检索结果-南通市图书馆

早年应激致雌性大鼠认知功能障碍中脑脊液氨基酸变化及意义

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

营养学报 2022年第2期44卷 164-172页

作者：王笑天谢方王雪王世达赵云钱令嘉军事科学院军事医学研究院军事认知与脑科学研究所北京100850

目的研究母婴分离应激雌性大鼠成年后脑脊液(cerebro-spinal fluid,CSF)氨基酸的变化,为探索早年应激致认知障碍的发生机制提供新的科学依据。方法采用母婴分离(maternal separation,MS)应激的方法建立早年应激大鼠模型,随机分对照组(... 详细信息

目的研究母婴分离应激雌性大鼠成年后脑脊液(cerebro-spinal fluid,CSF)氨基酸的变化,为探索早年应激致认知障碍的发生机制提供新的科学依据。方法采用母婴分离(maternal separation,MS)应激的方法建立早年应激大鼠模型,随机分对照组(CON)和应激组(MS)。在实验大鼠成年后采用旷场、物体识别及水迷宫实验评价认知功能,尼氏染色观察脑海马和前额叶皮质区神经细胞数量及排列,全自动蛋白表达分析系统(WESTM)检测突触后致密物95(PSD-95)蛋白表达水平,超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)靶向定量分析大鼠脑脊液氨基酸含量。结果与CON组大鼠相比,MS组大鼠旷场评分、物体识别认知指数、水迷宫穿台次数显著降低(P0)。结论母婴分离应激致大鼠成年后认知功能障碍,脑相关区域损伤和脑脊液氨基酸代谢异常,以及苏氨酸水平降低影响神经细胞突触可塑性可能是应激性认知功能障碍的病理基础。[营养学报,2022,44(2):164-172]

关键词：早年应激雌性大鼠脑脊液氨基酸代谢突触可塑性认知障碍

早年应激和CRHR1基因多态性与睡眠质量的相关性

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国心理卫生杂志 2019年第11期33卷 807-811页

作者：陈雅楠安翠霞王冉王岚宋美于鲁璐王育梅孙菲菲王学义河北医科大学第一医院精神卫生中心河北医科大学精神卫生研究所河北省脑老化与认知神经科学实验室

目的:探讨胎儿期及婴儿期暴露于地震应激与促肾上腺皮质激素释放激素受体1(CRHR1)基因多态性对成年期个体睡眠质量的影响。方法:共纳入经历地震应激者556例,根据地震应激时点分为婴儿期暴露组(n=172)、胎儿期暴露组(n=179)及震后出生的... 详细信息

目的:探讨胎儿期及婴儿期暴露于地震应激与促肾上腺皮质激素释放激素受体1(CRHR1)基因多态性对成年期个体睡眠质量的影响。方法:共纳入经历地震应激者556例,根据地震应激时点分为婴儿期暴露组(n=172)、胎儿期暴露组(n=179)及震后出生的对照组(n=205)。采用汉密顿焦虑(HAMA)、匹兹堡睡眠质量指数(PSQI)及聚合酶链式反应(PCR)分别测试3组人群睡眠质量、焦虑状态与CRHR1基因多态性。结果:胎儿期暴露组PSQI≥7分者的比例高于对照组(P 应激(OR=2.08)、rs7209436位点C等位基因表达(OR=1.98)以及焦虑状态(OR=2.65)对成年期个体睡眠质量异常发生存在风险。结论:胎儿期与婴儿期遭受地震应激、焦虑以及rs242924与rs7209436C等位基因高表达是成年期个体睡眠质量异常的危险因素。

关键词：早年应激 CRHR1 基因多态性睡眠质量异常影响

早年应激对成年大鼠行为和海马神经营养因子的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中华实验外科杂志 2012年第9期29卷 1691-1693页

作者：舒畅肖玲唐记华王晓萍王高华武汉大学人民医院精神卫生中心 430060

目的观察早年应激对雄性大鼠成年后行为和海马神经营养因子的影响。方法将新生雄性大鼠随机分为早年应激组（12只）和对照组（12只）。早年应激组大鼠出生后第2～14天每天与母鼠分离3h，第90天至第100天时用糖水偏好测验和旷场测验评估... 详细信息

目的观察早年应激对雄性大鼠成年后行为和海马神经营养因子的影响。方法将新生雄性大鼠随机分为早年应激组（12只）和对照组（12只）。早年应激组大鼠出生后第2～14天每天与母鼠分离3h，第90天至第100天时用糖水偏好测验和旷场测验评估行为，采用逆转录一聚合酶链反应（RT—PCR）方法、Westernblot方法检测海马神经营养因子（BDNF）和环磷酸腺苷（cAMP）反应元件结合蛋白（CREB）的mRNA及蛋白表达水平。结果早年应激组的糖水偏好、旷场总行程、内围场地行程、平均速度、直立次数均少于对照组[（66．6±6．6）％、（2793．33±945．66）cm、（194．34±86．10）cm、（5．25±1．47）cm／s、（9．25±4．49）次比（80．9±3．5）％、（4888．00±1112．47）cm、（483．09±324．45）cnl、（8．90±2．02）cm/s、（14．92±5．16）次，P〈0．01]。早年应激组的BDNF和CREB的mRNA及蛋白表达水平均显著低于对照组[（0．61±0．08）、（0．55±0．06）、（0．39±0．05）、（0．44±0．06）比（0．86±0．06）、（0．69±0．04）、（0．53±0．05）、（0．54±0．06），P〈0．01]。结论生命早期应激可能改变成年后海马神经营养因子水平，导致成年后的行为改变，增加情感障碍的易感性。

关键词：早年应激行为海马神经营养因子

早年应激与重性抑郁障碍机制研究进展(综述)

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国健康心理学杂志 2023年第6期31卷 811-815页

作者：郭文韬张丽丽栗克清李冰张云淑河北大学附属医院/河北大学临床医学院保定071000 河北省精神卫生中心/河北省重大精神与行为障碍疾病研究重点实验室/河北大学第六临床医学院

重性抑郁障碍(major depression disorder,MDD)因其高复发率、高致残率、低治愈率,严重影响着人类的生活。早年应激(early life stress,ELS)被认为是成年后MDD发生的重要环境因素。ELS会导致相关脑区的结构和功能发生改变、脑源性神经... 详细信息

重性抑郁障碍(major depression disorder,MDD)因其高复发率、高致残率、低治愈率,严重影响着人类的生活。早年应激(early life stress,ELS)被认为是成年后MDD发生的重要环境因素。ELS会导致相关脑区的结构和功能发生改变、脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)表达下降、影响下丘脑-垂体-肾上腺(hypothalamic-pituitary-adrenal,HPA)轴功能、增加相关炎症因子表达等导致抑郁症的发生。同时早年应激可能通过特定的表观遗传作用,与环境因素共同影响精神疾病的发生。本文将综述早年应激与重性抑郁障碍机制研究方面的新进展。

关键词：重性抑郁障碍早年应激脑源性神经营养因子下丘脑-垂体-肾上腺轴炎症因子

早年应激对大鼠海马神经发生的影响及逍遥散的调节机制研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

早年应激对大鼠海马神经发生的影响及逍遥散的调节机制研究

作者：董硕北京中医药大学

学位级别：硕士

研究背景早年应激(early life stress),又称生命早期应激,是个体在以婴幼儿时期为主的生命早期阶段对遇到的生理、心理等方面的恶性事件所做出的应激反应。国外学者将早年应激事件主要分为以下两类,一类应激事件是在一段时间内持续发生... 详细信息

研究背景早年应激(early life stress),又称生命早期应激,是个体在以婴幼儿时期为主的生命早期阶段对遇到的生理、心理等方面的恶性事件所做出的应激反应。国外学者将早年应激事件主要分为以下两类,一类应激事件是在一段时间内持续发生的负性应激事件,如持续的虐待、长时间的冷落、亲人的长期冲突等,另一类应激事件则是短暂但是应激程度巨大的严重恶性事件,如恶劣暴力行为、重大自然灾害等。早年应激一般发生在个体的海马、杏仁核等重要脑区发育的关键时期。生命早期长期暴露于恶性应激事件下会对机体的神经内分泌功能和神经系统的正常发育造成影响,并可能导致大脑组织结构和生理功能的异常,增加成年后患有心理疾病、精神类疾病的风险。中医药治疗抑郁症由来已久,因其具有疗效确切、副作用少、安全性高等优点,近年来应用逐渐广泛。逍遥散是《太平惠民和剂局方》中记载的经典方剂,主要针对由于“肝郁脾虚”的病机,治疗由慢性应激引起的抑郁症疗效显著。研究目的本研究通过PND(postnatal day)1-PND 21的母婴分离造模方法复制了早年应激大鼠模型,通过观察逍遥散药物干预后早年应激大鼠模型的行为学结果,初步明确逍遥散药物干预对早年应激模型大鼠的抑郁样行为的干预作用;通过观察各组大鼠海马组织DG区神经发生的情况,以初步探讨逍遥散对早年应激模型大鼠海马组织神经发生的影响;通过检测海马组织cAMP/PKA/CREB/BDNF信号通路的活性,以初步探讨逍遥散药物干预对早年应激模型大鼠海马组织神经发生相关通路的调节机制。研究方法本研究通过PND 1-PND 21的母婴分离造模方法复制了早年应激大鼠模型,在PND 22-PND49对大鼠进行逍遥散悬浊液、阳性对照药物氟西汀悬浊液的灌胃干预。分别在PND21、28、35、42、49测定并记录大鼠体重,分别在PND21和PND49对各组大鼠进行糖水偏好实验、强迫游泳实验、悬尾实验,在PND 49对各组大鼠进行旷场实验的行为学检测,以明确逍遥散可以改善早年应激模型大鼠抑郁样行为。采用免疫荧光染色法观察各组大鼠海马组织DG区Ki67+、DCX+、Neun+的平均光密度值,以初步探讨逍遥散对早年应激模型大鼠海马组织神经发生的影响;再利用ELISA法检测海马组织cAMP的蛋白含量,利用WB检测海马组织PKA、CREB、p-CREB、BDNF的蛋白表达量,利用RT-PCR检测海马组织PKA、CREB、p-CREB、BDNF的mRNA含量,以初步探讨逍遥散对早年应激模型大鼠海马组织cAMP/PKA/CREB/BDNF信号通路的调节机制。研究结果1.经过PND 1-PND 21的母婴分离造模方法可以复制早年应激大鼠模型,相比于正常组,经过母婴分离造模刺激后的大鼠活跃程度降低,体重呈现下降趋势,糖水偏好率降低,快感缺失,在强迫游泳实验与悬尾实验中不动时间增长;而PND22-PND49的逍遥散药物干预能够明显改善早年应激模型大鼠的上述抑郁样行为,并且在旷场试验中总移动距离增加,进入中央区的时间和次数增多,证明逍遥散药物干预具有改善早年应激模型大鼠抑郁样行为的效应;2.相比于正常组,模型组大鼠海马组织DG区Ki67+、DCX+、Neun+的平均光密度值明显降低,提示母婴分离造模方法可以通过抑制海马组织DG区神经干细胞的增殖、分化,并减少神经干细胞数量抑制大鼠的神经发生,这可能是母婴分离造模方法复制早年应激大鼠模型抑郁样行为的原因;相比于模型组,逍遥散组大鼠海马组织DG区Ki67+、DCX+、Neun+的平均光密度值明显增加,提示逍遥散可以通过促进海马组织DG区神经干细胞的增殖、分化,增加海马组织DG区神经干细胞的数量,改善早年应激模型大鼠的神经发生,并认为这可能是逍遥散干预改善早年应激模型大鼠抑郁样行为的主要机制之一;3.相比于正常组大鼠,模型组大鼠海马组织中cAMP、PKA、CREB、p-CREB、BDNF的蛋白表达量和mRNA含量相比于正常组均明显降低,表明母婴分离造模方法可以抑制海马组织cAMP/PKA/CREB/BDNF信号通路;相比于模型组,经过PND 22-PND 49的逍遥散和氟西汀药物干预后,两组大鼠海马组织中cAMP、PKA、CREB、p-CREB、BDNF的蛋白表达量和mRNA含量相比于模型组明显增加,说明PND 22-PND 49的逍遥散和氟西汀药物干预可以逆转母婴分离造模方法对海马组织cAMP/PKA/CREB/BDNF信号通路的抑制作用,并认为这可能是逍遥散干预改善早年应激模型大鼠海马神经发生的重要机制之一。研究结论逍遥散药物干预具有改善母婴分离造模方法复制的早年应激大鼠模型抑郁样行为的作用,其作用机制可能是通过促进海马组织cAMP/PKA/CREB/BDNF信号通路的表达,促进海马组织DG区神经干细胞的增殖和分化,并

关键词： cAMP/PKA/CREB/BDNF通路海马组织母婴分离神经发生逍遥散抑郁症早年应激

早年应激和CRHR1基因多态性对睡眠质量的影响

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

早年应激和CRHR1基因多态性对睡眠质量的影响

作者：陈雅楠河北医科大学

学位级别：硕士

目的:母亲怀孕期间暴露于重大创伤性事件可能会对胎儿神经发育产生影响,这种潜在的影响可能会持续到个体成年期,甚至持续终身;婴儿期暴露于严重创伤性事件时,也会产生一系列生理或心理反应,或许会对个体脑发育产生影响。已有研究证实,HP... 详细信息

目的:母亲怀孕期间暴露于重大创伤性事件可能会对胎儿神经发育产生影响,这种潜在的影响可能会持续到个体成年期,甚至持续终身;婴儿期暴露于严重创伤性事件时,也会产生一系列生理或心理反应,或许会对个体脑发育产生影响。已有研究证实,HPA轴末端的CRHR1基因多态性与应激及睡眠质量异常发生风险性增高相关,CRH通过对CRHR1的介导对睡眠-觉醒进行调控并影响睡眠,CRHR1拮抗剂能够用于恢复与应激有关的睡眠障碍。因此,本研究的目的是探讨胎儿期及婴儿期暴露于地震应激,及CRHR1基因多态性对个体成年期睡眠质量的交互影响。方法:本研究的对象为河北省唐山市开滦矿业集团职工,共调查9个矿区、3个社区及其他5个附属单位共1534人。采用自行设计的一般状况调查表,以一对一访谈的方式对受访者进行一般状况及近期情绪(HAMA评分、HAMD评分)、儿童期有无其它创伤性事件(儿童期创伤量表)、近期有无不良生活事件(生活事件量表)等相关状况的调查。根据暴露于地震应激的时期将受访者分为三组:婴儿期暴露组(1975年7月29日至1976年4月28日出生,婴儿期暴露于地震应激)、胎儿期暴露组(1976年7月29日至1977年4月28日出生,胎儿期暴露于地震应激)、对照组(1977年7月29日至1978年4月28日期间出生,未暴露于地震应激);其中将胎儿期暴露组根据暴露于地震应激时母亲妊娠的3个三月分为3个亚组:孕早期(1～3个月)组,孕中期(4～6个月)组,孕晚期(7～9个月)组。在符合入排标准的三组受访者中,每组随机抽取210名受试者进行血样DNA提取和CRHR1基因多态性检测,最后分别筛查各组中存在睡眠质量异常的受访者,并计算检出率。睡眠质量异常需符合:匹兹堡睡眠质量指数(PSQI)量表评分≥7分。数据采用SPSS21.0软件进行统计分析,计量资料组间比较采用单因素方差分析(one-way analysis of variance,ANOVA);计数资料组间比较采用卡方检验,对影响睡眠质量的因素进行Logistic回归分析。统计结果中,P<0.05代表差异存在统计学意义,P<0.01代表有极显著性差异;0

关键词：早年应激 CRHR1 基因多态性睡眠质量异常长期影响

早年应激对成年大鼠行为及VTA内GABARAP基因甲基化的影响

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

早年应激对成年大鼠行为及VTA内GABARAP基因甲基化的影响

作者：郭贞丽中南大学

学位级别：硕士

目的:研究早年应激对成年大鼠行为及中脑腹侧被盖区(Ventral tegmental area,VTA)内γ-氨基丁酸A型(GABAA)受体相关蛋白(GABARAP)基因表达及其甲基化水平的影响,初步探讨GABARAP基因甲基化是否参与早年应激诱发成年大鼠行为异常的病理... 详细信息

目的:研究早年应激对成年大鼠行为及中脑腹侧被盖区(Ventral tegmental area,VTA)内γ-氨基丁酸A型(GABAA)受体相关蛋白(GABARAP)基因表达及其甲基化水平的影响,初步探讨GABARAP基因甲基化是否参与早年应激诱发成年大鼠行为异常的病理过程。方法:雄性SD大鼠出生后按窝别随机分为母爱剥夺组(MD,N=18)和空白对照组(C,N=20)。采用母爱剥夺应激范式干预MD组大鼠,空白对照组不做任何实验处理。大鼠出生后21天(P21)断奶并分笼。在成年期(16周龄)采用旷场实验、糖水偏爱实验、强迫游泳实验、三箱社交实验评估大鼠行为;行为学评估结束后,收集大鼠VTA脑组织,采用亚硫酸氢盐扩增子测序PCR检测VTA内GABARAP基因甲基化水平,实时荧光定量RT-PCR(RT-q PCR)检测VTA内GABARAP m RNA表达水平,免疫印迹法(Western blot)检测VTA内GABARAP及其下游关键分子GABRG2、Beclin1蛋白表达水平。结果:1)行为学结果:(1)旷场实验结果显示:母爱剥夺组大鼠的直立次数显著低于空白对照组(p0.05);(2)糖水偏爱实验结果显示:母爱剥夺组大鼠的糖水偏爱率显著低于空白对照组(p0.05);(4)三箱社交实验结果显示:母爱剥夺组大鼠的社交能力指数和社交偏好指数与空白对照组差异不显著(p>0.05)。2)生物学结果:母爱剥夺组大鼠VTA内GABARAP基因甲基化水平显著高于空白对照组(p0.05);母爱剥夺组大鼠VTA内GABARAP、GABRG2和Beclin1蛋白表达水平与空白对照组差异不显著(p>0.05)。结论:1)早年应激诱发成年大鼠行为异常,主要表现为探索性行为减少、快感缺失及急性应激适应不良;2)早年应激增加成年大鼠VTA内GABARAP基因甲基化水平,高水平的GABARAP基因甲基化可能参与早年应激诱发成年大鼠行为异常的病理过程。(正文共29216字,参考文献195篇)

关键词：早年应激 γ-氨基丁酸A型受体相关蛋白 DNA甲基化腹侧被盖区

早年应激对啮齿类动物前脑NMDA受体亚基及c-fos表达的影响

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

早年应激对啮齿类动物前脑NMDA受体亚基及c-fos表达的影响

作者：贾娇山西医科大学

学位级别：硕士

临床研究和流行病学调查显示，早年应激(Early life stress，ELS)是精神疾病发病的重要危险因素之一，儿童期创伤性经历会增加个体对具有环境发病风险的精神疾病(如抑郁、焦虑障碍等)的易感性。前脑(海马、前额叶)既是应激的高位调节中... 详细信息

临床研究和流行病学调查显示，早年应激(Early life stress，ELS)是精神疾病发病的重要危险因素之一，儿童期创伤性经历会增加个体对具有环境发病风险的精神疾病(如抑郁、焦虑障碍等)的易感性。前脑(海马、前额叶)既是应激的高位调节中枢，也是认知相关的重要脑区，在精神疾病的机制学研究中占有重要地位。动物模型相关研究中，早年应激诱发的前脑突触可塑性改变和认知功能损伤为精神疾病发病机制的研究提供了独特的研究角度。谷氨酸是重要的中枢兴奋性递质，主要通过与突触后膜谷氨酸NMDA(N-methyl-D-aspartate，N-甲基-D-天冬氨酸)受体结合，发挥重要的生理作用。研究发现，早年应激通过作用于谷氨酸系统，引起NMDA受体改变和认知功能受损。同时动物研究显示早期处理(early handling)中，重复注射MK-801(dizocilpine maleate，地卓西平马来酸盐)通过阻断NMDA受体会诱发啮齿类动物认知功能损害。本研究通过早期MK-801处理模拟早年应激，研究其对大鼠前脑NMDA受体亚基表达的改变。实验一目的：本研究选择早期MK-801处理模拟早年应激，检测其对不同发育阶段NMDA受体亚基的影响。方法：选用非选择性NMDA受体拮抗剂MK-801(dizocilpine maleate，地卓西平马来酸盐)，于PND(postnatal day，出生后)54天重复注射,研究其对大鼠不同发育阶段(幼年期、青春期、成年期)前脑(海马和前额叶皮质脑区)NMDA受体亚基(NR1、NR2A、NR2B)表达的影响。结果： 1.幼年期(PND15)与对照组相比，应激组大鼠海马与前额叶皮质脑区NMDA受体各亚基表达水平均无统计学差异(P>0.05);2.青春期(PND42)与对照组相比，应激组大鼠海马与前额叶皮质脑区NMDA受体各亚基表达水平均无统计学差异(P>0.05);3.成年期(PND70)应激组大鼠海马NR1、NR2A表达水平较对照组增加[NR1：(149.55±12.08)vs.(100.00±14.34);NR2A：(171.54±8.88)vs.(100.00±22.83)]，差异均有统计学意义(P应激模型(心理应激)能更合理地模拟早年应激，以更好地研究早年应激对成年啮齿类动物认知功能的影响。第二部分实验选择限制筑窝材料和垫料(limited nesting and bedding material)模型，研究其对成年小鼠前脑c-fos基础表达水平的影响。实验二目的：研究早年应激对成年小鼠前脑(海马和前额叶皮质脑区)即早基因c-fos表达水平的影响。方法：选用限制筑窝材料和垫料模型，于PND2ND9造模处理。结果： 1.应激组与对照组相比，小鼠海马脑区c-fos表达水平无统计学差异(P>0.05) 2.应激组与对照组相比，小鼠前额叶皮质脑区c-fos表达水平无统计学差异(P>0.05) 综上，应激组小鼠与对照组小鼠c-fos基础表达水平无明显差异，提示早年应激未影响成年期小鼠前脑的c-fos基础表达。结论：本研究发现早年应激中早期MK-801处理会引起大鼠成年期NMDA受体亚基表达异常，提示其对大鼠神经发育产生了远期影响。同时实验二显示早年生活应激对小鼠成年期c-fos的基础表达无影响，为进一步实验提供基础。下一步实验通过检测成年小鼠学习记忆相关行为改变和c-fos表达的变化，研究早年应激对成年小鼠认知功能的影响。进而为临床精神疾病发病机制研究、治疗及预防提供重要依据。

关键词：早年应激 N-甲基-D-天冬氨酸受体 c-fos

同型半胱氨酸在早年应激诱导的肠易激综合征中的作用及其甲基化机制

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

同型半胱氨酸在早年应激诱导的肠易激综合征中的作用及其甲基化机...

作者：张亮军事科学院

学位级别：硕士

肠易激综合征(IBS)是一种功能紊乱性肠病,其症状主要表现为腹部疼痛或不适,伴有排便习惯或性状改变,发病率高,因其反复发作的特点为患病人群带来较大的生活负担,但目前该病发病机制尚不明确,流行病学调查显示,应激可造成IBS症状发作或... 详细信息

肠易激综合征(IBS)是一种功能紊乱性肠病,其症状主要表现为腹部疼痛或不适,伴有排便习惯或性状改变,发病率高,因其反复发作的特点为患病人群带来较大的生活负担,但目前该病发病机制尚不明确,流行病学调查显示,应激可造成IBS症状发作或加重。应激是生物机体在受到内外环境因素及社会、心理因素刺激时所出现的全身性非特异性适应反应,又称应激反应。而生命早期应激,如幼年期的精神创伤等早年负性生活事件,会增加成年后疾病的易感性,目前受到人们越来越多的关注。因此对早期应激损伤诱导的IBS的研究具有重要而独特的作用,其机制可能涉及脑-肠轴的异常变化和神经免疫内分泌网络中活性物质的异常等。近年来发现肠道菌群在脑-肠轴中扮演越来越重要的角色,菌群失调可能导致肠道内环境的紊乱和氨基酸等营养物质的代谢异常,而异常的氨基酸代谢可能导致体内活性代谢产物的异常,从而参与IBS的发病。其中,蛋氨酸在体内代谢循环中产生的一种活性物质,即同型半胱氨酸(Hcy),被公认为多种疾病的危险因子,其可能在IBS的发生发展中起到重要损伤作用,而其代谢途径中产生的甲基基团可能参与IBS相关症状的表观遗传学机制。因此,本研究从"早年应激损伤——肠道菌群失调——氨基酸代谢改变——Hcy损伤作用”这个新的的研究思路出发,揭示IBS的发病机制,并进一步探索Hcy介导的甲基化机制在IBS表观遗传学中的作用。这不仅对揭示IBS的发病机制,也对生物学诊断与治疗提供新的启示和科学依据,也对探索早年应激损伤诱导的其它疾病的生物学防治提供一定的启示和科学思路。第一章早年应激致IBS大鼠肠道菌群和氨基酸代谢的变化目的:检测早年应激致IBS大鼠肠道菌群和氨基酸代谢的改变,探讨肠道菌群失调和氨基酸代谢异常在IBS相关症状中的作用及损伤机制。方法:(1)IBS动物模型建立及行为学评价:选用新生期大鼠母婴分离(MS)的方式建立早年应激诱导的IBS疾病模型。采用行为学实验来评价和确认肠易激综合征动物模型的建立,包括结直肠扩张(CRD)-腹部回撤反射试验检测内脏敏感性、新异环境中排便性状和数量检测肠道转运功能、旷场试验和糖水偏嗜度试验检测精神行为改变,以及结肠组织HE染色。(2)肠道菌群的检测和分析:使用粪便基因组DNA快速提取试剂盒提取大鼠粪便样本中细菌基因组DNA,针对16S r DNA基因可变区域进行引物合成、扩增及测序,利用软件进行粪便样品的多样性分析。(3)氨基酸的检测:使用全自动氨基酸分析仪对各组大鼠粪便和血清样本进行氨基酸浓度检测。结果:(1)经过母婴分离干预后,与正常对照组相比,可见MS大鼠CRD容量阈值下降(P早年应激致IBS大鼠模型。(2)肠道菌群Alpha多样性分析中,与正常对照组相比,IBS大鼠的Shannon指数下降,提示IBS大鼠的菌群多样性下降。Beta多样性指数中的Lef Se分析中,IBS大鼠肠道菌群中毛螺菌科、单形拟杆菌、克里斯滕森菌科、δ变形菌纲、脱硫弧菌目、脱硫弧菌科和脱硫弧菌属的相对丰度均比正常对照组显著升高。(3)氨基酸分析发现,与正常对照组相比,IBS大鼠粪便中丝氨酸、蛋氨酸、苏氨酸、脯氨酸和赖氨酸均明显升高;血清中蛋氨酸、脯氨酸和苯丙氨酸显著升高,而甘氨酸和赖氨酸则明显下降。结论:(1)母婴分离方式建立早年应激诱导的IBS大鼠疾病模型。(2)IBS大鼠肠道菌群多样性降低,部分氨基酸代谢发生变化,它们可能共同参与了IBS的发病过程。其中蛋氨酸的显著变化提示含硫氨基酸可能在IBS的发病机制中起到重要作用。第二章Hcy在早年应激所致IBS中的作用及对甲基化水平的影响目的:研究Hcy在早年应激所致IBS中的损伤作用,并检测Hcy对甲基化水平的影响。方法:(1)Hcy在早年应激致IBS中的损伤作用:建立早年应激致IBS大鼠模型,实验动物分组为C组、MS组、MS+Met组和MS+Vit组。使用高效液相色谱法检测血浆Hcy水平。(2)Hcy对早年应激致IBS大鼠机体甲基化水平的影响:实验动物分组为C组、MS组和MS+Vit组。使用ELISA法检测大鼠血浆S-腺苷甲硫氨酸、S-腺苷同型半胱氨酸和结肠组织DNA总甲基化程度,使用Western blot法检测DNMT1、DNMT 3a/3b的蛋白表达,使用实时荧光定量PCR法检测DNMT1、DNMT3a/3b m RNA水平,使用ELISA法检测DNMTs的总活性。结果:(1)血浆Hcy浓度检测发现,MS组比C组血浆Hcy浓度明

关键词：肠易激综合征早年应激肠道菌群氨基酸代谢同型半胱氨酸甲基化 Claudin-1 Claudin-2 基因启动子