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香蕉束顶病毒NSP株系DNA组分5的克隆和序列分析

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植物病理学报 2005年第4期35卷 289-292页

作者：郑耘李华平肖火根范怀忠华南农业大学植物病毒研究室广州510642

本文利用PCR技术扩增得到香蕉束顶病毒(BBTV)NSP株系DNA组分5的全基因,该基因全长为1 013 nt,具有一个开放阅读框,编码161个氨基酸.NSP株系与南太平洋组澳大利亚、夏威夷、埃及分离物DNA组分5核苷酸和编码的氨基酸序列相比较,核苷酸序... 详细信息

本文利用PCR技术扩增得到香蕉束顶病毒(BBTV)NSP株系DNA组分5的全基因,该基因全长为1 013 nt,具有一个开放阅读框,编码161个氨基酸.NSP株系与南太平洋组澳大利亚、夏威夷、埃及分离物DNA组分5核苷酸和编码的氨基酸序列相比较,核苷酸序列同源率介于88%～89%之间,氨基酸序列同源率介于76%～79%之间,借助进化树分析和生物信息学研究方法,发现NSP株系组分5同样含有保守的与植物体内Rb蛋白结合的、能够调节寄主体内DNA复制相关蛋白积累的功能基序--LYCDE;并预测了蛋白质二级结构和性质.

关键词：香蕉束顶病毒 DNA-5组分序列分析

香蕉束顶病毒NS株系DNA组分6的克隆及序列分析

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华南农业大学学报 2001年第3期22卷 33-36页

作者：何自福肖火根李华平范怀忠华南农业大学植物病毒研究室广东广州510642

通过常规的基因克隆技术 ,对香蕉束顶病毒NS株系代表分离物的DNA组分 6进行了克隆和序列分析 ,并将该分离物这个组分的序列与先前报道的广州天河分离物 (属NSP株系 )的该组分序列进行比较 ,结果表明 :该组分全序列、ORF及其编码的氨基... 详细信息

通过常规的基因克隆技术 ,对香蕉束顶病毒NS株系代表分离物的DNA组分 6进行了克隆和序列分析 ,并将该分离物这个组分的序列与先前报道的广州天河分离物 (属NSP株系 )的该组分序列进行比较 ,结果表明 :该组分全序列、ORF及其编码的氨基酸序列在 2个分离物间的变异率分别为 3 4%、1 7%和 2 6 % .表明该组分在 2个株系代表分离物间存在较显著差异 ,从而进一步支持了广东BBTV存在 2个株系的结论 .此外 ,NS株系代表分离物DNA组分 6的全序列、ORF及其编码的氨基酸序列与澳大利亚分离物的变异率分别为 14.4%、7.5 %和 7.1% .

关键词：香蕉束顶病毒 NS株系基因克隆序列分析 DNA组分

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香蕉束顶病毒PCR检测技术研究

华南农业大学学报 1999年第1期20卷 5-8页

作者：肖火根胡晋生华南农业大学植物病毒研究室美国夏威夷大学植物病理系

建立了聚合酶链式反应（ＰＣＲ）扩增技术检测香蕉组织和单头蚜虫内的香蕉束顶病毒（ＢＢＴＶ），并报道了ＢＢＴＶ免疫捕捉ＰＣＲ（ＩＣ－ＰＣＲ）和直接结合ＰＣＲ（ＤＢ－ＰＣＲ）检测方法ＩＣ－ＰＣＲ和ＤＢ－ＰＣＲ分别能从４μ... 详细信息

建立了聚合酶链式反应（ＰＣＲ）扩增技术检测香蕉组织和单头蚜虫内的香蕉束顶病毒（ＢＢＴＶ），并报道了ＢＢＴＶ免疫捕捉ＰＣＲ（ＩＣ－ＰＣＲ）和直接结合ＰＣＲ（ＤＢ－ＰＣＲ）检测方法ＩＣ－ＰＣＲ和ＤＢ－ＰＣＲ分别能从４μｇ和０．

关键词：香蕉束顶病毒免疫捕捉PCR 直接结合PCR

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香蕉束顶病毒的提纯和血清学研究

热带作物学报 1996年第2期17卷 42-46页

作者：徐平东张广志周仲驹李梅沈春奇庄西卿林奇英谢联辉厦门华侨亚热带植物引种园国家植物引种隔离检疫基地福建农业大学植物病毒研究所福建省热带作物科学研究所

以香蕉交脉蚜（Ｐｅｎｔａｌｏｎｉａｎｉｇｒｏｎｃｒｖｏｓａ）人工接种表现典型束顶病症状的香蕉组培苗为材料，预预先经氯仿－正丁醇充分乳化的缓冲液抽提和澄清、差速离心、蔗糖垫部分纯化、蔗糖梯度离心，得到粒体完整的直径约１... 详细信息

以香蕉交脉蚜（Ｐｅｎｔａｌｏｎｉａｎｉｇｒｏｎｃｒｖｏｓａ）人工接种表现典型束顶病症状的香蕉组培苗为材料，预预先经氯仿－正丁醇充分乳化的缓冲液抽提和澄清、差速离心、蔗糖垫部分纯化、蔗糖梯度离心，得到粒体完整的直径约１８－２０ｎｍ的球状病毒。提纯的病毒制剂具典型的核蛋白紫外吸收光谱，最高吸收峰在２５７ｎｍ左右，最低吸收峰在２４０ｎｍ左右，Ａ２６０／２８０＝１．３，提纯产量最高可达３．４ｍｇ／ｋｇ组织。用上述提纯病毒作为抗原免疫家兔制备的抗血清，经对流免疫电泳方法测定效价为１：３２。用该抗血清建立的Ａ蛋白夹心ＥＬＩＳＡ（ＤＡＳ－ＥＬＩＳＡ）及与单克隆抗体结合使用的异种抗体双夹心ＥＬＩＳＡ（ＤＡＳ－ＥＬＩＳＡ）能检测各种香蕉束顶病样品。

关键词：香蕉束顶病毒提纯血清学

香蕉试管苗的束顶病毒批量快速检验程序的建立

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广西热作科技 1997年第2期 36-38页

作者：雷光富朱西儒张海保中国科学院年南植物研究所广州510650

植物抗病毒基因工程与香蕉束顶病毒(BBTV)分子生物学的研究进展

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广西热作科技 1997年第1期 40-41页

作者：朱西儒张海保中国科学院华南植物研究所广州510650

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香蕉束顶病毒的提纯

福建省农科院学报 1993年第2期8卷 1-4页

作者：叶旭东杨辉吴如健陈景耀柯冲福建省农业科学院果树研究所福州350013

应用液氮冷冻香蕉束顶病组织,高速粉碎,氯仿—正丁醇澄清,差速离心,沉淀悬浮后经蔗糖垫部分纯化病毒,收集的蔗糖垫浓缩后经0—40％连续蔗糖梯度离心4小时,在离心管上半部形成一个明显的含有大量等径病毒的紫外吸收峰。再经不连续硫酸铯... 详细信息

应用液氮冷冻香蕉束顶病组织,高速粉碎,氯仿—正丁醇澄清,差速离心,沉淀悬浮后经蔗糖垫部分纯化病毒,收集的蔗糖垫浓缩后经0—40％连续蔗糖梯度离心4小时,在离心管上半部形成一个明显的含有大量等径病毒的紫外吸收峰。再经不连续硫酸铯梯度离心6小时,形成一狭窄的乳白色带,含有高度纯化的直径约18nm的香蕉束顶病毒(BBTV)。用台湾提供的BBTV单克隆抗体,ELISA法可检测到提纯过程中病毒的存在,ISEM法可从粗提物中捕获大量等径病毒。ELISA法也用于检测田间及组织培养原种苗的带毒情况。

关键词：香蕉束顶病毒提纯

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DNA探针诊断和追踪香蕉束顶病毒研究

西南农业学报 1991年第4期4卷 76-79页

作者：赖星华 R.M.Robelt J.L.Dale 广西农科院植保所南宁530007 澳大利亚昆士南理工大学分子生物技术研究中心

本文报导应用DNA探针诊断、追踪香蕉束顶病的分子杂交技术.鉴于该探针具有高度特异性和灵敏度,香蕉束顶病的分子遗传学诊断可作为检疫依据.

关键词：香蕉束顶病毒 DNA探针诊断

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香蕉束顶病毒的电镜观察

云南农业大学学报 1989年第4期4卷 328-329页

作者：蔡祝南张中义王学英北京农业大学植物保护系云南农业大学植物病理研究室

1987年在云南河口县采集束顶病株香蕉,苗期症状为:幼苗病株矮缩,新叶变窄变短,束状丛生,部分病株叶片出现深浅不匀的条纹,严重的叶缘黄化,随后焦枯。假茎自上而下逐步焦枯,解剖假茎有时可见褐色条纹,部分出现烂心。香蕉束顶病发病程度... 详细信息

1987年在云南河口县采集束顶病株香蕉,苗期症状为:幼苗病株矮缩,新叶变窄变短,束状丛生,部分病株叶片出现深浅不匀的条纹,严重的叶缘黄化,随后焦枯。假茎自上而下逐步焦枯,解剖假茎有时可见褐色条纹,部分出现烂心。香蕉束顶病发病程度因品种、地理分布、种植年限及施肥管理水平而有差别。我们采集病叶,进行取材,在戊二醛及锇酸中进行双重固定,水洗后经乙醇梯度脱水,环氧丙烷置换,Epon812包埋,LKB8800超薄切片。切片经醋酸双氧铀-柠檬酸铅双染色,在JEM-100S电镜下观察切片。以健康株为对照。

关键词：香蕉束顶病毒病毒病电镜观察