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曲古霉素对卵巢癌细胞体外增殖与凋亡能力的影响及其分子机制研究

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中国临床药理学杂志 2019年第17期35卷 1909-1911,1916页

作者：王小蓉程艳香彭晓蓉肖华谢丽芳湖北省公安县人民医院妇产科湖北荆州434300 湖北省公安县人民医院检验科湖北荆州434300 湖北省公安县人民医院肿瘤科湖北荆州434300 武汉大学人民医院妇科湖北武汉430060 荆州市第一人民医院肿瘤科湖北荆州434000

目的研究曲古霉素对卵巢癌细胞增殖、凋亡能力的影响及机制。方法将卵巢癌SKOV-3细胞分为空白组(生理盐水)、对照组(10μg·m L-1顺铂)和低、中、高剂量实验组(1.0,1.5,2.0μmol·L-1曲古霉素)。以噻唑蓝(MTT)检测细胞增殖情况,以Hoechs... 详细信息

目的研究曲古霉素对卵巢癌细胞增殖、凋亡能力的影响及机制。方法将卵巢癌SKOV-3细胞分为空白组(生理盐水)、对照组(10μg·m L-1顺铂)和低、中、高剂量实验组(1.0,1.5,2.0μmol·L-1曲古霉素)。以噻唑蓝(MTT)检测细胞增殖情况,以Hoechst 33258核染色法检测细胞凋亡,以JC-1染色法检测细胞线粒体膜电位(MMP),以蛋白质印迹法(WB)检测细胞凋亡相关蛋白的表达。结果空白组、对照组和低、中、高剂量实验组凋亡率分别为(1.26±0.35)%,(25.48±2.52)%,(22.65±2.67)%,(29.15±3.34)%,(58.25±3.93)%,MMP分别为1.00±0.00,0.72±0.15,0.80±0.05,0.62±0.07,0.51±0.05,Caspase-3蛋白相对表达量为1.46±0.25,0.48±0.06,1.32±0.16,0.85±0.11,0.35±0.09,p53蛋白相对表达量为1.58±0.33,0.63±0.21,1.46±0.29,1.05±0.16,0.58±0.14,Bax蛋白相对表达量为0.56±0.12,0.91±0.05,0.89±0.22,0.92±0.15,1.32±0.20,Bcl2蛋白相对表达量为0.93±0.14,0.46±0.02,0.71±0.05,0.62±0.03,0.56±0.04,差异均有统计学意义(均P曲古霉素可抑制卵巢癌细胞的增殖,通过调控凋亡通路相关蛋白及线粒体凋亡途径诱导癌细胞凋亡,且与干预剂量相关。

关键词：卵巢癌曲古霉素增殖凋亡线粒体膜电位

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曲古霉素调节肝细胞糖异生的机制研究

国际内分泌代谢杂志 2018年第2期38卷 84-88页

作者：史亚男穆标周晓丽闫丽辉左湘川袁继红天津医科大学代谢病医院内分泌研究所卫生部激素与发育重点实验室天津市代谢性疾病重点实验室300700 天津市疾病预防控制中心毒理科 300011 武汉市汉口医院内分泌科 430012

目的探讨组蛋白去乙酰化酶（HDAC）抑制剂曲古霉素参与调节肝细胞糖异生的机制。方法体外培养人肝细胞系HL7702，分为对照组（5txlDMSO）、胰岛素组（5ul DMSO＋100nmol／L胰岛素）、曲古霉素联合胰岛素组（2mol／L曲古霉素＋100nmol／... 详细信息

目的探讨组蛋白去乙酰化酶（HDAC）抑制剂曲古霉素参与调节肝细胞糖异生的机制。方法体外培养人肝细胞系HL7702，分为对照组（5txlDMSO）、胰岛素组（5ul DMSO＋100nmol／L胰岛素）、曲古霉素联合胰岛素组（2mol／L曲古霉素＋100nmol／L胰岛素）、地塞米松组（1mol／L地塞米松）、曲古霉素联合地塞米松组（2mol／L曲古霉素＋1mol／L地塞米松）。采用体外葡萄糖输出、Western印迹和实时荧光定量RT-PCR的方法检测肝细胞体外葡萄糖输出、胰岛素信号分子蛋白激酶B（Akt）、叉头转录因子01（Fox01）的磷酸化和磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶（PEPCK）、葡萄糖-6-磷酸酶（G6Pase）基因的表达。结果与对照组相比，胰岛素组葡萄糖输出降低（t=5．35，P〈0．01），而与胰岛素组相比，曲古霉素联合胰岛素组葡萄糖输出增加（t=-14．049，P〈0．01）；与对照组相比，地塞米松组葡萄糖输出升高（t=-2．782，P〈0．01），与地塞米松组相比，曲古霉素联合地塞米松组葡萄糖输出升高（t=-2．955，P〈0．05）。与对照组相比，胰岛素组磷酸化Akt酪氨酸308、磷酸化Akt丝氨酸473、磷酸化Fox01丝氨酸256蛋白水平均升高（t=-5．356、-5．004、-3．073，P均〈0．05），PEPCK和G6PasemRNA水平均降低（t=5．215、4．777，P均〈0．01）；与胰岛素组相比，曲古霉素联合胰岛素组磷酸化Akt酪氨酸308、磷酸化Akt丝氨酸473、磷酸化Fox01丝氨酸256蛋白水平均降低（t=22．152、26．759、3．907，P均〈0．01），PEPCK和G6PasemRNA水平均升高（t=-3．144、-2．819，P均〈0．05）。结论曲古霉素能够通过抑制Akt和Fox01磷酸化活性，促进糖异生调节基因的表达，进而促进肝细胞葡萄糖输出。

关键词：曲古霉素蛋白激酶B 叉头转录因子O1 糖异生

曲古霉素A和枸杞多糖联合应用对人食管癌Eca-109细胞凋亡的影响

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河南职工医学院学报 2011年第4期23卷 393-395页

作者：郝习汪晓凯河南职工医学院内科学教研室郑州451191 郑州大学护理学院生理学教研室郑州450052

目的探讨曲古霉素A(TSA)和枸杞多糖(LBP)联合应用对食管癌Eca-109细胞凋亡的影响。方法分别用二甲基亚砜(DMSO,对照组)、1.0μmol/L TSA、1.0μmol/L TSA+10 mg/L枸杞多糖处理Eca-109细胞48h,用Annexin V-FITC和PI双染色,流式细胞仪检测... 详细信息

目的探讨曲古霉素A(TSA)和枸杞多糖(LBP)联合应用对食管癌Eca-109细胞凋亡的影响。方法分别用二甲基亚砜(DMSO,对照组)、1.0μmol/L TSA、1.0μmol/L TSA+10 mg/L枸杞多糖处理Eca-109细胞48h,用Annexin V-FITC和PI双染色,流式细胞仪检测3组细胞的凋亡率,Western-Blot检测3组细胞中Bax以及Bcl-2表达的变化。结果对照组、1.0μmol/L TSA组、1.0μmol/L TSA+10 mg/L LBP组作用48h后,Eca-109细胞凋亡率分别为(2.16±0.27)%、(7.48±1.01)%、(16.34±1.18)%;Bax蛋白表达水平分别为(0.46±0.23)、(1.28±0.20)、(1.94±0.32);Bcl-2蛋白表达水平分别为(1.18±0.12)、(0.42±0.03)、(0.25±0.04)。3组间3个指标差异均有统计学意义(P曲古霉素A对食管癌细胞的凋亡作用。

关键词：曲古霉素枸杞多糖凋亡食管癌 Bax Bcl-2 Eca-109细胞

曲古霉素通过自噬途径对K7M2 wt细胞凋亡的影响

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重庆医学 2019年第14期48卷 2345-2348页

作者：汪瑜罗梅懿黄歆宋永丹陈维永四川省成都市第七人民医院/四川省成都市肿瘤医院 610041 四川省医学科学院·四川省人民医院成都610072

目的研究组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古霉素(TSA)对小鼠骨肉瘤K7M2wt细胞增殖的抑制作用,并从凋亡和自噬途径探究其作用机制。方法CCK-8法检测TSA对K7M2wt细胞增殖的影响;流式细胞术(FCM)检测K7M2wt细胞凋亡率;Western blot检测TSA对K7M2w... 详细信息

目的研究组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古霉素(TSA)对小鼠骨肉瘤K7M2wt细胞增殖的抑制作用,并从凋亡和自噬途径探究其作用机制。方法CCK-8法检测TSA对K7M2wt细胞增殖的影响;流式细胞术(FCM)检测K7M2wt细胞凋亡率;Western blot检测TSA对K7M2wt细胞凋亡和自噬相关蛋白表达的影响;用自噬抑制剂研究自噬对细胞凋亡的影响。结果CCK-8结果显示TSA对K7M2wt细胞增殖有显著抑制作用,且呈浓度和时间依赖性;FCM结果显示TSA能够诱导K7M2wt细胞凋亡;Western blot结果显示TSA能够上调促凋亡蛋白caspase-3和Bax表达,下调抗凋亡蛋白Bcl-2表达;同时上调自噬标志蛋白Beclin-1和LC3-Ⅱ的表达;自噬抑制剂能够增加TSA对K7M2wt细胞的凋亡作用。结论自噬参与了TSA诱导K7M2wt细胞凋亡的过程,且在该过程中对细胞起到保护作用。

关键词：曲古霉素细胞凋亡自噬骨肉瘤

曲古霉素A诱导人膀胱癌细胞周期阻滞和凋亡的研究

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现代生物医学进展 2010年第6期10卷 1100-1102页

作者：李尧林爱华徐丹枫第二军医大学长征医院泌尿外科上海200003 解放军总医院干休所北京100036

目的:探讨组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古霉素A(TSA)对人膀胱癌T24细胞周期和凋亡的影响。方法:以不同剂量TSA(0.1μM,0.3μM和1μM)处理T24细胞。采用MTT法检测细胞存活率,AnnexinV-PI染色检测细胞凋亡,流式细胞仪检测caspase-3活性,Weste... 详细信息

目的:探讨组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古霉素A(TSA)对人膀胱癌T24细胞周期和凋亡的影响。方法:以不同剂量TSA(0.1μM,0.3μM和1μM)处理T24细胞。采用MTT法检测细胞存活率,AnnexinV-PI染色检测细胞凋亡,流式细胞仪检测caspase-3活性,Western blot法检测P21蛋白表达。结果:TSA剂量依赖性降低膀胱癌细胞存活率,促进细胞凋亡,表现为AnnexinV阳性细胞明显增多,同时活化的caspase-3水平增高。TSA还可通过诱导膀胱癌细胞周期阻滞于G2/M期抑制细胞生长,且呈剂量依赖性。结论:TSA通过促进caspase-3激活诱导膀胱癌细胞凋亡,同时诱导细胞阻滞于G2/M期。

关键词：曲古霉素膀胱癌细胞细胞周期凋亡

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曲古霉素对HepG2肝癌细胞系增殖的影响

中华实验外科杂志 2008年第11期25卷 1533-1533页

作者：邹莉萍于皆平沈世强武汉大学人民医院消化科 430060 武汉大学人民医院普外科 430060

近年来研究表明组蛋白乙酰化和去乙酰化与肿瘤的发生密切相关，组蛋白的乙酰化状态对基因的调控起着重要作用，去乙酰化酶抑制剂可明显抑制肿瘤细胞的生长。本研究旨在观察组蛋白去乙酰化酶抑制剂-曲古菌素（TSA）在体外、体内对HepG2... 详细信息

近年来研究表明组蛋白乙酰化和去乙酰化与肿瘤的发生密切相关，组蛋白的乙酰化状态对基因的调控起着重要作用，去乙酰化酶抑制剂可明显抑制肿瘤细胞的生长。本研究旨在观察组蛋白去乙酰化酶抑制剂-曲古菌素（TSA）在体外、体内对HepG2肝癌细胞系增殖的影响。

关键词：细胞系增殖 HepG2 组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古霉素肝癌组蛋白乙酰化抑制肿瘤细胞

组蛋白脱乙酰基酶抑制剂曲古霉素对心肌细胞肥大的影响

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中国心血管杂志 2014年第1期19卷 32-36页

作者：许强吴晓君张玉霄陈瑞马晶中国人民解放军总医院老年心内科 100853 中国人民解放军空军总医院心内科

目的利用体外培养的大鼠乳鼠心肌细胞,研究曲古霉素(TSA)对血管紧张素II(Ang II)诱导的心肌细胞肥大的影响,并探讨相关机制。方法分离乳鼠心肌细胞进行原代培养,应用血管紧张素Ⅱ制备心肌细胞肥大模型。分别给予不同浓度的TSA预处理心... 详细信息

目的利用体外培养的大鼠乳鼠心肌细胞,研究曲古霉素(TSA)对血管紧张素II(Ang II)诱导的心肌细胞肥大的影响,并探讨相关机制。方法分离乳鼠心肌细胞进行原代培养,应用血管紧张素Ⅱ制备心肌细胞肥大模型。分别给予不同浓度的TSA预处理心肌细胞,观察TSA对心肌细胞面积、3H亮氨酸掺入率、心房利钠肽(ANP)、脑利钠肽(BNP)的mRNA表达水平的影响。同时通过检测乙酰化组蛋白3的蛋白表达水平,观察AngⅡ和TSA对组蛋白脱乙酰基酶(HDAC)活性的影响。应用Western blot检测AngⅡ和TSA处理后磷酸化的c-Jun氨基末端激酶(JNK)表达水平的变化。结果10-6mmol/L AngⅡ作用48 h后,心肌细胞面积增加至对照组的(1.63±0.46)倍(P<0.01),而10-7mmol/L和3×10-7mmol/L TSA预处理可以剂量依赖性的抑制AngⅡ引起的心肌细胞面积增大。TSA干预也阻断了AngⅡ引起的蛋白合成速率增加以及ANP和BNP的蛋白表达水平的增加(均为P<0.05)。AngⅡ刺激心肌细胞使乙酰化组蛋白3的蛋白表达水平降低,TSA可逆转这一效应。同时TSA抑制了AngⅡ介导的磷酸化JNK表达水平的升高。结论 TSA可显著抑制AngⅡ诱导的心肌细胞肥大和HDAC活性增加,可能通过抑制JNK的激活而发挥抑制心室肥厚的作用。

关键词：心力衰竭组蛋白脱乙酰基酶抑制剂组蛋白脱乙酰基酶曲古霉素

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HPLC分离曲古霉素A～F

世界临床药物 1990年第6期 380-381页

作者：文向阳

曲古霉素一直被认为只是曲古霉素A、B二个组分的混合物。1980年利用HPLC测定,混合物中含有10种以上成份,1986年利用TLC检出含有10种成份,利用HPLC检出含有16种成份,然而这些方法都不适合于进行制备。本文报道用HPLC检出含有多于17种十... 详细信息

曲古霉素一直被认为只是曲古霉素A、B二个组分的混合物。1980年利用HPLC测定,混合物中含有10种以上成份,1986年利用TLC检出含有10种成份,利用HPLC检出含有16种成份,然而这些方法都不适合于进行制备。本文报道用HPLC检出含有多于17种十分相近的化合物,并能将这种复合物分离成曲古霉素A～F6种成份,它们在总曲古霉素中占65～75%。

关键词：曲古霉素抗真菌药 HPLC FLC

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曲古霉素A抑制膀胱癌移植瘤的研究

中华实验外科杂志 2007年第8期24卷 944-944页

作者：曲巍王立明朱有华孙伟第二军医大学附属长征医院肾移植科上海200003 第二军医大学实验动物中心

我们以T24细胞株建立膀胱癌的裸鼠皮下移植瘤摸型，观察曲古霉素A（TSA）的抑瘤作用，初步探讨其作用机制。

关键词：裸鼠皮下移植瘤曲古霉素膀胱癌 T24细胞株抑瘤作用