检索结果-南通市图书馆

牦牛和犏牛睾丸CPT1a和ETHE1基因mRNA水平比较研究

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中国畜牧兽医 2018年第7期45卷 1891-1897页

作者：李方伟黄林金素钰雷杰雯付伟郑玉才西南民族大学生命科学与技术学院成都610041

试验旨在探索牦牛杂交雄性不育后代(犏牛)睾丸脂肪酸氧化特点及其与雄性不育的关联性,阐明犏牛雄性不育的分子机制。以GAPDH和18SrRNA基因为双内参,建立了牦牛和犏牛肝脏型棕榈酰肉碱转移酶1a(CPT1a)和硫双加氧酶1(ETHE1)基因mRNA水平... 详细信息

试验旨在探索牦牛杂交雄性不育后代(犏牛)睾丸脂肪酸氧化特点及其与雄性不育的关联性,阐明犏牛雄性不育的分子机制。以GAPDH和18SrRNA基因为双内参,建立了牦牛和犏牛肝脏型棕榈酰肉碱转移酶1a(CPT1a)和硫双加氧酶1(ETHE1)基因mRNA水平的实时荧光定量PCR检测方法,结果发现,该实时荧光定量PCR方法扩增特异性好,扩增效率为98.5%~107.8%,标准曲线线性关系好。采集成年牦牛(n=9)和雄性不育犏牛(n=7)睾丸和附睾,通过常规组织切片和HE染色检测,证实犏牛睾丸和附睾中无精子,而牦牛睾丸和附睾中有精子。试验进一步从牦牛和犏牛睾丸中提取总RNA,测定睾丸中CPT1a和ETHE1基因的mRNA水平,结果显示,犏牛睾丸中CPT1a和ETHE1基因mRNA水平分别显著和极显著高于牦牛(P雄性不育犏牛睾丸的脂肪酸氧化供能水平加强,可能对脂肪酸燃料分子有更多的依赖性。

关键词：牦牛杂交雄性不育棕榈酰肉碱转移酶1a(CPT1a) 硫双加氧酶1(ETHE1)

牦牛DDAH1和DDAH2基因的克隆测序及其在牦牛和犏牛睾丸中的表达差异

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黑龙江畜牧兽医 2016年第10期 51-55页

作者：胡雨薇郑玉才尚秋萍金素钰黄林西南民族大学生命科学与技术学院成都610041

为了测定牦牛DDAH1和DDAH2基因序列并比较其在牦牛和雄性不育犏牛睾丸中的表达,以探究该基因与犏牛雄性不育的联系,试验从牦牛睾丸中提取总RNA,采用RT-PCR技术克隆并测序获得牦牛DDAH1和DDAH2基因的c DNA序列;利用实时荧光定量RT-PCR技... 详细信息

为了测定牦牛DDAH1和DDAH2基因序列并比较其在牦牛和雄性不育犏牛睾丸中的表达,以探究该基因与犏牛雄性不育的联系,试验从牦牛睾丸中提取总RNA,采用RT-PCR技术克隆并测序获得牦牛DDAH1和DDAH2基因的c DNA序列;利用实时荧光定量RT-PCR技术检测这两个基因在牦牛与犏牛睾丸中的表达。结果表明:克隆获得的牦牛DDAH1和DDAH2基因序列分别长959 bp及1 091 bp,均包含858 bp的CDS区。DDAH1基因序列与普通牛相比有4个碱基差异,序列同源性为99.58%,而推导的氨基酸序列仅存在1个氨基酸残基差异;DDAH2基因序列与普通牛比较相差1个碱基,序列同源性为99.91%,推导的氨基酸序列存在1个氨基酸残基差异。DDAH1和DDAH2基因在牦牛和犏牛睾丸组织中均有表达,DDAH1基因在犏牛睾丸组织中的表达量显著高于牦牛(P雄性不育有关。

关键词：牦牛杂交雄性不育 DDAH基因基因克隆睾丸

牦牛和雄性不育犏牛睾丸PPP2CA、PME-1基因mRNA水平的比较

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四川动物 2017年第3期36卷 306-310页

作者：任亮付伟金素钰黄林李彩霞郑玉才西南民族大学生命科学与技术学院成都610041 四川省广元市剑阁县动物疫病预防控制中心四川广元628300

蛋白磷酸酶2A(PP2A)参与细胞中蛋白质的可逆磷酸化作用,在磷酸化信号通路调控方面具有重要功能,其活性受蛋白磷酸甲酯酶-1(PME-1)和其他因素的调控。为阐明牦牛杂交雄性不育的分子机制,本研究从牦牛睾丸中克隆了PP2A催化亚基α基因(PPP2... 详细信息

蛋白磷酸酶2A(PP2A)参与细胞中蛋白质的可逆磷酸化作用,在磷酸化信号通路调控方面具有重要功能,其活性受蛋白磷酸甲酯酶-1(PME-1)和其他因素的调控。为阐明牦牛杂交雄性不育的分子机制,本研究从牦牛睾丸中克隆了PP2A催化亚基α基因(PPP2CA)和PME-1基因c DNA序列,编码区长度分别为930 bp和1 143 bp,编码的氨基酸序列保守;定量PCR检测显示,犏牛(n=7)睾丸中PPP2CA与PME-1基因的m RNA水平均极显著低于牦牛(n=13,P雄性不育有关。

关键词：牦牛犏牛杂交雄性不育蛋白磷酸酶2A 蛋白磷酸甲酯酶-1

牦牛和犏牛睾丸中泛素结合酶基因Ube2n、泛素连接酶基因Trim36表达水平的比较

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江苏农业科学 2017年第1期45卷 19-21页

作者：尚秋萍黄林胡雨薇雷杰雯金素钰郑玉才西南民族大学生命科学与技术学院四川成都610041

为探讨蛋白质泛素化与牦牛杂交后代睾丸精子发生异常的相关性,比较了参与泛素化的2种酶基因(泛素结合酶基因Ube2n、泛素连接酶基因Trim36)在成年牦牛和雄性不育犏牛睾丸中的mRNA水平。定量PCR分析显示,牦牛(n=9)睾丸中Ube2n、Trim36基因... 详细信息

为探讨蛋白质泛素化与牦牛杂交后代睾丸精子发生异常的相关性,比较了参与泛素化的2种酶基因(泛素结合酶基因Ube2n、泛素连接酶基因Trim36)在成年牦牛和雄性不育犏牛睾丸中的mRNA水平。定量PCR分析显示,牦牛(n=9)睾丸中Ube2n、Trim36基因的mRNA水平分别显著、极显著高于犏牛(n=7),其中Trim36 mRNA水平相差10倍以上。研究结果提示,犏牛睾丸蛋白质泛素化水平明显下降,可能会影响精子发生过程中正常的蛋白质更新。

关键词：牦牛杂交雄性不育睾丸蛋白质降解泛素化

牦牛PRDX5基因的克隆测序及其在牦牛与犏牛睾丸中的表达差异

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江苏农业科学 2016年第8期44卷 53-56页

作者：唐会会郑玉才王鹏非金素钰黄林西南民族大学生命科学与技术学院四川成都610041

测定牦牛PRDX5基因序列,并比较其在牦牛和雄性不育犏牛睾丸组织中的表达差异,以探究该基因与犏牛雄性不育的关系。从牦牛睾丸组织中提取总RNA,采用RT-PCR技术克隆并测序获得牦牛PRDX5基因的c DNA序列;利用实时荧光定量RT-PCR技术检测该... 详细信息

测定牦牛PRDX5基因序列,并比较其在牦牛和雄性不育犏牛睾丸组织中的表达差异,以探究该基因与犏牛雄性不育的关系。从牦牛睾丸组织中提取总RNA,采用RT-PCR技术克隆并测序获得牦牛PRDX5基因的c DNA序列;利用实时荧光定量RT-PCR技术检测该基因在牦牛与犏牛睾丸组织中的表达情况。结果表明:克隆获得的牦牛Prdx5序列长759 bp,包含长660 bp的CDS区,该序列与普通牛基因相差4个碱基,序列同源性为99.47%,相差的4个核苷酸导致推导的氨基酸序列存在3个氨基酸残基差异;Prdx5在牦牛和犏牛睾丸组织中均有表达,在牦牛睾丸组织中的表达量极显著高于犏牛(P雄性不育有关。

关键词：牦牛杂交雄性不育 PfiM5基因基因表达睾丸

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牦牛和黄牛Prdm9基因锌指域序列的比较

江苏农业科学 2014年第4期42卷 28-30页

作者：马晓琴黄林刘文静林亚秋金素钰郑玉才西南民族大学生命科学与技术学院四川成都610041 西南科技大学生命科学与工程学院四川绵阳621010

为了研究牦牛杂交雄性不育的分子机制,采用3'-RACE方法分别从牦牛、黄牛睾丸组织的总RNA中获取其Prdm9基因的部分cDNA序列,长度分别为1 548、1 392 bp,包含全部的锌指域。对比分析显示:牦牛、黄牛的Prdm9基因均含有5个连续的C2H2型锌指... 详细信息

为了研究牦牛杂交雄性不育的分子机制,采用3'-RACE方法分别从牦牛、黄牛睾丸组织的总RNA中获取其Prdm9基因的部分cDNA序列,长度分别为1 548、1 392 bp,包含全部的锌指域。对比分析显示:牦牛、黄牛的Prdm9基因均含有5个连续的C2H2型锌指,每个锌指均由21个氨基酸构成,锌指间是高度保守序列TGEKPYV,并且锌指域从这段高度保守序列开始;牦牛、黄牛各自Prdm9基因中的5个锌指间在氨基酸构成上存在差异,并且二者在整个锌指域上有6个氨基酸差异,其中5个都在锌指中的重要正向选择位点处,推测这些氨基酸差异可能与牦牛种间杂交后代的雄性不育有关。

关键词：牦牛黄牛杂交雄性不育睾丸 Prdm9基因

哺乳动物睾丸特异乳酸脱氢酶C基因选择性剪接的研究

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哺乳动物睾丸特异乳酸脱氢酶C基因选择性剪接的研究

作者：黄林西南民族大学

学位级别：硕士

乳酸脱氢酶C (LDH-C)催化丙酮酸与L-乳酸的相互转化，通过参与细胞能量代谢在精子的发生以及获能等过程中起关键作用。采用RT-PCR方法克隆哺乳动物猪、狗、兔、猫、大鼠、小鼠及鸽子睾丸组织ldhc的开放阅读框全长序列，结果发现由于mRN... 详细信息

乳酸脱氢酶C (LDH-C)催化丙酮酸与L-乳酸的相互转化，通过参与细胞能量代谢在精子的发生以及获能等过程中起关键作用。采用RT-PCR方法克隆哺乳动物猪、狗、兔、猫、大鼠、小鼠及鸽子睾丸组织ldhc的开放阅读框全长序列，结果发现由于mRNA序列外显子缺失或者内含子部分序列插入，七个物种分别产生了2～6种数目不等的剪接体。缺失的外显子大多位于外显子5、4、6和3上。仅在狗和小鼠序列中发现部分内含子序列的插入，增加的内含子部分序列导致在该内含子中形成异常终止密码子;外显子的缺失导致部分剪接体阅读框的移码并提前形成终止子密码子。我们的实验在牦牛睾丸和肌肉组织均未发现ldha及ldhb基因的可变剪接现象。非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳和Western blot分析没有发现ldhc剪接体表达的LDH-C4蛋白的活性。对牦牛和犏牛睾丸组织ldhc基因进行克隆，测序结果分析显示成熟mRNA序列因缺失1个或多个外显子，总共出现了8种剪接体形式，且性未成熟的犊牛或雄性不育的杂交犏牛睾丸组织的剪接体比成年牦牛多。缺失的外显子多为外显子7和4。外显子的缺失同样导致部分剪接体阅读框的移码并形成终止子密码子。利用ldhc剪接体特异引物进行的实时荧光定量PCR检测显示，相对于成年牦牛而言，犊牛和犏牛的睾丸组织ldhc基因全长mRNA的表达丰度明显降低。成年牦牛、犊牛和犏牛的ldhc剪接体的相对比例也明显不同。我们的研究提示，哺乳动物睾丸组织中可能广泛存在ldhc基因的剪接现象，考虑到牦牛和犏牛的正常和性未成熟或异常睾丸组织ldhc剪接体mRNA丰度以及相对比例的差异，我们推测可变剪接可能对牦牛睾丸组织ldhc基因的表达起调控作用。

关键词：牦牛犏牛睾丸乳酸脱氢酶C 选择性剪接体杂交雄性不育

牦牛和犏牛睾丸SAMD12基因的克隆测序及其mRNA水平比较

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西南民族大学学报（自然科学版） 2016年第5期42卷 525-530页

作者：杨乐黄林金素钰雷杰雯郑玉才西南民族大学生命科学与技术学院四川成都610041

SAMD12是新近发现的SAM结构域家族成员.为进一步探究犏牛雄性不育的分子机制,实验从健康成年牦牛(n=10)和雄性不育犏牛(n=7)睾丸组织中提取总RNA,利用常规基因克隆技术,对牦牛SAMD12基因进行克隆测序,并采用实时荧光定量PCR技术,比较牦... 详细信息

SAMD12是新近发现的SAM结构域家族成员.为进一步探究犏牛雄性不育的分子机制,实验从健康成年牦牛(n=10)和雄性不育犏牛(n=7)睾丸组织中提取总RNA,利用常规基因克隆技术,对牦牛SAMD12基因进行克隆测序,并采用实时荧光定量PCR技术,比较牦牛和犏牛睾丸中SAMD12基因mRNA水平.结果本实验克隆获得了牦牛SAMD12基因的3种变异体,分别命名为v715、v779和v852.v715与普通牛5号变异体完全对应;v779含SAM结构域但与普通牛序列存在一些差异,可能是SAMD12基因的新变异体类型;v852无结构域部分可能不表现活性.定量PCR结果显示:SAMD12基因在牦牛和犏牛睾丸中均有表达,但表达量差异不显著,推测其表达水平与犏牛雄性不育无直接关系.

关键词：牦牛犏牛睾丸 SAMD12基因杂交雄性不育

牦牛和不育犏牛睾丸中LGR4和ZNF281基因mRNA水平的分析

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西南民族大学学报（自然科学版） 2018年第6期44卷 551-555页

作者：于淼金素钰黄林雷杰雯郑玉才西南民族大学生命科学与技术学院四川成都610041

LGR4和ZNF281是信号转导通路中的重要分子,参与广泛的生物学过程.研究的目的是比较这两个基因在牦牛及其杂交后代睾丸中的表达.从成年牦牛(n=10)和雄性不育犏牛(n=7)睾丸中提取总RNA,采用实时定量PCR技术检测LGR4和ZNF281基因的mRNA水平... 详细信息

LGR4和ZNF281是信号转导通路中的重要分子,参与广泛的生物学过程.研究的目的是比较这两个基因在牦牛及其杂交后代睾丸中的表达.从成年牦牛(n=10)和雄性不育犏牛(n=7)睾丸中提取总RNA,采用实时定量PCR技术检测LGR4和ZNF281基因的mRNA水平.结果显示,这两个基因在睾丸组织中均有较高的表达水平,其中LGR4基因在牦牛和犏牛睾丸中表达量没有显著差异,而ZNF281基因在牦牛睾丸中的表达量极显著高于雄性不育犏牛(P 雄性不育有关.

关键词：牦牛犏牛杂交雄性不育精子发生