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木贼属植物的核心DNA条形码筛选

时珍国医国药 2017年第7期28卷 1662-1665页

作者：刘宇婧吴沿胜邢德科刘金欣袁媛江苏大学现代农业装备与技术省部共建教育部重点实验室镇江212013 承德医学院中药研究所承德067000 道地药材国家重点实验室培育基地中国中医科学院北京100700

木贼作为一种重要的中药材,人们常与同属其他植物混用,这直接影响到人们的身体健康。该实验拟从常用DNA条形码(ITS,mat K,rbc L和psb A-trn H)中筛选适合木贼属的核心DNA条形码,并存储正品及其混伪品的参考序列,便于今后查询,确保用药... 详细信息

木贼作为一种重要的中药材,人们常与同属其他植物混用,这直接影响到人们的身体健康。该实验拟从常用DNA条形码(ITS,mat K,rbc L和psb A-trn H)中筛选适合木贼属的核心DNA条形码,并存储正品及其混伪品的参考序列,便于今后查询,确保用药安全。本实验采集了14个样本,并从Gen Bank上获得木贼属121条序列。应用PAUP4.0软件计算K2P遗传距离,通过5个参数评估序列变异,构建NJ系统发育树,最终评价ITS,mat K,rbc L和psb A-trn H序列对木贼属植物的鉴别能力。研究结果表明,14个样本获得100%的DNA提取成功率;psb A-trn H,mat K,rbc L和ITS的扩增效率分别为:100%,96%,92%和52%。rbc L序列存在明显的Barcoding Gap,所构建的NJ系统发育树也能将木贼属植物区分开,鉴别成功率最高,为71.4%。因此,建议把rbc L序列作为木贼属植物的核心DNA条形码。

关键词：木贼 DNA条形码混伪品鉴定

木贼对动脉粥样硬化早期大鼠血清IL-1、IL-8及TNF-α的影响

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中国老年学杂志 2003年第8期23卷 538-539页

作者：甄艳军安杰周晓红侯建明朱方刘芳王耀民何立李梅河北医科大学西校区基础医学院河北石家庄050091 河北省中医院

目的　观察木贼对大鼠动脉粥样硬化早期血脂及血清 IL- 1、IL- 8、TNF-α的影响。方法　高脂饲料复制 SD大鼠高脂血症和早期动脉粥样硬化模型 ,同时给以不同剂量木贼水煎剂灌胃 ,实验 1 0 w后 ,测定各组动物血脂水平及血清 IL- 1、IL- 8... 详细信息

目的　观察木贼对大鼠动脉粥样硬化早期血脂及血清 IL- 1、IL- 8、TNF-α的影响。方法　高脂饲料复制 SD大鼠高脂血症和早期动脉粥样硬化模型 ,同时给以不同剂量木贼水煎剂灌胃 ,实验 1 0 w后 ,测定各组动物血脂水平及血清 IL- 1、IL- 8、TNF- α含量。结果　木贼预防性用药后与模型组比较血脂降低 (P木贼预防性用药可调控血清中炎性细胞因子 IL- 1、IL- 8的含量 ,有延缓动脉粥样硬化病变形成的作用。

关键词：木贼动脉粥样硬化大鼠血清 IL-1 IL-8 TNF-α

木贼有效部位提取物对氧化低密度脂蛋白致内皮细胞凋亡的干预

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中国老年学杂志 2010年第15期30卷 2160-2162页

作者：李志永李国拉王辉张莉侯建明甄艳军徐水县人民医院病理科河北保定072550 北京体育大学河北省儿童医院河北医科大学基础课教学部

目的提取木贼有效成分,并观察其对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)损伤人脐静脉内皮细胞(HUVEC)后细胞增殖与凋亡的影响。方法采用乙醇回流提取,大孔树脂分离纯化出有效成分,紫外分光光度计测定提取物中槲皮素与阿魏酸的含量;60μg/ml的ox-LD... 详细信息

目的提取木贼有效成分,并观察其对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)损伤人脐静脉内皮细胞(HUVEC)后细胞增殖与凋亡的影响。方法采用乙醇回流提取,大孔树脂分离纯化出有效成分,紫外分光光度计测定提取物中槲皮素与阿魏酸的含量;60μg/ml的ox-LDL刺激培养的HU-VEC株;扫描电镜观察细胞形态变化;流式细胞仪测定细胞周期、增殖指数及凋亡率。结果木贼有效成分槲皮素与阿魏酸的平均含量分别为1.69mg/g,1.23mg/g,纯度达到63.28%;木贼有效成分干预组细胞增殖指数增高、凋亡率明显下降(P木贼提取物达到有效标准,并能有效降低ox-LDL致内皮细胞凋亡率,明显改善内皮细胞增殖周期时相。

关键词：木贼有效成分氧化低密度脂蛋白凋亡与增殖

木贼大孔树脂提取物对单个核细胞-内皮细胞黏附的影响

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中草药 2009年第2期40卷 265-268页

作者：李丽玮黄伟李云峰甄艳军张莉侯建明河北医科大学基础课教学部河北石家庄050091

目的探讨木贼大孔树脂提取物对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的单个核细胞-内皮细胞黏附的作用及其可能的机制。方法体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC),大孔吸附树脂分离法获取木贼提取物,用不同质量浓度的木贼大孔树脂提取物作用于ox-LD... 详细信息

目的探讨木贼大孔树脂提取物对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的单个核细胞-内皮细胞黏附的作用及其可能的机制。方法体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC),大孔吸附树脂分离法获取木贼提取物,用不同质量浓度的木贼大孔树脂提取物作用于ox-LDL诱导的ECV304细胞12h,观察人单个核细胞与内皮细胞的黏附及ECV304细胞的IL-8和VCAM-1蛋白表达,并通过RT-PCR观察IL-8和VCAM-1的基因表达。结果高、中、低剂量(100、50、25μg/mL)的木贼大孔树脂提取物均显著抑制ox-LDL诱导的单个核-内皮细胞的黏附,下调ox-LDL诱导的ECV304细胞IL-8和VCAM-1蛋白和基因的表达,以中剂量(50μg/mL)效果最明显。结论木贼中总黄酮和总酚酸是木贼抗动脉粥样硬化(AS)的有效部位之一,两者抑制IL-8和VCAM-1的基因及蛋白表达可能是其抑制单个核-内皮细胞黏附及抗AS的机制之一。

关键词：木贼内皮细胞血管细胞黏附分子氧化低密度脂蛋白白细胞介素-8 动脉粥样硬化

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木贼的质量标准提升研究

中国药房 2020年第9期31卷 1080-1085页

作者：赖正权艾伟鹏胡震窦耀星蔡雨峰刘伟吴莹张慈婷谢晓琳廖慧君深圳大学总医院药学部广东深圳518055 香港中文大学中医学院香港广州中医药大学中医药数理工程研究院广州510006 华中科技大学协和深圳医院/深圳大学第六附属医院药学部广东深圳518052

目的:为完善木贼药材的质量标准提供参考。方法:以来自不同产地的10批木贼药材为样品,采用薄层色谱(TLC)法对样品中的山柰酚-3-O-β-D-槐糖苷进行定性鉴别;参照2015年版《中国药典》附录的相关方法,测定样品中重金属、黄曲霉毒素、杂质... 详细信息

目的:为完善木贼药材的质量标准提供参考。方法:以来自不同产地的10批木贼药材为样品,采用薄层色谱(TLC)法对样品中的山柰酚-3-O-β-D-槐糖苷进行定性鉴别;参照2015年版《中国药典》附录的相关方法,测定样品中重金属、黄曲霉毒素、杂质、水分、总灰分、酸不溶性灰分、水溶性浸出物和醇溶性浸出物的含量;采用高效液相色谱(HPLC)法测定样品中山柰酚-3-O-β-D-槐糖苷含量,并建立木贼水溶性成分的HPLC指纹图谱。结果:TLC鉴别结果显示,在供试品色谱中,与山柰酚-3-O-β-D-槐糖苷对照品色谱相应位置上显相同颜色的荧光斑点,且空白对照无干扰。10批样品中杂质含量为0.19%~2.32%,水分含量为10.12%~11.87%,总灰分含量为6.67%~10.11%,酸不溶性灰分含量为1.34%~2.12%,水溶性浸出物含量为9.17%~13.99%,醇溶性浸出物含量为7.49%~13.68%;初步拟定杂质含量不得超过3.00%、总灰分含量不得超过10.00%、酸不溶性灰分含量不得超过2.50%、水溶性浸出物含量不得少于9.00%、醇溶性浸出物含量不得少于5.00%的标准。9批样品中检测出了砷(含量为0.064~0.225 mg/kg),6批样品中检测出了镉(含量为0.106~0.132 mg/kg),所有样品中均检测出了铅(含量为0.221~1.896 mg/kg),但所有样品中均未检测到汞和黄曲霉毒素。HPLC方法学考察结果均符合《中国药典》相关要求;10批样品中山柰酚-3-O-β-D-槐糖苷含量为627.12~5384.53 mg/kg,10批样品的HPLC指纹图谱相似度均大于0.900。结论:本研究新建了木贼中山柰酚-3-O-β-D-槐糖苷的定性、定量分析方法;对木贼中重金属、黄曲霉毒素、杂质等项目进行了检测,并对杂质、灰分和浸出物进行了限度拟定。所建方法简便、准确、重复性好,可用于木贼的质量控制。

关键词：木贼山柰酚-3-O-β-D-槐糖苷薄层色谱法高效液相色谱法指纹图谱质量标准

正交设计优化木贼多糖的超声提取工艺(英文)

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化学研究与应用 2012年第6期24卷 990-995页

作者：黄礼德郭立强刘胜利黄锁义潘廷啟吕坤右江民族医学院广西百色533000

以蒸馏水为溶剂提取,通过单因素实验和正交实验,研究料液比、超声功率、超声提取温度和超声作用时间对木贼多糖提取效果的影响。超声提取法的优化工艺条件为:料液比(g/mL)1∶20,提取温度70℃,超声功率100 W,作用时间50 min。在此条件下... 详细信息

以蒸馏水为溶剂提取,通过单因素实验和正交实验,研究料液比、超声功率、超声提取温度和超声作用时间对木贼多糖提取效果的影响。超声提取法的优化工艺条件为:料液比(g/mL)1∶20,提取温度70℃,超声功率100 W,作用时间50 min。在此条件下,木贼多糖的平均提取率为12.33%,RSD为0.16%。超声波强化提取木贼多糖省时高效。

关键词：木贼多糖超声提取正交设计

木贼总黄酮的提取及对APAP致小鼠肝损伤保护作用的初步研究

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木贼总黄酮的提取及对APAP致小鼠肝损伤保护作用的初步研究

作者：孙昌霞吉林农业大学

学位级别：硕士

本品取自木贼科植物木贼(Equisetum hiemale L.)干燥地上部位。收载于2015版《中国药典》,平,甘、苦。归肺、肝经。疏散风热,明目退翳。主治目昏多泪,肠风下血,外伤出血。主产于东北、华北、内蒙古等地区,是历史悠久的传统中药。黄酮类... 详细信息

本品取自木贼科植物木贼(Equisetum hiemale L.)干燥地上部位。收载于2015版《中国药典》,平,甘、苦。归肺、肝经。疏散风热,明目退翳。主治目昏多泪,肠风下血,外伤出血。主产于东北、华北、内蒙古等地区,是历史悠久的传统中药。黄酮类成分是木贼主要有效成分,本文对木贼总黄酮提取工艺进行研究,并对其肝损伤保护作用进行初步探索,对深入开发传统中药木贼的临床应用价值具有深远意义。将木贼去根烘干,粉碎过筛,备用。取适量细粉,一定条件下对乙醇浓度、提取时间、料液比进行单因素考察,采用Box-Behnken Design响应面优化法筛选木贼总黄酮最佳提取工艺,并进行抗氧化活性研究。结果表明,按1:25(g/mL)的比例加入70%乙醇,超声50 min后,得率为10.06%,此时,木贼总黄酮含量最高,为13.57 mg/g,与预测值吻合度高达98%,各因素对木贼总黄酮含量的影响为:乙醇浓度>提取时间>料液比。探究最佳工艺下所得总黄酮抗氧化活性,实验显示:以抗坏血酸为阳性对照,木贼总黄酮具有一定的还原能力,对羟自由基(·OH)、ABTS·、DPPH·清除效果随黄酮浓度的增高而增强,对应IC值分别为1.02±0.01、0.75±0.00和0.35±0.00 mg/mL。此研究为木贼总黄酮的提取,天然抗氧化剂的开发以及后续实验奠定基础。在前期实验基础上,取10 kg木贼细粉,按最佳工艺对木贼总黄酮进行提取,石油醚除脂后(181 g),得826 g干粉,加适量蒸馏水最大程度溶解样品以作上样样品。采用D101大孔树脂柱对样品进行分离纯化,用5倍柱体积蒸馏水、30%、50%、70%、无水乙醇对其进行梯度洗脱。收集30%、50%、70%乙醇洗脱液,减压回收乙醇,冷冻干燥,得30%大孔树脂洗脱部位(EHLA)、50%大孔树脂洗脱部位(EHLB)、70%大孔树脂洗脱部位(EHLC),对其进行黄酮类成分含量测定,并探究其抗氧化效果。结果表明,经D101大孔树脂纯化后,木贼黄酮含量由总提物的16.43%上升至EHLA、EHLB、EHLC的70.95、83.61、68.37%,由高到低为:EHLB>EHLA>EHLC。EHLA表现出较强的还原能力,EHLA、EHLB、EHLC对ABTS·自由基清除能力的IC值分别为:0.36、0.20、0.30 mg/mL,清除能力大小为:EHLB>EHLC>EHLA;对DPPH·的清除能力的IC值分别为:0.06、0.02、0.14 mg/mL,清除能力大小为:EHLB>EHLA>EHLC。综合得率EHLB抗氧化能力最强,其次是EHLA。肝脏是机体重要代谢器官,对其起着不可替代作用。研究发现,应用广泛的解热镇痛药对乙酰氨基酚(简称APAP)对肝脏有一定程度的损害作用,安全剂量下的APAP发挥治病作用后经肾脏排出体外,而过量APAP则导致严重肝损伤甚至引发肝衰竭,本研究基于木贼总黄酮抗氧化以及黄酮类成分的抗炎作用,建立了APAP诱导的急性肝损伤模型,观察木EHLA、EHLB的护肝作用。结果表明,与模型组相比,给药组小鼠生长状况明显改善,两种药物均能显著降低小鼠血清ALT、AST水平,升高肝组织中MDA含量,不同程度地降低肝组织中SOD、GSH、GAH-Px含量,抑制TNF-α和IL-8含量的上。H&E染色及Western blot结果表明,给药组能缓解APAP引发的肝组织细胞凋亡。整体结果表明两种药物对APAP诱导的急性肝损伤均有保护作用,EHLB高剂量组效果较强,其机制可能与抑制脂质过氧化与氧化应激,缓解炎症反应及抗细胞凋亡有关。

关键词：木贼总黄酮 Box-Behnken Design响应面优化抗氧化 APAP 急性肝损伤

木贼对食饵性脂肪肝大鼠肝细胞增殖与凋亡的影响

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时珍国医国药 2011年第5期22卷 1163-1164页

作者：姜秀娟王旭辉丁晓猛李奕甄艳军河北医科大学基础课教学部河北石家庄050091 北京体育大学北京100084 石家庄市长安区医院 050031 中国戏曲学院北京100073

目的研究木贼水煎剂对食饵性脂肪肝大鼠肝细胞增殖与凋亡的影响。方法选用雄性SD大鼠,随机分为正常对照组、病理模型组、阳性药对照组及木贼水煎剂组。复制食饵性脂肪肝大鼠动物模型,同时给予木贼水煎剂预防性给药,以吉非罗齐为阳性药... 详细信息

目的研究木贼水煎剂对食饵性脂肪肝大鼠肝细胞增殖与凋亡的影响。方法选用雄性SD大鼠,随机分为正常对照组、病理模型组、阳性药对照组及木贼水煎剂组。复制食饵性脂肪肝大鼠动物模型,同时给予木贼水煎剂预防性给药,以吉非罗齐为阳性药对照。实验10周,检测血脂,肝细胞增殖周期与凋亡率,观察肝脏病理形态学变化。结果木贼水煎剂组TC,TG明显低于模型组(P0.05),增殖指数下降(P木贼能明显减轻脂肪肝大鼠肝细胞损伤。结论木贼通过抑制肝细胞凋亡,改善大鼠脂肪性肝损伤。

关键词：木贼大鼠脂肪肝凋亡增殖

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木贼配方颗粒喷雾干燥工艺优化

中国实验方剂学杂志 2016年第21期22卷 19-22页

作者：邵杰张爱丽施静王振中萧伟江苏康缘药业股份有限公司江苏连云港222001 江苏联合职业技术学院连云港中医药分院江苏连云港222007

目的:优选木贼配方颗粒的喷雾干燥工艺条件,制备合格的中间体,以利于后续干法制粒工序的开展。方法:以出粉率和粒径分布为指标,通过单因素试验筛选辅料种类;利用Minitab 16软件中的Plackett-Burman设计,以出粉率为指标,筛选影响喷雾干燥... 详细信息

目的:优选木贼配方颗粒的喷雾干燥工艺条件,制备合格的中间体,以利于后续干法制粒工序的开展。方法:以出粉率和粒径分布为指标,通过单因素试验筛选辅料种类;利用Minitab 16软件中的Plackett-Burman设计,以出粉率为指标,筛选影响喷雾干燥的3个主要影响因素(进风温度、固含比、进料速度),并确定非主要影响因素的水平。以山柰素转移率、细粉吸湿率和出粉率为指标,利用Box-Behnken优选工艺参数。结果:最佳喷雾干燥工艺条件为3%微粉硅胶加入固含量20%的木贼浸膏中,料液温度65℃,进风温度151℃,进风量4 m3·min^(-1),进料速度33 m L·min^(-1)。山柰素转移率94.2%,喷干粉吸湿率20.6%,出粉率85.0%。结论:优选的喷雾干燥工艺稳定可行,为木贼配方颗粒的大生产提供参考。

关键词：木贼配方颗粒喷雾干燥出粉率山柰素吸湿率