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枇杷蜜中酚类、脱落酸、蛋白质的检测及其指纹图谱的研究

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枇杷蜜中酚类、脱落酸、蛋白质的检测及其指纹图谱的研究

作者：孙崇臻暨南大学

学位级别：硕士

蜂蜜作为一种天然营养补充剂，具有较高的营养价值与抗菌、抗炎症等生理活性功能，在医疗与食品加工中得到广泛应用。但是由于利益的驱使，蜂蜜的掺假现象日益严重，掺假手段层出不穷，尤其是昂贵单花蜜的掺假给检测带来困难。蜂蜜中的... 详细信息

蜂蜜作为一种天然营养补充剂，具有较高的营养价值与抗菌、抗炎症等生理活性功能，在医疗与食品加工中得到广泛应用。但是由于利益的驱使，蜂蜜的掺假现象日益严重，掺假手段层出不穷，尤其是昂贵单花蜜的掺假给检测带来困难。蜂蜜中的黄酮、酚酸、脱落酸等微量成分及蛋白质等营养成分在不同蜂蜜中分布不同，可以作为单花种蜂蜜的植物源标识物，用于单花蜜的真实性检测。本文旨在研究蜂蜜中的生物标志物黄酮、酚酸、脱落酸及蛋白质，制定枇杷蜜的酚类色谱指纹图谱及蛋白质凝胶电泳图谱，为掺假枇杷蜜的快速检测提供依据。具体工作如下： 1.实验条件的探索：对蜂蜜中酚类物质的提取方法及高效液相色谱技术（HPLC）检测条件进行研究，确定XAD-2大孔树脂法作为酚类物质的提取方法，采用SHIM-PACKVP-ODS C18柱分离，以5%甲酸及甲醇为流动相进行梯度洗脱，77min内能较好地分离15种目标成分。利用HPLC-DAD技术对枇杷蜜、荔枝蜜等8种蜂蜜中的没食子酸、p-香豆酸、芹菜素等14种酚类及脱落酸进行检测。结果表明，不同种蜂蜜的脱落酸及酚类物质分布不同，脱落酸在荔枝蜜中含量最高，野桂花蜜中最低。总酚含量在325.3μg/100g到2260.8μg/100g之间，除山奈酚、芹菜素外，其他12种酚类在所有蜂蜜样品中均有检出。 2.蜂蜜中酚类的测定及枇杷蜜的掺假鉴别：应用HPLC-DAD技术对5个省份的10个品牌的枇杷蜜（如老蜂农、宝生园等）及油菜蜜、龙眼蜜等其他12种单花蜜进行酚类及脱落酸的测定，应用Minitab15.0及SPSS19.0分析软件对各物质的含量进行聚类分析以鉴别单花蜜的植物源差异及枇杷蜜的掺假程度。结果表明，不同品牌枇杷蜜总酚物质分布不同（302.5-580.3μg/100g），其中总酚酸含量平均为249.3μg/100g，高于总黄酮的含量（平均为140.9μg/100g）;对14种物质含量聚类分析可以鉴别掺入10%以上油菜蜜的枇杷蜜。 3.枇杷蜜酚类指纹图谱的构建及验证：利用中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2004A版）对所得的10个枇杷蜜图谱数据进行相似度分析，制定枇杷蜜的酚类标准指纹图谱。对掺入不同含量油菜蜜的枇杷蜜图谱数据进行相似度评价及聚类分析，从而对标准图谱进行验证。同时对荔枝蜜、野桂花蜜等其他10种单花蜜与对照谱图进行相似度分析，以区分不同植物源的蜂蜜。结果表明，利用相似度的对比分析可以成功区分掺入30%以上油菜蜜的枇杷蜜，并能将枇杷蜜与野桂花蜜、椴树蜜、荔枝蜜、龙眼蜜相区分。 4.蛋白质的检测及枇杷蜜蛋白指纹图谱的制定：对蜂蜜中蛋白质的提取方法进行研究，应用Bradford法对9个枇杷蜜及其他17个蜂蜜进行了蛋白质浓度的测定，并通过SDS-PAGE对26个蜂蜜进行蛋白质凝胶电泳，制定枇杷蜜的蛋白质指纹图谱。结果表明：26个蜂蜜样品的蛋白分子量主要集中在20.1-66.4kDa之间;不同蜜种所得蛋白图谱的蛋白分布及特征条带不同，枇杷蜜有3条特征条带（26kDa、39kDa、97kDa）;龙眼蜜有2条特征条带（39kDa、52kDa）;荔枝蜜有6条特征条带（23kDa、26kDa、29kDa、39kDa、44kDa、116kDa）;枣花蜜、益母草蜜分别在160kDa、49kDa处有特征条带;椴树蜜、洋槐蜜在88kDa处有特征条带，利用这些特征条带可以进行单花蜜种的区分。本研究实现了对蜂蜜中脱落酸、黄酮、酚酸及蛋白质的快速分离检测，制定的枇杷蜜标准指纹图谱可以有效用于单花蜜的植物源鉴别及掺假检测，对于枇杷蜜的功能性分析及质量控制有重要借鉴作用。

关键词：蜂蜜枇杷蜜酚类脱落酸蛋白质指纹图谱

紫外-可见分光光度法测定枇杷蜜中总黄酮含量不确定度评定

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医药导报 2018年第2期37卷 223-226页

作者：何苏琴王笑笑徐宇昌浙江省金华市中心医院药剂科金华321000 浙江省衢州市食品药品检验研究院衢州324002 浙江省衢州市市场监管局衢州324000

目的评定紫外-可见分光光度(UV)法测定枇杷蜜中总黄酮含量的不确定度。方法对UV法测枇杷蜜中总黄酮含量的全过程进行分析,建立数学模型,确定不确定度因素并对各个不确定因素进行评估,计算合成不确定度,并给出测量结果在95%置信区间下的... 详细信息

目的评定紫外-可见分光光度(UV)法测定枇杷蜜中总黄酮含量的不确定度。方法对UV法测枇杷蜜中总黄酮含量的全过程进行分析,建立数学模型,确定不确定度因素并对各个不确定因素进行评估,计算合成不确定度,并给出测量结果在95%置信区间下的扩展不确定度。结果枇杷蜜中总黄酮含量测定的不确定度评定结果为(38.497±5.674)μg·g^(-1)。结论该法适用于UV法测枇杷蜜中总黄酮含量的不确定度评定,不确定度主要由对照品储备液的制备和标准曲线的拟合引入。

关键词：枇杷蜜总黄酮槲皮素分光光度法,紫外-可见不确定度

中蜂枇杷蜜与意蜂枇杷蜜中的理化指标及抗氧化活性分析

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食品安全质量检测学报 2021年第5期12卷 2000-2004页

作者：赵华刘瑶郭迎迎盐城市食品药品监督检验中心盐城224055

目的分析中蜂枇杷蜜与意蜂枇杷蜜的理化指标及其抗氧化活性。方法以江苏中蜂枇杷蜜与意蜂枇杷蜜为研究对象,对其理化指标和总酚酸、总黄酮含量进行测定,采用DPPH·和ABTS~+自由基清除试验测定其抗氧化活性。结果中蜂枇杷蜜和意蜂枇杷蜜... 详细信息

目的分析中蜂枇杷蜜与意蜂枇杷蜜的理化指标及其抗氧化活性。方法以江苏中蜂枇杷蜜与意蜂枇杷蜜为研究对象,对其理化指标和总酚酸、总黄酮含量进行测定,采用DPPH·和ABTS~+自由基清除试验测定其抗氧化活性。结果中蜂枇杷蜜和意蜂枇杷蜜的理化指标均符合GH/T 18796—2012《蜂蜜》,中蜂枇杷蜜和意蜂枇杷蜜之间的水分、淀粉酶值、葡萄糖、果糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖、灰分均存在差异性;中蜂枇杷蜜的总酚、总黄酮、清除DPPH·自由基能力和ABTS~+自由基能力均显著优于意蜂枇杷蜜;枇杷蜜中总黄酮与清除ABTS~+自由基能力均存在良好线性关系,枇杷蜜中总酚与清除DPPH·自由基能力和ABTS~+自由基能力均存在良好线性关系。结论通过对中蜂枇杷蜜与意蜂枇杷蜜的理化指标及其抗氧化活性的检测,为中蜂枇杷蜜与意蜂枇杷蜜鉴定与检测提供理论依据,为枇杷蜜产品的开发提供理论支撑。

关键词：枇杷蜜中华蜜蜂意大利蜜蜂抗氧化活性

苏州枇杷蜜特征性成分筛选及蜜蜂酿造过程中主要成分变化分析

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苏州枇杷蜜特征性成分筛选及蜜蜂酿造过程中主要成分变化分析

作者：赵滦扬州大学

学位级别：硕士

枇杷(Eriobotrya japonica Thunb Lindl.)是蔷薇科,苹果亚科,枇杷属的常绿乔木,原产于中国南方地区,如今在全世界广泛种植。枇杷蜜具有独特的芳香气味和颜色,目前有关枇杷蜜的研究较少,尤其是对于枇杷蜜酿造过程中的变化规律还不明晰,... 详细信息

枇杷(Eriobotrya japonica Thunb Lindl.)是蔷薇科,苹果亚科,枇杷属的常绿乔木,原产于中国南方地区,如今在全世界广泛种植。枇杷蜜具有独特的芳香气味和颜色,目前有关枇杷蜜的研究较少,尤其是对于枇杷蜜酿造过程中的变化规律还不明晰,苏州太湖地区种植枇杷面积广泛,是当地重要的蜜粉源植物,对于枇杷蜜的系统性研究具有重要意义。本研究以其他单花蜜、其他地区枇杷蜜以及苏州枇杷蜜为实验材料,以探究苏州枇杷蜜的特征性挥发物质以及蜜蜂在酿造过程中主要成分的变化规律具体结果如下:(1)对枇杷蜜以及洋槐、荆条、柑橘、荞麦、椴树、益母草、黄芪、苕子、乌桕和桉树10种单花蜜中挥发性成分、糖类物质和矿物质含量进行测定,结果显示枇杷蜜中有33.498 min、34.988 min和44.197 min处三个特有峰值,在其他10种单花蜜中未检出,所以将这三种物质判定为枇杷蜜中的特征性成分,经过标准质谱库比对和外标法验证这三种物质分别为对甲氧基苯甲醇、对甲氧基苯甲醛和对甲氧基苯甲酸。枇杷蜜中果糖、葡萄糖和蔗糖含量与其他10种单花蜜间存在显著差异,且枇杷蜜中果葡比较低,比值为1.30。枇杷蜜中钠元素含量为12.52±0.30 mg/kg,镁元素19.06±1.60 mg/kg,这两种元素含量与其他10种单花蜜之间存在显著性差异,p枇杷蜜的挥发性成分、糖类物质和矿物质含量进行测定,结果显示苏州与其他5个地区枇杷蜜之间各物质含量存在显著性差异,苏州枇杷蜜中对甲氧基苯甲醛、对甲氧基苯甲醇和对甲氧基苯甲酸三种挥发性物质含量分别为11.56±1.24 μg/mL、5.45±0.45 μg/mL和6.64±0.65 μg/mL这三种物质含量其他5个地区枇杷蜜存在显著性差异,p枇杷蜜独特的芳香气味的原因。苏州枇杷蜜中蔗糖和麦芽糖含量都显著低于其他地区枇杷蜜,苏州枇杷蜜中矿物质含量除了钠元素外,镁元素、钾元素和锰元素含量均与其他地区枇杷蜜存在显著性差异。(3)对1-20 d共60个苏州枇杷蜜样品中水分、挥发性物质、糖类物质、淀粉酶含量进行测定,结果显示苏州枇杷蜜在酿造过程中水分含量整体呈现下降的趋势,且这种变化趋势与环境温度变化密切相关;淀粉酶值含量由11.13[mL(g*h)]上升至12.73[mL(g*h)],含量变化差异不显著,p>0.05;果糖、葡萄糖、麦芽糖含量逐渐升高,麦芽糖含量逐渐降低;三种特征性挥发性物质含量在枇杷蜜酿造的第1-5 d和第15-20 d含量差异变化呈现稳定趋势,p>0.05,差异不显著。本研究对苏州枇杷蜜酿造过程中特征性挥发物质含量及其主要成分进行了分析,研究结果有助于我们了解其酿造过程中主要指标的变化,为今后枇杷蜜的品质的判定标准提供一定的数据支持。同时为鉴别枇杷蜜和划分枇杷蜜的地理来源提供重要的理论依据。

关键词：枇杷蜜酿造过程挥发性物质理化性质

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枇杷蜜中蔗糖变化的研究

枇杷蜜中蔗糖变化的研究

2023年中国（浙江·江山）蜂业博览会暨全国蜂产品市场信息交流会

作者：许小龙王燕夏崇岗南京天嘉检测服务有限公司

通过高效液相色谱法,研究了枇杷蜜中蔗糖含量在成熟过程中的转化方向。新鲜收集的枇杷蜜中蔗糖含量在20%左右,在不同温度及时间条件下,蔗糖含量会降低至5%左右(减少约15%),而果糖和葡萄糖总量增加了约13%。大部分蔗糖转化成了果糖和葡萄... 详细信息

通过高效液相色谱法,研究了枇杷蜜中蔗糖含量在成熟过程中的转化方向。新鲜收集的枇杷蜜中蔗糖含量在20%左右,在不同温度及时间条件下,蔗糖含量会降低至5%左右(减少约15%),而果糖和葡萄糖总量增加了约13%。大部分蔗糖转化成了果糖和葡萄糖,约2%蔗糖转化成了其他糖类。此研究对蜂产品企业控制枇杷蜜的质量提供了参考。

关键词：枇杷蜜果糖葡萄糖蔗糖转化方向

来源： cnki会议评论

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提高枇杷蜜产量的策略——回复读者的一封信

蜜蜂杂志 2023年第8期43卷 17-19页

作者：王静琳何雨泊马振刚农业农村部长江上游传粉昆虫资源保护与利用重点实验室重庆师范大学重庆市媒介昆虫重点实验室重庆市动物学生物学重点实验室重庆师范大学

枇杷花期主要集中在10-12月，这时自然界中其它开花植物较少，因此枇杷蜜是十分纯净的，收购价远高于其它蜂蜜。但枇杷蜜一直产量不高，养蜂人经济效益提升困难。总结了前人的养殖经验，包括对蜂种、蜂箱、蜂群管理、蜜源地等管理的建... 详细信息

枇杷花期主要集中在10-12月，这时自然界中其它开花植物较少，因此枇杷蜜是十分纯净的，收购价远高于其它蜂蜜。但枇杷蜜一直产量不高，养蜂人经济效益提升困难。总结了前人的养殖经验，包括对蜂种、蜂箱、蜂群管理、蜜源地等管理的建议，希望为广大的养蜂工作者提供参考。

关键词：枇杷蜜提高产量蜂群管理蜜源策略

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中蜂枇杷蜜高产技术探讨

中国蜂业 2017年第4期68卷 38-39页

作者：赖康王建文王顺海四川省蜂业管理站成都610041

枇杷蜜是四川的一大特色冬蜜。利用中蜂生产枇杷蜂蜜,不但可获得优质的蜂蜜,还可为枇杷传花授粉,提质增效。但近年在枇杷蜜的生产过程中,蜂群出现垮蜂、盗蜂、染病等问题,影响了枇杷蜜的生产。根据枇杷泌蜜的特点,选好放蜂场地,繁好蜂群... 详细信息

枇杷蜜是四川的一大特色冬蜜。利用中蜂生产枇杷蜂蜜,不但可获得优质的蜂蜜,还可为枇杷传花授粉,提质增效。但近年在枇杷蜜的生产过程中,蜂群出现垮蜂、盗蜂、染病等问题,影响了枇杷蜜的生产。根据枇杷泌蜜的特点,选好放蜂场地,繁好蜂群,强群采集,注意保温,严防盗蜂,适时取蜜可获得高产。

关键词：中蜂枇杷蜜高产技术

太湖流域中蜂简约式养殖技术解析(三)--中蜂枇杷蜜生产的技术要点

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中国蜂业 2023年第3期74卷 24-25页

作者：宋正海金如兴柯亚露邱晨黄峰王伟蔺哲广吉挺苏州市吴中区东山动物防疫站 215100 苏州东山莫厘居蜂产品专业合作社 215100 苏州市吴中区畜牧兽医站 215100 扬州大学动物科学与技术学院 225009

太湖流域的苏州市吴中区盛产枇杷,自古便为贡品,拥有“东山白沙枇杷”和“西山青种枇杷”2个地理标志产品。吴中区4万多亩成片集中的枇杷林,为冬季中蜂枇杷蜜生产提供了极为有利的条件。以“购蜂育王、繁蜂取蜜、售蜂授粉”为特点的简... 详细信息

太湖流域的苏州市吴中区盛产枇杷,自古便为贡品,拥有“东山白沙枇杷”和“西山青种枇杷”2个地理标志产品。吴中区4万多亩成片集中的枇杷林,为冬季中蜂枇杷蜜生产提供了极为有利的条件。以“购蜂育王、繁蜂取蜜、售蜂授粉”为特点的简约化中蜂养殖模式,带领太湖流域的蜂农探索出一条甜蜜致富的新路径。上两期,我们介绍了该模式的蜂群购买技术要点和蜂群快速繁育技术,本期重点介绍枇杷蜜生产技术要点。

关键词：枇杷蜜生产技术要点取蜜中蜂白沙枇杷育王繁蜂地理标志产品

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白枇杷蜜

人生十六七 2019年第15期 38-39页

作者：浦子不详

看到枇杷蜜,未吃进嘴里就甜了。我吃的是白枇杷蜜,这蜜的色泽比普通的蜜淡一些,近似白玉;香浓了些,仿佛眼前就是一座花园;吃到嘴里,更甜一点。一旁的人说,枇杷蜜比一般的蜜要好,而白枇杷蜜则是枇杷蜜中的极品。来到浙江宁海县一市镇的... 详细信息

看到枇杷蜜,未吃进嘴里就甜了。我吃的是白枇杷蜜,这蜜的色泽比普通的蜜淡一些,近似白玉;香浓了些,仿佛眼前就是一座花园;吃到嘴里,更甜一点。一旁的人说,枇杷蜜比一般的蜜要好,而白枇杷蜜则是枇杷蜜中的极品。来到浙江宁海县一市镇的石峡岭白枇杷山庄,山庄主人叶建国指着枇杷树组成的果树林说,这蜜就是这里的蜂采酿的。

关键词：枇杷蜜白枇杷