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普通针毛蕨配子体发育的研究

植物研究 2006年第1期26卷 70-73页

作者：张开梅石雷李东中国科学院植物研究所

采用混合土培养普通针毛蕨（Macrothelypteris torresiana （Gaud．） Ching）孢子，显微镜下观察记录其孢子萌发及配子体发育过程。结果表明：孢子褐色，赤道面观为半圆形，极面观椭圆形，单裂缝。播种3d左右孢子萌发，萌发类型为书带... 详细信息

采用混合土培养普通针毛蕨（Macrothelypteris torresiana （Gaud．） Ching）孢子，显微镜下观察记录其孢子萌发及配子体发育过程。结果表明：孢子褐色，赤道面观为半圆形，极面观椭圆形，单裂缝。播种3d左右孢子萌发，萌发类型为书带蕨型，配子体发育为槲蕨型。播种7d左右发育为片状体，丝状体与片状体两阶段的界限不明显。原叶体边缘及背腹面均可产生毛状体。播种21d左右发育形成幼原叶体，成熟原叶体呈心脏形。播种35d左右开始有性器官出现，精子器近圆球形，由3个细胞组成，成熟颈卵器颈部由4列细胞组成，4～5层细胞高。原叶体受精后1个月内即可观察到从原叶体上生成的幼胚。

关键词：普通针毛蕨孢子萌发配子体发育

普通针毛蕨中原芹菜素与其糖苷对PDK-1/AKT途径的拮抗效应

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中国医院药学杂志 2019年第21期39卷 2147-2151页

作者：韩盼金灿曹爽张慧宏赖永继刘子维华中科技大学同济医学院附属武汉中心医院药学部湖北武汉430014 武汉工程大学化工与制药学院湖北武汉430502

目的:揭示原芹菜素与其糖苷之间的拮抗作用,并在分子水平上阐明这两个化合物对于PDK-1介导的AKT磷酸化的拮抗作用。方法:首先建立普通针毛蕨的HPLC指纹图谱,并确定目标化合物含量。而后通过免疫印迹实验,采用组合模式给药,证实了这两个... 详细信息

目的:揭示原芹菜素与其糖苷之间的拮抗作用,并在分子水平上阐明这两个化合物对于PDK-1介导的AKT磷酸化的拮抗作用。方法:首先建立普通针毛蕨的HPLC指纹图谱,并确定目标化合物含量。而后通过免疫印迹实验,采用组合模式给药,证实了这两个化合物对于PDK-1介导的AKT磷酸化的拮抗作用。再后通过CETSA实验进一步证实了这两个化合物对PDK-1蛋白的竞争性结合行为,最后采用分子对接给予这种拮抗作用图像化的解释。结果:普通针毛蕨提取物中原芹菜素和原芹菜素葡萄糖苷的摩尔浓度分布为1.249μmol·L^-1和0.928μmol·L^-1。在该浓度下原芹菜素的抗肿瘤增殖效果可以被原芹菜素葡萄糖苷所抑制,且原芹菜素所介导的PDK-1下调也可以被原芹菜素葡萄糖苷所拮抗。同时CETSA实验进一步证实了这个两个化合物与PDK-1的竞争性结合。结论:本研究揭示了一个原芹菜素的拮抗因素,并为原芹菜素葡萄糖苷含量控制提供了依据。

关键词：原芹菜素 PDK-1 普通针毛蕨拮抗效应

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普通针毛蕨质量标准的研究

时珍国医国药 2011年第10期22卷 2327-2329页

作者：黄晓华蔡亚玲熊朝梅汪建平阮金兰华中科技大学同济药学院湖北省天然药物化学与资源评价重点实验室湖北武汉430030

目的研究普通针毛蕨的质量标准。方法运用显微鉴定、薄层色谱、紫外可见分光光度法、高效液相色谱等技术对普通针毛蕨进行研究,对其水分、总灰分、酸不溶灰分、总黄酮、原芹菜素含量进行测定。结果参照《中国药典》2005年版(Ⅰ部),普通... 详细信息

目的研究普通针毛蕨的质量标准。方法运用显微鉴定、薄层色谱、紫外可见分光光度法、高效液相色谱等技术对普通针毛蕨进行研究,对其水分、总灰分、酸不溶灰分、总黄酮、原芹菜素含量进行测定。结果参照《中国药典》2005年版(Ⅰ部),普通针毛蕨生药中水分不得超过15.00%,总灰分不得超过8.31%,酸不溶性灰分不得超过3.90%,t检验显示,上述指标,因产地不同,无显著性差异(P>0.05);生药中原芹菜素的含量不得低于0.71%,总黄酮含量不得低于28.21%。因药材产地不同,其总黄酮、原芹菜素含量有显著性差异(0.01普通针毛蕨药材的质量标准提供了依据,方法简单易行。

关键词：普通针毛蕨质量标准黄酮类化合物

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普通针毛蕨配子体发育和卵发生的细胞学研究

普通针毛蕨配子体发育和卵发生的细胞学研究

作者：张剑锋上海师范大学

学位级别：硕士

蕨类植物的配子体发育和卵发生研究是有性生殖研究的重要部分,不同系统演化地位的蕨类植物有性生殖存在着显著的差别。在Smith系统真水龙骨目中,真水龙骨Ⅱ类蕨类植物的有性生殖尚未见报道。因此,本论文选用真水龙骨Ⅱ类金星蕨科的普通... 详细信息

蕨类植物的配子体发育和卵发生研究是有性生殖研究的重要部分,不同系统演化地位的蕨类植物有性生殖存在着显著的差别。在Smith系统真水龙骨目中,真水龙骨Ⅱ类蕨类植物的有性生殖尚未见报道。因此,本论文选用真水龙骨Ⅱ类金星蕨科的普通针毛蕨(Macrothelypteris torresiana)为材料,利用显微观察法、超微结构观察和组织化学方法对其进行配子体发育和卵发生研究,对完善蕨类生殖生物学和探讨蕨类植物有性生殖的演化具有重要科学意义。本文的主要结果如下:1.普通针毛蕨配子体的发育经历了孢子萌发、丝状体、片状体、原叶体等阶段。孢子萌发为书带蕨型,片状体为铲形;配子体呈心形,具单细胞棒状毛状体,接种35d左右在雌配子体生长点下方产生颈卵器,具四列颈壁细胞,呈圆柱状。配子体发育类型为槲蕨型。2.光镜观察表明,普通针毛蕨颈卵器产生于生长点下方的表面细胞,该细胞经两次分裂形成了顶细胞、初生细胞和基细胞。其中初生细胞再经过两次不等分裂产生卵细胞、腹沟细胞和颈沟细胞,这三个细胞紧密相连,随着发育,颈沟细胞和腹沟细胞逐渐退化,卵细胞周围形成分离腔。3.普通针毛蕨卵发生的超微结构研究表明,卵细胞刚产生时,卵细胞与腹沟细胞、颈沟细胞之间通过胞间连丝紧密相连,卵细胞中内质网、线粒体、高尔基体发达,质体内富含淀粉粒。发育早期,卵细胞和腹沟细胞之间逐渐形成分离腔,而在卵细胞上表面偏中央处,卵细胞与腹沟细胞仍然相连,此处连接区域为孔区,孔区处胞间连丝发达。随着卵细胞继续发育,卵细胞上表面有不定型物质堆积,卵膜逐渐形成。而腹沟细胞可能存在一定的自噬作用,通过孔区将卵细胞内的物质吸入腹沟细胞或者分离腔内,使得孔区上方无法形成卵膜,导致产生受精孔。发育卵后期,卵细胞中线粒体发达,细胞核产生大量核外突。随着卵细胞的发育,腹沟细胞和颈沟细胞逐渐退化,最终完全退化消失。4.普通针毛蕨卵发生组织化学研究表明,沟细胞外产生的粘性物质呈PAS反应阳性,表明这些物质为多糖类物质;卵膜亦呈PAS反应阳性,应含有多糖类物质;在卵细胞发生早期细胞内均含有造粉体,但随着发育卵细胞和沟细胞内淀粉粒数量逐渐减少,最后退化消失。本研究首次阐明了普通针毛蕨颈卵器和卵细胞发生的详细过程和细胞学变化,这些研究表明普通针毛蕨卵细胞发生经历了新卵、发育卵、成熟卵等过程,卵细胞外产生卵膜,在卵细胞上表面卵膜中央产生受精孔。这些特征表明普通针毛蕨卵发生属于进化类型,对揭示蕨类植物系统演化具有价值,也为阐明蕨类有性生殖的机制奠定了基础。

关键词：蕨类植物普通针毛蕨配子体发育卵发生

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普通针毛蕨地下部位化学成分研究

普通针毛蕨地下部位化学成分研究

作者：汤莹华中科技大学

学位级别：硕士

普通针毛蕨为少常用草药,历代本草均未见收载,民间也没有其药用价值的报道。但是近年来,有研究学者发现该植物中含有具抗肿瘤活性的成分原芹菜素(protoapigenone)并对此成分进行化学合成和结构修饰研究。由于普通针毛蕨的抗肿瘤活性很... 详细信息

普通针毛蕨为少常用草药,历代本草均未见收载,民间也没有其药用价值的报道。但是近年来,有研究学者发现该植物中含有具抗肿瘤活性的成分原芹菜素(protoapigenone)并对此成分进行化学合成和结构修饰研究。由于普通针毛蕨的抗肿瘤活性很可能与其中所含的特殊B环黄酮化合物的结构有关,所以我们希望在本植物中继续寻找有此类似结构的新化合物。为了进一步开发普通针毛蕨抗肿瘤有效成分,我们对普通针毛蕨的地下部分进行了广泛的化学成分研究,并进行初步的药理活性研究。从普通针毛蕨地下部分的甲醇提取物中,通过硅胶、聚酰胺、SephadexLH-20、ODS反相硅胶柱等色谱技术,分离得到了11个化合物。综合运用紫外光谱(UV)、红外光谱(IR)、质谱(MS)、X-ray及核磁共振光谱(1H NMR、13C NMR、HSQC、HMBC)现代波谱学技术和化学方法,鉴定这些化合物并对其进行归属:1:β-谷甾醇;2:β-谷甾醇-3-0-β-D-葡萄糖苷-6′-二十烷酸酯;3:5,7-二羟基-2-(1,2-异丙二氧基-4-酮-环己-5-烯)-色原酮;4:原芹菜素;5:2-(顺-1,2-二羟基-4酮-环己-5-烯)-5,7-二羟基-色原酮;6:5,7-二羟基-2-(1-羟基-2,6-二甲氧基-4-酮-环己烷)-色原酮;7:胡萝卜苷;8:2-(反-1,4-二羟基环己烷)-5,7-二羟基-色原酮;9:5,7-二羟基-2-(1,4-二羟基-环己-2,5-二烯)-色原酮;10:芹菜素4′-O-β-D-葡萄糖苷;11:5,7-二羟基-2-(1,4-二羟基-环己-2,5-二烯)-色原酮-4′-O-β-D-葡萄糖。其中化合物3和6为新化合物。运用MTT法对普通针毛蕨中所分离得到的单体化合物进行体外细胞毒性筛选表明,新化合物3和6对Hep G2肿瘤细胞的增殖均有一定的抑制作用,且有统计学差异,其细胞毒作用呈现一定程度的剂量依赖性。从图表中可以计算得出,化合物3对Hep G2肿瘤细胞作用48 h的IC50值为48.65μg/mL,化合物6对Hep G2肿瘤细胞作用48 h的IC50值为66.53μg/mL,均大于文献报道的原芹菜素的IC50值。本文还对国内外有关药用蕨类植物研究作一综述,为蕨类植物化学成分研究和资源开发综合利用提供参考。

关键词：蕨类植物普通针毛蕨化学成分黄酮类化合物抗肿瘤 MTT

正交试验法优选普通针毛蕨地上部位总黄酮提取纯化工艺

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中国医院药学杂志 2010年第23期30卷 1969-1972页

作者：陈镜楼刘瑜洁阮金兰蔡亚玲华中科技大学同济药学院湖北省天然药物化学与资源评价重点实验室湖北武汉430030

目的:优选普通针毛蕨地上部位总黄酮提取和纯化工艺条件。方法:以总黄酮提取率为考查指标,液料比、提取次数、提取时间、乙醇浓度为考察因素,选用L9(34)表对提取工艺进行正交试验。以总黄酮提取率、总黄酮纯度和主要活性成分原芹菜素(pr... 详细信息

目的:优选普通针毛蕨地上部位总黄酮提取和纯化工艺条件。方法:以总黄酮提取率为考查指标,液料比、提取次数、提取时间、乙醇浓度为考察因素,选用L9(34)表对提取工艺进行正交试验。以总黄酮提取率、总黄酮纯度和主要活性成分原芹菜素(protoapigenone)物质为考查指标,用高效液相色谱法测定原芹菜素含量,以加碱水量,加碱水次数,碱水pH值,加酸后pH为影响因素,选用L9(34)表对纯化工艺进行正交试验。结果:普通针毛蕨总黄酮提取最佳工艺为20倍量75%乙醇提取3次,每次1.5h。纯化条件为药材醇提浸膏加2倍量pH9的氢氧化钠溶液,提取2次,提取液用浓盐酸调节为pH1。结论:优选工艺获得的总黄酮提取率,纯度和原芹菜素含量较高。本方法合理,便于生产。

关键词：正交设计普通针毛蕨总黄酮