检索结果-南通市图书馆

板蓝根多糖通过TLR4-NF-κB通路影响PRRSV感染后细胞因子的分泌

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国兽医学报 2024年第2期44卷 327-334页

作者：李倩楠吴文义张云天杨明凡金钺张红英河南农业大学动物医学院河南郑州450046 河南省动物性食品安全重点实验室河南郑州450046 郑州市中兽药研究与评价重点实验室河南郑州450046

为探究板蓝根多糖(Radix isatidis polysaccharide,IRPS)对猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)感染后细胞因子分泌的影响。本试验用永生化的猪肺泡巨噬细胞(3D4/21/CD163)作为靶细胞,分别采取ELISA和Western blot等试验方法对其炎性细胞因子以及诱导炎性细胞因子分泌的TLR4和NF-κB等蛋白表达水平进行测定,并通过TAK-242(TLR4特异性抑制剂)对TLR4通路进行抑制/封闭,ELISA检测TLR4-NF-κB信号通路被阻断后的IRPS对PRRSV感染3D4/21/CD163细胞分泌细胞因子的影响。结果显示IRPS能够降低PRRSV感染3D4/21/CD163细胞后IL-1β、IL-6、IL-8和TNF-α等炎性细胞因子的分泌,并且能够降低PRRSV感染3D4/21/CD163细胞后TLR4和NF-κB的蛋白表达水平;当TLR4-NF-κB信号通路被阻断时,炎性细胞因子的表达相对于单独的IRPS组有不同程度的升高。说明IRPS能够通过TLR4-NF-κB信号通路影响炎性细胞因子的分泌,减少炎性细胞因子对细胞的损伤。

关键词：板蓝根多糖 PRRSV 细胞因子 TLR4

基于TLRs信号通路探究板蓝根多糖体外抗PRRSV增殖的作用机制

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

基于TLRs信号通路探究板蓝根多糖体外抗PRRSV增殖的作用机制

作者：吴文义河南农业大学

学位级别：硕士

猪繁殖与呼吸综合征(Porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)引起的高度传染性疾病,该病在临床上主要表现为公猪精液质量下降,母猪繁殖障碍,仔猪断奶后肺炎,个体机能下降,生长缓慢,死亡率高等。自传入我国以来,近几十年对养猪业造成了巨大的经济损失。PRRSV感染后不仅能够激活先天性免疫反应,诱导猪体内炎症细胞因子如IL-1β、IL-6等的过度表达,造成“细胞因子风暴”,从而引发炎症;此外,部分毒株感染后还能够通过影响机体对病毒的清除从而引起免疫抑制,达到持续感染的目的。板蓝根多糖(Radix Isatidis Polysaccharide,IRPS)是中药板蓝根的主要活性成分之一,具有抗炎、抗菌、抗病毒和促进免疫器官增殖、增强免疫活性等多重作用。前期研究发现,IRPS能够显著抑制PRRSV JXA1在3D4/21/CD163细胞上的增殖,减少PRRSV感染引起的炎症因子分泌,促进I型干扰素的表达,但其作用机制尚未明确。本试验通过研究IRPS在抗PRRSV感染过程中TLRs及其信号通路中关键分子的表达变化,结合激光共聚焦和流式细胞术方法分析IRPS与3D4/21/CD163细胞的TLRs受体之间的相互作用,确定IRPS抗PRRSV作用的TLRs作用位点及信号通路。试验一IRPS对PRRSV JXA1感染的3D4/21/CD163细胞TLRs及其下游信号分子表达的影响为了明确IRPS抑制PRRSV增殖的作用机制,采用荧光定量PCR与Western blot方法,实时检测IRPS对PRRSV JXA1感染的3D4/21/CD163细胞TLR3、TLR4受体蛋白及其下游关键信号分子My D88、TRIF、NF-κB、IRF3、IRF7等的mRNA和蛋白表达水平的影响。结果显示,IRPS能够抑制PRRSV感染前期TLR4、My D88、NF-κB蛋白水平的上调;抑制PRRSV感染前期TLR3、TRIF、IRF3、IRF7蛋白水平的下调;抑制PRRSV感染后期TLR4、NF-κB、IRF3蛋白水平的下调。结合前期试验推测,IRPS可能通过TLR3/TRIF途径和TLR4/NF-κB或TLR4/IRF3途径缓解PRRSV感染引起的免疫抑制与炎症反应。试验二IRPS调节TLRs抑制PRRSV增殖的作用研究试验一初步确定了IRPS作用于TLR3、TLR4信号通路抑制PRRSV增殖,为了进一步确定TLRs在IRPS抑制PRRSV增殖过程中的作用,该步骤使用对应的TLRs通路抑制剂/激动剂进行验证。试验采用荧光定量PCR、Western blot、ELISA方法,检测TLR3激动剂Poly(I:C)、TLR4抑制剂TAK-242处理对IRPS抗PRRSV过程中TLRs下游信号因子、PRRSV复制和细胞因子分泌的影响。结果显示,Poly(I:C)处理能够显著上调PRRSV感染前期TRIF、IRF3、IRF7蛋白的表达,促进IRF3、IRF7蛋白的磷酸化,抑制PRRSV增殖,促进I型干扰素的分泌;TAK-242处理能够显著下调PRRSV感染前期My D88、NF-κB蛋白的表达,抑制NF-κB蛋白的磷酸化,减少炎性因子TNF-α和IL-6的分泌;IRPS与Poly(I:C)、TAK-242均具有协同作用。结果表明,IRPS通过TLR3/TRIF/IRF3/IRF7途径和TLR4/My D88/NF-κB途径缓解PRRSV感染引起的免疫抑制和炎症反应,从而抑制PRRSV增殖。试验三CLSM、FCM检测IRPS与3D4/21/CD163细胞的结合位点(TLRs)以上研究结果表明,IRPS能够通过调节TLRs信号通路抑制PRRSV增殖。为了探究IRPS与TLRs受体的作用方式,我们用FITC对IRPS进行荧光标记,采用激光共聚焦和流式细胞术方法,检测IRPS与3D4/21/CD163细胞的TLRs受体之间是否存在相互作用。结果显示,IRPS能够与3D4/21/CD163细胞结合,与TLR3、TLR4受体存在共定位现象;TLR3、TLR4抗体/配体处理能够抑制IRPS与TLRs受体结合。综上,IRPS与3D4/21/CD163细胞的TLR3、TLR4受体存在相互作用。

关键词： PRRSV 板蓝根多糖 TLR3 TLR4 炎症反应免疫抑制

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

板蓝根多糖抗病毒作用及其机制研究进展

中草药 2022年第19期53卷 6227-6233页

作者：李咸慰宋沁洁杨新荣李国峰李东辉吴红伟李越峰甘肃中医药大学甘肃兰州730000 甘肃省中药制药工艺工程研究中心甘肃兰州730000

板蓝根多糖是板蓝根的主要成分,具有多种药理作用,其中抗病毒作用较为突出,可通过多种方式实现,如直接杀灭病毒和抑制病毒吸附、复制及蛋白表达,还可通过促进免疫细胞增殖分化、促进细胞因子释放、降低促炎因子水平以及参与红细胞免疫... 详细信息

板蓝根多糖是板蓝根的主要成分,具有多种药理作用,其中抗病毒作用较为突出,可通过多种方式实现,如直接杀灭病毒和抑制病毒吸附、复制及蛋白表达,还可通过促进免疫细胞增殖分化、促进细胞因子释放、降低促炎因子水平以及参与红细胞免疫等方式增强机体的免疫作用,Toll样受体3(toll-likereceptor-3,TLR3)通路和Janus激酶(Janus kinase,JAK)/信号转导子和转录激活因子(signal transducer and activator of transcription,STAT)通路是其通过免疫调节方式抗病毒的重要信号通路,免疫佐剂的应用可为板蓝根多糖与其他抗病毒制剂的联合使用提供一定思路。主要综述了板蓝根多糖抗病毒作用及其机制的研究进展,以期为板蓝根多糖的临床应用提供参考。

关键词：板蓝根板蓝根多糖抗病毒免疫信号通路作用机制

板蓝根多糖对马立克病病毒在鸡胚成纤维细胞中复制的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国兽医学报 2023年第6期43卷 1167-1174页

作者：龚乐乐秦静霖林树乾贺秀媛庄国庆孙爱军河南农业大动物医学院国家动物免疫学国际联合研究中心河南郑州450046 山东省农业科学院家禽研究所山东济南250023

从板蓝根多糖(Isatidis Radix polysaccharides, IRPS)对马立克病病毒(Marek?s disease virus, MDV)的增殖抑制、感染阻断以及直接杀灭这3个给药途径探讨IRPS抗MDV作用。利用Real-time quantitative PCR(RT-qPCR)、蛋白免疫印迹(Western blot)以及间接免疫荧光(IFA)等试验观察IRPS对病毒复制的影响。结果显示,IRPS剂量依赖性抑制MDV的基因表达、蛋白合成以及降低病毒复制水平。同时,IRPS可以降低IL-6的表达,并促进IFN-β的表达。结果表明,IRPS可能通过降低炎症反应,并且促进干扰素表达而抑制MDV的复制。

关键词：马立克病病毒板蓝根多糖病毒复制疫病防控

板蓝根多糖对PRRSV-JXA1株体外增殖的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国兽医学报 2022年第12期42卷 2505-2513页

作者：苏科李倩楠樊俊洋刘健朱世豪郝潇雅杨明凡张红英河南农业大学动物医学院河南郑州450046 河南省动物性食品安全重点实验室河南郑州450046 郑州市中兽药创制与评价重点实验室河南郑州450046

为研究板蓝根多糖(Radix isatidis polysaccharide,IRPS)体外抑制猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)增殖的作用方式、复制环节和途径,通过荧光定量PCR进行了最佳计量和给药方式的筛选,确定了IRPS作用于病毒复制的环节,通过荧光定量PCR、间接免疫荧光、蛋白质印迹等试验探讨了TLR4/NF-ΚB途径对IRPS抑制PRRSV-JXA1株增殖的影响。结果显示,IRPS抑制PRRSV-JXA1株增殖的最佳剂量为0.015625 g/L,最佳给药方式和最佳阻断环节为预防作用和吸附环节,分别使病毒载量减少了91.34%(P<0.0001)和88.83%(P<0.0001);IRPS在多个时间点促进了PRRSV感染细胞TLR4表达;当TLR4/NF-ΚB途径被阻断时IRPS不能抑制PRRSV的增殖作用,反而促进其增殖(P<0.0001)。结果表明,IRPS主要作用于PRRSV-JXA1株感染的吸附环节,TLR4下游NF-ΚB信号通路是IRPS体外抑制PRRSV-JXA1株增殖的关键通路。

关键词：板蓝根多糖猪繁殖与呼吸综合征病毒荧光定量PCR 间接免疫荧光蛋白质印迹 TLR4

板蓝根多糖在3D4/21/CD163细胞上对PRRSV感染过程的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

动物医学进展 2022年第4期43卷 52-57页

作者：刘建苏科朱世豪樊俊洋李倩楠郝潇雅杨明凡张红英河南农业大学动物医学院河南郑州450000 河南省动物性食品安全重点实验室河南郑州450000 郑州市中兽药研究与评价重点实验室河南郑州450000

以永生化的传代猪肺泡巨噬细胞(3D4/21/CD163)作为靶细胞,研究板蓝根多糖(IRPS)对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的体外抗病毒效果。研究IRPS的最佳给药方式及其抑制病毒增殖的环节,分别以预防作用、直接杀灭作用和治疗作用来测定IRPS抑... 详细信息

以永生化的传代猪肺泡巨噬细胞(3D4/21/CD163)作为靶细胞,研究板蓝根多糖(IRPS)对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的体外抗病毒效果。研究IRPS的最佳给药方式及其抑制病毒增殖的环节,分别以预防作用、直接杀灭作用和治疗作用来测定IRPS抑制PRRSV增殖的最佳作用方式和药物浓度;从IRPS对PRRSV的吸附、入侵环节的影响确定IRPS抑制病毒感染的具体环节,用荧光定量PCR和间接免疫荧光对IRPS的抗PRRSV作用进行验证。结果显示,当药物浓度为0.062 5 mg/mL时对PRRSV的直接杀灭作用和预防作用效果最好,显著降低PRRSV在细胞中的拷贝数;IRPS主要是在病毒入侵细胞的环节发挥作用。

关键词：猪繁殖与呼吸综合征板蓝根多糖抗病毒作用

板蓝根多糖体外抗PRRSV JXA1增殖及作用机制研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

板蓝根多糖体外抗PRRSV JXA1增殖及作用机制研究

作者：苏科河南农业大学

学位级别：硕士

猪繁殖与呼吸障碍综合征是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)引起的,严重危害养猪产业的疾病。自上世纪八十年代末该病毒在美国西部首次被发现,几乎同一时间欧洲许多国家也检测出阳... 详细信息

猪繁殖与呼吸障碍综合征是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)引起的,严重危害养猪产业的疾病。自上世纪八十年代末该病毒在美国西部首次被发现,几乎同一时间欧洲许多国家也检测出阳性PRRSV,之后随全球贸易遍布各大洲国家。当前预防该病的主流措施是弱毒和灭活疫苗接种,但由于灭活苗免疫效果不佳,弱毒苗存在极大散毒风险,因此开发其他药物可能对防治该病具有深远意义。中药抗病毒历史悠久,对中国几千年的文明传承具有深远意义。由于猪肺泡巨噬细胞是PRRSV天然靶细胞,所以选择该细胞研究板蓝根多糖体外抗PRRSV作用机理更具现实意义,而猪原代PAM细胞制作成本高昂且不易获取,用于研究TLRs和细胞因子的动态表达容易造成大量浪费,因此将成功转染并稳定表达CD163受体的永生猪肺泡巨噬细胞3D4/21/CD163作为研究对象进行本试验更为适宜。本文从板蓝根中提取具有抗病毒活性的板蓝根多糖(Radix Isatidis Polysaccharide,IRPS)进行体外抗病毒试验,将IRPS以抗病毒试验筛选的最佳浓度和作用方式作用于PRRSV JXA1感染3D4/21/CD163细胞来检测药物对TLRs及其下游相关细胞因子表达的影响,最后根据上述试验结果验证TLRs在IRPS抑制PRRSV JXA1体外增殖的功能。试验分为四个部分,如下所述:试验一板蓝根多糖对PRRSV JXA1体外增殖的影响。本试验用稳定表达CD163的永生化猪传代肺泡巨噬细胞(3D4/21/CD163)作为靶细胞来研究IRPS抑制PRRSV JXA1感染的最佳药物浓度、给药方式,以及药物阻断病毒复制的环节。根据IRPS与PRRSV JXA1作用细胞的先后顺序将给药方式分为预防组、直接杀灭组和治疗组来研究IRPS的最佳用药浓度和给药方式;根据IRPS对PRRSV JXA1的吸附、侵入和胞内增殖环节的影响来探究IRPS抑制PRRSV JXA1复制的环节。以最佳用药浓度、给药方式和阻断复制环节共同作用细胞来验证药物最终的抗PRRSV效果。结果显示:IRPS抑制PRRSV-JXA1增殖的最佳剂量为0.015625mg/m L,最佳给药方式和最佳阻断环节为预防作用和吸附环节,分别使病毒载量减少了91.34%(P<0.0001)和88.83%(P<0.0001),0.015625mg/m L的IRPS以预防的给药方式作用于病毒的吸附环节效果最佳,最终使病毒载量下降了94.97%。试验二IRPS对PRRSV JXA1感染3D4/21/CD163细胞TLRs转录和翻译水平的影响。试验分为细胞对照组、给药组和病毒对照组,所筛选的最佳给药剂量的IRPS以预防和抗吸附的作用方式给药。采用荧光定量PCR和Western blotting分别检测病毒感染开始6h、12h、18 h、24 h、30 h、36 h、48 h TLRs的转录和翻译水平。结果显示PRRSV JXA1分别促进TLR3、TLR4、TLR7、TLR9,3个、4个、0个、5个时间点转录,其他时间点则表现为抑制效果,从整体结果看IRPS双向调节了TLRs的转录;Western blotting检测结果结合蛋白灰度分析可见IRPS对TLR3、TLR4和TLR9的翻译整体呈上调作用。结论:IRPS双向调节TLRs m RNA转录水平,促进TLRs蛋白翻译水平。试验三IRPS对感染PRRSV JXA1的3D4/21/CD163细胞分泌细胞因子的影响。试验分细胞对照组、药物抗病毒组和病毒对照组,用0.015625mg/m L的IRPS以预防的方式作用于PRRSV JXA1对靶细胞的吸附环节,在药物作用第6 h、12 h、18 h、24 h、30 h、36 h、48 h收集细胞,通过相对荧光定量PCR检测细胞因子转录水平;收集上清液,使用ELISA试剂盒检测不同时间点细胞因子的翻译水平。结果显示:药物对检测的四种炎性因子(IL-1β、IL-6、IL-8和TNF-α)的28个时间点中有27个展示出不同程度的双向调节作用;对检测的三种干扰素(IFN-α、IFN-β、IFN-γ)21个时间点中有18个表现出双向调节作用;对检测的免疫抑制因子(IL-10)7个时间点均表现双向调节作用。IRPS促进病毒清除因子(IFN-α、IFN-β、IFN-γ、TNF-α)的表达;抑制部分炎症因子(IL-1β、IL-8)的过度表达;对免疫抑制因子(IL-10)前期的表达为促进效果,抑制其后期表达。整体上IRPS对感染PRRSV JXA1的3D4/21/CD163细胞分泌细胞因子具有显著双向调节作用。试验四TLR4和CD163在IRPS抗PRRSV JXA1过程中功能的验证。试

关键词：板蓝根多糖猪繁殖与呼吸综合征病毒双向免疫调节

谷氨酰胺和板蓝根多糖对无初乳仔鼠小肠吸收功能的影响

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

饲料研究 2022年第12期45卷 58-62页

作者：王春秀张宾宾刘聪王东雪祝廷奇肖传斌河南农业大学动物科技学院河南郑州450046 河南农业大学动物医学院河南郑州450046

试验探讨外源性谷氨酰胺和板蓝根多糖(Gln-RIP)联合应用灌胃无初乳仔鼠对其肠道形态和吸收功能的影响。试验选取120只仔鼠分为5组,每组6个重复。A组仔鼠饲喂初乳,B组仔鼠饲喂常乳+0.9%生理盐水,C组仔鼠饲喂常乳+1 g/kg Gln,D组仔鼠饲喂... 详细信息

试验探讨外源性谷氨酰胺和板蓝根多糖(Gln-RIP)联合应用灌胃无初乳仔鼠对其肠道形态和吸收功能的影响。试验选取120只仔鼠分为5组,每组6个重复。A组仔鼠饲喂初乳,B组仔鼠饲喂常乳+0.9%生理盐水,C组仔鼠饲喂常乳+1 g/kg Gln,D组仔鼠饲喂常乳+1 g/kg Gln+20 mg/kg RIP,E组仔鼠饲喂常乳+1 g/kg Gln+40 mg/kg RIP。应用大体解剖学技术、D-木糖吸收试验、HE染色技术、Leica显微图像处理系统对不同剂量的Gln-RIP灌胃的无初乳仔鼠组与初乳组肠绒毛高度和隐窝深度进行分析。结果显示:21 d时,C组、D组、E组小鼠体重显著高于A组、B组(P<0.05)。0~21 d各组中仔鼠小肠长度随日龄增加而增长。21 d时,D组、E组仔鼠的十二指肠绒毛高度显著高于B组(P<0.05),21 d时,B组、D组仔鼠空肠隐窝深度显著高于A组(P<0.05)。21 d时,B组仔鼠十二指肠V/C值显著低于E组(P<0.05)。21 d时,A组仔鼠的AV值显著高于B组(P<0.05),B组显著低于E组(P<0.05)。研究表明,Gln-RIP能够促进无初乳仔鼠肠道形态发育,增强小肠的吸收功能。

关键词：板蓝根多糖谷氨酰胺 SD无初乳仔鼠肠道

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

淫羊藿多糖和板蓝根多糖的提取和初步鉴定

动物医学进展 2022年第12期43卷 79-83页

作者：李秀萍王春雨唐艳刘德稳高晨吴秀芬李卫东李冬梅于运峰胡元亮德州学院生态与资源环境学院山东德州253000 南京农业大学动物医学院江苏南京210095

初步探讨了淫羊藿多糖和板蓝根多糖的制备和理化性质,从而为进一步应用提供参考。用水煎醇沉法提取粗淫羊藿多糖(EPSg)和粗板蓝根多糖(IRPSg),经Sevag法除蛋白,DEAE-52柱层析分离,并对纯淫羊藿多糖EPS1和纯板蓝根多糖IRPS1进行沉淀溶解... 详细信息

初步探讨了淫羊藿多糖和板蓝根多糖的制备和理化性质,从而为进一步应用提供参考。用水煎醇沉法提取粗淫羊藿多糖(EPSg)和粗板蓝根多糖(IRPSg),经Sevag法除蛋白,DEAE-52柱层析分离,并对纯淫羊藿多糖EPS1和纯板蓝根多糖IRPS1进行沉淀溶解和红外光谱鉴定。结果显示,EPSg和IRPSg的提取率分别为4.24%和5.24%;经柱层析分离,分别得到2个纯淫羊藿多糖(EPS1和EPS2)和2个纯板蓝根多糖(IRPS1和IRPS2),EPS1的糖含量(53.1%)高于EPS2(37.34%),EPS1收集液用50 mL/L盐酸滴定产生的颗粒状沉淀用20 mg/mL NaOH溶液回滴不能溶解,IRPS1的糖含量(97.92%)高于IRPS2(30.85%),IRPS1收集液用50 mL/L盐酸滴定产生的絮状沉淀用20 mg/mL NaOH溶液回滴可以溶解;红外光谱显示,EPS1有酸性多糖的特征光谱,IRPS1无糖醛酸。结果表明,淫羊藿多糖与板蓝根多糖的组成和理化性质不完全相同。

关键词：淫羊藿多糖板蓝根多糖提取鉴定