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杧果炭疽病病原菌侵染特性研究

中国南方果树 2017年第2期46卷 20-25页

作者：莫贱友赵广李其利郭堂勋黄穗萍韦继光广西农业科学院植物保护研究所南宁530007 广西作物病虫害生物学重点实验室南宁530007 广西林业有害生物防治检疫站南宁530028

采用细胞组织学和扫描电镜观察杧果炭疽病菌Colletotrichum gloeosporioides在杧果叶片、果实上的侵染过程,并研究了温度、湿度、刺伤对其发病情况的影响。结果表明,杧果炭疽菌在条件适宜情况下,可在3h内萌发并侵入寄主组织;伤口可促进... 详细信息

采用细胞组织学和扫描电镜观察杧果炭疽病菌Colletotrichum gloeosporioides在杧果叶片、果实上的侵染过程,并研究了温度、湿度、刺伤对其发病情况的影响。结果表明,杧果炭疽菌在条件适宜情况下,可在3h内萌发并侵入寄主组织;伤口可促进杧果炭疽菌分生孢子的萌发,但不利于附着胞的形成。20~28℃之间,温度越高发病越重;湿度69.2%~85.4%之间,湿度越高发病越重,且伤口可加重杧果炭疽病发生。

关键词：杧果胶孢炭疽菌侵染过程发病条件

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杧果高效栽培与贮藏加工

杧果高效栽培与贮藏加工

杧果中DXS基因的鉴定及与其他植物的比较分析

丛书名：科学种植致富丛书

2001年

作者：邱栋梁

本书介绍了芒果的生物学特性，苗木繁育，芒果园的建立，营养与施肥，树体管理，病虫害防治，以及采收、贮藏保鲜与加工等内容。

ISBN: (纸本)7533518578

本书介绍了芒果的生物学特性，苗木繁育，芒果园的建立，营养与施肥，树体管理，病虫害防治，以及采收、贮藏保鲜与加工等内容。

关键词：杧果水果加工芒果果树园艺果贮藏

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汇雅图书（南通市图书馆）

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分子植物育种 2019年第1期17卷 46-54页

作者：盖江涛王鹏叶秀旭白蓓蓓陈业渊党志国中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所儋州571737

1-脱氧-D-核酮糖5-磷酸合成酶(1-deoxy-D-xylulose-5-phosphate synthase, DXS)是2-C-甲基-D-赤藓糖醇-4-磷酸(2-C-Methyl-D-erythritol-4-phosphate, MEP)途径的第一个关键酶。本研究鉴定了杧果DXS基因,以拟南芥DXS基因为参考,通过BLASTP方法获得了番木瓜、金钱橘、甜橙、苹果、桃子、白梨、葡萄、中华猕猴桃、无油樟、小果野蕉的DXS基因的蛋白序列,共32条序列,对其进行了保守结构域、保守基序、系统发育、理化性质、蛋白二级结构分析等研究。保守结构域及保守基序分析结果表明,杧果DXS蛋白包含一个PLN02582结构域,保守结构域内包含6个motif,其宽度、排列顺序与大多数植物相同,说明DXS基因家族具有高度保守性。系统发育分析结果显示,单子叶植物纲与双子叶植物纲的DXS基因没有分别形成分支,推测在进化过程中DXS基因的分化在双子叶植物纲和单子叶植物纲形成之后。理化性质分析及蛋白二级结构分析结果显示,稳定性蛋白占65.63%,碱性蛋白占25%,所有蛋白均为亲水性蛋白。杧果DXS蛋白为酸性、不稳定蛋白,具有亲水性。杧果DXS蛋白的二级结构主要结构元件是无规则卷曲、α-螺旋。本研究为进一步阐明杧果DXS基因在萜类合成途径中的功能提供了理论依据。

关键词：杧果 1-脱氧-D-核酮糖 5-磷酸合成酶(DXS) MEP 途径萜类

杧果炭疽菌（Colletotrichum asianum）SLT2基因沉默、丁香精油抑菌机理及对杧果采后品质影响

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杧果炭疽菌（Colletotrichum asianum）SLT2基因沉默、丁香精油抑...

作者：李俊国海南大学

学位级别：硕士

杧果(Mangifera indica L.)为多年生的常绿乔木,是一种经济效益高的热带果树。果实中的营养成分极其丰富,具有极高的营养价值与保健功能,赢得大众的喜爱。杧果炭疽病是杧果采后常发性病害,病原菌在杧果后熟过程中,活跃而迅速发病,导致... 详细信息

杧果(Mangifera indica L.)为多年生的常绿乔木,是一种经济效益高的热带果树。果实中的营养成分极其丰富,具有极高的营养价值与保健功能,赢得大众的喜爱。杧果炭疽病是杧果采后常发性病害,病原菌在杧果后熟过程中,活跃而迅速发病,导致果实腐烂,影响果实品质。真菌MAPK通路的SLT2-MAPK具有调控真菌的菌丝生长、孢子形成和致病力等功能。丁香精油具有安全、无毒、环境友好、无残留以及广谱抑菌等优点,被应用于食品、化妆品和果蔬采后保鲜中。本试验从以下几个方面进行研究:杧果炭疽病原菌鉴定;植物精油对杧果炭疽菌的抑菌活性;丁香精油对芒果炭疽病菌的抑菌机理及芒果采后品质影响的研究。以期为今后开展植物精油对杧果炭疽病防治提供参考依据。主要研究结果如下:1.通过对病原菌的分离、致病力测定,结合形态学特点及分子生物学鉴定,引起杧果叶片炭疽病的炭疽菌主要为亚洲炭疽菌(Colletotrichum asianum),该菌株是广西杧果炭疽病原菌中的优势菌株。2.本试验为了验证SLT2对亚洲炭疽菌(***)的生物学功能。以茶炭疽菌的基因组DNA为模板,设计引物,完成双启动子的目的基因扩增与回收,经过酶切、连接,构建完成p CAMBIA1303-CTJ-RNAi载体骨架。3.通过提取亚洲炭疽菌(***)的基因组DNA,分析相关序列,设计引物,完成目的基因SLT2片段的扩增与回收;经过双酶切、连接,SLT2片段的扩增产物与p CAMBIA1303-CTJ-RNAi载体骨架重组,将重组产物进行PCR验证,测序,比对序列后获得能稳定生长的亚洲炭疽菌(***)的SLT2 RNAi阳性转化子。4.将获得的亚洲炭疽菌(***)SLT2 RNAi阳性转化子与野生型进行表型测定比较,PDA培养基上培养7 d,野生型BS8-1和沉默菌株(?)BS8-1的菌落直径分别为7.8 cm、5.67 cm;果实致病力测定发现,野生型BS8-1和沉默菌株(?)BS8-1对金煌杧和贵妃杧侵染5 d后的病斑直径分别为1.57 cm、0.92 cm和0.49 cm、0.17 cm;叶片致病力测定发现,野生型BS8-1和沉默菌株(?)BS8-1侵染5 d后的病斑直径分别为1.77 cm和0.42 cm;产孢量和菌丝干重测定发现,沉默菌株(?)BS8-1的产孢量和菌丝干重都低于野生型BS8-1。结果初步说明了SLT2基因沉默在一定程度上降低了亚洲炭疽菌(***)的生长发育和对果实与叶片的致病能力。5.通过室内毒力测定试验,丁香精油对亚洲炭疽菌(***)菌落抑制效果最好,EC值为0.19μL/m L,其次是肉桂精油,EC为0.33μL/m L;茶树精油、香茅精油和樟脑精油的EC值在0.7-1.0μL/m L之间,抑菌效果相对较弱;玫瑰草油、橄榄精油、草果精油、山茶花精油和柠檬精油的EC值在1.0μL/m L以上,抑制效果最差。6.不同浓度的丁香精油处理亚洲炭疽菌(***)后,亚洲炭疽菌(***)的菌丝生长速率、菌丝干重、产孢子量和孢子萌发皆受到影响,0.2、0.5、1.0、2.0和4.0μL/m L丁香精油处理后,菌丝生长的抑制率分别为5.05%、13.64%、24.49%、51.77%和88.89%;并且显著抑制了菌丝干重的增加、产孢量与孢子萌发;扫描电镜观察发现,丁香精油处理后,***的菌丝扭曲、表面褶皱、菌丝末端出现皱缩和堆叠等现象。7.不同浓度的丁香精油处理亚洲炭疽菌(***)后,菌丝的细胞壁和细胞膜受到伤害,出现破损,完整性降低,透性增加,导致可溶性蛋白和可溶性还原糖外泄、细胞外渗率增加。8.2.0μL/mL丁香精油处理贵妃杧,能有效抑制果实中可滴定酸(TA)和维生素C(VC)含量的下降和果实的失重,同时维持了果实的硬度和提高了可溶性固形物(TSS)含量;贮藏12 d后,对果实的自然发病效果维持在52.63%,说明2.0μL/m L丁香精油处理,可有效抑制炭疽病害直径扩展,并且有效延缓了采后贵妃杧衰老与品质劣变的速度,使贵妃杧的货架期得到延长。

关键词：杧果基因沉默丁香精油杧果炭疽菌抑菌机理采后保鲜

杧果炭疽病菌内切葡聚糖酶基因CgEg1B克隆与敲除载体构建

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中国南方果树 2017年第1期46卷 5-10页

作者：张恺莉蒲金基张贺周芳雪杨永利刘娅楠刘晓妹海南大学环境与植物保护学院/海南大学热带作物种质资源保护与开发利用教育部重点实验室海口570228 中国热带农业科学院环境与植物保护研究所/农业部热带作物有害生物综合治理重点实验室海口571101

为了明确内切葡聚糖酶CgEg1B与杧果炭疽病菌Colletotrichum gloeosporioides致病力的关系,本试验以杧果炭疽病菌DNA为模板,利用同源克隆技术扩增CgEg1B,对其序列特征、蛋白保守结构域进行分析,并借助In-Fusion HD Cloning Kit技术进行... 详细信息

为了明确内切葡聚糖酶CgEg1B与杧果炭疽病菌Colletotrichum gloeosporioides致病力的关系,本试验以杧果炭疽病菌DNA为模板,利用同源克隆技术扩增CgEg1B,对其序列特征、蛋白保守结构域进行分析,并借助In-Fusion HD Cloning Kit技术进行敲除载体构建。结果表明,该基因DNA和cDNA全长分别为1 077bp、1 020bp,编码区有内含子(57bp)1个,推测编码339个氨基酸,其分子量约为37.13kDa,等电点PI为5.11。与NCBI网站中已公布的基因进行Blastp比对,发现该序列与鳄梨炭疽菌***(EQB54542.1)的内切葡聚糖酶基因相似性为99%;该基因的敲除载体pCgEg1BGH-1构建成功。CgEg1B基因具备真菌内切葡聚糖酶基因家族的序列特征,推测CgEg1B基因可能与杧果炭疽病菌的侵入、定殖和致病性有关。

关键词：杧果胶孢炭疽菌内切葡聚糖酶CgEg1B基因克隆敲除载体

杧果PEPC基因家族全基因组鉴定及表达分析

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中国南方果树 2021年第6期50卷 37-46页

作者：彭文丽刘照宇李晓波杨成坤海南省农垦科学院海口570311 海南大学园艺学院/热带作物新品种选育教育部工程研究中心海口570228

PEPC家族蛋白在植物光合碳同化过程中具有重要作用,同时具有多种非光合生物学功能,目前杧果中鲜见报道。本研究对杧果MiPEPCs进行了全基因组鉴定,并分析了它们在不同组织(成熟叶片、成熟树皮、种子、根、花、果肉和果皮)和两个品种(高... 详细信息

PEPC家族蛋白在植物光合碳同化过程中具有重要作用,同时具有多种非光合生物学功能,目前杧果中鲜见报道。本研究对杧果MiPEPCs进行了全基因组鉴定,并分析了它们在不同组织(成熟叶片、成熟树皮、种子、根、花、果肉和果皮)和两个品种(高糖品种台农一号杧和低糖品种热农1号杧)中的表达情况。结果表明,杧果MiPEPC基因家族成员4个,其理化特征较为相似,且所有MiPEPCs蛋白亚细胞定位预测均为细胞质。基因组定位发现杧果MiPEPCs分布于4条不同的染色体。联合拟南芥,水稻,菠萝的PEPCs蛋白进行系统进化分析显示可分为2个亚组,MiPEPCs分布在第I(PTPC)和II亚族(BTPC)。杧果植物型MiPEPCs和细菌型MiPEPCs分离时间早于单子叶植物和双子叶植物的分离时间,两者蛋白序列差异大,但仍具有一定的保守性。顺式作用元件分析显示,MiPEPCs含有数量较多的光响应元件和激素响应元件。转录组表达分析结合qPCR试验验证发现,MiPEPCs在不同杧果组织中的表达具有偏好性,可能参与杧果的多个生物学过程(包含光合和非光合过程),初步推测MiPEPC1、MiPEPC3可能参与杧果果实成熟过程,为进一步探究MiPEPC家族在杧果中的生物学功能奠定了基础。

关键词：杧果 PEPC基因家族果实发育表达分析蛋白序列

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杧果内生真菌分离鉴定及多样性分析

果树学报 2013年第6期30卷 1030-1039页

作者：吴婧波詹儒林柳凤李国平赵艳龙常金梅海南大学环境与植物保护学院海南海口570228 中国热带农业科学院南亚热带作物研究所广东湛江524091

【目的】为了解杧果内生真菌的群落组成、物种多样性及分布规律,【方法】采用形态学和ITS-rDNA序列分析相结合的方法对‘凯特’等4个杧果品种的内生真菌进行了分类鉴定,并以内生真菌的分离率(IR)、定殖率(CR)、相对频率(RF)、多样性指数... 详细信息

【目的】为了解杧果内生真菌的群落组成、物种多样性及分布规律,【方法】采用形态学和ITS-rDNA序列分析相结合的方法对‘凯特’等4个杧果品种的内生真菌进行了分类鉴定,并以内生真菌的分离率(IR)、定殖率(CR)、相对频率(RF)、多样性指数(H')及相似性系数(Cs)为指标衡量试验结果。【结果】从480块新鲜杧果组织中分离得到53株内生真菌,经鉴定为16个分类单元,其中14个属于子囊菌(Ascomycota),2个属于担子菌(Basidiomycota)。胶孢炭疽菌(Colletotrichum gloeosporioides)、杧果球座菌(Guignardia mangiferae)、葡萄座腔菌(Botryosphaeria dothidea)为杧果的优势种,相对频率分别为20.75%、18.87%和18.87%。【结论】杧果内生真菌种类丰富,且具有品种和组织差异性。

关键词：杧果内生真菌分离鉴定多样性

杧果GeBP转录因子家族基因的鉴定及表达分析

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经济林研究 2021年第4期39卷 137-147页

作者：孙瑞青杨楠刘志鑫夏煜琪孙宇高庆远蒲金基党志国张贺海南大学热带作物学院海南海口570228 中国热带农业科学院环境与植物保护研究所海南海口571101 中国热带农业科学院农业农村部热带作物有害生物综合治理重点实验室海南海口571101 中国热带农业科学院热带生物技术研究所海南海口571101 中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所海南海口571101

【目的】探究杧果Mangifera indica GeBP基因家族成员的分子特征和表达模式,为杧果GeBP家族作用与功能的研究奠定基础,并为杧果种质资源的抗病性鉴定提供参考依据。【方法】采用生物信息学的方法,对杧果GeBP基因家族成员的理化性质、蛋... 详细信息

【目的】探究杧果Mangifera indica GeBP基因家族成员的分子特征和表达模式,为杧果GeBP家族作用与功能的研究奠定基础,并为杧果种质资源的抗病性鉴定提供参考依据。【方法】采用生物信息学的方法,对杧果GeBP基因家族成员的理化性质、蛋白质二级结构、保守结构域、蛋白质三级结构及其与拟南芥Arabidopsis thaliana、番茄Lycopersicon esculentum和水稻Oryza sativa的系统进化关系进行分析,并利用qRT-PCR的方法检测杧果GeBP家族成员在叶、盛花、果等不同发育时期的相对表达量,以及杧果叶片被细菌性黑斑病菌Xanthomonas campestris ***和胶孢炭疽菌Colletotrichum gloeosporioides侵染时GeBP基因家族成员的转录水平。【结果】在杧果基因组中鉴定出10个杧果GeBP基因家族成员,依次命名为MiGeBP1、MiGeBP2、MiGeBP3……MiGeBP10;检测发现,杧果GeBP基因家族蛋白均为不稳定亲水蛋白;其蛋白质二级结构中,无规则卷曲和α-螺旋为其结构组成的主要元件;通过构建系统进化树分析可知,杧果、拟南芥、番茄、水稻这4个物种的57个氨基酸序列可分为5个分支,其中杧果GeBP基因家族的10个成员分属于4个分支中,MiGeBP3与MiGeBP4、MiGeB8和MiGeBP9的亲缘关系最近;利用qRT-PCR方法对其组织特异性表达的分析结果表明,杧果GeBP基因家族成员在不同组织中的表达存在差异性;杧果叶片在被细菌性黑斑病和胶孢炭疽菌侵染时,MiGeBPs对病原菌的侵染作出了不同程度的响应,不同的基因家族成员对病原细菌、病原真菌的响应程度不同。【结论】在杧果中鉴定到MiGeBP转录因子家族的10个成员,其与双子叶植物的亲源关系均较近,而与单子叶植物的亲源关系均较远,其中MiGeBP3和MiGeBP4、MiGeB8、MiGeBP9的亲缘关系都较近。该基因家族成员在病原菌的侵染过程中作出了不同程度的响应:经细菌性黑斑病菌侵染后,基因MiGeBP8在侵染处理后的各个检测时间点均显著表达,但仅在侵染处理后6 h时呈上调表达,而在其他检测时间点均呈下调表达;基因MiGeBP9仅在侵染处理后24 h时呈下调表达,而在其他检测时间点均呈上调表达。经胶孢炭疽菌侵染后,MiGeBP5与MiGeBP6基因在侵染处理后0~72 h的检测时段内均显著上调表达。由此推测,GeBP基因家族成员不同程度地参与了杧果的免疫反应。

关键词：杧果 GeBP转录因子分子特征表达分析

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杧果果实后熟过程中PME基因家族的鉴定与表达分析

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分子植物育种 2023年第10期21卷 3180-3190页

作者：雷亚欣黄小镂丛汉卿罗海燕乔飞姜成东海南大学园艺学院海口570208 中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所海口571101

为探明影响杧果(Mangifera indica L.)软化的机理、研究果胶甲酯酶(pectin methylesterase,PME)基因家族在杧果果肉中的功能,本研究对‘红象牙’杧果软化期间果实硬度、可溶性固形物含量、微管结构、PME酶活和PME家族表达量进行测定,并... 详细信息

为探明影响杧果(Mangifera indica L.)软化的机理、研究果胶甲酯酶(pectin methylesterase,PME)基因家族在杧果果肉中的功能,本研究对‘红象牙’杧果软化期间果实硬度、可溶性固形物含量、微管结构、PME酶活和PME家族表达量进行测定,并对PME基因家族进行生物信息学分析。结果表明,杧果后熟软化过程中伴随着微管骨架的解聚、果实硬度的下降、可溶性固形物含量的升高以及PME活性的降低。在‘红象牙’杧果基因组中共筛选出51个PME基因,Ⅰ型PME(包含PME和PMEI结构域)基因有24个,Ⅱ型PME(仅含PME结构域)基因有27个。51个PME基因中有22个在后熟期表达,参与果实软化。同时,发现mango030191和mango030421两个基因在后熟期内高表达,可能在抑制果胶降解,抑制果实软化中发挥重要作用。Ⅰ型和Ⅱ型PME基因在系统发育树中占据不同分支,第1~2分支都是Ⅰ型PME基因,第3分支都是Ⅱ型PME基因。Ⅰ型和Ⅱ型PME基因拥有各自的基序、保守结构域、内含子外显子特征。本研究鉴定并提供了杧果PME基因家族成员的基本信息,为阐明杧果后熟过程中PME基因的功能提供理论依据。

关键词：杧果果胶甲酯酶果实软化基因家族鉴定