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支气管哮喘与慢性阻塞性肺疾病及其重叠综合征患者中性粒细胞极性化的差异

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中华医学杂志 2014年第48期94卷 3796-3800页

作者：邓帆董航明邹梦晨赵海金蔡春青蔡绍曦南方医科大学南方医院呼吸与危重症医学科慢性气道疾病实验室广州510515 南方医科大学南方医院内分泌科广州510515 南方医科大学南方医院公共卫生与热带医学学院广州510515

目的探讨支气管哮喘（哮喘）与慢性阻塞性肺疾病（慢阻肺）及其重叠综合征患者外周血中性粒细胞极性化的差异.方法根据2011年慢阻肺全球创议（GOLD）、全球哮喘防治创议（GINA）及2012哮喘-慢阻肺重叠综合征共识标准,人选2013年4月至2... 详细信息

目的探讨支气管哮喘（哮喘）与慢性阻塞性肺疾病（慢阻肺）及其重叠综合征患者外周血中性粒细胞极性化的差异.方法根据2011年慢阻肺全球创议（GOLD）、全球哮喘防治创议（GINA）及2012哮喘-慢阻肺重叠综合征共识标准,人选2013年4月至2014年6月南方医院呼吸内科门诊受试者中健康不吸烟、健康吸烟、哮喘、慢阻肺及重叠综合征各20例.采用密度梯度离心法分离外周血中性粒细胞,通过Zigmond小室观察中性粒细胞在甲酰甲硫氨酰-亮氨酰-苯丙氨酰（fMLP）浓度梯度刺激下的自发极性化率、任意极性化率和定向极性化率.Western印迹检测各组外周血中性粒细胞的钙库操纵性钙内流（SOCE）的重要组分基质相互作用因子（STIM）1、2及Orai1蛋白表达情况.结果哮喘组、慢阻肺组、重叠综合征组中性粒细胞自发极性化率显著高于健康不吸烟组、健康吸烟组[（25.05±4.06）％、（16.20 ±4.46）％、（29.43±5.53）％比（7.27±0.99）％、（7.06±3.12％）,均P＜0.01],哮喘组、重叠综合征组中性粒细胞定向极性化率显著高于健康不吸烟组、健康吸烟组[（14.62 ±2.26）％、（8.00±1.75）％比（5.12±1.28）％、（5.24±1.34％）,均P＜0.05],而慢阻肺组中性粒细胞定向极性化率[（2.45±0.54）％]显著低于健康不吸烟组、健康吸烟组（均P＜0.01）.哮喘组、慢阻肺组、重叠综合征组中性粒细胞STIM1、2和Orai1蛋白表达灰度值均显著高于健康不吸烟组、健康吸烟组（STIM1：1.63 ±0.14、0.88±0.41、1.29±0.22比0.26±0.14、0.38 ±0.12;STIM2：0.52 ±0.19、0.22 ±0.13、0.24 ±0.10比0.05 ±0.03、0.10±0.06;Orai1：0.56 ±0.04、0.39±0.05、0.48±0.05比0.13 ±0.04、0.13 ±0.03）（均P＜0.01）.结论哮喘、慢阻肺及其重叠综合征患者外周血中性粒细胞的极性化存在明显异常和差异,且其SOCE的组分表达上调.

关键词：哮喘肺疾病,慢性阻塞性重叠综合征中性粒细胞极性化

甲基-β-环糊精对中性粒细胞极性化及其与细胞内游离钙离子浓度变化的关系

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中国组织工程研究与临床康复 2008年第29期12卷 5619-5622页

作者：袁春华蔡春青王斌邹飞江西科技师范学院江西省南昌市330013 南方医科大学公共卫生与热带医学学院广东省广州市510515

背景:脂筏是质膜上富含胆固醇和鞘磷脂的微结构域。甲基-β-环糊精(Methyl-β-cyclodextrin,mβCD)为脂筏破裂剂,破坏膜脂的完整性。目的:观察mβCD对甲酰甲硫氨酰-亮氨酰-苯丙氨酸(N-formyl-methionyl-leucyl-phenylalanine,fMLP)诱导... 详细信息

背景:脂筏是质膜上富含胆固醇和鞘磷脂的微结构域。甲基-β-环糊精(Methyl-β-cyclodextrin,mβCD)为脂筏破裂剂,破坏膜脂的完整性。目的:观察mβCD对甲酰甲硫氨酰-亮氨酰-苯丙氨酸(N-formyl-methionyl-leucyl-phenylalanine,fMLP)诱导的中性粒细胞极性化过程中的作用,及其与胞内游离钙离子浓度(Cytosolic free Ca2+concentration,[Ca2+]i)的关系。设计、时间及地点:开放性实验,于2007-02在南方医科大学公共卫生与热带医学学院环境医学研究室完成。材料:fMLP由美国Phoenix pharmaceuticals公司提供,mβCD由美国Sigma公司提供。方法:取健康志愿者外周静脉血5mL,采用重复梯度密度离心的方法分离中性粒细胞。根据诱导中性粒细胞极性化处理条件的不同分为3组,正常对照组、fMLP组、mβCD+fMLP组。正常对照组不加入任何试剂。fMLP组加入100nmol/LfMLP孵育15min。mβCD+fMLP组先加入10mmol/LmβCD预孵育15min,然后加入100nmol/LfMLP孵育15min。最后3组均滴入终浓度为10μmol/Lfuro-3/AM避光孵育45~60min。主要观察指标:倒置显微镜下观察中性粒细胞在不同处理条件下的细胞极性化情况,使用激光共聚焦显微镜监测[Ca2+]i在mβCD抑制细胞极性化过程中的变化。结果:fMLP可以诱导中性粒细胞的极性化,而预先使用10mmol/LmβCD孵育15min后,fMLP诱导的中性粒细胞极性化受抑制。同时,极性化过程中中性粒细胞的[Ca2+]i急剧增加,而mβCD预孵育后[Ca2+]i上升相幅度明显下降。结论:脂筏破裂剂mβCD抑制了fMLP诱导中性粒细胞极性化过程,该作用可能与[Ca2+]i变化有关。

关键词：中性粒细胞极性化 [Ca^2+]i mβCD

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TRPM7对dHL-60细胞极性化的影响

第三军医大学学报 2013年第18期35卷 1910-1914页

作者：吴娴波邹文英蔡春青陈新宏邹飞孟晓静南方医科大学公共卫生与热带医学学院广州510515

目的探讨瞬时受体电位M7(transient receptor potential melastatin 7,TRPM7)对dHL-60细胞极性化的影响及可能的分子机制。方法通过siRNA技术下调dHL-60细胞TRPM7蛋白表达,分为转染无义干扰片段的对照组和TRPM7干扰组,用Zigmond小室观... 详细信息

目的探讨瞬时受体电位M7(transient receptor potential melastatin 7,TRPM7)对dHL-60细胞极性化的影响及可能的分子机制。方法通过siRNA技术下调dHL-60细胞TRPM7蛋白表达,分为转染无义干扰片段的对照组和TRPM7干扰组,用Zigmond小室观察细胞极性化的变化,采用Western blot检测TRPM7和磷酸化AKT的表达,并用细胞免疫荧光方法观察磷酸化AKT的定位情况。结果与转染无义干扰片段的对照组相比,转染TRPM7靶向siRNA的dHL-60细胞中,TRPM7蛋白表达水平明显降低(P极性化率与对照组相比显著增加(P化AKT表达明显上调,并从细胞质转向了细胞膜,呈极性分布在细胞质膜上,而总AKT的表达则无明显变化。AKT的特异性抑制剂Triciribine可使dHL-60细胞在fMLP刺激下的磷酸化AKT的极性分布消失。结论 TRPM7通过AKT信号通路调控细胞极性相关分子,进而影响dHL-60细胞的极性化能力。

关键词：瞬时受体电位M dHL-细胞极性化 AKT

含碳碳弱键SEBS的自由基反应性研究及其极性化改性

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含碳碳弱键SEBS的自由基反应性研究及其极性化改性

作者：吴天昊北京化工大学

学位级别：硕士

SEBS全称为苯乙烯-乙烯-丁烯-苯乙烯嵌段共聚物,由苯乙烯-丁二烯-苯乙烯(SBS)氢化后得到,是苯乙烯类热塑性弹性体(TPS)产品中重要的一种。SEBS具有良好的物理机械性能、耐热解能力、耐候性、绝缘性等性能,具有广阔的应用范围,如汽车零... 详细信息

SEBS全称为苯乙烯-乙烯-丁烯-苯乙烯嵌段共聚物,由苯乙烯-丁二烯-苯乙烯(SBS)氢化后得到,是苯乙烯类热塑性弹性体(TPS)产品中重要的一种。SEBS具有良好的物理机械性能、耐热解能力、耐候性、绝缘性等性能,具有广阔的应用范围,如汽车零部件、电绝缘材料、医用材料、粘合剂和聚合物共混改性剂等。SEBS作为一种非极性聚合物,其极性较小、表面活性较低,在应用过程中亲水性较差,与极性高分子材料、无机填料的相容性和粘结性不好。但很多应用领域要求SEBS具有极性,如医用输血袋等,这就需要对SEBS进行极性化改性。目前所研究的SEBS极性化改性工作大部分集中于SEBS的主链上PS、EB段的功能化接枝改性,操作一般比较复杂繁琐。本论文基于一种SEBS大分子引发剂作为基体材料,通过SEBS大分子引发剂的分子链末端大分子自由基热引发极性单体来实现极性化改性。通过此方法极性化改性后SEBS,末端极性基团具有多样化和可设计性,可以有效的控制极性单体种类和组分含量,极性化效果好。本方法操作简单,对于反应单体和产物无需进行处理,引发活性高、反应平稳、性能稳定、成本低,具有工业化应用潜力。主要研究内容及结果如下：1、实验室自制并设计了SEBS大分子引发剂,通过本体聚合探索了SEBS大分子引发剂引发几种极性单体进行聚合反应的研究。结果表明：在反应时间为6h,反应温度大于85℃的条件下,SEBS大分子引发剂可以实现热引发,可以引发MMA、HEMA、PEGMA、PEGMEMA极性单体实现聚合反应,其中效果较好的是PEG单体。2、通过本体聚合方法研究了SEBS大分子引发剂引发PEGMEMA单体的反应条件,结果如下：反应温度的升高有助于聚合物中嵌段组分含量的提升;在170℃的高温条件下,SEBS大分子引发剂在5min的反应时间内即可引发PEGMEMA进行反应,反应时间的延长对于聚合物中嵌段组分含量的影响较小。3、在熔融聚合体系中研究了SEBS大分子引发剂引发PEGMEMA反应体系的反应温度、反应时间和反应单体摩尔比的影响,结果如下：温度升高有助于提高极性嵌段组分含量,极性增大,接触角减小,拉伸强度下降程度增加;嵌段单体摩尔比升高,有助于提高极性嵌段组分含量,极性增大,接触角减小,拉伸强度下降程度增加;反应时间延长对嵌段组分含量影响较小,但产物极性增大,接触角变小。4、研究了SEBS大分子引发剂引发两种单体进行共聚合反应,结果表明SEBS大分子引发剂可以引发PEGMEMA、GMA和PEGMEMA、 PEGMA两个极性单体体系进行共聚合反应。

关键词： SEBS大分子引发剂 PEGMEMA 接触角嵌段聚合极性化

ROCE与SOCE参与调节fMLP诱导的中性粒细胞极性化的研究

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ROCE与SOCE参与调节fMLP诱导的中性粒细胞极性化的研究

作者：唐侍豪南方医科大学

学位级别：硕士

背景中性粒细胞是人体免疫系统的重要组成部分,在人体循环系统中,占白细胞的50-60%。中性粒细胞聚集在损伤的组织能够引起许多免疫性疾病,而它们向着炎症刺激因子浓度高的方向发生极性化和迁移是它们聚集的必要条件。在静息条件下,中性... 详细信息

背景中性粒细胞是人体免疫系统的重要组成部分,在人体循环系统中,占白细胞的50-60%。中性粒细胞聚集在损伤的组织能够引起许多免疫性疾病,而它们向着炎症刺激因子浓度高的方向发生极性化和迁移是它们聚集的必要条件。在静息条件下,中性粒细胞呈球形或椭球形,且其粘附性较差,而在炎症因子的刺激下,中性粒细胞会在刺激因子浓度高的一端形成片足,在另一端形成尾足而发生极性化,随后朝着浓度高的方向移动。许多的免疫性疾病就是由于这一过程的相关分子被不适当的激活引起的,比较常见的有过敏反应、哮喘、急性呼吸窘迫综合症、慢性阻塞性肺病,还有可能导致风湿性关节炎、动脉粥样硬化、病毒性心肌炎、炎性皮肤病甚至肿瘤的发生和肿瘤转移。另一方面,有研究证实了中性粒细胞对炎症刺激因子反应迟钝或不反应也与许多疾病相关,例如迟钝白血病综合症、髓增生异常症候症和Ⅰ型丙种球蛋白异常血症等。中性粒细胞无论是不适当激活还是反映迟钝都会导致机体出现障碍。因此,中性粒细胞的极性化和迁移是一个具有深远意义的研究,对中性粒细胞极性化机制的研究能够为中性粒细胞异常导致的组织损伤或中心粒细胞功能紊乱导致的疾病提供潜在的治疗靶点。通常情况下,趋化物通过作用于细胞膜上的G-蛋白偶联受体而将胞外信号转化为胞内应答,但不同的趋化物可能作用于不同的趋化物受体而作用于G蛋白不同的βγ亚单位从而激活不同的效应蛋白,因而不同的趋化物对细胞的极性化的现象也有比较明显的差异。中性粒细胞能够感受趋化物2%的浓度梯度变化,并由此产生极性化和迁移。目前人们常用于科学研究的中性粒细胞的趋化物有甲酰甲硫氨酰-亮氨酰-苯丙氨酸(fMLP),人白三烯(LTB4),血小板激活因子(PAF),白细胞介素8(IL-8)等,其中fMLP来源于细菌的多肽,它对中性粒细胞的刺激作用最强而且效果最明显,因此,我们的课题研究选择了fMLP作为刺激中性粒细胞的趋化物。我们知道,钙离子作为第二信使,在细胞的生理病理功能中起着不可代替的作用,而且细胞内的钙动员是细胞极性化和迁移的重要原因。中性粒细胞在趋化物刺激下胞内钙离子浓度的升高是其发生极性化的必要条件,而细胞的极性化又是细胞迁移的第一步。帕尼特与他的同事们在三十年前发现,fMLP作为中性粒细胞效果最好的趋化剂,能够通过激活中性粒细胞膜上的相关受体来激活磷脂酶C (PLC),从而作用于使磷脂酰肌醇二磷酸磷酸使其分解成三磷酸肌醇(IP3)和甘油二脂,IP3与内质网上的IP3受体结合,使得内质网内的钙离子释放到细胞质内,从而导致细胞质内钙浓度升高。当内质网内的钙离子浓度降低时,内质网膜上的STIM1蛋白的EF-hand能够感受到内质网内钙离子浓度的降低,于是STIM1便向细胞膜靠近,激活细胞膜上的钙库耗竭调节钙内流通道(SOCE)引起细胞外钙离子内流。近年来,越来越多的研究都证实了通过SOCE的钙离子内流参与了细胞极性化、细胞生存、细胞迁移与转移等多种病理和生理过程。而且无论是体内实验还是体外实验,都有人提出SOCE引起的钙离子内流能够激活细胞内许多钙离子信号,从而调节细胞的极性化和迁移。在临床试验中,豪斯团队甚至证实了由于中性粒细胞功能紊乱引起的损伤和免疫性疾病与SOCE功能的增强有关。尽管目前的研究在各个方面都有了巨大的研究成果,但是仍然不清楚趋化物引起中性粒细胞的迁移是否只由SOCE机制来调节。事实上,最近有研究发现,在许多细胞中存在着一种可能与激活蛋白激酶C通道有关的非SOCE机制引起的钙内流通道,叫做受体调节钙内流通道(ROCE)。前面提到,G蛋白偶联受体是将胞外趋化物刺激转化为胞内信号的关键环节,fMLP激活G蛋白偶联受体后,其作用的下游底物都可能参与到中性粒细胞的极性和趋化性的过程中去。目前,中性粒细胞的研究主要集中在Rho, Rac和Cdc42这三个蛋白上,研究表明,用fMLP刺激人中性粒细胞能短暂的激活这三个蛋白。许多研究证明了Rho的激活对于fMLP诱导的中性粒细胞趋化性是必须的。其中,Rac2是中性粒细胞所特有的,它在中性粒细胞极性化时定位与细胞前端的片足,而Cdc42主要定位与细胞后端的尾足,并且Cdc42在调节细胞的定向迁移的起着关键作用。但是尽管小G蛋白家族成员在细胞的极性化与趋化过程的重要作用已经被证实了,但是这个具体机制仍然不清楚且受到广泛的争议,而且不同的钙信号与小G蛋白家族相互作用引起的细胞极性化的机制是否不同也有待研究。SOCE与ROCE是否通过激活小G蛋白家族来实现其功能的研究更是少之又少。目的我们假设在中性粒细胞上,fMLP刺激中性粒细胞不但可以诱发SOCE,而且同时诱发ROCE。我们的研究中不但使用了药理性抑制剂如PKC通道抑制剂calphostin C以及PLC通道抑制剂U73122,还使用了抗体封闭技术

关键词：钙库耗竭调节钙内流受体调节钙内流极性化中性粒细胞

部分氢化聚苯乙烯—丁二烯—苯乙烯三嵌段共聚物（SEBS）的极性化研究

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部分氢化聚苯乙烯—丁二烯—苯乙烯三嵌段共聚物（SEBS）的极性化...

作者：李云勇四川大学

学位级别：硕士

本论文采用了SEBS与TPU共混的方法来提高SEBS基料的极性，从而扩大了SEBS应用范围。论文中采用了多种测试表征方法对SEBS／TPU共混材料的流变性能、低温性能、微观结构等进行了研究。同时探讨了增容剂、TPU、充油量等各种因素对共混材... 详细信息

本论文采用了SEBS与TPU共混的方法来提高SEBS基料的极性，从而扩大了SEBS应用范围。论文中采用了多种测试表征方法对SEBS／TPU共混材料的流变性能、低温性能、微观结构等进行了研究。同时探讨了增容剂、TPU、充油量等各种因素对共混材料性能的影响。并且找到了适合SEBS、TPU共混的最佳加工工艺条件。利用高压毛细管流变仪对SEBS和TPU的流变性能进行了研究。结果表明，SEBS熔体流动表现为非牛顿性，粘度随剪切速率增加而降低。加入填充油的SEBS有优良的热流动稳定性。充油SEBS对温度不敏感，而TPU对温度很敏感。利用DSC和DMTA对SEBS／TPU共混材料的低温性能及相容性进行了测试，DSC测试结果表明SEBS中EB段的T随着充油用的增加而降低，但当充油量达到100％后，SEBS软段的Tg维持在-64℃左右。同时发现，共混后SEBS的玻璃化转变温度有所上升，在SEBS-g-MAH用量为15％(wt)时处，升高了3℃，此时共混物发生相转变。从DMTA结果可知，当TPU相对于SEBS含量为150％(wt)的时候，两个tanδ峰值比较接近，共混物的相

关键词：氢化聚苯乙烯—聚丁二烯—聚苯乙烯三嵌段共聚物(SEBS) 热塑性聚氨酯弹性体(TPU) 极性化共混相容性

苯乙烯-丁二烯-苯乙烯嵌段共聚物极性化研究进展

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弹性体 2021年第3期31卷 73-77页

作者：李静静邵磊山中国石油化工股份有限公司茂名分公司研究院广东茂名525000

综述了苯乙烯-丁二烯-苯乙烯嵌段共聚物极性化在大分子化学改性和负离子原位聚合改性这两种方法中的研究进展,详细阐述了两种方法的技术手段及优缺点,并对极性化后SBS的应用进行简单概述。

关键词：苯乙烯-丁二烯-苯乙烯嵌段共聚物极性化进展

极性化苯乙烯-丁二烯-苯乙烯三嵌段共聚物的磺化改性及其纳米复合材料的制备

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合成橡胶工业 2010年第6期33卷 468-472页

作者：何三雄吴唯陈玉洁栾立醒华东理工大学材料科学与工程学院上海200237

以浓硫酸和乙酸酐制得的乙酰硫酸酯为磺化剂,对极性化苯乙烯-丁二烯-苯乙烯三嵌段共聚物(PSBS)进行磺化改性,采用红外光谱表征了磺化PSBS(SPSBS),通过测定硫元素含量考察了磺化条件,并用熔融插层法制备了SPSBS/有机蒙脱土(OMMT)纳米复... 详细信息

以浓硫酸和乙酸酐制得的乙酰硫酸酯为磺化剂,对极性化苯乙烯-丁二烯-苯乙烯三嵌段共聚物(PSBS)进行磺化改性,采用红外光谱表征了磺化PSBS(SPSBS),通过测定硫元素含量考察了磺化条件,并用熔融插层法制备了SPSBS/有机蒙脱土(OMMT)纳米复合材料,研究了复合材料的插层结构和拉伸性能。结果表明,在丙酮/环己烷为混合溶剂(丙酮体积分数为10%)、PSBS质量浓度为0.10～0.15 g/mL、硫酸/PSBS(质量比)为8.5/100、乙酸酐/硫酸(摩尔比)为1.69、反应温度为25℃、反应时间为15～40 min的条件下,PSBS可温和地进行磺化反应制得SPSBS,且反应过程中无凝胶产生;在SPSBS/OMMT纳米复合材料中,SPSBS插层进入OMMT片层间,且插层效果优于PSBS和苯乙烯-丁二烯-苯乙烯三嵌段共聚物(SBS);随着磺化度的增加,SPSBS的插层效果越好;SPSBS的拉伸性能优于PSBS和SBS,SPSBS/OMMT纳米复合材料的拉伸性能也优于PSBS/OMMT和SBS/OMMT纳米复合材料,且随着磺化度的增加,SPSBS/OMMT纳米复合材料的拉伸性能逐渐提高。

关键词：苯乙烯-丁二烯-苯乙烯三嵌段共聚物极性化磺化有机蒙脱土纳米复合材料插层结构拉伸性能

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SBS热塑弹性体的极性化改性及其应用

粘接 2008年第3期29卷 41-45页

作者：邸明伟刘杨张彦华顾继友东北林业大学材料科学与工程学院黑龙江哈尔滨150040

综述了SBS热塑弹性体在环氧化、接枝改性、卤化、磺化、氯甲基化以及在合成过程中引入极性基团等方面极性化改性的研究进展,并对极性化改性后SBS的应用进行了概述。

关键词：热塑弹性体 SBS 极性化改性应用