检索结果-南通市图书馆

生物工程学报 2023年第11期39卷 4593-4607页

作者：李乐彭程于坤朋唐艺玲林燕玲李利君倪辉李清彪集美大学海洋食品与生物工程学院福建厦门361021 福建省食品微生物与酶工程重点实验室福建厦门361021 厦门市食品生物工程技术研究中心福建厦门361021 海洋食品精深加工关键技术省部共建协同创新中心辽宁大连116034 厦门海洋职业技术学院福建厦门361100

木糖苷酶催化低聚木糖水解在木质纤维素降解中起重要作用,但该酶活性易被产物木糖抑制,严重限制了其应用。基于分子对接,本文研究了茶梗发酵培养基差异表达显著的黑曲霉(Aspergillus niger)β-木糖苷酶An-xyl与木糖的亲和性,并对其进行... 详细信息

木糖苷酶催化低聚木糖水解在木质纤维素降解中起重要作用,但该酶活性易被产物木糖抑制,严重限制了其应用。基于分子对接,本文研究了茶梗发酵培养基差异表达显著的黑曲霉(Aspergillus niger)β-木糖苷酶An-xyl与木糖的亲和性,并对其进行克隆表达和性质表征,进一步探讨了该酶与纤维素酶对茶梗中木质纤维素的降解作用。分子对接结果表明,An-xyl与木糖的亲和性低于木糖耐受性较差的米曲霉β-木糖苷酶xyl A。重组表达的An-xyl木糖抑制常数Ki值为433.2 mmol/L,与同为GH3家族的β-木糖苷酶相比木糖耐受性较高。以p NPX为底物时,K_(m)和V_(max)分别为3.6 mmol/L和10000μmol/(min·mL)。An-xyl最适温度65℃,最适pH 4.0,65℃处理300 min能保持约61%的酶活力,在pH2.0-8.0的范围内处理24h后酶活力仍能维持80%左右。添加An-xyl与纤维素酶共同水解茶梗,反应2h和4h产生还原糖含量比单独使用纤维素酶水解分别提高了19.3%和38.6%。本研究表明,通过差异表达挖掘的An-xyl具有高木糖耐受性和较好的催化活性和稳定性,可协同作用水解茶梗类木质纤维素,丰富了具有高木糖耐受性β-木糖苷酶的资源,为其应用提供了实验依据。

关键词：黑曲霉 β-木糖苷酶木糖耐受性茶梗木质纤维素

来源：

维普期刊数据库

同方期刊数据库评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

Leifsonia ***2019中一种新型耐木糖β-木糖苷酶的表达与特征

引用

微生物学报 2022年第4期62卷 1452-1463页

作者：何易焦镕虎王晨曦王茜许光治浙江农林大学食品与健康学院浙江临安311300

【目的】从栀子灰蝶幼虫分离的Leifsonia ***2019菌株中克隆表达出一种新型β-木糖苷酶Xyl4900,并研究其酶学性质,以期为开发适用于工业生产的β-木糖苷酶提供参考。【方法】采用生物信息学分析技术分析Leifsonia ***2019菌株的β-木糖... 详细信息

【目的】从栀子灰蝶幼虫分离的Leifsonia ***2019菌株中克隆表达出一种新型β-木糖苷酶Xyl4900,并研究其酶学性质,以期为开发适用于工业生产的β-木糖苷酶提供参考。【方法】采用生物信息学分析技术分析Leifsonia ***2019菌株的β-木糖苷酶Xyl4900基因并在大肠杆菌中表达了该基因,纯化并研究了其酶学性质。【结果】Xyl4900与GH3家族的β-葡萄糖苷酶同源性高,但带有β-木糖苷酶结构域,可特异性水解对硝基苯基β-D-吡喃木糖苷(pNPX),是一种新型β-木糖苷酶。酶学特性分析显示,Xyl4900在45℃和pH 7.0的条件下酶活性最高,且在pH 6.0–9.0的范围内孵育14 h,仍保持80%以上的酶活力。除Cu^(2+)外,其他金属离子(2.5 mmol/L)对Xyl4900酶活力无明显影响,且对低浓度有机溶剂(5%V/V)有较强耐受性。此外,在20%(W/V)NaCl或100 mmol/L木糖溶液中Xyl4900的酶活性仍高于50%,表现出较好的盐和木糖耐受性。动力学参数分析显示,Xyl4900的K_(m)值、V_(max)值和木糖抑制常数K_(i)值分别为0.80 mmol/L、36.10 U/mg和150.12 mmol/L。特别地,Xyl4900能够很好地降解木二糖、木三糖。【结论】Xyl4900具有良好的pH稳定性、木糖及盐耐受性,能够较好地应用到半纤维素降解和其他工业生产中。

关键词： Leifsonia sp.ZF2019 GH3糖苷水解酶 β-木糖苷酶盐耐受性木糖耐受性

来源：

维普期刊数据库

同方期刊数据库评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

嗜热拟青霉木糖苷酶的性质及其与木聚糖酶的协同作用

引用

食品与发酵工业 2008年第7期34卷 12-16页

作者：江正强杨绍青朱会芳王岚中国农业大学食品科学与营养工程学院

嗜热拟青霉(Paecilomyces thermophila)J18利用玉米芯能产胞外木糖苷酶,通过(NH_4)_2SO_4沉淀、DEAE-52离子交换层析及Q-琼脂糖凝肢-FF(QSFF)离子交换层析从上清液纯化得到了电泳纯的木糖苷酶,纯化倍数为31.9倍,回收率为2.27%。SDS-PAG ... 详细信息

嗜热拟青霉(Paecilomyces thermophila)J18利用玉米芯能产胞外木糖苷酶,通过(NH_4)_2SO_4沉淀、DEAE-52离子交换层析及Q-琼脂糖凝肢-FF(QSFF)离子交换层析从上清液纯化得到了电泳纯的木糖苷酶,纯化倍数为31.9倍,回收率为2.27%。SDS-PAG E及Superdex-75凝胶过滤层析测定木糖苷酶的分子量分别为53.5 ku和51.8 ku。该酶最适温度及pH分别为55℃和pH 6.5。木糖苷酶能够水解木二糖和低聚木糖但不能水解木聚糖,水解低聚木糖的相对速率随聚合度增加而增加。该酶对木糖的抑制常数Ki值为139 mmol/L,具有很高的木糖耐受性。木糖苷酶与内源木聚糖酶一起水解木聚糖产生更多的还原糖,表现出协同作用。

关键词：嗜热拟青霉木糖苷酶木糖耐受性协同作用

来源：

维普期刊数据库

同方期刊数据库评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

真菌来源的木糖苷酶Xyl21和AX543的基因克隆、表达和酶学性质研究

真菌来源的木糖苷酶Xyl21和AX543的基因克隆、表达和酶学性质研究

引用

作者：张明慧天津科技大学

学位级别：硕士

木聚糖是一类异质多糖,主链是由β-1,4-糖苷键连接木糖单元而形成,其结构复杂,降解过程需要多种糖苷水解酶共同完成;其中,β-木糖苷酶和α-L-阿拉伯糖苷酶对木聚糖的完全降解是必不可少的,它们在生物技术领域尤其是在食品、生物转化、... 详细信息

木聚糖是一类异质多糖,主链是由β-1,4-糖苷键连接木糖单元而形成,其结构复杂,降解过程需要多种糖苷水解酶共同完成;其中,β-木糖苷酶和α-L-阿拉伯糖苷酶对木聚糖的完全降解是必不可少的,它们在生物技术领域尤其是在食品、生物转化、纸浆和造纸行业等行业都有着广泛的应用。本研究中枝顶孢属菌来源的木糖苷酶基因ax543序列全长为975bp,编码324个氨基酸和一个终止密码子,序列比对结果显示,与来源于Acremenium chrysogenum的木糖苷酶/阿拉伯呋喃糖苷酶类似蛋白的一致性为86%(无性质研究)。木糖苷酶基因ax543在毕赤酵母中成功表达,通过酶活测定及底物对接证实AX543具有木糖苷酶/阿拉伯呋喃糖苷酶双功能酶活性;经测定,木糖苷酶和阿拉伯呋喃糖苷酶AX543的比活分别为4.99 U/mg和1.16 U/mg,以pNPX/pNPAf分别为底物时的动力学常数Km,Vmax和Kcat分别为 5.94 mmol/L、3.53 μmol/min/mg、2.46 s-1 和 14.29 mmol/L、3.23μmol/min/mg、2.25 s-1;性质研究表明AX543的最适温度为25℃,在15℃,4℃和0℃,以pNPX为底物时的相对酶活分别为53.61%,20.57%和6.28%,以pNPAf为底物时的相对酶活较低分别为38.44%,14.04%,4.15%;说明AX543是一个低温的双功能酶,该酶的热稳定较差,50℃处理5 min后酶活全部丧失;AX543的最适pH为6.0,在pH5.5-7范围内,其木糖苷酶活性高于阿拉伯呋喃糖苷酶活性,pH稳定性结果显示,以pNPAf为底物时在pH5.0-9.0范围内较稳定;其底物特异性较广泛,能与Xyn11-1协同水解榉木木聚糖;通过木糖/阿拉伯糖耐受性测定,计算得到AX543的Ki值分别为 84.78 mmol/L 和 45.01 mmol/L。青霉菌来源的木糖苷酶基因xyl21的ORF由1506个核苷酸组成,编码301个氨基酸和一个终止密码子,序列比对结果显示,xyl21的核酸序列与来源于Alicyclobacillus ferrooxydans的GH39家族β-木糖苷酶氨基酸序列一致性为63%,说明Xy121-11是一个新颖的木糖苷酶基因。将木糖苷酶基因xyl21于大肠杆菌中成功诱导表达,其比活力为5.154 U/mg,Km值、Vmax和Kcat分别是1.71 mmol/L、17.6 μmol/***和19.04 s-1;纯化后的Xy121-11的最适pH为5.5,在pH5-6.5范围内,酶活都保持在80%以上。最适温度为45℃,热稳定性的结果表明,该酶在45℃处理1h后的剩余酶活为80%,但在50℃和55℃的热稳定性较差;在木糖耐受性上,Xyl21展现出了较好的优势,对木糖的抑制常数为1100 mmol/L;此外,通过水解产物分析实验发现Xyl21还能够水解聚糖底物,其底物特异性较为广泛。本研究中的低温双功能酶AX543与高木糖耐受性酶Xyl21与均具有实际应用的潜力。

关键词：木糖苷酶阿拉伯呋喃糖苷酶双功能酶低温酶基因克隆外源表达酶学性质木糖耐受性

来源：

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

欢迎您,

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

欢迎您,

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：