异极显著（P林蛙卵油能使保健组和造模家兔脾组织中ApoE、LDL-R、ABCA1基因表达量明显增加，保健组对LDL-R基因表达的影响最大，对ABCA1基因的影响最小，造模组对ABCA1基因表达的影响最大，对ApoE基因影响最小，并且对降血脂组的调控作用大于强化降血脂组。 5.林蛙卵油能调控ApoE、LDL-R、ABCA1基因在降血脂过程中的表达，这些与血脂相关的基因在林蛙卵油的调节下可以充分发挥其降血脂的作用，3.25g/kg剂量的林蛙卵油是最佳浓度。定期服用林蛙卵油具有保健功能，对预防高脂血症有一定的疗效，3.25g/kg剂量的林蛙卵油是家兔高血脂症预防的最佳浓度，3.25g/kg剂量的林蛙卵油对家兔高脂血症的治疗最有效，而且连续灌胃一个月效果好。

关键词：家兔脾脏林蛙卵油高脂血症 ApoE LDL-R ABCA1基因