检索结果-南通市图书馆

日本通草蛉cDNA文库构建及部分ESTs分析

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昆虫学报 2008年第8期51卷 792-797页

作者：聂瑞娥杨星科刘志琦中国农业大学昆虫系北京100193 中国科学院动物研究所北京100101

本研究以日本通草蛉Chrysoperla nipponensis(Okamoto)为材料,采用Oligo(dT)引物定向克隆构建cDNA文库并进行EST序列测定,旨在以基因库的形式进行种质资源的保存,为其遗传改良奠定基础,并为探讨其分类地位提供分子依据。对该文库质量分... 详细信息

本研究以日本通草蛉Chrysoperla nipponensis(Okamoto)为材料,采用Oligo(dT)引物定向克隆构建cDNA文库并进行EST序列测定,旨在以基因库的形式进行种质资源的保存,为其遗传改良奠定基础,并为探讨其分类地位提供分子依据。对该文库质量分析表明:库容量为1.0×106,重组率为80.0%,平均插入片段为512bp。测序后最终成功得到323条表达序列标签(expressed sequencetags,ESTs)序列,经Phrap程序聚类拼接后得到236条单基因簇(unigene),包括86个重叠群(congtigs)和150个单拷贝(singlets)。使用NCBI中的BlastN和BlastX程序对236条ESTs进行本地化搜索,BlastN的结果表明:180条ESTs(76.3%)没有注解,56条ESTs(23.7%)与GenBank上公布的序列有较高的同源性,其中一条序列被确定为该种的16SrRNA基因,利用MEGA软件构建了基于该16SrRNA序列草蛉科的系统发育树,结果显示通草蛉属Chrysoperla与叉草蛉属Dichochrysa、玛草蛉属Mallada、草蛉属Chrysopa的亲缘关系比较近,这与传统分类相吻合。BlastX的比对结果为197条ESTs(83.5%)有功能注解,39条ESTs(16.5%)无注解或score值小于100。使用GO(geneontology)数据库对236条ESTs序列进行功能注释,结果表明:142条ESTs(59.7%)有注解,并表达出40多种基因产物。

关键词：日本通草蛉 cDNA文库表达序列标签(EST) 序列分析系统树

转基因玉米表达的Cry1Ab、PAT和EPSPS蛋白对日本通草蛉幼虫的安全风险评估

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植物保护学报 2018年第4期45卷 663-669页

作者：高欣欣全玉东王振营白树雄张天涛何康来中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害国家重点实验室北京100193

为评价我国自主研发的转基因玉米表达的Cry1Ab、PAT和EPSPS蛋白对日本通草蛉Chrysoperla nipponensis幼虫生长发育的安全风险,通过将外源蛋白混入日本通草蛉人工饲料中的方法,以加入砷酸二氢钾(KH_2AsO_4)的饲料为阳性对照,研究了日本... 详细信息

为评价我国自主研发的转基因玉米表达的Cry1Ab、PAT和EPSPS蛋白对日本通草蛉Chrysoperla nipponensis幼虫生长发育的安全风险,通过将外源蛋白混入日本通草蛉人工饲料中的方法,以加入砷酸二氢钾(KH_2AsO_4)的饲料为阳性对照,研究了日本通草蛉幼虫取食后的生长发育状况。结果表明:日本通草蛉取食含Cry1Ab和EPSPS蛋白饲料的幼虫发育历期、茧期、结茧率、羽化率及成虫体重等生物学参数与取食正常饲料处理相比均没有显著差异;而取食含PAT蛋白饲料的幼虫发育历期和结茧率分别为10.7 d和96.6%,与取食正常饲料的对照11.1 d和89.9%差异显著,即饲料中添加PAT蛋白显著提高了幼虫的存活率和发育速率;取食含KH_2AsO_4饲料的日本通草蛉幼虫不能存活到茧期,说明KH_2AsO_4具有显著的杀虫活性。ELISA检测结果表明,取食了分别添加有3种外源蛋白饲料的日本通草蛉幼虫体内可以检测到相应的Cry1Ab、EPSPS和PAT蛋白,含量分别为2 758.8~5 210.7、35 018.0~54 426.6、16.8~149.8 ng/g。表明转基因玉米所表达的Cry1Ab、EPSPS和PAT蛋白对日本通草蛉幼虫没有显著的不利影响。

关键词：日本通草蛉 Cry1Ab/PAT/EPSPS蛋白安全性评价转基因玉米

多异瓢虫成虫对日本通草蛉集团内捕食作用的分子检测技术

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新疆农业科学 2020年第4期57卷 636-641页

作者：王冬梅李彩虹刘建新疆农业科学院植物保护研究所/农业部西北荒漠绿洲作物有害生物综合治理重点实验室乌鲁木齐830091

【目的】研究利用分子检测技术评价棉田多异瓢虫对日本通草蛉的集团内捕食作用。【方法】根据基因库NCBI中的日本通草蛉的线粒体细胞色素氧化酶I(COI)的基因序列(登录号为KY806757),设计日本通草蛉的特异引物,并测定特异引物的灵敏度。... 详细信息

【目的】研究利用分子检测技术评价棉田多异瓢虫对日本通草蛉的集团内捕食作用。【方法】根据基因库NCBI中的日本通草蛉的线粒体细胞色素氧化酶I(COI)的基因序列(登录号为KY806757),设计日本通草蛉的特异引物,并测定特异引物的灵敏度。利用DNA检测技术,在室内以该引物检测喂食5粒日本通草蛉卵的多异瓢虫成虫中肠内靶标食物的衰变情况,估算多异瓢虫对日本通草蛉的半衰期。【结果】所设计引物只对日本通草蛉DNA具有扩增效果,对与其同域发生的其它害虫和天敌不具扩增作用,其扩增片段大小约为220 bp,其最低检出浓度为0.117 ng/μL。多异瓢虫成虫喂食日本通草蛉卵后,检出率随消化时间呈现逐渐下降的趋势,到16 h检出率为0,多异瓢虫成虫半衰期为8.32 h。【结论】利用该技术可定量评价多异瓢虫与日本通草蛉集团内竞争。

关键词：日本通草蛉细胞色素氧化酶I基因多异瓢虫成虫中肠内容物集团内竞争

12种杀虫剂对日本通草蛉不同虫态的毒力及安全性评价

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植物保护 2019年第2期45卷 211-217页

作者：王晓陈鹏张硕李振斌王凡刘锦刘永杰山东农业大学植物保护学院山东省蔬菜病虫生物学重点实验室泰安271018

为明确常见杀虫剂对日本通草蛉各虫态的影响,在室内分别采用浸渍法和喷雾法测定了12种(8类)杀虫剂对日本通草蛉卵、幼虫、蛹和成虫的毒性,并评价了杀虫剂对日本通草蛉的毒性风险。结果表明,高效氯氰菊酯对日本通草蛉为极高风险,毒死蜱... 详细信息

为明确常见杀虫剂对日本通草蛉各虫态的影响,在室内分别采用浸渍法和喷雾法测定了12种(8类)杀虫剂对日本通草蛉卵、幼虫、蛹和成虫的毒性,并评价了杀虫剂对日本通草蛉的毒性风险。结果表明,高效氯氰菊酯对日本通草蛉为极高风险,毒死蜱、吡虫啉、烯啶虫胺和阿维菌素为高风险,溴氰虫酰胺、啶虫脒和氯虫苯甲酰胺为中等风险,噻嗪酮、吡蚜酮、螺虫乙酯和甲氧虫酰肼为低风险;与其他虫态相比,12种杀虫剂对日本通草蛉蛹的毒性均为最低。在害虫生物防治及综合治理中应尽量选用对日本通草蛉毒性低的杀虫剂,以起到保护天敌的作用。

关键词：日本通草蛉杀虫剂毒性致死中浓度毒性风险

吡虫啉亚致死剂量对日本通草蛉实验种群生命表的影响

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植物保护学报 2016年第6期43卷 1014-1019页

作者：刘中芳封云涛高越郭晓君张鹏九范仁俊山西省农业科学院植物保护研究所农业有害生物综合治理山西省重点实验室太原030031

为评价吡虫啉对日本通草蛉Chrysoperla nipponensis（Okamoto）实验种群的亚致死效应,采用浸渍法处理日本通草蛉卵,测定了吡虫啉亚致死剂量LC_（10）、LC_（20）、LC_（30）对日本通草蛉生长发育、繁殖力和生命表参数的影响。结果表明,... 详细信息

为评价吡虫啉对日本通草蛉Chrysoperla nipponensis（Okamoto）实验种群的亚致死效应,采用浸渍法处理日本通草蛉卵,测定了吡虫啉亚致死剂量LC_（10）、LC_（20）、LC_（30）对日本通草蛉生长发育、繁殖力和生命表参数的影响。结果表明,经吡虫啉亚致死剂量LC_（10）、LC_（20）、LC_（30）处理后,日本通草蛉幼虫发育历期和蛹期分别延长0.86~2.04 d和1.00~2.37 d,平均单头蛹重降低1.16~1.56 mg,羽化率降低6.13%~13.08%;雌虫产卵前期延长0.19~0.51 d,每雌平均产卵量减少17.75~51.64粒,寿命减少1.75~2.84 d;内禀增长力（r_m）、净繁殖率（R_0）和周限增长率（λ）均显著降低,平均世代历期（T）和种群加倍时间（D_t）均显著延长。研究表明,吡虫啉亚致死剂量对日本通草蛉种群的增长具有抑制作用。

关键词：日本通草蛉亚致死效应吡虫啉生命表

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一种半固体人工饲料连代饲养日本通草蛉幼虫

环境昆虫学报 2010年第1期32卷 85-89页

作者：李国平马丽封洪强邱峰河南省农业科学院植物保护研究所郑州450002 河南农业职业学院植物科学系河南中牟451450

以棉蚜Aphis gossypii Glover饲养日本通草蛉Chrysoperla nippoensis(Okamoto)作为对照,用一种半固体人工饲料连续饲养10代日本通草蛉,对日本通草蛉各生长阶段的生长和发育指标进行观测。结果显示,用人工饲料饲养的日本通草蛉的幼虫历期... 详细信息

以棉蚜Aphis gossypii Glover饲养日本通草蛉Chrysoperla nippoensis(Okamoto)作为对照,用一种半固体人工饲料连续饲养10代日本通草蛉,对日本通草蛉各生长阶段的生长和发育指标进行观测。结果显示,用人工饲料饲养的日本通草蛉的幼虫历期为13～15d,蛹期为8d,较对照组的7d和6d分别延长6～8d和2d;用棉蚜饲养的对照组日本通草蛉幼虫累计存活率为94%,成虫获得率为87%,而人工饲料饲养连续10代的幼虫累计存活率为81%～89%,成虫获得率69%～79%。取食人工饲料的日本通草蛉成虫,在产卵前期、产卵量、产卵期及寿命方面与对照组存在显著的差异,人工饲料组草蛉的产卵前期为5.07～5.22d,而对照组草蛉的产卵前期为4.12d,人工饲料组草蛉的产卵量为190～390粒,对照组的单雌产卵量为667.2粒,人工饲料组草蛉的寿命为36～38d,对照组成虫寿命52d。以上结果表明,这种半固体人工饲料可以满足日本通草蛉幼虫生长发育基本需要,可用于日本通草蛉的室内继代饲养,但需要进一步优化配方。

关键词：日本通草蛉人工饲料生长发育繁殖

取食不同食物对日本通草蛉生长发育、繁殖和飞行能力的影响

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中国生物防治学报 2012年第1期28卷 15-19页

作者：刘中芳吴孔明中国农业科学院植物保护研究所北京100193 山西省农业科学院植物保护研究所太原030032

本文研究了日本通草蛉Chrysoperla nipponensis幼虫取食棉铃虫Helicoverpa armigera、小地老虎Agrotisipsilon、甜菜夜蛾Spodoptera exigua、斜纹夜蛾Spodoptera litura 4种鳞翅目害虫卵和棉蚜Aphis gossypii共5种食物时的生长发育、繁殖和飞行能力。结果表明:幼虫取食棉铃虫卵时发育历期最长(12.95 d)、蛹期最短(9.69 d),取食棉蚜时发育历期最短(10.28 d)、蛹期最长(10.39 d);幼虫食物对蛹重、成虫羽化率、产卵前期、产卵量和寿命均无显著影响(P>0.05)。飞行能力测试中,幼虫食物显著影响成虫的累计飞行时间和平均飞行速度,而对成虫累计飞行距离则无显著影响;幼虫取食棉铃虫卵时成虫累计飞行时间最长(13.58 h)、飞行超过10 h的个体占60%,平均飞行速度最小(0.49 km h 1)、所有个体飞行速度均小于1.0 km h 1;取食棉蚜时成虫累计飞行时间最短(9.38 h)、飞行超过10 h的个体仅占36.85%,平均飞行速度最大(0.75 km h 1)、21.05%个体飞行速度大于1.0 km h 1。结果说明,幼虫食物是影响日本通草蛉个体发育和种群动态的重要因素之一。

关键词：日本通草蛉幼虫食物生长发育繁殖能力飞行能力

转cry1Ab/2Aj和cry1Ac基因玉米对龟纹瓢虫和日本通草蛉的生态安全性

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转cry1Ab/2Aj和cry1Ac基因玉米对龟纹瓢虫和日本通草蛉的生态安全...

作者：刘艳敏中国农业科学院

学位级别：硕士

转Bacillus thuringiensis (Bt)基因抗虫作物的应用能有效防控靶标害虫的发生,降低广谱杀虫剂的施用,保护农田生态环境。但是,转基因作物的种植是否会非靶标生物如在农田发挥害虫种群控制作物用的天敌昆虫带来负面影响一直是转基因生态... 详细信息

转Bacillus thuringiensis (Bt)基因抗虫作物的应用能有效防控靶标害虫的发生,降低广谱杀虫剂的施用,保护农田生态环境。但是,转基因作物的种植是否会非靶标生物如在农田发挥害虫种群控制作物用的天敌昆虫带来负面影响一直是转基因生态安全领域关注的一个焦点问题。龟纹瓢虫Propylea japonica Thunberg和日本通草蛉Chrysoperla sinica Tjedar是农田生态系统中常见的捕食性天敌昆虫。两类天敌昆虫除了捕食猎物,还有取食花粉的习性,特别是草蛉成虫不捕食昆虫,主要以花粉为食物。这样,两种天敌昆虫均可通过取食Bt作物花粉而直接摄取到Bt蛋白。因此,两种天敌昆虫被作为指示性生物而广泛应用于转基因抗虫作物非靶标效应评价工作中。本研究评价了转crylAb/2Aj和转crylAc基因玉米对龟纹瓢虫幼虫和日本通草蛉成虫的生态安全性。研究结果归纳如下：1、基于本实验室的前期工作及经验,发展了评价转基因抗虫玉米花粉对龟纹瓢虫幼虫潜在影响的生测体系。通过所发展的生测体系,将非转基因玉米(郑58)花粉直接饲喂给龟纹瓢虫幼虫,通过昆虫解剖镜检发现：龟纹瓢虫幼虫取食到大量的玉米花粉,且花粉取食量随着幼虫龄期的增长而显著增加,四龄幼虫的花粉取食量达到最高为138.94±22.89μg。结果说明所发展的饲喂体系允许瓢虫幼虫取食到大量的玉米花粉。以相应的非转基因亲本花粉为对照,采用该生测体系评价了两种转基因抗虫玉米品种双抗12-5(转crylAb/2Aj基因)和BT-799(转cry1Ac基因)对龟纹瓢虫幼虫的潜在影响。结果显示：取食Bt玉米花粉的龟纹瓢虫幼虫发育历期缩短,但对龟纹瓢虫幼虫其他生命参数如存活率、化蛹率、羽化率和成虫鲜重没有显著影响。为了明确Bt玉米花粉被龟纹瓢虫幼虫取食后其所含Cry蛋白的归趋,检测转crylAb/2Aj基因玉米新鲜花粉粒及龟纹瓢虫幼虫粪便中花粉粒中Cry蛋白的平均含量,分析显示大约77%的CrylAb/2Aj蛋白被瓢虫幼虫排出体内。结果说明,龟纹瓢虫通过取食转Bt基因玉米花粉可暴露于花粉中包含的Cry蛋白,但CrylAb/2Aj和CrylAc蛋白对龟纹瓢虫幼虫没有毒性,种植表达这类Bt蛋白的转基因玉米对龟纹瓢虫不会产生显著的负面影响。2、发展了评价转基因玉米花粉对日本通草蛉成虫潜在影响的试验体系,评价取食转crylAb/2Aj和crylAc基因的玉米花粉对日本通草蛉成虫的安全性。结果表明：取食转基因玉米花粉25天,日本通草蛉成虫的存活率、产卵前期和日均产卵量等生命表参数与取食非转基因亲本对照玉米花粉的草蛉成虫没有显著性差异。通过ELISA试验进一步明确了试验中日本通草蛉成虫取食到较高浓度的Cry蛋白。结果表明,Cry1Ab/2Aj和CrylAc蛋白对日本通草蛉没有毒性,种植转crylAb/2Aj和crylAc基因玉米对日本通草蛉成虫不会带来显著的负面影响。

关键词：龟纹瓢虫日本通草蛉 Cry1Ab/2Aj Cry1Ac 非靶标影响