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杜仲水提物对慢性温和不可预知刺激致郁小鼠海马神经保护作用及机制研究

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杜仲水提物对慢性温和不可预知刺激致郁小鼠海马神经保护作用及机...

作者：李卓妮西北农林科技大学

学位级别：硕士

抑郁症是一种表现为异常感情和情绪、植物性神经功能失调（包括饮食和睡眠障碍）、认知障碍（例如不恰当的愧疚和担忧）和其他异常精神活动的精神疾病。目前,抑郁症的发病率较高、严重影响患者的生活质量,甚至会引致自杀。然而,抑郁症... 详细信息

抑郁症是一种表现为异常感情和情绪、植物性神经功能失调（包括饮食和睡眠障碍）、认知障碍（例如不恰当的愧疚和担忧）和其他异常精神活动的精神疾病。目前,抑郁症的发病率较高、严重影响患者的生活质量,甚至会引致自杀。然而,抑郁症的发病机制并不清楚,存在多种假说,临床中也缺乏行之有效的治疗方法。杜仲具有多种药理成分,且具有一定的神经保护作用及抗炎特性,可能是改善抑郁症的潜在药物。本试验通过构建慢性温和不可预知刺激（Chronic Unpredictable Mild Stress,CUMS）致郁小鼠模型,利用杜仲水提物（Water Extract of Eucommia ulmoides,WEU）对该模型小鼠进行干预,观察其治疗效果并进行机制探究。本试验将2月龄ICR小鼠随机分为2组:对照组（n=15）,CUMS组（n=40）。CUMS组小鼠均接受冰浴、悬尾、夹尾、潮湿垫料、电刺激、强迫游泳、束缚等7种不同的慢性不可预测的温和刺激。建模周期为4周,建模完成后,进行悬尾试验、强迫游泳、旷场试验和高架十字迷宫等行为学测试,筛选出CUMS成功致郁的小鼠模型,并将抑郁样行为小鼠随机分为2组:模型组（CUMS,n=13）和杜仲水提物治疗组（WEU,n=13）。WEU组小鼠给予含3%（w/w）杜仲皮水提取物的维持饲料2周,对照组和CUMS组小鼠给予正常饲料2周,之后对各组小鼠进行行为学检测,并使用免疫荧光染色检测小鼠海马中小胶质细胞数量形态,新生神经元的数量,神经祖细胞的分化;Western blot检测炎症相关通路上蛋白水平的变化;利用16s r RNA高通量测序检测小鼠盲肠中肠道微生物的变化。主要结果如下:1.成功构建了CUMS致郁小鼠模型,模型小鼠在悬尾试验和强迫游泳试验中均表现出更长的绝望不动时间。WEU治疗后,小鼠在悬尾试验和强迫游泳试验中的不动时间均显著减少,表明小鼠的抑郁样行为得到了改善;同时,WEU治疗增加了小鼠在旷场试验的中心区域中活动距离及在高架十字迷宫中开臂的活动距离,表明小鼠的探索欲望增强,焦虑情绪减轻。***显著抑制了CUMS致郁小鼠海马中小胶质细胞的活化,减少小胶质细胞的数量,降低小胶质细胞的复杂程度,且能通过抑制TLR4/NFκBp38/MAPK信号通路激活降低小胶质细胞的激活进而缓解小鼠海马中神经炎症的发生。3.各组小鼠海马中增殖细胞的总数目没有显著影响,但与对照组相比,CUMS组小鼠海马中新生颗粒细胞的数量明显减少,且经WEU治疗后,新生颗粒细胞的数量明显增加。与对照组相比,CUMS显著减少增殖细胞中放射状胶质样神经祖细胞数量,而WEU有挽救这种变化的趋势。***致使小鼠肠道菌群发生紊乱,改变原有肠道微生物结构,而WEU治疗能在一定程度上抑制这种变化,使治疗组小鼠肠道菌群构成更趋近于对照组的肠道微生物构成。以上结论显示杜仲可能是具有潜力的抗抑郁药物,能够减轻抑郁样行为的发生,改善神经炎症,纠正紊乱的肠道菌群,为抑郁症药物开发提供了新思路。

关键词：慢性温和不可预知刺激抑郁症杜仲水提物神经炎症肠道菌群

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杜仲水提物对百草枯神经毒性的保护作用研究

杜仲水提物对百草枯神经毒性的保护作用研究

作者：闫文勇西北农林科技大学

学位级别：硕士

近年来人们对农作物产量以及害虫防治的需求不断增加,农药的使用量也越来越多,但农药、除草剂的使用不当,如过量使用、投毒、误食等,会危害环境生态体系和人们的生命健康。百草枯(paraquat,PQ),学名1-1’-二甲基-4-4’-联吡啶阳离子盐,... 详细信息

近年来人们对农作物产量以及害虫防治的需求不断增加,农药的使用量也越来越多,但农药、除草剂的使用不当,如过量使用、投毒、误食等,会危害环境生态体系和人们的生命健康。百草枯(paraquat,PQ),学名1-1’-二甲基-4-4’-联吡啶阳离子盐,是一种由硫酸二甲酯、金属钠、吡啶反应而成的快速非选择性的除草剂,由于其除草范围广,效果好,被誉为农药之王。但是,百草枯对人和动物是具有毒性的,既可以经口进入人体,也可以经皮肤吸收而引起中毒,常作为自杀药物使用。百草枯进入人体后会迅速扩散到全身,穿过血脑屏障,损害神经系统,造成神经毒性。流行病学研究表明,百草枯长期暴露会增加帕金森病等神经退行性疾病的患病率,在科研上常被用于小鼠帕金森模型的建模。由于百草枯神经中毒机制并不明确,到目前为止,还没有百草枯的特效解毒药,百草枯中毒有非常高的致死率。因此,研究百草枯的神经毒性及治疗方案,具有重要的科学价值和社会意义。杜仲(Eucommia ulmoides,EU)又称木棉、石思仙等,是中国特有的药材,具有补肝肾的功效。杜仲提取物含有多种成分,如绿原酸、木质素、黄酮类和环烯醚萜类等成分,在降血压、降血脂、抗骨质疏松以及抗菌抗病毒等方面也具有很好的疗效。但是,尚不清楚杜仲是否具有治疗百草枯神经毒性的功能。本研究首先建立小鼠百草枯中毒模型,然后对小鼠进行杜仲水提物(water extract of Eucommia ulmoides ***,WEE)灌胃治疗,并通过Morris水迷宫、Masson染色、免疫荧光染色、Brd U标记、蛋白质印迹和激光共聚焦显微镜观察等一系列技术和方法,研究百草枯对小鼠不同脑部区域的神经毒性,以及杜仲水提物对其的保护作用,结果如下:(1)百草枯攻毒后,小鼠的学习记忆能力明显下降,通过服用杜仲水提物可以明显缓解这种由百草枯引起的小鼠认知功能障碍。百草枯攻毒导致小鼠的肺部出现炎症、出血和纤维化等症状,进行杜仲水提物治疗后,染毒小鼠的肺部损伤明显好转,出血、炎症等症状均减轻。(2)百草枯神经毒性模型小鼠中,大脑海马区增殖细胞、中间神经元以及神经胶质细胞数量发生明显改变,通过服用杜仲水提物可以提高海马新生细胞、中间神经元和胶质细胞的数量。(3)百草枯攻毒后,小鼠海马突触相关蛋白,如spinophilin、synaptophysin和PSD95等表达出现异常,服用杜仲水提物后,这些与突触相关的蛋白表达水平趋向正常。(4)百草枯攻毒模型小鼠海马区的炎症和凋亡相关蛋白如NF-κB、ERK、p38和Caspase3等出现表达异常,服用杜仲水提物后,这些异常均得到不同程度的挽救。(5)百草枯攻毒后,对小鼠的脑干和纹状体区域进行研究,结果发现,该区域的多巴胺能神经元和胆碱能神经元收到损伤,神经递质相关蛋白如TH、TPH2、CHAT等均出现表达异常,杜仲水提物治疗后,多巴胺能神经元和胆碱能神经元得到明显的挽救,相关蛋白的含量也得到改善。综上所述,本研究首次发现杜仲水提物对百草枯神经毒性具有治疗作用。

关键词：百草枯杜仲水提物学习记忆海马纹状体

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杜仲水提物对脑梗死大鼠神经细胞凋亡的影响

医学分子生物学杂志 2022年第3期19卷 235-239页

作者：刘忠志蔡诚湖北医药学院附属国药东风总医院神经内科湖北省十堰市442008

目的探索杜仲水提物对脑梗死大鼠神经细胞凋亡的影响。方法将40只大鼠随机分为对照组、模型组、杜仲水提物组和Ravoxertinib组,各10只。HE染色检测大鼠大脑皮质损伤、TUNEL染色检测大鼠大脑皮质细胞凋亡、ELISA法检测氧化应激指标超氧... 详细信息

目的探索杜仲水提物对脑梗死大鼠神经细胞凋亡的影响。方法将40只大鼠随机分为对照组、模型组、杜仲水提物组和Ravoxertinib组,各10只。HE染色检测大鼠大脑皮质损伤、TUNEL染色检测大鼠大脑皮质细胞凋亡、ELISA法检测氧化应激指标超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)水平;Western印迹检测大鼠大脑皮质中ERK1/2信号通路。结果HE染色结果显示,对照组大鼠脑组织无明显病理变化,模型组大鼠脑组织病理损伤显著增加(P杜仲水提物组和Ravoxertinib组大鼠脑组织病理损伤明显减轻(P杜仲水提物组大鼠和Ravoxertinib组大鼠神经细胞凋亡率、Caspase-3和MDA水平、p-ERK1/2/ERK1/2和Bax表达水平明显下降,SOD含量明显上升(P杜仲水提物组大鼠比较,Ravoxertinib组大鼠上述指标无明显差异(P>0.05)。结论杜仲水提物通过调控ERK1/2信号通路,改变大鼠脑组织神经细胞生物学行为,调节氧化应激反应,从而对脑梗死发挥治疗作用。

关键词：脑梗死杜仲水提物神经细胞凋亡

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杜仲水提物对糖尿病大鼠血清和阴茎组织睾酮的影响

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中国性科学 2004年第11期13卷 7-8页

作者：张万宏刘子龙戚玉才董汉生湖北省武汉市皮肤病防治研究所性学科武汉430031 华中科技大学同济医学院计划生育研究所武汉430030 湖北省武汉科盾生殖医学门诊武汉430010

目的:研究杜仲水提物对糖尿病(DM)模型大鼠血清和阴茎组织睾酮(T)水平的影响。方法:采用四氧嘧啶两次给药法建立DM模型;30只DM大鼠随机分为赋形剂组(n=10)、西地那非组(n=10)和杜仲组(n=10)。灌胃4周后,用放射免疫法检测血清和阴茎组织... 详细信息

目的:研究杜仲水提物对糖尿病(DM)模型大鼠血清和阴茎组织睾酮(T)水平的影响。方法:采用四氧嘧啶两次给药法建立DM模型;30只DM大鼠随机分为赋形剂组(n=10)、西地那非组(n=10)和杜仲组(n=10)。灌胃4周后,用放射免疫法检测血清和阴茎组织匀浆液中的睾酮水平;结果:杜仲组血清和阴茎组织睾酮水平显著高于赋形剂组(P杜仲可提高DM大鼠血清和阴茎组织睾酮水平。

关键词：杜仲水提物糖尿病大鼠血清阴茎组织睾酮中医药疗法

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杜仲对链脲佐菌素致糖尿病小鼠降血糖作用

中药药理与临床 2015年第4期31卷 144-146页

作者：苏卓郭诚梧州市中医院梧州543000

目的:研究杜仲对链脲佐菌素(STZ)致糖尿病小鼠血糖的影响及其作用机制。方法:50只小鼠尾静脉注射STZ 120mg/kg,尾静脉注射前禁食12 h。尾静脉注射72 h后检测小鼠的空腹血糖(FBG),FBG≥11.1 mol/L则说明糖尿病小鼠模型造模成功。将成模... 详细信息

目的:研究杜仲对链脲佐菌素(STZ)致糖尿病小鼠血糖的影响及其作用机制。方法:50只小鼠尾静脉注射STZ 120mg/kg,尾静脉注射前禁食12 h。尾静脉注射72 h后检测小鼠的空腹血糖(FBG),FBG≥11.1 mol/L则说明糖尿病小鼠模型造模成功。将成模的小鼠随机分为:模型组、罗格列酮组(4 mg/kg)、杜仲水提物10 g/kg、5 g/kg、2.5 g/kg组,另设10只昆明小鼠为正常组。连续灌胃给药14天,每天1次,正常组和模型组每日灌胃给与等体积的生理盐水。末次给药前禁食12小时,给药1小时后拔眼球取血,离心取血清待测。给药后14天检测小鼠空腹血糖(FBG);对小鼠胰腺组织进行病理学观察;放射免疫测定法测定小鼠血清中空腹胰岛素(FNS)含量,计算胰岛素敏感指数(ISI),试剂盒测定血清中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSHPx)的活性和丙二醛(MDA)的含量;蛋白免疫印迹法测定胰腺组织中含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3(caspase-3)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-7(caspase-7)的蛋白含量。结果:与模型组比较,杜仲水提物10 g/kg给药组的小鼠血糖(12.08±2.65)显著降低,胰岛素敏感指数(15.25±3.58)上升;血清中SOD(255.42±26.26)和GSH-Px(598.24±79.57)活性升高,MDA(9.25±2.86)含量有所下降;胰腺组织中caspase-3、caspase-7的蛋白含量(0.31±0.09,0.42±0.23)下降。结论:杜仲水提物对糖尿病小鼠具有降血糖作用,其作用机制可能与提高小鼠机体内的抗氧化能力,以及降低胰腺中caspase-3、caspase-7的蛋白含量相关。

关键词：杜仲水提物链脲佐菌素糖尿病血糖小鼠

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