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时钟基因Rev-erbα在疾病中作用的研究进展

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中国药理学与毒理学杂志 2022年第7期36卷 544-551页

作者：盛明月陈刚领中国药科大学中药学院江苏南京211198

Rev-erbα是生物钟系统的时钟基因,广泛表达于生物体各组织器官。作为核受体超家族中的成员,Rev-erbα可被GSK4112,SR9009,SR9011和SR8278等配体调控并发挥转录抑制作用。研究表明,Rev-erbα可通过调控脂质代谢、抑制炎症反应和氧化应... 详细信息

Rev-erbα是生物钟系统的时钟基因,广泛表达于生物体各组织器官。作为核受体超家族中的成员,Rev-erbα可被GSK4112,SR9009,SR9011和SR8278等配体调控并发挥转录抑制作用。研究表明,Rev-erbα可通过调控脂质代谢、抑制炎症反应和氧化应激及增强β淀粉样蛋白的吞噬在心脑血管疾病和神经退行性疾病的发生发展中发挥重要的作用。此外,Rev-erbα可通过抑制自噬和细胞增殖发挥抗癌作用。Rev-erbα的配体被广泛应用于多种疾病的防治研究中。本文对Rev-erbα及其配体在心脑血管疾病、神经退行性疾病和癌症等疾病中的作用进行综述,同时对Rev-erbα作为药物靶标的可行性作简要探讨。

关键词：昼夜节律时钟基因 Rev-erbα 心脑血管疾病炎症

时钟基因在牙齿发育中表达分布与调控机制的研究进展

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国际口腔医学杂志 2022年第4期49卷 380-385页

作者：赵曼竹宋锦璘重庆医科大学附属口腔医院口腔综合科重庆401147 重庆医科大学附属口腔医院重庆401147

时间生物学的出现将生命科学研究由静态思维转向了动态思维。近年来时钟基因在口腔医学领域,尤其是牙齿发育中的调控作用与机制越来越受到学者们的关注。生物节律在牙齿硬组织中留下的痕迹包括釉柱横纹、芮氏线、牙本质冯·埃布纳线等,... 详细信息

时间生物学的出现将生命科学研究由静态思维转向了动态思维。近年来时钟基因在口腔医学领域,尤其是牙齿发育中的调控作用与机制越来越受到学者们的关注。生物节律在牙齿硬组织中留下的痕迹包括釉柱横纹、芮氏线、牙本质冯·埃布纳线等,但时钟基因如何参与牙齿硬组织的生成调控及其分子机制仍未被完全揭示,一直是该领域研究的热点。目前的研究主要聚焦于时钟基因在牙发育过程中的动态表达规律和在牙齿硬组织矿化生成过程中的作用与机制,本文就时钟基因在牙齿发育中的表达分布特点、调控作用及机制的研究进展作一综述。

关键词：时钟基因牙齿发育表达矿化调控机制

时钟基因BMAL1在运动性骨骼肌损伤恢复中的作用

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中国应用生理学杂志 2022年第3期38卷 220-226页

作者：傅泽铤夏雨丁海丽成都体育学院四川成都610041

目的:探讨时钟基因BMAL1在运动性骨骼肌损伤恢复中的作用。方法:208只8周龄SD大鼠随机分为对照组(C组,n=104)和运动组(E组,n=104)。E组于跑台进行90 min下坡跑,运动后于0 h,6 h,12 h,18 h,24 h,30 h,36 h,42 h,48 h,54 h,60 h,66 h,72 ... 详细信息

目的:探讨时钟基因BMAL1在运动性骨骼肌损伤恢复中的作用。方法:208只8周龄SD大鼠随机分为对照组(C组,n=104)和运动组(E组,n=104)。E组于跑台进行90 min下坡跑,运动后于0 h,6 h,12 h,18 h,24 h,30 h,36 h,42 h,48 h,54 h,60 h,66 h,72 h各取C组、E组8只大鼠腓肠肌,通过实时荧光定量PCR实验检测骨骼肌核心时钟基因BMAL1表达量,应用余弦分析软件circacompare(R package)获取拟合余弦曲线参数,分析其节律性振荡的变化趋势;透射电镜观察骨骼肌肌纤维超微结构变化;免疫印迹法(Western blot)检测骨骼肌BMAL1、DESMIN表达;免疫荧光观测BMAL1与DESMIN的定位及含量变化。结果:C组BMAL1 mRNA在72 h内呈现3个完整近日节律周期;E组BMAL1 mRNA在0 h~24 h近日节律消失。与C组比较,E组在运动后0 h、6 h、12 h、18 h,BMAL1 mRNA含量显著升高(P0.05);在运动后0 h、12 h,DESMIN蛋白表达降低(P0.05)。E组BMAL1与DESMIN在运动后0 h、12 h、24 h发生共定位,0 h~24 h共定位呈现先降低后升高的趋势,24 h的荧光强度达到最高值。结论:运动后时钟基因BMAL1可能与调控骨架蛋白DESMIN的协同作用增强,从而与促进肌纤维结构恢复有关。

关键词：大脑/肌肉芳香经受体核转位因子样蛋白1 时钟基因运动性骨骼肌损伤结蛋白骨架蛋白大鼠

大负荷运动后时钟基因Bmal1调控骨骼肌线粒体结构功能的作用机制

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中国病理生理杂志 2022年第2期38卷 325-332页

作者：夏雨丁海丽傅泽铤成都体育学院运动医学与健康研究所四川成都610041

目的:探讨大负荷运动后大鼠骨骼肌时钟基因Bmal1节律振荡变化及其对线粒体结构功能的调控作用。方法:将156只成年SD大鼠随机分为对照组和运动组,运动组予以一次大负荷运动训练。每6 h取各组大鼠腓肠肌,使用RT-qPCR检测各时相时钟基因Bm... 详细信息

目的:探讨大负荷运动后大鼠骨骼肌时钟基因Bmal1节律振荡变化及其对线粒体结构功能的调控作用。方法:将156只成年SD大鼠随机分为对照组和运动组,运动组予以一次大负荷运动训练。每6 h取各组大鼠腓肠肌,使用RT-qPCR检测各时相时钟基因Bmal1的mRNA水平,并用余弦分析软件CircaCompare(R Packages)获取拟合余弦曲线参数,分析时钟基因Bmal1的mRNA表达节律性振荡情况,透射电镜下观察每周期始末(ZT0、ZT24、ZT48和ZT72)骨骼肌线粒体的形态学变化,Western blot检测Bmal1和过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子1α(peroxisome proliferator activated receptorγcoactivator-1α,PGC-1α)的蛋白表达,ELISA测定ATP和ADP含量,以及线粒体氧化呼吸链酶细胞色素C氧化酶复合物亚单位Ⅱ(subunitsⅡof cytochrome C oxidase complex,COXⅡ)和COXⅣ的活性。结果:运动组Bmal1的mRNA表达在ZT0~ZT24时节律出现紊乱(P>0.05),ZT24~ZT48和ZT48~ZT72时节律恢复(P时钟基因Bmal1的节律紊乱,可能参与调控了线粒体的结构功能异常。

关键词：大负荷运动时钟基因过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子1α 线粒体骨骼肌

电针预处理对促排卵大鼠子宫组织核心时钟基因Bmal1表达节律的影响

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针刺研究 2024年

作者：朱钱刘静玉郝赛楠王照弦夏良君沈洁程洁李茜夏有兵南京中医药大学针药结合教育部重点实验室南京中医药大学针灸推拿学院.养生康复学院徐州医科大学

目的：观察电针预处理对促排卵大鼠子宫组织中时钟基因Bmal1表达节律的影响，探讨电针预处理提高促排卵大鼠植入期子宫内膜容受性的作用机制。方法：将72只雌性SD大鼠按随机数字表法分为3组：正常组、模型组和预电针组，每组24只。除正... 详细信息

目的：观察电针预处理对促排卵大鼠子宫组织中时钟基因Bmal1表达节律的影响，探讨电针预处理提高促排卵大鼠植入期子宫内膜容受性的作用机制。方法：将72只雌性SD大鼠按随机数字表法分为3组：正常组、模型组和预电针组，每组24只。除正常组外，其余2组大鼠腹腔注射孕马血清促性腺激素48 h后腹腔注射人绒毛促性腺激素制备促排卵模型。预电针组选取“关元”“三阴交”，于造模前两个动情周期每日21:00电针干预，每次15 min，直至造模结束；正常组与模型组予以相同麻醉固定。正常组大鼠动情期与输精管结扎雄鼠合笼，其余两组造模结束当日合笼。3组大鼠于合笼成功后第5天04:00起每隔4 h每批每组4只进行取材，共分6批。HE染色观察子宫内膜厚度、腺体、血管数目及组织形态变化；ELISA检测血清雌二醇(E2)与孕酮(Pg)含量；实时荧光定量PCR检测子宫核心时钟基因Bmal1和子宫内膜容受性因子同源框基因(HoxA10)、白血病抑制因子(LIF)的mRNA表达；Western blot法检测子宫HoxA10、LIF蛋白表达。结果：与正常组相比，模型组子宫内膜厚度变薄(P＜0.01)，腺体和血管的数量显著减少(P＜0.01，P＜0.05)；子宫Bmal1节律表达峰值和谷值的表达时点与正常组相反；血清E2、Pg含量显著提高(P＜0.01，P＜0.05)；内膜容受性因子HoxA10和LIF的mRNA和蛋白表达水平显著降低(P＜0.01，P＜0.05)。与模型组相比，预电针组子宫内膜厚度、腺体和血管的数量均显著增加(P＜0.05)；子宫Bmal1节律表达的峰谷值回调到与正常组接近，其表达水平也有所增加，其中ZT12时点三组的表达差异最为显著；血清Pg含量显著降低(P＜0.05)；容受性因子HoxA10和LIF的mRNA和蛋白水平升高(P＜0.01，P＜0.05)。结论：电针预处理能够改善种植窗口期子宫内膜容受性，其机制可能是调节子宫组织时钟基因Bmal1的节律表达，纠正促排导致的时钟基因节律紊乱。

关键词：电针预处理激素促排昼夜节律时钟基因 Bmal1

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时钟基因在扬州鹅内分泌组织中的节律性表达

中国家禽 2021年第12期43卷 1-6页

作者：刘迪侯丽娥季王阳包强翁恺麒徐琪扬州大学动物科学与技术学院江苏扬州225009

鹅产蛋行为是典型的节律行为,为了揭示时钟基因在扬州鹅不同内分泌组织中的节律性表达规律,选取在连产周期内且产蛋时间基本一致的扬州鹅24只,在48 h内每隔6 h采集3只鹅的下丘脑、垂体、卵巢组织样品,并采用RT-qPCR分别检测Clock、Bmal1... 详细信息

鹅产蛋行为是典型的节律行为,为了揭示时钟基因在扬州鹅不同内分泌组织中的节律性表达规律,选取在连产周期内且产蛋时间基本一致的扬州鹅24只,在48 h内每隔6 h采集3只鹅的下丘脑、垂体、卵巢组织样品,并采用RT-qPCR分别检测Clock、Bmal1、Bmal2、Cry1、Cry2、Per2基因在不同时间点的表达变化。结果显示:所检测的6个时钟基因在3个组织中均有所表达,且在不同的时间点表达量有所差异。其中Clock基因在3个组织中的表达均呈现出节律性,Bmal1基因在垂体和卵巢中表现出节律性,Bmal2基因在卵巢中表现出节律性,Per2基因在下丘脑、卵巢组织中与Clock基因表达趋势相反,表现出负反馈调节作用。表明Clock基因很有可能介导Per2参与鹅产蛋行为节律调控。

关键词：时钟基因扬州鹅 RT-qPCR 内分泌组织节律性表达

大负荷运动后骨骼肌核心时钟基因Bmal1/Clock、Cry1/Per1的节律性振荡变化趋势

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中国体育科技 2023年第7期59卷 90-96,F0003页

作者：丁海丽傅泽铤夏雨成都体育学院四川成都610041

目的:探讨大负荷运动对骨骼肌核心时钟基因节律性表达的影响。方法:将208只8周龄SD大鼠随机分为对照(control,C)组与运动(Exercise,E)组,E组予以一次大负荷运动训练。每6 h取各组比目鱼肌,采用透射电镜观察骨骼肌纤维超微结构,通过实时... 详细信息

目的:探讨大负荷运动对骨骼肌核心时钟基因节律性表达的影响。方法:将208只8周龄SD大鼠随机分为对照(control,C)组与运动(Exercise,E)组,E组予以一次大负荷运动训练。每6 h取各组比目鱼肌,采用透射电镜观察骨骼肌纤维超微结构,通过实时荧光定量PCR实验测定骨骼肌核心时钟基因Bmal1、Clock、Cry1、Per1表达量,并使用余弦分析软件circacompare(R package)获取拟合余弦曲线参数,分析其节律性振荡的变化趋势。结果:1)C组Bmal1、Clock、Cry1、Per1 mRNA在72 h内呈现3个完整近日节律周期;E组Bmal1 mRNA、Cry1和Per1mRNA在0~24 h、Clock mRNA在0~72 h近日节律消失。2)与C组相比,E组Bmal1 mRNA在0、6、12和18 h显著升高,Clock mRNA在0 h时显著升高;Cry1、Per1 mRNA在0、12 h显著降低。3)C组各时相肌纤维超微结构正常,E组0、24和48 h均出现不同程度肌小节结构破坏、线粒体肿胀及聚集等改变,72 h有所缓解。结论:一次大负荷运动可诱发骨骼肌核心时钟基因Bmal1/Clock、Cry1/Per1节律振荡紊乱,其变化趋势与肌纤维超微结构损伤时相基本一致。

关键词：骨骼肌时钟基因 Bmal1/Clock Cry1/Per1 生物节律生物钟

时钟基因Bmal1调控运动性骨骼肌损伤后骨架蛋白合成的作用机制

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时钟基因Bmal1调控运动性骨骼肌损伤后骨架蛋白合成的作用机制

时钟基因Cry1与Bmal1在小鼠子宫内膜生理性修复过程中的表达研究

第十二届全国体育科学大会

作者：傅泽铤丁海丽夏雨黄增浩刘沛洁成都体育学院

研究目的:生物节律通过时钟基因的表达调控人体各组织器官的机能,对人体多种生理活动有重要影响。骨骼肌作为外周组织也受时钟基因调控,但时钟基因如何通过调控骨骼肌进而影响运动能力的分子机制尚未完全认识。Bmal1作为核心时钟基因,... 详细信息

研究目的:生物节律通过时钟基因的表达调控人体各组织器官的机能,对人体多种生理活动有重要影响。骨骼肌作为外周组织也受时钟基因调控,但时钟基因如何通过调控骨骼肌进而影响运动能力的分子机制尚未完全认识。Bmal1作为核心时钟基因,参与肌生成的过程,敲除bmal1会导致生物钟完全紊乱甚至引起肌少症;骨架蛋白中titin是连接Z盘和收缩蛋白之间的蛋白丝、desmin贯穿Z线使肌原纤维连接起来,同时也是新肌生成的重要标志。因此,本研究以时钟基因bmal1对骨架蛋白desmin、和titin的作用为切入点,通过观察大负荷运动后骨骼肌肌纤维超微结构、bmal1、desmin及titin的蛋白表达、共定位情况,探讨骨骼肌骨架蛋白合成是否受时钟基因的调控,以及骨骼肌Bmal1调控骨架蛋白合成的作用机制,为肌肉运动能力的恢复以及治疗肌肉相关疾病提供新的思路与实验依据。研究方法:(1)研究对象与分组:健康雄性8周龄SD大鼠182只随机分为对照组(C组,n=91)、模型组(M组,n=91)。根据不干预与干预后不同时相,又分为0h、6h、12h、18h、24h、30h、36h、42h、48h、54h、60h、66h、72h各13个亚组,共26个组别。(2)建立EIMD模型:采用一次大负荷运动建立运动性骨骼肌损伤模型,参考Armstong离心运动方案,使用小动物电动跑台对大鼠进行训练。M组在正式实验前进行适应性跑台训练3天,第1天坡度0°,速度16m/min,运动时间5min;第2天坡度0°,速度16m/min,运动时间10min;第3天休息,第4天进行一次持续性下坡跑,坡度-16°,速度16m/min,运动时间90min。(3)取材与指标检测:大负荷运动后即刻与0h时相重合,按照各组对应不同时相,将大鼠称重后腹腔注射10%水合氯醛麻醉,腹主动脉取血,迅速分离腓肠肌,用刀片迅速去除筋膜和肌腱,制备蛋白样品和冰冻切片;应用余弦分析软件circacompare(R package)获取Bmal1基因表达拟合余弦曲线参数;透射电镜观察骨骼肌肌纤维超微结构变化;蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测骨骼肌bmal1、desmin、titin蛋白表达;免疫荧光双染结合激光共聚焦观察desmin、titin与bmal1共定位情况。研究结果:(1)EIMD大鼠骨骼肌不同时相bmal1的趋势变化。(1)C组bmal1基因呈现节律性表达,72h内共呈现3个完整节律周期。(2)M组bmal1基因表达在72h中节律性丧失,0-24h节律出现紊乱,24-48h节律有所恢复,48-72h与C组相似。(2)EIMD大鼠不同时相骨骼肌纤维超微结构变化。(1)C组肌纤维超微结构整齐,肌节均匀,z线清晰,肌原纤维排列整齐,线粒体分布均匀,形态正常。(2)M组运动后0h,肌节变宽,z线模糊不清呈水波状,肌原纤维断裂、扭曲,间隙增大;12h组,肌纤维大面积溶解,整个视野内无法看清整齐的肌原纤维和肌节,z线消失;24h组,肌原纤维弯曲,排列不规则,间隙依然比较大;48h组,整个视野内超微结构紊乱,肌原纤维溶解,线粒体严重肿胀,损伤最为严重;72h组,骨骼肌超微结构扭曲的形态基本恢复。(3)EIMD大鼠骨骼肌不同时相bmal1、desmin、titin蛋白的表达量。(1)bmal1蛋白表达统计结果显示:与C组相比,M组运动后即刻bmal1表达显著下降(P0.05)。(3)titin蛋白表达统计结果显示:与C组相比,M组运动后即刻titin表达显著下降(P0.05)。(4)EIMD大鼠骨骼肌desmin、titin与bmal1共定位结果。(1)desmin与bmal1共定位统计结果显示:与C组相比,M组在运动后24h-48h显著升高(P0.05)。研究结论:(1)运动性骨骼肌损伤可伴随核心时钟基因bmal1的昼夜节律紊乱,而在24h至48h后bmal1节律震荡呈逐渐恢复的趋势。(2)骨架蛋白desmin、titin蛋白表达的时相变化与电镜下骨骼肌纤维超微结构改变相一致。(3)运动性骨骼肌损伤后,desmin的表达趋势与bmal1一致,且二者发生共定位,titin则无此变化。(4)bmal1在骨骼肌损伤修复过程中发挥重要作用,其机制可能与通过调控骨架蛋白desmin的合成,从而促进肌纤维结构恢复有关。

关键词： Bmal1 时钟基因运动性骨骼肌损伤 desmin titin

来源： cnki会议评论

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生殖医学杂志 2023年第5期32卷 708-715页

作者：杨旭清鲁聪刘婷婷吴江旭王思雨王树芳陈西华贺斌徐祥波王乾兴遵义医科大学遵义563006 国家卫生健康委科学技术研究所北京100081 北京协和医学院研究生院北京100730 新乡医学院新乡453003

目的以小鼠月经模型为基础,探究时钟基因Cry1与Bmal1对小鼠月经期子宫内膜生理性修复过程的影响。方法通过建立小鼠月经样生理性修复模型,利用苏木素伊红(HE)染色法进行组织形态学观察;利用免疫组织化学(IHC)染色法观察CRY1与BMAL1蛋... 详细信息

目的以小鼠月经模型为基础,探究时钟基因Cry1与Bmal1对小鼠月经期子宫内膜生理性修复过程的影响。方法通过建立小鼠月经样生理性修复模型,利用苏木素伊红(HE)染色法进行组织形态学观察;利用免疫组织化学(IHC)染色法观察CRY1与BMAL1蛋白在小鼠月经样修复模型中的表达定位;进一步利用蛋白免疫印迹杂交(Western blot)检测CRY1与BMAL1蛋白的表达水平。结果孕酮撤退后24~48 h子宫大体颜色逐渐变淡,子宫直径由粗逐渐变细。HE染色结果显示,孕酮撤退后24 h蜕膜化区域大部分细胞坏死崩解,且随着时间推移,子宫内膜厚度增加,子宫腔面出现再上皮化,腺体数量明显增多;48 h时,子宫内膜修复完整,基本恢复到正常子宫形态。IHC染色结果显示,CRY1和BMAL1蛋白的阳性染色定位于细胞质和细胞核中,主要集中在细胞核,且阳性信号随着孕酮撤退时间呈现一定差异。Western blot检测结果显示,孕酮撤退24 h后,子宫内膜CRY1蛋白表达显著降低(P时钟基因在子宫内膜呈现规律性的周期性表达,提示时钟基因及其信号通路可能参与子宫内膜生理性修复过程。

关键词：子宫内膜生理性修复时钟基因 CRY1 BMAL1