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南瓜属EST-SSR标记的开发及在杂种纯度鉴定中的应用

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华北农学报 2011年第6期26卷 97-101页

作者：张国裕张帆姜立纲翟伟卜李海真国家蔬菜工程技术研究中心北京100097

为利用SSR标记进行快速、准确的南瓜杂交种纯度分析,进行了南瓜EST-SSR标记的开发。从NCBI数据库下载1 457条南瓜属作物EST序列,去除冗余序列后进行SSR位点搜索,共得到215条含有SSR位点的EST序列。这些SSR位点包含111种重复基元,其中二... 详细信息

为利用SSR标记进行快速、准确的南瓜杂交种纯度分析,进行了南瓜EST-SSR标记的开发。从NCBI数据库下载1 457条南瓜属作物EST序列,去除冗余序列后进行SSR位点搜索,共得到215条含有SSR位点的EST序列。这些SSR位点包含111种重复基元,其中二核苷酸(62个,占28.84%)和三核苷酸(86个,占40.0%)重复类型占主导地位;重复基元中出现最多的是CT(21个,占9.77%),其次为TC(13个,占6.05%)和AAG(12个,占5.58%)。将215个SSR位点设计成EST-SSR引物后,随机合成了其中的43对引物。利用4份遗传背景差异较大的南瓜自交系对合成的43对引物进行扩增效果评价,其中28对引物有稳定清晰的扩增产物,占合成引物的65.12%。利用这些有效扩增引物对南瓜属作物商品杂交种进行纯度检测,共获得13个杂交组合的特异性检测引物,F1杂交种的纯度在79.2%～100.0%,与田间检测结果相符。结果表明,利用南瓜EST序列开发SSR引物具有简单快速、成本低和适用性好的特点。

关键词：南瓜 EST-SSR 标记开发杂种纯度

甘蓝型三系杂交油菜秋播制种技术研究Ⅱ母本摘苔对杂种纯度和产量影响的研究

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种子 1997年第2期16卷 38-39页

作者：侯燕何惠平朱文秀李厚英贵州省油料科学研究所思南565109 贵州省种子公司贵阳550001

父母本于9月上、中旬育苗移栽，较好的水平管理，抽苔现蕾后，通过连续两次摘苔可延迟开花20天以上，盛花期微粉减少到1．3－1．4级，杂种不育株率下降到8％－15％，制种每公顷可达到900．0～1350．0kg。

关键词：油菜秋播制种摘苔杂种纯度甘蓝型油菜

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利用分子标记技术检测玉米杂种纯度研究

生物技术 2003年第5期13卷 19-21页

作者：赵姝华李玥莹王鹤李冬梅张俊涛辽宁省农科院大连生物技术研究所辽宁大连116024 沈阳师范大学辽宁沈阳110034

以 12份玉米自交系及其组配的 8个杂交种为材料 ,利用分子标记技术进行杂种纯度检测研究。采用RAPD标记方法 ,从 30 0个随机引物中 ,筛选确定了 8个杂交种种子纯度检测引物 ,制定了检测标准标记图谱。建立了海禾 3纯度分析的SCAR标记 ,... 详细信息

以 12份玉米自交系及其组配的 8个杂交种为材料 ,利用分子标记技术进行杂种纯度检测研究。采用RAPD标记方法 ,从 30 0个随机引物中 ,筛选确定了 8个杂交种种子纯度检测引物 ,制定了检测标准标记图谱。建立了海禾 3纯度分析的SCAR标记 ,该SCAR标记与RAPD标记在种子纯度检测上结果完全一致。

关键词：分子标记技术检测玉米杂种纯度

利用SCAR-PCR检测杂交油菜“蜀杂9号”的杂种纯度

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西南农业学报 2006年第1期19卷 32-34页

作者：张帆李江李熠毅李小艳刘璐王茂林赵云四川省种子管理站四川成都610041 四川大学生命科学学院四川成都610064

用两个分别能在“蜀杂9号”父、母本之间稳定产生多态性的随机引物S18和S31,对父、母本DNA样品进行RAPD扩增,将得到的特异标记片段S18750和S31550进行回收、克隆和测序。根据测序结果设计序列特异性扩增(SCAR)引物SZ9SP1和SZ9SP2,将“蜀... 详细信息

用两个分别能在“蜀杂9号”父、母本之间稳定产生多态性的随机引物S18和S31,对父、母本DNA样品进行RAPD扩增,将得到的特异标记片段S18750和S31550进行回收、克隆和测序。根据测序结果设计序列特异性扩增(SCAR)引物SZ9SP1和SZ9SP2,将“蜀杂9号”的亲本RAPD标记转化为序列特异的SCAR标记。当用两对引物分别扩增杂种F1代单株总DNA时,能分别获得父、母本特异序列扩增带,表明获得的SCAR标记能可靠地用于“蜀杂9号”杂种纯度的检测。

关键词：杂交油菜杂种纯度分子标记 RAPD SCAR

甘蓝型油菜细胞质雄性不育系212A恢复基因的分子标记及其杂种纯度鉴定研究

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甘蓝型油菜细胞质雄性不育系212A恢复基因的分子标记及其杂种纯度...

作者：白红涛西北农林科技大学

学位级别：硕士

杂种优势具有强大的增产潜力,被视作增加粮食产量、改善作物品质的重要途径。油菜是杂种优势明显的作物,我国在油菜杂种优势利用方面取得了被国际上认可的成就。通过“三系”法、“两系”法选育出的杂交种已大面积推广种植。其中,培育... 详细信息

杂种优势具有强大的增产潜力,被视作增加粮食产量、改善作物品质的重要途径。油菜是杂种优势明显的作物,我国在油菜杂种优势利用方面取得了被国际上认可的成就。通过“三系”法、“两系”法选育出的杂交种已大面积推广种植。其中,培育优良的恢复系是杂交育种的一项重要工作。杂种优势的体现很大程度上取决于恢复系恢复能力的强弱。与育性恢复基因连锁的分子标记的获得,可以在苗期鉴定恢复株是否含有目的基因,大大缩短了选育时间,加速了育种进程。杂交种在产量和品质方面均优于常规种。杂交种纯度的高低影响其优势的发挥。目前我国生产上用于杂交制种使用的细胞质雄性不育系多数不育性不彻底,低温或高温条件下分化的雄蕊易形成微量花粉,导致自交产生不育的假杂种。因此在油菜杂交种应用于生产之前,有必要对其纯度进行鉴定。本研究所用材料212A、1521C和1102C均是由西北农林科技大学油菜育种课题组自行选育而成,不育系212A与陕2A可能具有相同的恢保关系。以212A与1521C的杂交F2群体构建作图群体,采用集团分析分离法(BSA),利用RAPD、SRAP分子标记技术筛选与育性恢复基因连锁的分子标记。并用SRAP分子标记技术对212A与1102C的子一代杂交种陕油8号纯度进行鉴定,为快速鉴定杂种纯度提供技术依据。主要结果如下: 1通过对212A与1521C的F2群体的田间育性调查发现,144株中可育单株115株,不育单株29株,卡平方测验,符合3:1的分离比,说明212A的育性恢复由一对显性核基因控制。 2从690条10-mer的RAPD引物中筛选到一个与育性恢复基因连锁的一个标记:OPS11-850;270对SRAP引物中筛选到一个与育性恢复基因连锁的标记:M17E13-150。它们位于恢复基因的同一侧,遗传图距分别是:13.1cM和17.3cM。 3将RAPD特异片段OPS11-850回收、克隆和测序。根据测序结果,利用Primer5.0设计6对20-24个碱基的特异引物,特异性扩增后没有呈现原RAPD引物的多态性,说明此标记不能直接转成SCAR标记。 4用196对SRAP引物对杂种陕油8号及其父母本扩增,筛选出5对偏父本的引物组合、2对偏母本引物组合、1对互补引物组合。用互补型引物组合对杂种纯度进行鉴定,结果为88.7%,低于大田鉴定结果91.3%。

关键词：细胞质雄性不育 RAPD SRAP SCAR 杂种纯度

利用SSR分子标记技术鉴定和分析茄子杂种F_1的纯度

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南方农业学报 2015年第9期46卷 1551-1556页

作者：王艳娜王益奎李文嘉蒋雅琴吴永官黎炎康德贤广西大学农学院南宁530005 广西农业科学院蔬菜研究所南宁530007 广西作物遗传改良生物技术重点开放实验室南宁530007 华南农业大学园艺学院广州510642

【目的】分析、鉴定茄子杂种F1纯度,为提高茄子杂交育种效率提供参考依据。【方法】在育苗期,采用SSR分子标记技术对栽培茄×栽培茄正、反杂交种和野生茄×栽培茄杂交种进行纯度鉴定及亲缘关系分析。【结果】从124对SSR引物中筛选出15... 详细信息

【目的】分析、鉴定茄子杂种F1纯度,为提高茄子杂交育种效率提供参考依据。【方法】在育苗期,采用SSR分子标记技术对栽培茄×栽培茄正、反杂交种和野生茄×栽培茄杂交种进行纯度鉴定及亲缘关系分析。【结果】从124对SSR引物中筛选出15对在亲本间存在差异、扩增稳定、条带清晰的引物;从210株杂种F1单株中共鉴定出208株真杂种,杂种纯度为99.0%,鉴定结果与田间性状调查结果一致;栽培茄×栽培茄正、反交组合的F1与亲本的亲缘关系均较近,遗传关系差别微小;野生茄×栽培茄组合的F1与父本的亲缘关系均较远,且表现出偏母本遗传。【结论】SSR分子标记技术能快速、准确鉴定茄子杂交后代的纯度,可作为分子标记辅助育种手段用于指导选择符合茄子育种目标的优良杂交品种选育。

关键词：茄子 SSR分子标记技术杂种纯度鉴定亲缘关系分析

用RAPD标记鉴定甘蓝型油菜杂种H9909的纯度

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华中农业大学学报 2002年第4期21卷 301-305页

作者：段院生刘平武杨光圣华中农业大学作物遗传改良国家重点实验室

通过对杂交组合H990 9两亲本的指纹图谱分析 ,初选出 4个引物S374、S1334、S136 5和UBC5 2 3用于杂种纯度鉴定。引物S1334和UBC5 2 3在两亲本中均扩增出特异带 ,引物S374和S136 5能扩增出父本标记带。以两亲本和手工杂种F1为模板对上述 ... 详细信息

通过对杂交组合H990 9两亲本的指纹图谱分析 ,初选出 4个引物S374、S1334、S136 5和UBC5 2 3用于杂种纯度鉴定。引物S1334和UBC5 2 3在两亲本中均扩增出特异带 ,引物S374和S136 5能扩增出父本标记带。以两亲本和手工杂种F1为模板对上述 4个引物再一次进行RAPD扩增 ,S1334并没有在F1的RAPD图谱产生理想的双亲型或偏父型标记带 ,UBC5 2 3在F1扩增得到的父本标记带和在母本中扩增的标记带大小相近 ,不易辨别 ;引物S374、S136 5均能使F1扩增出父本的特异带 ,进一步确定引物S374和S136 5可用于杂种鉴定。引物S374的RAPD标记将待鉴定 10 0个单株中的 5个不育单株标记为假杂种 ,与田间育性调查的结果完全一致。引物S136 5的RAPD分析结果显示 ,除上述 5个不育单株外 ,另外 2个可育单株亦为假杂种 ,可能由外来花粉串粉或机械混杂引起。

关键词： RAPD标记鉴定甘蓝型油菜杂种 H9909 杂种纯度

冬瓜SSR多态性标记遗传及杂种种子纯度鉴定

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分子植物育种 2021年第13期19卷 4423-4428页

作者：陈婕英刘政国汪春玲陈庆明程志魁马连莲苟纪权广西大学农学院南宁530001

种子纯度鉴定是种子应用于生产前的必经过程,是确保种子质量的关键,开发出一套准确有效、低廉便捷的冬瓜种子纯度鉴定方法能为种子质量提供技术支撑。本研究以‘金圆2号’、‘金圆3号’和‘绿仙子2号’3个冬瓜杂种为试验材料,筛选出2对... 详细信息

种子纯度鉴定是种子应用于生产前的必经过程,是确保种子质量的关键,开发出一套准确有效、低廉便捷的冬瓜种子纯度鉴定方法能为种子质量提供技术支撑。本研究以‘金圆2号’、‘金圆3号’和‘绿仙子2号’3个冬瓜杂种为试验材料,筛选出2对具有共显性的SSR引物XD-18和XD-99用于冬瓜种子纯度鉴定。首先利用冬瓜杂种的F_2代分析这2个标记是否符合孟德尔式分离,若符合孟德尔式分离则再利用这2对引物分别对冬瓜杂种种子进行SSR分子标记纯度鉴定,并与田间种植纯度鉴定进行比较实验,结果显示:这2个标记在F2代群体中均符合1∶2∶1的孟德尔式分离,冬瓜杂种种子SSR分子标记纯度鉴定结果与田间种植纯度鉴定结果高度一致。本研究可为冬瓜乃至作物杂种种子的纯度鉴定提供一套更准确的技术体系。

关键词：冬瓜 SSR标记孟德尔式分离杂种纯度

辣椒雄性不育稳定性对杂种种子纯度影响的研究

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北方园艺 2005年第1期 44-46页

作者：沈火林中国农业大学农学生物技术学院北京100094

通过对以 890 7A为不育源转育中育性的表现和育成的雄性不育系不育的稳定性观察 ,结果表明雄性不育的稳定性强烈地受到辣椒品种 (自交系 )遗传背景的影响 ,稳定不育的材料主要分布在早熟甜椒和牛角形、羊角形辣椒中 ,其他类型辣椒中较... 详细信息

通过对以 890 7A为不育源转育中育性的表现和育成的雄性不育系不育的稳定性观察 ,结果表明雄性不育的稳定性强烈地受到辣椒品种 (自交系 )遗传背景的影响 ,稳定不育的材料主要分布在早熟甜椒和牛角形、羊角形辣椒中 ,其他类型辣椒中较易出现育性不稳定的材料 ;通过 8份不同类型的胞质雄性不育系自然杂交、人工杂交等采的杂种纯度鉴定表明 ,稳定不育的不育系在露地无论是自然杂交还是人工杂交杂种纯度均能保证 10 0 % ,对于育性不稳定的材料 ,结合人工杂交 ,特别是隔离昆虫条件下人工辅助杂交 ,能显著提高杂种纯度。

关键词：辣椒杂种纯度人工杂交雄性不育育性自然杂交种子纯度稳定性观察影响不同类型