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百合（Lilium）杂交特性研究及种子诱变条件筛选

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百合（Lilium）杂交特性研究及种子诱变条件筛选

作者：王美玲山西农业大学

学位级别：硕士

百合(Lilium spp.)花大色艳,在园林造景中别具一格,许多国外引进的新品种在我国北方露地栽植生长不良,因此,选育在我国北方生境下生长良好的百合新品种,对我国百合育种有深远的意义。本研究根据百合叶片下表皮气孔保卫细胞的性状,对100... 详细信息

百合(Lilium spp.)花大色艳,在园林造景中别具一格,许多国外引进的新品种在我国北方露地栽植生长不良,因此,选育在我国北方生境下生长良好的百合新品种,对我国百合育种有深远的意义。本研究根据百合叶片下表皮气孔保卫细胞的性状,对100份材料的倍性进行了鉴定;在此基础上进行了自交和杂交试验,筛选优良的杂交亲本;同时探索山丹种子预处理条件和筛选诱变山丹种子的最佳组合。主要研究结果如下:1.百合叶片气孔保卫细胞的周长和叶绿体数目与倍性成正比,气孔密度与倍性成反比。得出了不同倍性的气孔性状参数范围,并由此鉴定了71份百合品种的倍性。研究发现百合二倍体和三倍体的气孔保卫细胞大小和密度有交集,百合保卫细胞叶绿体密集且重叠,不易计数,故此结论仅可作为参考。2.研究发现10品种/种百合可以自然结实,其种子很大概率是天然杂交种,可以作为育种材料,具有研究价值。以‘Orange Planet’为母本的2个组合收获了有胚种子,可以作为母本材料。3.以种子的半致死率为标准,筛选得出1.7%EMS诱变4h和25m M/L MNU诱变4h为诱变山丹种子的处理方法。

关键词：百合(Lilium spp.) 山丹(Lilium pumilum) 倍性杂交 EMS MNU

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白鲫×红鲫杂交后代的遗传变异

中国科学：生命科学 2015年第6期45卷 371-380页

作者：王静肖军曾鸣徐康陶敏张纯段巍刘文彬罗凯坤刘筠刘少军湖南师范大学生命科学学院教育部蛋白质化学及鱼类发育生物学重点实验室长沙410081

以雌性日本白鲫和雄性红鲫为亲本进行杂交,获得了杂交子代合方鲫.对该杂交子代及其亲本的形态特征、繁殖特性和遗传特性进行了较系统的研究.合方鲫的体色为青灰色,外形特征介于父母本之间,表现出杂交特征.合方鲫性腺发育正常,雌雄两性可... 详细信息

以雌性日本白鲫和雄性红鲫为亲本进行杂交,获得了杂交子代合方鲫.对该杂交子代及其亲本的形态特征、繁殖特性和遗传特性进行了较系统的研究.合方鲫的体色为青灰色,外形特征介于父母本之间,表现出杂交特征.合方鲫性腺发育正常,雌雄两性可育,并且具有较高的受精率(90.2%)和孵化率(80.5%),为新品系的繁衍和群体扩大奠定了基础.合方鲫的染色体数为2n=100,DNA含量与亲本一致,是一种二倍体鱼.合方鲫的45S r DNA的ITS区包括ITS-1,5.8S和ITS-2三部分,总长度为884 bp,与亲本序列相似度较高并表现出偏向于父本遗传的特征.同时,杂交子代序列兼有双亲特异碱基位点,表现出重组现象.合方鲫5S r DNA的NTS区具有3种长度类型,序列全长为654 bp,与母本相似度为94.2%,与父本似度为95.1%,杂交子代序列具有明显的重组和突变特征,这些基因重组和突变是品种改良和新品系形成的遗传基础.本研究证明了合方鲫在遗传组成和外形方面都与其亲本有本质区别,是一种有杂种特性的后代,该杂交品种的形成在鱼类遗传育种方面具有重要意义.

关键词：日本白鲫红鲫杂交遗传变异

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木香薷新种质的杂交法创制与鉴定

木香薷新种质的杂交法创制与鉴定

作者：靳桂华河南科技学院

学位级别：硕士

以木香薷8个株系(代号分别为BJ-B、BJ-Z、DT-18、DT-24、ZH-8、ZH-11、J-EC和GQ-Z)和荆芥、鼠尾草为材料,分别于2021年和2022年在学校芳香植物研发中心采用杂交法(近缘杂交和远缘杂交)创制适合精油提取型和耐涝型的木香薷新种质,并从形... 详细信息

以木香薷8个株系(代号分别为BJ-B、BJ-Z、DT-18、DT-24、ZH-8、ZH-11、J-EC和GQ-Z)和荆芥、鼠尾草为材料,分别于2021年和2022年在学校芳香植物研发中心采用杂交法(近缘杂交和远缘杂交)创制适合精油提取型和耐涝型的木香薷新种质,并从形态学和分子生物学方面对其杂种后代进行鉴定,主要研究结果如下:(1)为创制适合精油提取型木香薷新种质,以“腺毛密度+花器官形态+花粉特性”为标准,从8个亲本中筛选出适合做父本的种质5个(BJ-B、GQ-Z、DT-24、ZH-11和GQ-Z);以“腺毛密度+花器官形态+柱头可授性”为标准,筛选出适合做母本的种质6个(DT-18、DT-24、ZH-8、ZH-11、J-EC和GQ-Z)。为创制耐涝型木香薷新种质,以“气孔密度+花器官形态+花粉特性”为标准,从8个亲本中筛选出适合做父本的种质4个(BJ-B、GQ-Z、DT-24、和GQ-Z);以“气孔密度+花器官形态+柱头可授性”为标准,筛选出适合做母本的种质5个(DT-18、DT-24、ZH-8、J-EC和GQ-Z)。(2)2021年和2022年共配制近缘杂交组合44个,远缘杂交组合8个。2021年19个组合的近缘杂交,共授粉555朵小花,其中3个组合收获到15粒种子,平均结实率为17.00%;5个组合的远缘杂交,共授粉199朵小花,结实率均为0;杂交后代的出苗率及成苗率由高到低的组合依次为:DT-18×GQ-Z>GQ-Z×BJ-B>ZH-8×GQ-Z;3个组合中仅DT-18×GQ-Z获得1个F1代单株。2022年25个组合的近缘杂交,共授粉1277朵小花,其中9个组合收获到181粒种子,平均结实率为18.77%,3个组合的远缘杂交,共授粉113朵小花,结实率仍为0;杂交后代的出苗率由高到低的组合依次为:BJ-Z×DT-18>DT-18×BJ-Z>GQ-Z×ZH-8=BJ-B×GQ-Z>J-EC×DT-24>DT-24×ZH-11、BJ-B×BJ-Z>J-EC×BJ-B>BJ-Z×GQ-Z;成苗率达100%的组合有5个,即J-EC×BJ-B、BJ-B×BJ-Z、BJ-B×GQ-Z、J-EC×DT-24、DT-24×ZH-11,最终共获得8个组合的110个F1代单株。根据两年的杂交结实率、出苗率及成苗率,最终选定亲和性较好的2个杂交组合,即DT-18×BJ-Z和GQ-Z×ZH-8,结实率分别为40.00%和40.63%。(3)基于196粒杂交F1种子的种皮微形态特征和111株杂交F1代单株的表型特征鉴定发现,7个组合的29个单株与父本相似,初步定为疑似杂种单株。基于111株F1代单株的腺毛密度和气孔密度鉴定发现,3株为腺毛密度和气孔密度均高于双亲的单株,分属2个组合;37株为超亲(超单亲或超双亲)的高腺毛密度单株,分属6个组合;67株为气孔密度超亲的单株,分属8个组合。基于2个组合(DT-18×GQ-Z和J-EC×BJ-B)的9个F1代单株的分子生物学鉴定发现,有8株同时具有父母本的特异性条带,确定为真杂种,其中编号“16-26”单株的腺毛密度和气孔密度均高于父母本,为兼备精油提取和耐涝型的木香薷新种质。

关键词：木香薷新种质创制杂交杂种鉴定

(?)属（Hemiculter）两个同域分布种自然杂交及基因渐渗研究

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(?)属（Hemiculter）两个同域分布种自然杂交及基因渐渗研究

作者：冯磊磊西北农林科技大学

学位级别：硕士

自然杂交在动植物类群中是一种普遍的现象,特别是当两个密切相关的物种同域分布且生殖隔离不完全。如果杂交后代可育并能与亲本产生持续回交则容易形成渐渗杂交。渐渗杂交促进物种形成及适应性渐渗,也能导致物种灭绝,降低物种多样性。此... 详细信息

自然杂交在动植物类群中是一种普遍的现象,特别是当两个密切相关的物种同域分布且生殖隔离不完全。如果杂交后代可育并能与亲本产生持续回交则容易形成渐渗杂交。渐渗杂交促进物种形成及适应性渐渗,也能导致物种灭绝,降低物种多样性。此外,渐渗杂交影响系统发育关系的准确构建,从而混淆物种准确鉴别。因此,在分类学方面,探究渐渗杂交对物种界限和现行分类学标准的影响至关重要。张氏(?)(Hemiculter tchangi)和(?)(H.leucisculus)为(?)属小型鱼类,具有相似的生活史和形态特征。研究表明,张氏(?)和(?)在长江上游地区分布区重叠,这为种间发生自然杂交和基因渐渗提供了机会。然而,目前关于张氏(?)和(?)是否存在自然杂交鲜有报道。因此,本文以同域近缘物种张氏(?)和(?)为研究对象,联合线粒体cytb基因、三个核基因(rho、rag2和myh6)标记和形态特征探究了种内及种间的遗传结构、系统发育关系、种群历史和基因渐渗,比较了杂种后代与纯种的形态差异并探讨发生机制及其进化意义。主要研究结果和结论如下:张氏(?)和(?)群体遗传多样性均较高,呈现高单倍型多样性和低核苷酸多样性模式且从上游至下游遗传多样性逐渐增加。线粒体单倍型网络图和系统发育进化关系显示张氏(?)和(?)为两个高度分化的物种,最近共同祖先距今大约2.97Mya。中性检验和贝叶斯天际线结果支持(?)可能发生了历史的种群扩张,而张氏(?)群体可能经历了近期的突然种群收缩,从而导致物种丰度差异。系统发育关系显示42个个体形态与其所属线粒体类型不匹配,显示出张氏(?)和(?)种间存在广泛的线粒体单倍型共享。同域物种间配对Fst略小于异域种群及张氏(?)和(?)存在的近期基因交流,均表明张氏(?)和(?)发生了线粒体的双向渐渗。STRUCTURE分析发现了61个核基因组混杂和22个线-核不一致个体,其中大部分个体被New Hybrids判别为F2代或与(?)的回交后代,揭示了张氏(?)和(?)发生种间核基因双向渐渗。遗传数据表明渐渗杂交的强度因地理位置而异,表现为杂种数量从上游到下游逐渐增加,且杂交可能是物种丰度差异导致的。(?)和张氏(?)在形态上分化良好,利用形态学指标能够准确地区分,其杂交后代未呈现亲本物种的中间形态而偏向于(?)的形态。由于渐渗杂交发生,形态判别分析不能准确区分杂种和纯种,(?)和张氏(?)存在形态判别和遗传指派结果不一致。此外,杂种后代的年龄结构和适合度与纯种无明显差异。综上所述,本研究揭示了张氏(?)和(?)正在进行的种间渐渗杂交现象,但面对持续的基因流,遗传数据显示(?)和张氏(?)仍高度分化且在形态上分化良好,物种界限得以维持。由于渐渗杂交发生,形态判别分析很难区分杂种和纯种,杂交个体更偏向于(?)的形态特征,同时(?)和张氏(?)存在形态判别和遗传指派结果不匹配。本研究为(?)属物种间的渐渗杂交提供了案例证明,另一方面将有助于理解种间基因流动在物种边界维持中的作用,并为更好地理解同域近缘物种相互作用和制定未来物种保护的及时策略提供见解。

关键词：杂交双向渐渗形态物种界限杂种个体

马骝罗汉鱼、古典罗汉鱼及其杂交F1遗传差异分析

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马骝罗汉鱼、古典罗汉鱼及其杂交F1遗传差异分析

作者：彭其林上海海洋大学

学位级别：硕士

罗汉鱼(Cichlasoma spp)又名彩鲷、花罗汉等,起源于马来西亚,是通过杂交育种集合多个种类南美慈鲷科鱼的优良性状培育的一种全新观赏鱼鱼种。罗汉鱼的杂交选育一直为一个高度商业机密,较少见到罗汉鱼杂交选育相关的研究报道。为了进一... 详细信息

罗汉鱼(Cichlasoma spp)又名彩鲷、花罗汉等,起源于马来西亚,是通过杂交育种集合多个种类南美慈鲷科鱼的优良性状培育的一种全新观赏鱼鱼种。罗汉鱼的杂交选育一直为一个高度商业机密,较少见到罗汉鱼杂交选育相关的研究报道。为了进一步的了解罗汉鱼杂交选育下杂交子代在形态学上与亲本的遗传关系,本研究通过对马骝罗汉、古典罗汉及其杂交F(古典♀×马骝♂)在表观形态学和内在酶活变化以及分子遗传三个方面展开相关研究。表观形态学研究主要是分析杂交F与其父母本之间在形态学上的遗传关系;分子遗传,进一步验证杂交子代与亲本的亲缘关系,杂交分化率,为杂交的后续开展进行遗传分化预测;内在酶活差异分析实验的开展,通过对比杂交F与其父母本在正常饲养条件下和急性温度胁迫下的肝脏组织和鳃组织的酶活指标测定分析马骝罗汉、古典罗汉鱼及其杂交F对低温胁迫的应激调节能力和耐受力来对所得杂交F进行遗传进化评价。进一步的验证杂交F在马骝罗汉鱼对低温胁迫的应激调节能力和耐受力的基础上是否有所提高。本研究主要内容如下:(1)马骝罗汉和古典罗汉虽同为罗汉鱼,但属于不同品系,两者之间在从表观形态上看存在明显的差异,差异特征主要集中在头部、三鳍、体色。由于马骝罗汉鱼的连续自交,观赏价值得到了稳步的提高,但也导致马骝罗汉鱼的遗传多样性降低,抗病力差。本研究通过马骝罗汉与古典罗汉杂交得到了杂交F,马骝罗汉、古典罗汉及杂交F在各鳍条、侧线上下鳞等可数性状无差异,无法通过可数性状来区分三者之间的形态差异;从可量性状出发,通过统计方法分析,发现杂交后代结合了双亲各自性状,杂交子代F在三鳍和鱼体体色方面更偏向于母本古典罗汉,体表珠点和头部性状更偏向于父本,整合了父本马骝起头的优势和母本大三鳍的性状优势,表现出优良的杂种优势;通过对所得到的形态学数据进行整理,经方差分析对比了马骝罗汉、古典罗汉及其杂交F三种子代的8项形态学比例参数,发现F代有5项比例(体长/全长,体宽/全长,尾柄长/体长,尾柄高/体长,眼间距/体长)与其母本古典罗汉差异不显著,有2项比例(眼径/体长,眼径/眼间距)与其父本马骝罗汉差异不显著,一项比例(体高/体长)介于父母本之间,得到了一个综合,与亲本古典罗汉和马骝罗汉差异显著(P杂交子代形体指标偏向母本有7项,2项偏向父本。从杂交角度来看,杂交后代结合了双亲各自性状,杂交子代,在表观形态上绝大部分性状都偏向了母本古典罗汉,仅一小部分性状偏向父本马骝罗汉或者介于父母本之间,总的来说马骝罗汉和古典罗汉杂交所得到的F表观形态指标受母本影响较大;在罗汉鱼的杂交选育中,我们可以根据对子代的体型要求,针对性的选择选择头型比例好的雄鱼和相应体型的母本进行杂交搭配。(2)利用GBS(Genotyping-by-sequencing)测序技术,分别对挑选的6条马骝罗汉鱼(MM组)、6条古典罗汉鱼(GG组)、6条杂交F(GM组)的SNP位点构建了测序文库和基因分型,分析杂交子杂交F与父母本之间的亲缘关系和三组试验鱼的遗传多样性,为后罗汉鱼杂交选育在分子标记辅助育种上提供理论基础。18个样本构建出4481280条存在参考基因组的序列,样本测序的平均深度为9.47×,检测和过滤突变位点后,总的得到了224064个SNP位点。系统进化树的结果表明,杂交鱼的亲缘关系更接近母本古典罗汉鱼。在群体遗传结构分析中,亲代值K=2时得到了最小的Cross Validation Error值,证明杂交鱼的理论祖先是古典罗汉和马骝罗汉鱼。在群体遗传多样性参数上,群体达到了遗传平衡,GG组、GM组、MM组的Fst值分别为0.5706,0.8774,0.6004;遗传距离(DR)为2.0988,0.4348,0.4514,均>0.25,表明三组子代存在高度分化。(3)内在酶活差异分析实验的开展,对MM组马骝罗汉、GG组古典罗汉及其GM组杂交F1(古典♀×马骝♂)抗氧化和MDA含量进行了差异分析,水温的变化牵动鱼体温的变化,通过马骝罗汉、古典罗汉及其杂交F在急性温度胁迫下应激反应中的酶活指标变化差异分析,对杂交子代在抗温胁迫上的遗传进化结果进行验证。本试验,以平均体重分别17.20±6.4g,23.89±8.2g,19.34±7.2g的马骝罗汉、古典罗汉及其杂交F1作为实验对象,过程中设定了3个不同温度梯度,分别为T(28℃)、T(22℃)、T(16℃),28℃分别降温到22℃和16℃,稳定6小时,再从16℃,分别升温到22℃和28℃记为T和T。分五个点取样,将GM组杂交F、古典罗汉组鱼及和马骝罗汉组鱼进行胁迫处理后采取组织进行样品处理得到原始数据,最后通过对所得的各组样本数据进行比较分析,结果:同等温度条件下三组试验鱼的免疫酶活,古典罗汉鱼在急性降温胁迫中,组织细胞受自由基攻击最严重,其次是马骝罗汉鱼,受攻击最小的是杂交F。温度回升T,肝脏组织过氧化氢酶(CAT)活力值和丙二醛(M

关键词：罗汉鱼杂交形态差异 GBS测序技术内在酶活急性温度胁迫

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湖羊本品种选育提高及杂交利用组合的筛选

湖羊本品种选育提高及杂交利用组合的筛选

作者：屈成榆林学院

学位级别：硕士

湖羊具有多胎、泌乳性好、耐粗饲等优良特性,深受国内养羊业的青睐,是推动我国经济发展的重要产业支柱。由于近年来各地湖羊养殖热情持续高涨,导致湖羊种羊市场供不应求,以次充好的现象屡见不鲜。更为重要的是,该现象也使得湖羊种羊生... 详细信息

湖羊具有多胎、泌乳性好、耐粗饲等优良特性,深受国内养羊业的青睐,是推动我国经济发展的重要产业支柱。由于近年来各地湖羊养殖热情持续高涨,导致湖羊种羊市场供不应求,以次充好的现象屡见不鲜。更为重要的是,该现象也使得湖羊种羊生产性能下降明显。鉴于此,本研究采用分子育种与传统育种相结合的方法,以绵羊多胎主效基因Fec B基因为选种分子标记,建立核心群湖羊的筛选标准,开展湖羊繁育及后裔培育、选育并测定其繁殖性能和生长性能等指标,以提高湖羊种羊的生产性能。同时,利用当前流行的不同肉羊品种种羊与湖羊杂交,测定其繁殖性能、生长性能和屠宰性能等指标,综合筛选出适合榆林地区的湖羊肉用杂交的最佳组合。本研究旨在对湖羊进行本品种选育提高及杂交组合的筛选,以期获得湖羊优化利用的最佳方案,指导肉羊养殖场更科学的饲养和利用品种资源优势,提高养殖的经济效益,为肉羊产业的发展提供一定的科学依据。本研究主要结果如下:1.湖羊的本品种选育本研究组建了符合湖羊标准的公羊40只,母羊1039只的核心群。与生产群相比,核心群湖羊在产羔率、公母羔的平均初生重、公羔的平均断奶重、2、4、6月龄体重和2-6月龄平均日增重等方面具有显著优势(P杂交利用繁殖性能方面,萨福克、白杜泊和湖羊组的妊娠率显著高于黑杜泊组(P杂交组的失水率和熟肉率均显著高于湖羊(P杂交组合为本地区最佳的二元杂交组合。

关键词：湖羊本品种选育 FecB基因杂交生长性能

精子保存液中添加精氨酸和亮氨酸对杂交黄颡鱼（黄颡鱼♀×瓦氏黄颡鱼♂）受精和孵化的影响

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精子保存液中添加精氨酸和亮氨酸对杂交黄颡鱼（黄颡鱼♀×瓦氏黄...

作者：王家琪华中农业大学

学位级别：硕士

黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco)是我国特种鱼类中养殖产量名列前茅的养殖品种,其中杂交黄颡鱼“黄优1号”新品种(GS-02-001-2018)的诞生为其产业持续稳定的增长做出了卓有成效的贡献。“黄优1号”是以黄颡鱼(♀)×瓦氏黄颡鱼(♂)杂交... 详细信息

黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco)是我国特种鱼类中养殖产量名列前茅的养殖品种,其中杂交黄颡鱼“黄优1号”新品种(GS-02-001-2018)的诞生为其产业持续稳定的增长做出了卓有成效的贡献。“黄优1号”是以黄颡鱼(♀)×瓦氏黄颡鱼(♂)杂交为基础生产的品种,由于种间生殖隔离,不仅受精受到影响,还会因胚胎发育时产生高比例的异常胚胎而影响孵化,导致杂交子代中的畸形率很高。本实验室前期发现了杂交黄颡鱼畸形率高的原因可能是父系线粒体自噬不完全,不能完全消除。此外,我们发现亮氨酸可以影响细胞自噬,通过对黄颡鱼注射亮氨酸可以改善精子活力。因此,本研究以L-精氨酸和L-亮氨酸为调控因子,在精子保存液中单独或共同添加,研究不同浓度对黄颡鱼和瓦氏黄颡鱼杂交时的受精和孵化的影响,查明最适添加浓度,探讨两种氨基酸之间是否存在协同效应。并发明一种更适合黄颡鱼人工繁殖的新型孵化桶,以寻求建立一种高效而便捷的人工繁殖方法,为指导繁殖实践提供科学依据。实验主要研究结果如下:1.不同浓度L-精氨酸对受精和孵化的影响实验对L-精氨酸的浓度梯度作单因子倍差设计,浓度范围为0.25-8.00 mmol/L。结果显示,受精率随着精氨酸浓度的等倍增加,呈先升后降的趋势。各浓度组的受精率均显著高于对照组(p0.05)。2.不同浓度L-亮氨酸对受精和孵化的影响实验对L-亮氨酸也作相同设计,浓度范围为0.05-1.60 mmol/L。结果显示,随着亮氨酸浓度的增加,受精率和孵化率呈先升后降,而畸形率呈先降后升的趋势。在0.10-0.80 mmol/L浓度组的受精率均显著高于对照组(p<0.05),其中以0.80mmol/L浓度组的受精率最高,达(72.37±1.92)%,显著高于除在0.20-0.40 mmol/L浓度组以外的其余各浓度组。在0.20-1.60 mmol/L浓度组的孵化率均显著高于对照组(p<0.05),其中以0.80 mmol/L浓度组的孵化率最高,达(77.94±3.90)%,显著高于在0.05-0.10 mmol/L的浓度组和1.60 mmol/L浓度组(p<0.05)。在0.10-1.60mmol/L浓度组的畸形率均显著低于对照组(p<0.05),其中以0.80 mmol/L浓度组的畸形率最低,为(6.80±2.17)%,显著低于在0.05-0.10 mmol/L的浓度组和1.60mmol/L浓度组(p<0.05)。实验还显示,当浓度到1.60 mmol/L时,对受精率、孵化率和畸形率具有一定的负效应。回归分析表明,受精率、孵化率和畸形率对亮氨酸浓度的响应呈指数相关,求得最适浓度分别为0.834 mmol/L、0.969 mmol/L和0.968mmol/L。3.不同浓度L-精氨酸和L-亮氨酸共同作用对受精和孵化的影响实验对L-精氨酸和L-亮氨酸作2因子3水平的3正交设计,精氨酸的浓度水平为0.2 mmol/L,亮氨酸的浓度水平为0.5 mmol/L。实验结果显示,精氨酸0.2 mmol/L浓度对应的亮氨酸1.5 mmol/L水平组、精氨酸0.4 mmol/L浓度对应的亮氨酸3个水平组和精氨酸0.6 mmol/L浓度对应的亮氨酸1.0-1.5 mmol/L水平组的受精率均显著高于对照组(p<0.05),受精率提高了29.19%-44.85%。两种氨基酸各水平组的孵化率均显著高于对照组(p<0.05),提高了19.44%-38.06%;畸形率与孵化率相反,各水平组均显著低于对照组(p<0.05),降低了48.49%-77.11%。显示这两种氨基酸组合的最适浓度为精氨酸0.4 mmol/L和亮氨酸1.0 mmol/L,与对照组相比,受精率和孵化率分别提高了44.85%和38.06%,畸形率降低了77.11%。为查明繁殖效率改变的原因,我们使用CASA分析对精子活力做进一步的验证。其中,三个处理组分别为0.4mmol/L精氨酸、1.0mmol/L亮氨酸以及0.4mmol/L精氨酸+1.0mmol/L亮氨酸。实验结果显示,与对照组相比,处理组能够显著增加精子活力以及提高精子运动的时间(p<0.05),以同时添加精氨酸与亮氨酸达到最高,参数为VAP(120.76±3.76μm/s)、VSL(123.19±3.11μm/s)、VCL(126.28±5.98μm/s)。同时精子运动时间大幅度提高,其中以0.4 mmol/L精氨酸+1

关键词：黄颡鱼瓦氏黄颡鱼杂交 L-精氨酸 L-亮氨酸受精孵化

木耳属重要种的种质资源评价及原生质体远缘杂交研究

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木耳属重要种的种质资源评价及原生质体远缘杂交研究

作者：石晨阳吉林农业大学

学位级别：硕士

木耳属是世界上广泛分布的木腐真菌,具有十分重要的食用和药用价值。近年来随着人们对木耳需求的不断增加和习近平主席对“小木耳,大产业”的点赞,木耳产业不断迎来新的发展高潮,但同时原有的木耳菌种退化现象逐年显现,开发木耳新种质... 详细信息

木耳属是世界上广泛分布的木腐真菌,具有十分重要的食用和药用价值。近年来随着人们对木耳需求的不断增加和习近平主席对“小木耳,大产业”的点赞,木耳产业不断迎来新的发展高潮,但同时原有的木耳菌种退化现象逐年显现,开发木耳新种质显得越来越迫切。目前木耳产业大多依旧存在使用以前的品种或者主要探讨栽培方法的改进以及研发不同基质替代的现象,有关通过原生质体单核化进行生物育种的报道较少,有关种间远缘杂交的报道更是鲜有报道,远缘杂交不仅可以将双亲的优良性状集合到杂交子代中,还有可能培育出超亲遗传的杂交菌株,为木耳遗传育种提供更多的材料,为生产提供新的品种,同时丰富木耳种质资源并为生产者提供更多选择的可能性。本试验收集了目前木耳属中可人工栽培的主要种的菌株毛木耳(Auricularia cornea)、皱木耳(Auricularia delicata)、黑木耳(Auricularia heimuer)、脆木耳(Auricularia fibrillifera),从农艺性状评价、分子标记评价、原生质体单核化及远缘杂交研究3方面展开试验,为木耳属种的种质资源评价更完善提供参考同时筛选出具有开发利用价值的优良菌株。具体研究结果如下:1、农艺性状评价。将供试菌株采用菌袋进行栽培试验,采用目前最科学、实用、高效的小孔出耳方式对菌株子实体进行栽培,在本试验中经过多次测量求平均数收集的数据表明:在菌株子实体长方面,脆木耳菌株>皱木耳菌株>毛木耳菌株>黑木耳菌株,子实体宽皱木耳菌株>毛木耳菌株>脆木耳菌株>黑木耳菌株,子实体厚皱木耳菌株>毛木耳菌株>黑木耳菌株>脆木耳菌株,在菌株生育期方面由短到长为脆木耳菌株毛木耳菌株>黑木耳菌株>皱木耳菌株,菌株子实体产量由高到低为黑木耳菌株>毛木耳菌株>皱木耳菌株>脆木耳菌株。综合本试验所有的农艺性状指标,筛选出具有较大开发利用价值的菌株,分别为生育期短且口感佳的皱木耳Z1、子实体纹路均匀且泡发度大的皱木耳Y1及产量高的黑木耳A14,同时试验数据可为日后进行木耳属种的种质资源评价提供借鉴和参考。2、分子标记评价。本试验SSR引物设计基于黑木耳全基因组序列、毛木耳全基因组序列、皱木耳全基因组序列和脆木耳转录组测序数据进行设计,从SSR分子标记评价和ITS分子标记评价2方面进行评价,从48对引物中选出18对特异性好、稳定性高的引物用于本试验中菌株的聚类分析,NTSYS-PC聚类分析结果表明在遗传相似系数为0.36处时,可以将供试菌株分为4大类群。第Ⅰ类群包括7个菌株,主要为毛木耳菌株,具体包括W1、W6、W9、W10、AP66、P4、Z等菌株,该类群中包含皱木耳Z;第Ⅱ类群主要为皱木耳菌株,具体为Z1、Z2、Y1、Y2;第Ⅲ类群为黑木耳菌株A14;第Ⅳ类群为脆木耳5513。本试验SSR聚类分析中,准确的将供试菌株分为4个类群,分别为毛木耳菌株、皱木耳菌株、黑木耳菌株、脆木耳菌株。ITS分子标记基于ITS片段PCR扩增构建系统发育树,在该发育树中供试菌株被分为2大类群,第Ⅰ类群为深色菌株类群主要包含Z、Z1、Z2、Y1、Y2、A14、5513、AP66、W6、P4,其中皱木耳5个种,毛木耳2个种,黑木耳1个种和脆木耳1个种;第Ⅱ类群为浅色菌株类群共3个种,均为毛木耳菌株,分别为W1、W9、W10。两种分子评价方法中,基于木耳基因组(黑木耳全基因组序列、毛木耳全基因组序列、皱木耳全基因组序列和脆木耳转录组数据)设计引物的SSR分子标记法更详细的将各菌株进行分类,具有更高的准确性。3、本试验优化出同时适合本试验中菌株的最佳原生质体制备条件:酶浓度为1.95%、酶解时间为2.5h、酶解温度为28.5℃、0.63mol/L甘露醇为稳渗液,且原生质体最佳再生浓度为150个/μL,并以蔗糖培养基为再生培养基碳源的再生效果较好。在试验中得到的53株单核菌株可继续进行种间杂交试验,为进一步获得更多的优良菌株提供了试验材料,为生产提供更多的品种。4、将供试菌株进行原生质体单核化处理,经菌丝培养、染色、镜检等试验处理,共收集到10株菌株53个单核菌株,然后将单核菌株进行种间杂交试验,种间杂交共32个杂交组合,最后得到19株杂交菌株,最终仅有A14×Z1、A14×Y1收集到子实体,种间杂交菌株出耳率为10.53%。同时对2株杂交菌株进行农艺性状比较,结果表明:杂交菌株子实体的横径、纵径、厚度、颜色等介于亲本菌株之间,且菌株A14×Z1在产量方面表现出超亲优势,具有较大的开发利用的价值。同时也发现:在种间杂交试验中,其在SSR分子标记和ITS分子标记中的相对遗传距离越近的种越容易杂交成功,但是杂交菌株的出耳率很低且出现优良菌株的概率较低。

关键词：木耳农艺性状分子标记原生质体杂交

燕麦高效育种杂交技术研究与籽粒品质近红外模型构建

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燕麦高效育种杂交技术研究与籽粒品质近红外模型构建

作者：杨晓虹河北北方学院

学位级别：硕士

燕麦(Avena sativa L.)隶属于禾本科燕麦属,是全球仅次于小麦、玉米、水稻、马铃薯、大麦以及高粱的第七大栽培作物。我国作为栽培燕麦的起源中心之一,具有悠久的种植历史,但目前燕麦新品种选育主要以传统育种为主。随着杂种优势在作物... 详细信息

燕麦(Avena sativa L.)隶属于禾本科燕麦属,是全球仅次于小麦、玉米、水稻、马铃薯、大麦以及高粱的第七大栽培作物。我国作为栽培燕麦的起源中心之一,具有悠久的种植历史,但目前燕麦新品种选育主要以传统育种为主。随着杂种优势在作物上的广泛应用,燕麦的杂交育种也逐渐提上日程,从而改进了燕麦新品种选育的方法。本研究以提高燕麦育种效率为目的,通过改进燕麦杂交技术提高了杂交结实率,并通过建立合适的品质测定指标,实现燕麦营养成分的快速检测,为燕麦品质育种奠定基础。研究结果如下:1.改进杂交方法的技巧,提高杂交结实率。通过改变母本穗铃的授粉状态、授粉方式,延长授粉时间等技术措施,以及父本水养装置及盆栽防倒装置的创新,将燕麦常规杂交技术杂交结实率不到5%,提高到65%,是常规杂交法杂交结实率的13倍。2.建立了“温室、盆栽、周年化”的杂交模式。通过对杂交方法改进,杂交所需母本个数比传统杂交法显著减少,所需母本的个数仅为原来的5%;杂交圃所需面积比传统杂交法缩小,可在温室全年种植,实现“温室、盆栽、周年化”杂交模式。3.进一步明确了杂交所需的最佳土壤配比、温度、湿度。通过温室和植物光照培养箱对燕麦进行培养和生理指标测定,明确了燕麦生长最佳营养土成分配比和比例,为壤土∶沙子∶草炭1:1:2最适合;通过设置燕麦生长温度梯度,明确了燕麦最佳授粉温度为23℃左右;通过设置燕麦生长湿度梯度,明确了燕麦最佳授粉空气湿度为45%。4.对159份燕麦资源进行了近红外扫描分析,并将其中的108份燕麦资源用化学法进行品质测定。通过对108份资源的近红外数据扫描和化学对比法测定,两者对应分析,在国内首次建立了燕麦水分、蛋白质、脂肪、淀粉、β-葡聚糖、燕麦生物碱C、燕麦生物碱P等7项燕麦营养指标的近红外数据模型,并利用该近红外数据模型对部分燕麦籽实品质进行测定,为快速品质育种和定向育种提供了技术支持。综合以上研究结果,通过试验摸索出提高燕麦杂交效率的方法、优化燕麦培养基质、得到杂交适宜的温度和湿度,构建近红外光谱扫描燕麦营养品质的种质资源库,形成高效、便捷育种模式,实现杂交育种高效化、育种指标数字化,育种目标明确化,为燕麦的生产和燕麦产业服务。

关键词：燕麦杂交高效育种籽粒品质近红外模型