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前体物质对林可霉素发酵的影响

当代化工研究 2024年第10期 8-10页

作者：陈东王婷王鸿发刘万莲宁夏泰益欣生物科技股份有限公司宁夏750205

为提升林可霉素发酵效价,本文对林可霉素发酵工艺进行优化,考察在发酵过程中补加含硫前体物质、HMP、氨基酸等对林可霉素发酵的影响。结果表明,当添加0.1g/L半胱氨酸、1.5g/L硫酸钠、0.01g/L甲硫氨酸时,林可霉素发酵效价高达9855μ/mL;... 详细信息

为提升林可霉素发酵效价,本文对林可霉素发酵工艺进行优化,考察在发酵过程中补加含硫前体物质、HMP、氨基酸等对林可霉素发酵的影响。结果表明,当添加0.1g/L半胱氨酸、1.5g/L硫酸钠、0.01g/L甲硫氨酸时,林可霉素发酵效价高达9855μ/mL;此外,添加4.0g/L HMP时,林可霉素效价高达9810μ/mL;另外,对5种氨基酸进行浓度组合优化后,林可霉素的发酵效价也得到了显著提升,其效价在氨基酸优化浓度为谷氨酸(0.1g/L)、缬氨酸(0.15g/L)、蛋氨酸(0.2g/L)、亮氨酸(0.5g/L)、酪氨酸(0.05g/L)时达到最高,高达9560μ/mL。因此,通过优化林可霉素前体物质添加工艺,可加快林可霉素的生物合成速率,有效提高林可霉素的发酵效价。

关键词：发酵林可霉素前体物质

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渗透压对林可霉素发酵效价影响的研究

当代化工研究 2024年第4期 32-34页

作者：陈东郭佳马思丽宁夏泰益欣生物科技股份有限公司宁夏750205

为有效提高林可霉素A产量降低林可霉素B组分含量,提升林可霉素产品纯度,本研究以NaCl作为渗透压调节剂研究渗透压对林可霉素发酵的影响,通过比较不同NaCl质量分数(0、0.5%、1.0%、1.5%、2.5%)下林可霉素A和林可霉素B效价的大小,确定以1.... 详细信息

为有效提高林可霉素A产量降低林可霉素B组分含量,提升林可霉素产品纯度,本研究以NaCl作为渗透压调节剂研究渗透压对林可霉素发酵的影响,通过比较不同NaCl质量分数(0、0.5%、1.0%、1.5%、2.5%)下林可霉素A和林可霉素B效价的大小,确定以1.0%NaCl作为渗透压调节剂的最适添加质量分数。同时,在该条件下,比较分析了甘油、脯氨酸和甜菜碱三种渗透压保护剂对林可霉素效价的影响,结果显示,甘油质量分数为0.5%时,林可霉素A效价最高林可霉素B效价最低,脯氨酸和甜菜碱质量分数为0.25%时,林可霉素A效价最高林可霉素B效价最低,比较发现0.25%脯氨酸效果显著高于0.5%甘油和0.25%甜菜碱。综上所述,在1.0%NaCl+0.25%脯氨酸时,可以有效提高林可霉素A效价降低林可霉素B效价,为进一步扩大林可霉素A产量奠定了基础。

关键词：渗透压林可霉素发酵渗透压保护剂

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林可霉素基因工程研究的新进展

中国抗生素杂志 2022年第6期47卷 521-527页

作者：蔡新露许婉莲许玉荣吴杭张部昌安徽大学生命科学学院物质科学与信息技术研究院合肥230601 合肥师范学院化学与化学工程学院合肥230601

林可霉素是一种由林可链霉菌产生的林可酰胺类抗生素,主要用于防治由革兰阳性菌引发的感染。近年来,随着林可链霉菌基因组测序的完成,林可霉素基因工程研究进展迅速。本文就近期林可霉素生物合成及其调控的研究进行总结,并重点介绍在结... 详细信息

林可霉素是一种由林可链霉菌产生的林可酰胺类抗生素,主要用于防治由革兰阳性菌引发的感染。近年来,随着林可链霉菌基因组测序的完成,林可霉素基因工程研究进展迅速。本文就近期林可霉素生物合成及其调控的研究进行总结,并重点介绍在结构基因、调控基因、抗性基因和代谢前体基因的改造方面实现林可霉素定向高产,以及新型林可霉素衍生物创制的新进展。

关键词：林可链霉菌林可霉素基因工程代谢调控高产

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林可霉素生物合成及其分子调控研究进展

微生物学通报 2023年第11期50卷 5097-5109页

作者：许玉荣刘梦王静茹吴杭张部昌合肥师范学院化学与制药工程学院安徽合肥230601 安徽大学生命科学学院物质科学与信息技术研究院安徽合肥230601

林可霉素(lincomycin)是由林可链霉菌(Streptomyces lincolnensis)产生的酰胺类抗生素,在临床上主要用于治疗革兰氏阳性菌引起的感染。鉴于其具有高药用价值和经济价值,林可霉素生物合成和分子调控备受关注,并取得了较好的研究进展。本... 详细信息

林可霉素(lincomycin)是由林可链霉菌(Streptomyces lincolnensis)产生的酰胺类抗生素,在临床上主要用于治疗革兰氏阳性菌引起的感染。鉴于其具有高药用价值和经济价值,林可霉素生物合成和分子调控备受关注,并取得了较好的研究进展。本文综述了林可霉素的特征结构和生物合成,并重点介绍了林可链霉菌中林可霉素的分子调控机制等方面的研究进展,有利于深入认识林可链霉菌次级代谢调控网络,为在林可霉素高产菌中改造调控因子或其靶点元件提高产量提供理论指导。

关键词：林可链霉菌林可霉素生物合成调控机制菌株改造

rRNA甲基转移酶LmrB基因突变对林可霉素生物合成的影响

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生物学杂志 2023年第1期40卷 40-45页

作者：许玉荣许婉莲徐晶晶赵明高亮吴杭合肥师范学院化学与化学工程学院合肥230601 安徽大学生命科学学院物质科学与信息技术研究院合肥230601 中国科学技术大学附属第一医院合肥230001

为探究林可链霉菌野生菌NRRL2936和高产菌LC-G中lmrB基因的抗性以及对林可霉素产量的影响,将来自两种不同菌株的lmrB(2936-B和LC-G-B)连接到表达载体pET28a和pIB139上,分别转入异源宿主大肠杆菌BL21与变铅青链霉菌TK24中,获得相应的lmr... 详细信息

为探究林可链霉菌野生菌NRRL2936和高产菌LC-G中lmrB基因的抗性以及对林可霉素产量的影响,将来自两种不同菌株的lmrB(2936-B和LC-G-B)连接到表达载体pET28a和pIB139上,分别转入异源宿主大肠杆菌BL21与变铅青链霉菌TK24中,获得相应的lmrB异源表达菌株,对其进行林可霉素抗性实验。通过同源重组方法,在NRRL2936和LC-G中分别缺失lmrB,并在LC-G中进行lmrB的过表达,对所获得的重组菌株进行林可霉素产量检测。结果显示:尽管LC-G-B基因片段长度短于2936-B,但并未使LC-G-B丧失功能,且在大肠杆菌和变铅青链霉菌中,2936-B对林可霉素的抗性均明显高于LC-G-B;同时,lmrB缺失突变株△lmrB的林可霉素A产量较NRRL2936降低约40%。在LC-G中缺失lmrB基因,林可霉素A产量降低约30%,而将NRRL2936的lmrB引入到LC-G中可显著提高林可霉素的产量。

关键词：林可链霉菌林可霉素 rRNA甲基转移酶抗性

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一株林可霉素降解菌的筛选鉴定及其降解机制

微生物学通报 2023年第3期50卷 997-1009页

作者：任省涛莫改敬陈红王振宇王海磊河南师范大学生命科学学院、功能微生物绿色转化技术河南省工程实验室河南新乡453007 河南科技学院河南新乡453003

【背景】抗生素污染越来越引起人们的关注。利用微生物处理抗生素污染被认为是一种环境友好型的方法。【目的】筛选林可霉素高效降解菌并研究其降解机制。【方法】经形态学观察、生理生化鉴定和16S rRNA基因测序分析进行鉴定;通过PCR技... 详细信息

【背景】抗生素污染越来越引起人们的关注。利用微生物处理抗生素污染被认为是一种环境友好型的方法。【目的】筛选林可霉素高效降解菌并研究其降解机制。【方法】经形态学观察、生理生化鉴定和16S rRNA基因测序分析进行鉴定;通过PCR技术和质谱分析技术对该菌抗性基因和降解产物等进行分析。【结果】从林可霉素菌渣堆肥样本中获得一株高效降解林可霉素的假单胞菌(Pseudomonas RST-1),该菌在林可霉素浓度为3.0 g/L的牛肉膏蛋白胨培养基上培养40 h后,林可霉素降解率高达57.3%。该菌含有intI1、sul1、sul2等抗性基因,降解产物为去甲基林可霉素和2-丙基-N-甲基脯氨酸。【结论】菌株RST-1具有高效降解林可霉素的能力,推测可能的降解机制为去甲基化和酰胺键水解作用,该菌株降解特性及降解机制研究为林可霉素降解工程菌及其高效降解菌剂的研制奠定了基础。

关键词：抗生素林可霉素假单胞菌属抗性基因降解产物

林可霉素高产菌株的选育及质量风险管理在其生产过程中的应用

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林可霉素高产菌株的选育及质量风险管理在其生产过程中的应用

作者：刘小琼安徽工程大学

学位级别：硕士

林可霉素是一种由林肯链霉菌代谢产生的高效抗革兰氏阳性菌的抗生素,具有抗菌活性强、耐药性慢、毒性低等优点,为临床用主要的抗生素之一,存在较大的商业价值和社会价值。为保障药品的安全性和有效性,企业在不断的探索以期在提高林可霉... 详细信息

林可霉素是一种由林肯链霉菌代谢产生的高效抗革兰氏阳性菌的抗生素,具有抗菌活性强、耐药性慢、毒性低等优点,为临床用主要的抗生素之一,存在较大的商业价值和社会价值。为保障药品的安全性和有效性,企业在不断的探索以期在提高林可霉素产量的同时提升其质量。本文利用紫外和脉冲强光对林肯链霉菌的原生质体进行诱变以筛选高产菌株;通过对培养基和培养条件的考察,获得林可霉素最佳的发酵工艺,采用优化后的发酵工艺对筛选的菌株进行培养,林可霉素的产量相比出发菌株有显著提升;运用质量风险管理工具(FMEA)对林可霉素生产过程中各风险点予以识别,并提出相应措施降低风险以期获得优质高产的代谢产物。主要研究内容和结果如下:1.林可霉素高产菌株的诱变与筛选。以出发菌株(林肯链霉菌,编号:SL-98-2#)制备原生质体,采用紫外照射与脉冲强光复合方法进行诱变,获得3株产量高的诱变菌株;经传代5次的稳定性试验数据显示,林可霉素高产菌株(编号:SL-98-2#-2)的遗传稳定性较好,与出发菌株(编号:SL-98-2#)相比第5代菌株的代谢产物林可霉素的含量提高了24.32%。2.林可霉素发酵工艺的研究。通过24孔板培养法对培养基进行对比研究,考察了磷酸盐、硝酸盐、可溶性淀粉对林可霉素代谢的影响。采用L(5)正交设计方法对经筛选培养基进行优化,获得了最佳培养基(24号),利用优化后的培养基发酵培养,林可霉素的产量较优化前提高了40.63%。基于优化后的培养基,进一步考察了p H值、菌种种龄、接种量、发酵温度、溶氧和发酵周期等因素对林可霉素发酵的影响,得最佳发酵条件。以优化后的培养基及发酵条件对林肯链霉菌的诱变菌株(编号:SL-98-2#-2)进行培养,林可霉素的含量为5804μg/m L,相比发酵工艺优化前提高了24.23%。3.质量风险工具的选择。通过对质量风险管理常用工具进行比对,确定适合林可霉素生产过程的风险评估管理工具(FMEA法);结合文献计量法对药品生产风险管理进行分析,运用FMEA对林可霉素生产过程中的风险进行评估。4.FMEA法在林可霉素生产风险评估中的运用。为确保赋值的科学性,在FMEA法评估中引入了β权重系数,β权重的赋值取决于工作人员的职位、学历、工龄以及对工艺的熟悉程度。对林可霉素生产过程中涉及的“人流物流”、“生产前准备和生产后清场”、“生产物料”、“工艺参数和过程控制”、“清洗和灭菌”、“共线风险分析”等因素进行分析,制定风险控制措施,降低林可霉素的生产风险。

关键词：林可霉素林肯链霉菌诱变与筛选发酵工艺质量风险管理工具 β权重系数 FMEA

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抗生素过敏致人死亡1例

刑事技术 2024年第1期49卷 102-106页

作者：孙会会朱晓东张秀秀刘振兴单绍东苗龙飞王爱华德州市公安局物证鉴定研究中心山东德州253000 公安部鉴定中心北京100038

临床抗生素中毒和致死的情况,主要是抗生素过量使用或者患者本身体质特别敏感而引发的。本文以一起非法行医案为例,采用液相色谱-串联质谱法对抗生素引起的疑似过敏性死亡病例中林可霉素、头孢曲松和地塞米松成分进行检测分析。结合案... 详细信息

临床抗生素中毒和致死的情况,主要是抗生素过量使用或者患者本身体质特别敏感而引发的。本文以一起非法行医案为例,采用液相色谱-串联质谱法对抗生素引起的疑似过敏性死亡病例中林可霉素、头孢曲松和地塞米松成分进行检测分析。结合案件勘查情况、尸体解剖、病理学检验及毒物检验的结果,证实死者死于抗生素过敏反应。本结果填补了液相色谱-串联质谱法同时测定人体血浆中林可霉素、头孢曲松和地塞米松的空白,填充了因抗生素过敏致死的数据量,归纳了抗生素过敏致死的法医学指征及检验,可为抗生素过敏和死亡病例的临床和法医学鉴定提供方法和数据参考。

关键词：法医毒物分析过敏性致死林可霉素头孢曲松地塞米松

磁性金属有机框架材料对水中林可霉素的去除研究

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食品安全质量检测学报 2022年第17期13卷 5656-5663页

作者：李涵乐武晋海刘明珠彭媛赵嘉美邱玉吴建虎高志贤山西师范大学食品科学与工程学院太原030000 军事科学院军事医学研究院环境医学与作业医学研究所天津市环境与食品安全风险监控技术重点实验室天津300050

目的基于磁性金属有机框架(metal-organic framework,MOF)材料的磁固相萃取(magnetic solid phase extraction,MSPE)技术吸附去除环境水样中残留的林可霉素。方法采用溶剂热法预制FeO纳米颗粒后,与铜基金属离子和均苯三甲酸有机配体结... 详细信息

目的基于磁性金属有机框架(metal-organic framework,MOF)材料的磁固相萃取(magnetic solid phase extraction,MSPE)技术吸附去除环境水样中残留的林可霉素。方法采用溶剂热法预制FeO纳米颗粒后,与铜基金属离子和均苯三甲酸有机配体结合制备FeO-MOF199复合材料。通过扫描电子显微镜(scanning electron microscopy,SEM)、X射线衍射(X-ray diffraction,XRD)、傅里叶变换红外吸收光谱法(Fourier transform infrared spectroscopy,FTIR)、差热热重分析曲线(thermogravimetric differential thermal analysis,TG-DTA)和N吸附-解吸实验等表征手段对材料的形貌、晶体结构及理化性质进行分析。通过等温吸附平衡和吸附动力学实验评估该材料对林可霉素吸附性能,并对吸附后洗脱剂进行优化。结果所制备的FeO-MOF199呈规则的正八面体形态,并具有较高的比表面积(749.19 m~2/g)和优越的热稳定性。吸附实验结果表明该吸附过程符合Freundlich吸附动力学方程和伪二阶动力学模型。FeO-MOF199材料用于海河水和津河水中低浓度的林可霉素吸附,去除率可达80%以上。结论FeO-MOF199材料具有良好的吸附性能和吸附效果,结合MSPE工艺可以有效应用于抗生素残留的吸附,所建立的方法具有简单、有效、准确的林可霉素吸附去除性能。

关键词：磁性金属有机框架材料林可霉素磁固相萃取