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高毒力肺炎克雷伯菌临床感染特征及质谱同源性分析

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中华预防医学杂志 2021年第8期55卷 945-951页

作者：李晓杰王庆亮冯俊超关小玲陈芝菊胡波中山大学附属第三医院检验科广州510630 中山大学附属第三医院普通外科广州510630 贵州医科大学医学检验学院贵阳550000

目的从敏感和多重耐药的肺炎克雷伯菌中筛选出hvKP表型株,对比探讨其临床感染特征的分布和同源性。方法回顾性收集2014至2018年中山大学附属第三医院临床感染标本所分离的敏感和多重耐药的肺炎克雷伯菌共158株,通过黏液拉丝试验(string ... 详细信息

目的从敏感和多重耐药的肺炎克雷伯菌中筛选出hvKP表型株,对比探讨其临床感染特征的分布和同源性。方法回顾性收集2014至2018年中山大学附属第三医院临床感染标本所分离的敏感和多重耐药的肺炎克雷伯菌共158株,通过黏液拉丝试验(string test,ST)初筛hvKP感染情况,共筛选到65例患者,男性51例,女性14例,平均年龄56岁。构成比分析其临床感染相关信息,基质辅助激光解析电离飞行时间质谱技术(MALDI-TOF MS)对筛选出的hvKP进行种属鉴定及建立新数据库,利用分析软件对所有符合实验条件的菌株进行生物树聚类分析和主成分分析,获得蛋白水平的同源性。结果根据ST试验,158株肺炎克雷伯菌株中,65例患者共筛选到hvKP 65株,其中62株为全敏感菌株,3株为多重耐药菌株,感染者入院主要疾病诊断集中在肝胆疾病、脑病及肝脓肿;人群基础病主要为糖尿病与高血压。聚类分析将hvKP在距离水平线550处分为3群;主成分分析发现部分菌株具有较近亲缘关系,其中占比最大的Kc群主要与肝胆管疾病有关。Ka群主要与手术后感染有关。结论hvKP具有高侵袭力,临床感染表现多样,感染病患多为免疫力低下老年患者。MALDI-TOF MS质谱快速同源性分析对hvKP感染快速筛查具有重要临床意义。

关键词：肺炎克雷伯菌时间飞行质谱同源性

Sequenom质谱法分析细胞毒性T淋巴细胞相关分子4基因多态性与宫颈癌易感性的关系

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中华医学遗传学杂志 2011年第3期28卷 313-317页

作者：蒋丽洛若愚张蔚王丽荣王芳程艳香武汉大学人民医院妇产科 430060

目的探索细胞毒性T淋巴细胞相关分子4（cytotoxic T-lymphocyte-associated protein4，CTLA4）基因单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphism，SNPs）与宫颈癌易感性的关系。方法应用sequenomMassARRAY时间飞行质谱系统对100例宫颈癌及100名健康对照者CTLA4基因20个多态位点（CTLA4—1-CTLA4—20）进行基因型分型，统计分析基因型频率和肿瘤易感性的关系。结果与正常人群中最常见的CTLA4基因单倍型-1576A、-318C和1402G相比，带有单倍型-1576G、-318T或1402A的个体均显著增加宫颈癌的风险（P〈0．05），相对风险度的比值比及其95％可信区间分别为2．87（1．75～4．76），4．02（1．72～9．09）和4．51（1．46～13．88）．而其余基因型与宫颈癌发病风险没有显著的相关性；其中rs5742909易感位点与先前的报道相一致。而双荧光素酶报告基因实验进一步证明，位于基因启动子区域的rs11571316多态位点能显著影响报告基因的表达活性。结论CTLA4基因启动子区域的SNP可能通过影响CTLA4基因的表达水平来影响个体对宫颈癌的易感性。

关键词：宫颈癌单核苷酸多态性时间飞行质谱

基于MassARRAY多重PCR-MS的登革病毒分型检测

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中国国境卫生检疫杂志 2022年第5期45卷 342-346页

作者：李颖江丽刘莹莹曹晓梅中国检验检疫科学研究院卫检所北京100176 中国检验检疫科学研究院(综合检测中心) 北京100176

目的建立一种基于MassARRAY技术的覆盖登革病毒4个血清型的多重PCR-MS检测方法,用于登革病毒分型及溯源。方法根据从NCBI网站获取的Ⅰ~Ⅳ型登革病毒全基因组序列设计9对引物,并引入伊蚊28S rRNA和人RNaseP基因的引物用于登革病毒溯源及... 详细信息

目的建立一种基于MassARRAY技术的覆盖登革病毒4个血清型的多重PCR-MS检测方法,用于登革病毒分型及溯源。方法根据从NCBI网站获取的Ⅰ~Ⅳ型登革病毒全基因组序列设计9对引物,并引入伊蚊28S rRNA和人RNaseP基因的引物用于登革病毒溯源及质控。用该方法检测11份已知血清型的不同稀释度登革病毒阳性样本,评估方法的特异性、灵敏度。结果11份登革病毒样本经本方法检测全部为阳性,分型结果均与预期一致;各型引物组合未见交叉反应或交错检出。灵敏度应与荧光定量PCR方法相当。结论本研究建立的多重PCR-MS登革病毒分型检测方法具有高度特异性、灵敏度、高通量等优势,可用于登革病毒的快速检测、分型和样本溯源。

关键词：时间飞行质谱质谱登革病毒分型

上海市医学会检验医学分会第二届质谱学组成立

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检验医学 2019年第6期34卷 572-572页

作者：上海市医学会检验医学分会质谱学组上海市医学会检验医学分会质谱学组

上海市医学会检验医学分会第二届质谱学组于2019年5月16日下午在上海市临床检验中心1208会议室召开。由学组副组长、上海市精神卫生中心检验科主任林萍教授主持。上海市临床检验中心主任王华梁教授致辞,他表示质谱技术作为分析技术已经... 详细信息

上海市医学会检验医学分会第二届质谱学组于2019年5月16日下午在上海市临床检验中心1208会议室召开。由学组副组长、上海市精神卫生中心检验科主任林萍教授主持。上海市临床检验中心主任王华梁教授致辞,他表示质谱技术作为分析技术已经在其他领域使用很久,近几年才开始逐渐运用到临床检验中,但是发展非常迅速,特别是用于微生物鉴定的时间飞行质谱。

关键词：临床检验上海市质谱学医学会学分组成精神卫生中心时间飞行质谱

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血清差异表达多肽谱用于人卵巢癌诊断的研究

南京医科大学学报（自然科学版） 2012年第7期32卷 1029-1032页

作者：仇志琴黄玉政陶永辉张英虞丰南京医科大学附属无锡第二人民医院妇产科江苏无锡214002 江苏省血吸虫病防治研究所卫生部重点实验室江苏无锡214064

目的:建立卵巢癌患者血清差异表达多肽谱,并探讨其潜在诊断价值。方法:应用磁珠富集多肽结合基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry,MALDI-TOF-MS)检测方法,筛选上皮性卵巢癌组和健康对照组差异表达多肽峰,利用ClinProTools软件比较两组血清多肽表达差异并建立差异表达多肽谱及早期诊断模型。结果:在卵巢癌组血清中,m/z 2 662.02、2 653.68、5 859.21、5 901.69、5 937.06表达显著上调;m/z 1 857.82、2 074.28、2 856.33表达显著下调。差异表达图谱建立的诊断模型预测早期卵巢癌的准确率达到81.8%(9/11),利用9例宫颈癌血清验证均为阴性,特异性达100%(0/9)。结论:磁珠富集-质谱结合ClinProTools生物信息学分析技术,有望成为新的人卵巢癌辅助诊断技术。

关键词：卵巢癌磁珠富集时间飞行质谱血清多肽

激素处理对小鼠植入前胚胎发育及胚胎冷冻解冻效果的影响

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激素处理对小鼠植入前胚胎发育及胚胎冷冻解冻效果的影响

作者：归婧广西大学

学位级别：硕士

小鼠是胚胎工程研究中常用的动物之一,同时,小鼠还是基因功能和人类疾病研究常用的模型动物。为了进一步拓展研究领域,同时为家畜育种提供一个可资参考的技术体系,建立高效的小鼠胚胎操作平台是本实验室近期的主要目标之一。本试验通过... 详细信息

小鼠是胚胎工程研究中常用的动物之一,同时,小鼠还是基因功能和人类疾病研究常用的模型动物。为了进一步拓展研究领域,同时为家畜育种提供一个可资参考的技术体系,建立高效的小鼠胚胎操作平台是本实验室近期的主要目标之一。本试验通过对小鼠腹腔注射不同剂量超排激素（5IU PMSG+5IU HCG和10IU PMSG+10IU HCG）,观察了对小鼠植入前胚胎发育、胚胎冷冻解冻效果及卵巢组织和血清中蛋白成分变化的影响,这些数据的积累能为本实验室建立高效的小鼠胚胎操作平台奠定基础。实验首先筛选了最适合昆白小鼠胚胎发育的培养液。小鼠胚胎分别培养在KSOM.M16、CZB三种培养液中,4天之后观察囊胚率,各组之间差异显著（分别为75.94%、46.07%、63.93%,P＜0.05）,KSOM发育率明显高于其他两组。因此随后的实验均采用KSOM作为培养液。其次在含有不同浓度的牛磺酸（0mM、2.5mM、5mM、10mM、50mM）的KSOM中培养小鼠胚胎,4天后观察囊胚率,各处理组差异并不显著（分别为75.76%、77.45%、73、56%、73.06%、71.78%,P＞0.05）,因此以后的KSOM中不添加牛磺酸。最后使用不同浓度激素（5IU PMSG+5IU HCG和10IUPMSG+10IU HCG）对小鼠进行超排,观察囊胚发育情况（囊胚率分别为76.45%、67.08%,P＜0.05）,各处理组差异显著。在使用不同剂量激素（5IU PMSG+5IU HCG和10IU PMSG+10IU HCG）对小鼠进行超排后,运用时间飞行质谱分别检测不同处理样品的蛋白含量差异。对照组存在特异表达蛋白gi19116236,5IU PMSG+5IU HCG处理组存在特异表达蛋白gi19116236和gi148669394,10IU PMSG+10IU HCG处理组中没有检测出特异蛋白。gi19116236和gi148669394两种蛋白的结构和功能尚不清楚;经不同激素处理后在卵巢样品检测中并未发现特异蛋白。在使用不同剂量激素（5IU PMSG+5IU HCG和10IU PMSG+10IU HCG）对小鼠进行超排后,将获得胚胎进行冷冻解冻,10IU激素组合胚胎复苏率和囊胚率高于5IU且差异显著（86.03%、73.63%VS82.93%、67.95%,P＜0.05）。总之,本研究结果说明在KSOM胚胎培养液较适合昆白小鼠植入前胚胎培养;5IU PMSG+5IU HCG超排激素组合较适合小鼠植入前胚胎发育;10IU PMSG+10IU HCG超排激素组合更适合对胚胎冷冻解冻的小鼠进行超排;利用不同激素组合进行超数排卵,会导致血清中特异蛋白表达出现差异,5IUPMSG+5IU HCG超排激素组合促进小鼠血清中gi148669394蛋白的释放,10IUPMSG+10IU HCG超排激素组合抑制小鼠血清中gi19116236和gi148669394两种蛋白的释放。

关键词：超排激素植入前胚胎时间飞行质谱血清卵巢

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壳寡糖在传统食品酸菜腌渍过程中的应用

大连海洋大学学报 2009年第S1期25卷 198-201页

作者：金桥王鑫王刚佟长青徐建平李伟沈阳农业大学食品学院辽宁沈阳110161 大连水产学院辽宁省水产品加工与综合利用重点开放实验室辽宁大连116023 大连市产品质量监督检验所辽宁大连116021

采用复合酶降解法从壳聚糖中制备得到壳寡糖,并对所得壳寡糖进行了时间飞行质谱分析。经分析该壳寡糖聚合度为2~10,但也有少量聚合度为32~70。采用正常腌渍和添加壳寡糖两种方式进行酸菜发酵,并对发酵液的pH、大肠菌群数、乳酸菌数、霉... 详细信息

采用复合酶降解法从壳聚糖中制备得到壳寡糖,并对所得壳寡糖进行了时间飞行质谱分析。经分析该壳寡糖聚合度为2~10,但也有少量聚合度为32~70。采用正常腌渍和添加壳寡糖两种方式进行酸菜发酵,并对发酵液的pH、大肠菌群数、乳酸菌数、霉菌和酵母数等指标的变化规律进行研究。结果表明:随着发酵时间的延长,两种发酵液的pH迅速下降并稳定至3.20左右;pH值的下降,抑制了大肠菌群生长,而且有壳寡糖的酸菜发酵液对大肠菌群的抑制作用更加明显;在发酵过程中,乳酸菌的数量逐渐上升,酵母菌的数量在发酵初期增长很快,霉菌的数量则一直较少。感官品质评价结果表明,添加壳寡糖腌渍的酸菜感官质量优于传统腌渍方法得到的酸菜。

关键词：壳寡糖时间飞行质谱酸菜发酵

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壳寡糖在酸菜腌渍过程中的应用

壳寡糖在酸菜腌渍过程中的应用

基体辅助激光解吸电离飞行时间质谱用于中草药黄芪鉴别的研究

2007年中国水产学会学术年会暨水产微生态调控技术论坛

作者：金桥佟长青邬丽君李伟辽宁省水产品加工与贮藏重点开放实验室大连水产学院食品工程学院

采用复合酶降解法从壳聚糖中制备得到壳寡糖,并对所得其进行了时间飞行质谱分析。所得壳寡糖经分析聚合度为2～10,但也有少量聚合度为32～70。采用正常腌渍和添加壳寡糖两种方式进行酸菜发酵,并对发酵液的pH值、大肠菌群数值、乳酸菌计... 详细信息

采用复合酶降解法从壳聚糖中制备得到壳寡糖,并对所得其进行了时间飞行质谱分析。所得壳寡糖经分析聚合度为2～10,但也有少量聚合度为32～70。采用正常腌渍和添加壳寡糖两种方式进行酸菜发酵,并对发酵液的pH值、大肠菌群数值、乳酸菌计数、霉菌和酵母计数等指标的变化规律进行研究。结果表明随着发酵时间的延长,两种发酵液的pH迅速下降并稳定至3.20左右。pH值的下降,抑制了大肠菌群生长,而且有壳寡糖的酸菜发酵液对大肠菌群的抑制作用更加明显。在发酵过程中,乳酸菌的数量逐渐上升,酵母菌的数量在发酵初期增长很快,霉菌的数量则一直较少。

关键词：壳寡糖时间飞行质谱酸菜发酵

来源： cnki会议评论

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药物分析杂志 2001年第1期21卷 7-10页

作者：袁湘林张玉奎邹汉法中国科学院大连化学物理研究所国家色谱研究分析中心大连116011

目的 :考察基体辅助激光解吸电离时间飞行质谱用于中草药鉴别的可行性。方法 :以 2 ,5 -二羟基苯甲酸为基体对不同产地的黄芪进行质谱分析 ,比较质谱图 ,找出黄芪的指纹峰 ,通过指纹峰和专属性较强的质谱峰判断黄芪的真伪。结果 :判断... 详细信息

目的 :考察基体辅助激光解吸电离时间飞行质谱用于中草药鉴别的可行性。方法 :以 2 ,5 -二羟基苯甲酸为基体对不同产地的黄芪进行质谱分析 ,比较质谱图 ,找出黄芪的指纹峰 ,通过指纹峰和专属性较强的质谱峰判断黄芪的真伪。结果 :判断出兰州产红芪不是黄芪。结论 :建立中草药的基体辅助激光解吸电离质谱的指纹谱库 ,可以对中草药进行快速鉴别。

关键词：基体辅助激光解吸电离时间飞行质谱中草药黄芪鉴别