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利用激光显微切割技术提取高质量RNA

中华病理学杂志 2005年第10期34卷 680-682页

作者：陈凌付丽天津医科大学附属肿瘤医院乳腺病理研究室教育部乳腺癌重点实验室300060

RNA的提取是许多实验研究的第一步,也是一个非常重要的环节.而获得高质量的RNA,又是后续实验进展顺利及结果可靠的有力保障.在以往对肿瘤的研究中我们大多以整块组织为研究对象,但众所周知肿瘤组织中不仅含有肿瘤成分还有间质细胞、炎... 详细信息

RNA的提取是许多实验研究的第一步,也是一个非常重要的环节.而获得高质量的RNA,又是后续实验进展顺利及结果可靠的有力保障.在以往对肿瘤的研究中我们大多以整块组织为研究对象,但众所周知肿瘤组织中不仅含有肿瘤成分还有间质细胞、炎细胞等成分;有些肿瘤组织还具有异质性的特点,即包含了肿瘤进展不同阶段的病变.这些都造成提取出的RNA不"纯",从而导致研究结果出现一定的偏差.还有些研究以培养的肿瘤细胞为实验材料,虽然部分地解决了细胞单一性的问题,但是细胞在培养过程中是否存在某些附加的突变从而影响实验结果却是值得考虑的.因此如何获取纯净的、高质量的RNA成为亟待解决的问题.1996年美国国立癌症研究所开发出了激光捕获显微切割(laser capture microdissection,LCM)技术[1].这是一项在显微镜下从组织切片中分离单一类型细胞群或单个细胞的技术.该技术成功地解决了组织中的细胞异质性问题,是肿瘤学及分子病理学研究的一项革命性技术。

关键词： RNA 显微切割技术质量提取培养的肿瘤细胞肿瘤组织激光间质细胞实验研研究对象

组织切片显微切割技术及其在肿瘤研究中的应用

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中华病理学杂志 2000年第2期29卷 136-139页

作者：钱洪流厦门大学医学院病理学教研室 361005

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激光显微切割技术在甲基化水平检测中的应用

中国实验诊断学 2011年第8期15卷 1396-1397页

作者：杨明王丽萍茅淑砚吕静静蒲春雪王悦增吉林大学第一医院乳腺外科吉林长春130021 吉林大学中日联谊医院病理科吉林大学病理生物学教育部重点实验室

睾丸特异性蛋白质50 TSP50是利用甲基化敏感差分析技术（MS-RDA技术）从睾丸和乳腺癌组织中分离出来的低甲基化片段。其表达的TSP50蛋白质与丝氨酸蛋白酶具有同原性。通过免疫组织化学技术证明了TSP50的产物特异性表达在乳腺癌中,而正... 详细信息

睾丸特异性蛋白质50 TSP50是利用甲基化敏感差分析技术（MS-RDA技术）从睾丸和乳腺癌组织中分离出来的低甲基化片段。其表达的TSP50蛋白质与丝氨酸蛋白酶具有同原性。通过免疫组织化学技术证明了TSP50的产物特异性表达在乳腺癌中,而正常乳腺组织中则不表达。

关键词：低甲基化显微切割技术水平检测免疫组织化学技术特异性蛋白质乳腺癌组织应用激光

激光捕获显微切割技术在分子生物学研究中的应用

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广东医学 2009年第10期30卷 1574-1576页

作者：马军亮刘伦旭四川大学华西医院胸心外科成都610041

实体组织是由形态和功能不同的细胞组成,对整个组织样本的分析结果通常是由占主要或占主导地位的细胞类型所决定,掩盖了数量有限的或某一特定类型的细胞有关的重要生物学变化。实现对组织目标分子细胞学分析和(或)表型确定的细胞进行分... 详细信息

实体组织是由形态和功能不同的细胞组成,对整个组织样本的分析结果通常是由占主要或占主导地位的细胞类型所决定,掩盖了数量有限的或某一特定类型的细胞有关的重要生物学变化。实现对组织目标分子细胞学分析和(或)表型确定的细胞进行分析,要求快速、高效、准确地获得特定群体的细胞以作进一步研究。手工进行组织显微切割的方法缓慢、繁琐、需要相当的灵活性,技术往往难以掌握,而且标本容易受到污染。切割的样品通常只能用于有限的类型分析。1996年,美国国立卫生院(NIH)国家肿瘤研究所的Emmert-Buck等开发出激光捕获显微切割技术(laser capture microdissection,LCM)。应用该技术可以在显微镜直视下快速、准确获取所需的单一细胞亚群,甚至单个细胞,从而成功解决了组织中细胞异质性问题。[第一段]

关键词：显微切割技术分子生物学激光捕获美国国立卫生院细胞组成实体组织细胞学分析显微镜直视

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染色体显微切割技术

生物学通报 1998年第11期33卷 38-40页

作者：李一琨广州中山大学生命科学院

最近十几年里，在对染色体特定基因研究和分子标记遗传图谱等研究方面，以经典的遗传作图为基础，出现了很多新方法，微切及微克隆技术（ＣｈｒｏｍｏｓｏｍｅＭｉｃｒｏｄｉｓｓｅｃｔｉｏｎａｎｄＭｉ－ｃｒｏｃｌｏｎｇ）是随着近１... 详细信息

最近十几年里，在对染色体特定基因研究和分子标记遗传图谱等研究方面，以经典的遗传作图为基础，出现了很多新方法，微切及微克隆技术（ＣｈｒｏｍｏｓｏｍｅＭｉｃｒｏｄｉｓｓｅｃｔｉｏｎａｎｄＭｉ－ｃｒｏｃｌｏｎｇ）是随着近１０年来分子生物学技术的发展而诞生的...

关键词：染色体显微切割技术微克隆技术材料

激光捕获显微切割技术纯化的鼻咽癌癌细胞和间质细胞的比较蛋白质组学研究

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中国组织化学与细胞化学杂志 2009年第4期18卷 473-474页

作者：李美香谢远杰石金凤张晓红赵国军黄欣琼刘月顺龙治峰南华大学医学院组织学与胚胎学教研室湖南衡阳421001

显微切割技术在原发性皮肤B细胞淋巴瘤诊断中的应用

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中华肿瘤杂志 2001年第2期23卷 141-141页

作者：苏文王跃华 Jo Spencer 山西肿瘤研究所血液学研究室太原030013 英国St Thomas医院组织病理科

原发性皮肤B细胞淋巴瘤（PCBCL）局部病变通常只作手术切除或局部放疗,因此，为避免不必要的联合化疗，PCBCL的确诊十分重要。我们采用显微切割技术，在免疫组化的基础上直接分离出肿瘤细胞，再进行IgH基因重排分析，以探讨显微切割技... 详细信息

原发性皮肤B细胞淋巴瘤（PCBCL）局部病变通常只作手术切除或局部放疗,因此，为避免不必要的联合化疗，PCBCL的确诊十分重要。我们采用显微切割技术，在免疫组化的基础上直接分离出肿瘤细胞，再进行IgH基因重排分析，以探讨显微切割技术在原发性皮肤淋巴瘤诊断中的应用价值。

关键词：原发性皮肤B细胞淋巴瘤淋巴瘤诊断显微切割技术

霍奇金淋巴瘤IκBα基因第5外显子突变初步分析

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中华病理学杂志 2005年第6期34卷 341-344页

作者：刘晓健杨文涛周晓燕严青施达仁复旦大学附属肿瘤医院分子病理研究室上海200032

目的分析单个霍奇金淋巴瘤细胞IκBα基因第5外显子的碱基序列,探讨IκBα基因突变与霍奇金淋巴瘤的关系。方法用免疫组织化学EnVision法检测7例霍奇金淋巴瘤CD30抗原,采用激光显微切割技术捕获CD30阳性表达的单个霍奇金淋巴瘤细胞和其... 详细信息

目的分析单个霍奇金淋巴瘤细胞IκBα基因第5外显子的碱基序列,探讨IκBα基因突变与霍奇金淋巴瘤的关系。方法用免疫组织化学EnVision法检测7例霍奇金淋巴瘤CD30抗原,采用激光显微切割技术捕获CD30阳性表达的单个霍奇金淋巴瘤细胞和其周围反应性增生的淋巴细胞,以这些标本的基因组DNA为模板,用半巢式聚合酶链反应(PCR)方法扩增IκBα基因的第5外显子,PCR产物经纯化后直接测序。结果分析测序图发现3例霍奇金淋巴瘤细胞IκBα第5外显子出现点突变,均形成TGA终止密码子。结论霍奇金淋巴瘤中IκBα基因第5外显子出现点突变,可能是霍奇金淋巴瘤恶性转化过程中除EB病毒感染外另一重要分子机制。

关键词：霍奇金淋巴瘤 IκBα基因外显子突变聚合酶链反应(PCR) EnVision法第5外显子淋巴瘤细胞初步 CD30抗原免疫组织化学显微切割技术基因组DNA EB病毒感染 α基因突变反应性增生 PCR产物终止密码子碱基序列淋巴细胞

人巨细胞病毒包涵体——病毒核酸和特异阶段表达抗原的产物

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中华实验和临床病毒学杂志 2003年第3期17卷 262-265页

作者：闫庆国黄高昇郭英王哲冯骥良杨国嵘第四军医大学西京医院病理科西安710032

目的　探讨人巨细胞病毒包涵体的组成及意义。方法　采用显微切割技术结合PCR和Southern杂交及免疫组织化学的催化信号扩增法 ,检测人巨细胞病毒的核酸和 3种不同阶段表达的抗原。结果　通过液压显微切割系统将组织中巨细胞病毒包涵体... 详细信息

目的　探讨人巨细胞病毒包涵体的组成及意义。方法　采用显微切割技术结合PCR和Southern杂交及免疫组织化学的催化信号扩增法 ,检测人巨细胞病毒的核酸和 3种不同阶段表达的抗原。结果　通过液压显微切割系统将组织中巨细胞病毒包涵体游离出来 ,PCR扩增出预期长度的DNA片段 ,Southern杂交证实为HCMV的核酸片段 ,催化信号扩增法检测结果显示包涵体主要表达立即早期和早期抗原DDG9/CCH2 ,而基质蛋白AAC10则为阴性。

关键词：巨细胞病毒包涵体毒核酸特异阶段抗原显微切割技术 PCR Southern杂交免疫组织化学