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早期生长反应基因1在急性胰腺炎肝脏损害机制中的作用

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解放军医学杂志 2006年第10期31卷 979-982页

作者：邹树田伏洲崔建峰成都军区总医院全军普通外科中心成都610083

目的研究早期生长反应基因1(Egr-1)在急性胰腺炎肝脏损害机制中的作用。方法24只雄性Wistar大鼠随机分为4组,分别用生理盐水,1%、3%及5%牛磺胆酸钠溶液进行相应处理,观察各组大鼠肝组织Egr-1免疫组化染色结果并进行胰腺病理评分,检测血... 详细信息

目的研究早期生长反应基因1(Egr-1)在急性胰腺炎肝脏损害机制中的作用。方法24只雄性Wistar大鼠随机分为4组,分别用生理盐水,1%、3%及5%牛磺胆酸钠溶液进行相应处理,观察各组大鼠肝组织Egr-1免疫组化染色结果并进行胰腺病理评分,检测血清AST、LDH及TNF-α和IL-1β水平。从正常Wistar大鼠分离培养肝细胞,观察原代培养肝细胞在TNF-α刺激及PD98059预处理后Egr-1mRNA表达情况。结果肝组织Egr-1表达与急性胰腺炎肝损害程度呈正相关,且原代培养肝细胞Egr-1mRNA表达水平与肝细胞损害程度呈正相关。结论Egr-1可能参与急性胰腺炎肝损害过程,并且其作用机制部分依赖于细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)。

关键词：早期生长反应基因1 胰腺炎肝损害有丝分裂素激活蛋白激酶类

早期生长反应基因1敲除对肝癌组织基因表达谱的影响

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中华肿瘤防治杂志 2007年第14期14卷 1066-1069页

作者：廖允军陈俊任夏荣高海斌王成友南方医科大学附属深圳医院/深圳市第二人民医院肝胆外科广东深圳518035

目的:对比观察早期生长反应基因1(EGR-1)敲除大鼠与野生大鼠肝癌模型基因表达谱的变化,探讨EGR-1基因是否参与调控肝癌的生长与转移。方法:应用cDNA表达芯片对EGR-1基因敲除大鼠和野生大鼠肝癌模型的癌标本组织抽提的mRNA进行芯片杂交,... 详细信息

目的:对比观察早期生长反应基因1(EGR-1)敲除大鼠与野生大鼠肝癌模型基因表达谱的变化,探讨EGR-1基因是否参与调控肝癌的生长与转移。方法:应用cDNA表达芯片对EGR-1基因敲除大鼠和野生大鼠肝癌模型的癌标本组织抽提的mRNA进行芯片杂交,并对两者的基因表达谱进行对比分析。将同一基因在一个模型中的表达高于另一个模型的3倍以上作为基因差异表达的判断标准。结果:野生大鼠肝癌模型与EGR-1敲除大鼠肝癌模型相比较,前者有25条已知基因和2条未知基因表达上调,而后者有41条已知基因和23条未知基因表达上调;其中包括与细胞增殖和肿瘤转移相关的重要基因。结论:EGR-1基因敲除可引起大鼠肝癌模型基因表达谱的明显变化;EGR-1很可能参与了肝癌细胞生长与转移的调控。

关键词：肝肿瘤 cDNA微阵列早期生长反应基因1 基因表达

自体移植静脉中早期生长反应基因1的表达及意义

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中国医科大学学报 2005年第5期34卷 411-413页

作者：刘程伟胡新华杨军张雪松王新文辛世杰张强中国医科大学附属第一医院血管外科辽宁沈阳110001 佳木斯大学附属第一医院放射科

目的:研究自体静脉移植后早期生长反应基因1(Egr-1)表达的动态变化,探讨其在内膜增生(IH)中的作用。方法:W istar大鼠80只,建立自体静脉移植模型。应用原位杂交和RT-PCR方法检测Egr-1 mRNA的表达,应用W estern蛋白印迹和免疫组化方法检... 详细信息

目的:研究自体静脉移植后早期生长反应基因1(Egr-1)表达的动态变化,探讨其在内膜增生(IH)中的作用。方法:W istar大鼠80只,建立自体静脉移植模型。应用原位杂交和RT-PCR方法检测Egr-1 mRNA的表达,应用W estern蛋白印迹和免疫组化方法检测Egr-1蛋白表达情况,同时进行组织形态学研究。结果:自体静脉移植后,Egr-1mRNA和Egr-1蛋白的表达具有双相变化。移植1 h,Egr-1 mRNA阳性率为(35±7)%,6 h和24 h时下降,7 d时重新升高,4周达高峰(45±6)%。移植早期2 h即有Egr-1蛋白的表达,阳性率为(30±5)%,并持续至6h,24 h^3 d表达下降,移植4周Egr-1蛋白的阳性表达率达到高峰(40±9)%。结论:Egr-1的激活及表达与自体移植静脉内膜增生关系密切,Egr-1可能成为防治移植静脉内膜增生及狭窄、闭塞的一个新的干预靶点。

关键词：早期生长反应基因1 移植静脉,自体内膜增生

早期生长反应基因1启动子介导肿瘤基因-放疗的研究进展

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国际放射医学核医学杂志 2010年第4期34卷 206-208,219页

作者：郭睿李彪上海交通大学医学院附属瑞金医院核医学科200025

早期生长反应基因1（Egr-1）启动子为Egr-1上游的顺式作用元件,其活性受电离辐射、自由基等诱导剂的调控.Egr-1与治疗基因结合（如肿瘤坏死因子α基因、自杀基因等）构成基因-放射治疗体系,利用辐射在肿瘤局部从时间、空间调控治疗基因... 详细信息

早期生长反应基因1（Egr-1）启动子为Egr-1上游的顺式作用元件,其活性受电离辐射、自由基等诱导剂的调控.Egr-1与治疗基因结合（如肿瘤坏死因子α基因、自杀基因等）构成基因-放射治疗体系,利用辐射在肿瘤局部从时间、空间调控治疗基因的表达,使表达产物局限于肿瘤局部发挥肿瘤杀伤效应,并降低了不良反应.放射治疗与基因治疗的结合为肿瘤治疗提供了新方法.

关键词：基因表达调控放射疗法肿瘤早期生长反应基因1 启动区(遗传学)

反义寡核苷酸抑制早期生长反应基因1表达对移植静脉内膜增生的影响

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中华普通外科杂志 2008年第1期23卷 54-57页

作者：刘程伟胡新华王石张雪松王树卿张强辛世杰段志泉佳木斯大学附属第一医院普外一科 154003 中国医科大学附属第一医院血管外科

目的研究反义寡脱氧核苷酸（antisense oligodeoxynucleotides，ASODN）抑制早期生长反应基因1（early growth response gene-1，Egr-1）表达对移植静脉血管平滑肌细胞增殖和内膜增生的影响。方法构建Egr-1 ASODN，建立自体静脉移植模型... 详细信息

目的研究反义寡脱氧核苷酸（antisense oligodeoxynucleotides，ASODN）抑制早期生长反应基因1（early growth response gene-1，Egr-1）表达对移植静脉血管平滑肌细胞增殖和内膜增生的影响。方法构建Egr-1 ASODN，建立自体静脉移植模型，Egr-1 ASODN转染移植静脉，术后随机分为1、2、6、24h，3、7、14、28、42d组，以未应用Egr-1 ASODN的大鼠为对照组。荧光显微镜检测Egr-1 ASODN转染移植静脉情况；应用原位杂交和RT—PCR方法检测Egr-1 mRNA的表达；联合应用免疫组织化学方法和Western blot检测Egr-1蛋白表达情况。结果实验组移植1h，Egr-1 ASODN主要位于移植静脉的外膜、中膜和部分内皮细胞（荧光灰度值为67±11），移植2h至24h，Egr-1 ASODN则主要位于移植静脉的中膜，移植7d，Egr-1 ASODN主要位于移植静脉的内膜。移植后期未检测到Egr-1 ASODN的表达。Egr-1 mRNA的表达只呈现一个高峰（基因表达值1．8±0．5）。移植早期Egr-1蛋白表达主要位于中膜的VSMC、部分单核细胞和内皮细胞，而移植后期在中膜和新生内膜的VSMC都未检测到Egr-1蛋白的表达。与对照组相比VSMC的增殖程度和内膜厚度均明显减轻（P〈0．01）。结论Egr-1 ASODN可显著抑制移植静脉的内膜增生，其作用可能是通过抑制Egr-1基因及其蛋白产物表达，从而抑制VSMC增殖、促进其凋亡而实现的。

关键词：静脉寡脱氧核糖核苷酸类,反义早期生长反应基因1

携带靶向干扰小鼠早期生长反应基因1短发夹RNA的慢病毒载体转染小鼠视网膜的干扰效率研究

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中华生物医学工程杂志 2011年第2期17卷 115-119页

作者：蒋晶晶刘双珍文丹王沙中南大学湘雅医院眼科长沙410008

目的构建携带绿色荧光蛋白（GFP）和靶向干扰早期生长反应基因1（Egr-1）短发夹RNA（shRNA）共表达的慢病毒载体,转染小鼠视网膜组织,观察其对Egr-1基因的干扰效率.方法针对已经筛选确定的Egr-1基因shRNA有效靶序列,构建携带GFP和靶... 详细信息

目的构建携带绿色荧光蛋白（GFP）和靶向干扰早期生长反应基因1（Egr-1）短发夹RNA（shRNA）共表达的慢病毒载体,转染小鼠视网膜组织,观察其对Egr-1基因的干扰效率.方法针对已经筛选确定的Egr-1基因shRNA有效靶序列,构建携带GFP和靶向干扰Egr-1 shRNA的慢病毒载体LV-shRNA（Egr-1）.15日龄C57BL/6小鼠完全随机法分为实验组和阴性对照组,每组10只.LVshRNA（Egr-1）慢病毒载体经玻璃体腔注射转染至实验组小鼠右眼内,不针对任何特异基因的LV-NC 慢病毒载体通过同样的转染途径转染至阴性对照组小鼠右眼内,实验组及阴性对照组小鼠左眼不做任何处理设为空白对照组.2周后荧光显微镜下观察转染情况,实时定量PCR（RQ-PCR）、免疫印迹（Western blot）、免疫荧光检测Egr-1的表达,观察Egr-1基因的干扰效率.结果慢病毒载体经玻璃体腔注射途径转染小鼠视网膜后,GFP广泛分布于视网膜全层,包括视网膜色素上皮层.与空白对照组和阴性对照组注射眼比较,RQ-PCR检测显示实验组注射眼Egr-1 mRNA表达明显下调（0.290＋0.074比1.006±0.033、1.010±0.086,均P＜0.001）,抑制率为71.29%;免疫印迹显示实验组注射眼内Egr-1蛋白表达明显下调（0.224±0.035比0.674±0.050、0.688±0.049,P＜0.001）,抑制率为67.44%.免疫荧光检测发现实验组注射眼在视网膜除内核层有少许Egr-1阳性细胞分布外,没有荧光表达.结论成功构建携带绿色荧光蛋白和靶向干扰Egr-1基因shRNA的慢病毒载体,经玻璃体腔注射转染小鼠眼内其转染效率高,分布范围广,且对小鼠视网膜Egr-1基因抑制效率高.

关键词：早期生长反应基因1 RNA干扰转染慢病毒载体基因表达调控

葡萄糖和肿瘤坏死因子-α对内皮细胞中早期生长反应基因-1表达的影响

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中国组织化学与细胞化学杂志 2012年第3期21卷 258-261页

作者：曹艳丽王涤非孟馨谷剑秋王晓黎张锦中国医科大学附属第一医院内分泌科沈阳110001

目的探讨葡萄糖和肿瘤坏死因子-α对内皮细胞中早期生长反应基因-1表达的影响。方法利用人脐静脉内皮细胞体外培养,予以25mmol/L葡萄糖和/或10ng/ml肿瘤坏死因子-α与内皮细胞共同孵育,运用蛋白免疫印迹方法检测细胞中早期生长反应基因-... 详细信息

目的探讨葡萄糖和肿瘤坏死因子-α对内皮细胞中早期生长反应基因-1表达的影响。方法利用人脐静脉内皮细胞体外培养,予以25mmol/L葡萄糖和/或10ng/ml肿瘤坏死因子-α与内皮细胞共同孵育,运用蛋白免疫印迹方法检测细胞中早期生长反应基因-1蛋白的表达,运用酶联免疫吸附法检测纤溶酶原激活抑制物-1的表达。结果葡萄糖和肿瘤坏死因子-α均可增加早期生长反应基因-1的表达,两种因素共同作用产生协同作用。而且,葡萄糖和肿瘤坏死因子-α也可促进纤溶酶原激活抑制物-1的表达。细胞外调节蛋白激酶1/2的抑制剂(PD98059)可下调肿瘤坏死因子-α所诱导的早期生长反应基因-1、纤溶酶原激活抑制物-1的表达,而对葡萄糖所诱导的早期生长反应基因-1的表达无明显影响。结论肿瘤坏死因子-α可能通过细胞外调节蛋白激酶1/2路径促进早期生长反应基因-1和纤溶酶原激活抑制物-1表达。肿瘤坏死因子-α和葡萄糖可能通过不同的信号通路调节早期生长反应基因-1、纤溶酶原激活抑制物-1表达,在肥胖、糖尿病等代谢紊乱所致的血管并发症的发生中起到重要的作用。

关键词：肿瘤坏死因子-α 早期生长反应基因1 肥胖血管疾病糖尿病

EGR1基因与中国汉族人群阿尔茨海默病发病风险的关联研究

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上海交通大学学报（医学版） 2019年第2期39卷 153-159页

作者：方新宇卢卫红王慧珍倪建良张江涛蔡军李涛张登峰张晨上海交通大学医学院附属精神卫生中心生化研究室上海200030 中国科学院昆明动物研究所昆明650223 浙江省立同德医院精神卫生科杭州310007 四川大学华西医院心理卫生中心成都610041

目的·探讨早期生长反应基因1(early growth response gene 1,EGR1)与中国汉族人群阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)发病风险的关联。方法·纳入2个独立样本共计715例AD患者和760例健康对照(包括来自华东地区的382例AD患者和426例... 详细信息

目的·探讨早期生长反应基因1(early growth response gene 1,EGR1)与中国汉族人群阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)发病风险的关联。方法·纳入2个独立样本共计715例AD患者和760例健康对照(包括来自华东地区的382例AD患者和426例健康对照以及来自西南地区的333例AD患者和334例健康对照)。采取外周静脉血并提取DNA,利用SNaPshot技术对单核苷酸多态性位点rs11743810进行分型。结合公共数据库探索EGR1基因在AD患者和健康对照的大脑中是否存在差异表达;并通过STRING数据库构建蛋白质–蛋白质交互作用(protein-protein interaction,PPI)网络图,以明确EGR1与AD高风险基因之间是否存在联系;采用表达数量性状基因座(expression quantitative trait loci,eQTL)关联分析探讨rs11743810多态性与AD易感性的关系。结果·差异表达分析发现,AD患者与健康对照脑内EGR1基因在颞叶皮层表达存在显著差异(校正前|log2FC|=0.780,P=0.000;FDR校正后P=0.001)。PPI结果也表明EGR1蛋白与AD高风险基因表达的蛋白如淀粉样蛋白前体(amyloid precursor protein,APP)以及载脂蛋白J(clusterin,CLU)之间存在交互作用。然而,eQTL分析结果显示,EGR1基因单核苷酸多态性rs11743810不同基因型在10个脑区的表达无明显差异(校正后P>0.05)。外周血DNA样本分析结果也提示AD组和健康对照组的rs11743810位点基因型和等位基因分布频率的差异均无统计学意义(P>0.05)。结论·rs11743810多态性位点可能不是中国汉族人群AD的主要致病位点。

关键词：阿尔茨海默病基因多态性早期生长反应基因1 表达数量性状基因座差异表达

pGL3/EGR1-Bax重组载体的构建及对非小细胞肺癌细胞的转染

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上海交通大学学报（医学版） 2012年第12期32卷 1659-1662页

作者：黄静沈庆冯玉麟李华重庆市第三人民医院呼吸内科重庆400014 四川大学华西医院呼吸内科成都610051

目的构建早期生长反应基因1(EGR1)启动子与Bax基因共表达载体pGL3/EGR1-Bax并转染非小细胞肺癌细胞。方法以小鼠脑组织基因组DNA为模板,采用PCR法分别扩增EGR1和Bax基因全长编码序列,分别克隆入载体pTA2,构建重组质粒pTA2/EGR1和pTA2/B... 详细信息

目的构建早期生长反应基因1(EGR1)启动子与Bax基因共表达载体pGL3/EGR1-Bax并转染非小细胞肺癌细胞。方法以小鼠脑组织基因组DNA为模板,采用PCR法分别扩增EGR1和Bax基因全长编码序列,分别克隆入载体pTA2,构建重组质粒pTA2/EGR1和pTA2/Bax,测序鉴定;再将EGR1与Bax基因亚克隆至pGL3-Basic载体中,构建双基因共表达载体pGL3/EGR1-Bax,测序鉴定。采用基因转染技术将基因导入非小细胞肺癌NCI-H460细胞,分别以未转染及空pGL3-Basic载体转染的NCI-H460细胞株作为空白对照组和阴性对照组,采用RT-PCR技术和Western blotting方法检测NCI-H460细胞EGR1和BaxmRNA和蛋白的表达。结果测序鉴定证实,构建的双基因共表达载体pGL3/EGR1-Bax的EGR1、Bax序列与GenBank发布基因序列完全一致。与对照组和空载体转染组NCI-H460细胞比较,pGL3/EGR1-Bax转染组NCI-H460细胞中EGR1和Bax的mRNA表达以及Bax的蛋白表达明显增强。结论成功构建双基因共表达载体pGL3/EGR1-Bax,并实现了EGR1和Bax基因在NCI-H460细胞中的有效表达。

关键词：早期生长反应基因1 Bax基因克隆转染基因表达