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日本脑炎病毒WHe株NS1基因的克隆、测序及表达

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西北农林科技大学学报（自然科学版） 2007年第4期35卷 23-26,31页

作者：乔宪凤唐青海郑新民熊忠良刘西梅华文君周荆荣何维明湖北省农业科学院畜牧兽医研究所湖北省动物胚胎工程及分子育种重点实验室湖北武汉430064 西北农林科技大学动物科技学院陕西杨凌712100

以日本脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)WHe株的基因组RNA为模板,采用RT-PCR技术,克隆了JEV WHe株的NS1基因,并对其进行了测序和序列分析。构建了pET28b-NS1表达载体,转化表达宿主大肠杆菌BL21(DE3),并对其进行了诱导表达,对... 详细信息

以日本脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)WHe株的基因组RNA为模板,采用RT-PCR技术,克隆了JEV WHe株的NS1基因,并对其进行了测序和序列分析。构建了pET28b-NS1表达载体,转化表达宿主大肠杆菌BL21(DE3),并对其进行了诱导表达,对表达产物进行检测。结果表明,NS1基因全长1 145 bp,其核酸序列与JEV P3株同源性为99．4％,与SA14和SA14-14-2等27个JEV毒株的核苷酸序列同源性为98％,表明NS1基因的保守性很高;pET28b-NS1表达产物的相对分子质量约为43 ku,大小与预期结果相符。NS1基因克隆表达成功。

关键词：日本脑炎 WHe株 NS1基因 RT-PCR

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日本脑炎28例患者的预后分析

脑与神经疾病杂志 2010年第3期18卷 199-201页

作者：连立飞李杜娟贾建平黄丽娜河南科技大学第一附属医院神经内科洛阳471003 华中科技大学同济医学院首都医科大学北京宣武医院神经内科

目的评估日本脑炎(JE)患者预后的影响因素。方法回顾性分析2004年7月～2008年9月我院治疗的28例JE患者,评定其临床资料及6个月时预后。结果 28例JE患者6个月时随访,9名患者死亡,8名患者预后差,生活不能自理。结论呼吸衰竭、癫、深昏迷... 详细信息

目的评估日本脑炎(JE)患者预后的影响因素。方法回顾性分析2004年7月～2008年9月我院治疗的28例JE患者,评定其临床资料及6个月时预后。结果 28例JE患者6个月时随访,9名患者死亡,8名患者预后差,生活不能自理。结论呼吸衰竭、癫、深昏迷(GCS240mmH2O)和脑电图异常及影像学病变范围广与结局差相关(P2次)、颅内压显著增高和深昏迷与死亡密切相关(P<0.05)。积极控制成年JE患者出现的癫发作和高颅压可能是改善预后的关键措施。

关键词：日本脑炎癫发作颅内压

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日本脑炎病毒基因疫苗的研究进展

细胞与分子免疫学杂志 2002年第5期18卷 512-514页

作者：吴玉水马文煜等第四军医大学微生物学教研室室陕西西安710032

日本脑炎 (Ｊａｐａｎｅｓｅｅｎｃｅｐｈａｌｉｔｉｓ ,ＪＥ)是一种由蚊虫传播引起的人类和马中枢神经系统感染性疾病。人类每年的发病总例数约 3.5万以上 ,其中约有 1万例患者死亡。日本脑炎病毒 (ＪＥＶ)为黄病毒科黄病毒属的成员之... 详细信息

日本脑炎 (Ｊａｐａｎｅｓｅｅｎｃｅｐｈａｌｉｔｉｓ ,ＪＥ)是一种由蚊虫传播引起的人类和马中枢神经系统感染性疾病。人类每年的发病总例数约 3.5万以上 ,其中约有 1万例患者死亡。日本脑炎病毒 (ＪＥＶ)为黄病毒科黄病毒属的成员之一。其他重要的人类病原性黄病毒包括 :黄热病、登革热 1～ 4型、蜱传脑炎和圣路易脑炎病毒等。疫苗是预防黄病毒感染的有效手段。目前用于预防ＪＥＶ感染的疫苗有 3种 ,两种为灭活疫苗 (分别由感染的鼠脑和原代仓鼠肾细胞培养制备 ) ,一种为减毒活疫苗 (ＳＡ14 14 2株 )。国外采用的为感染鼠脑制备的灭活疫苗 ,其缺点是费用高、有引起变态反应的危险 ,且不能刺激机

关键词：日本脑炎日本脑炎病毒基因疫苗 JE

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儿童日本脑炎的治疗进展

临床医药文献电子杂志 2020年第48期7卷 190-190页

作者：陈丹胡越重庆医科大学附属儿童医院神经内科儿童发育疾病研究教育部重点实验室国家儿童健康与疾病临床医学研究中心儿童发育重大疾病国家国际科技合作基地儿科学重庆市重点实验室

日本脑炎是亚洲的虫媒性疾病,是由日本脑炎病毒造成的,其可以造成严重的神经系统表现。近年来我们对日本脑炎的体外研究及动物模型有了较大的进步,但对人类的治疗方法上仍然落后。少许的发病机制试验研究及治疗研究已经在进行,本文总结... 详细信息

日本脑炎是亚洲的虫媒性疾病,是由日本脑炎病毒造成的,其可以造成严重的神经系统表现。近年来我们对日本脑炎的体外研究及动物模型有了较大的进步,但对人类的治疗方法上仍然落后。少许的发病机制试验研究及治疗研究已经在进行,本文总结了日本脑炎的病因流行病学、临床表现、临床试验治疗及潜在的治疗药物。

关键词：儿童日本脑炎治疗进展

广东从化无规定马属动物疫病区龙门缓冲区猪日本脑炎免疫效果监测及分析

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广东畜牧兽医科技 2016年第3期41卷 6-8页

作者：王政张永泉龚伟宏薛培群惠州市动物卫生监督所广东惠州516001

为了解广东从化无规定马属动物疫病区龙门缓冲区猪日本脑炎的免疫效果,指导该县日本脑炎的免疫工作,采用猪乙型脑炎病毒ELISA抗体检测试剂盒对从龙门缓冲区已免疫日本脑炎疫苗的8个猪场采集的240份血清进行了猪日本脑炎抗体的检测与分... 详细信息

为了解广东从化无规定马属动物疫病区龙门缓冲区猪日本脑炎的免疫效果,指导该县日本脑炎的免疫工作,采用猪乙型脑炎病毒ELISA抗体检测试剂盒对从龙门缓冲区已免疫日本脑炎疫苗的8个猪场采集的240份血清进行了猪日本脑炎抗体的检测与分析。结果显示,龙门缓冲区猪日本脑炎免疫抗体整体阳性率为92.92%;种猪的抗体阳性率水平高于商品肉猪,但差异不显著;良好饲养条件下猪群的抗体阳性率水平高于中等饲养条件下的猪群,但差异不显著。试验说明猪日本脑炎疫苗取得良好的免疫效果,能产生较强的保护力,对日本脑炎应坚持疫苗预防为主的防控措施。

关键词：龙门缓冲区日本脑炎免疫效果

日本脑炎病毒DNA疫苗和基因工程亚单位颗粒疫苗的动物保护实验研究

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中国人兽共患病杂志 2002年第6期18卷 3-6页

作者：吴玉水张富泉马文煜宋建华肖毅杨敬张红毅第四军医大学微生物学教研室西安710032 DivisionofBiomedicalSciences ImperialCollegeofScienceTechnologyandMedicine

目的　评价 3种日本脑炎病毒 (JEV)新型疫苗 ,即E蛋白病毒样颗粒 (VLPs)、DNA疫苗 (pV/JE)以及E蛋白颗粒 (Eps)的动物免疫效果。方法　BALB/c小鼠经 2次接种疫苗后 ,测定其病毒特异性的CTL活性、结合抗体、中和抗体 ,并以10LD5 0JEV攻... 详细信息

目的　评价 3种日本脑炎病毒 (JEV)新型疫苗 ,即E蛋白病毒样颗粒 (VLPs)、DNA疫苗 (pV/JE)以及E蛋白颗粒 (Eps)的动物免疫效果。方法　BALB/c小鼠经 2次接种疫苗后 ,测定其病毒特异性的CTL活性、结合抗体、中和抗体 ,并以10LD5 0JEV攻击免疫小鼠 ,观察其保护效果。结果　各新型疫苗组的CTL活性为 33%～ 5 6 % ,灭活疫苗组为 2 2 % ,而载体和PBS对照组的CTL活性分别为 17%和 18%。一次免疫后 ,实验组小鼠血清结合抗体阳转率为 90 %。除DNA疫苗组外 ,各组小鼠的二次免疫血清抗体效价高于一次免疫的抗体效价 (P <0 0 5 ) ,且以VLPs加佐剂组小鼠血清抗体效价最高 ,Eps加佐剂组次之 ,均高于 pV/JE组和灭活疫苗组 (P <0 0 5 )。三种疫苗可诱发小鼠产生中和抗体。各实验组小鼠能够抵抗JEV的攻击 ,而对照组小鼠的死亡率为 37 5 %。结论　三种新型疫苗可以正确表达JEV的E蛋白表位 ,可诱发免疫小鼠产生抗JEV的中和抗体并有保护性作用 ,免疫效果优于灭活疫苗 ,有可能成为候选的JEV新型疫苗。

关键词： DNA疫苗日本脑炎日本脑炎病毒疫苗动物免疫 E蛋白病毒样颗粒 E蛋白颗粒

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日本脑炎基因工程疫苗的研究进展

猪业科学 2008年第6期25卷 30-33页

作者：常志顺徐健汤德元李春燕云南省畜牧兽医科学研究所贵州大学动物科学学院贵州贵阳550025 贵州大学动物科学学院

日本脑炎是严重威胁人畜健康的一种中枢神经系统的急性传染病,是重要的人兽共患病,世界卫生组织把日本脑炎疫苗确定为优先研究和开发的项目之一。日本脑炎的防治主要是接种灭活苗和弱毒苗,由于灭活苗免疫原性较差、注射量大,且需重复注... 详细信息

日本脑炎是严重威胁人畜健康的一种中枢神经系统的急性传染病,是重要的人兽共患病,世界卫生组织把日本脑炎疫苗确定为优先研究和开发的项目之一。日本脑炎的防治主要是接种灭活苗和弱毒苗,由于灭活苗免疫原性较差、注射量大,且需重复注射;而我国利用SA14-14-2弱毒株研制的弱毒苗在世界上居于领先水平,具有接种针次少、副反应小、免疫原性强等优点,已在国内得到广泛应用。但弱毒苗易受母源抗体的影响,有毒力回复突变的可能性,且存在胎内感染的潜在隐患,加之SA14-14-2株病毒通过蚊虫繁殖后,其弱毒特性和基因型特征能否发生回复突变,致使毒力增强,引起健康人的感染和传播,是人们最担心的问题。如何选择合适的日本脑炎疫苗防治该病是当今人们在该领域研究的热点问题,随着日本脑炎病毒分子生物研究的深入,基因工程疫苗是日本脑炎疫苗的新的发展方向,现在很多学者正在设法利用生物技术手段研究开发基因工程疫苗,以克服现有疫苗的缺点,此项研究的成功将填补国内空白。本文综述了日本脑炎基因工程亚单位疫苗、合成肽疫苗、重组活疫苗和核酸疫苗等的研究新进展,为日本脑炎基因工程疫苗的深入研究提供参考。

关键词：日本脑炎基因工程疫苗热点研究

日本脑炎ML-17两个变异株的基因组序列及突变分析(英文)

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中国热带医学 2006年第8期6卷 1340-1344页

作者：金玉明 Afjal Hossain Khan Mohammed Alimul Islam Takeshi Nabeshima Shingo Inoue Kouichi Morita Department of Virology Institute of Tropical MedicineNagasaki University1-12-4 SakamotoNagasaki 852-8523Japan Hainan Provincial Center of Disease Control and Prevention Department of Virology Institute of Tropical MedicineNagasaki University1-12-4 SakamotoNagasaki 852-8523Japan

目的鉴别日本脑炎疫苗株ML-17的两个大宽变异株（ML-17L2和ML-17L4）的存在，并通过全基因组序列测定分析引起斑形和毒力改变的基因突变。方法首先对疫苗株ML-17在传代过程中出现的多斑ML-17sh的两个大宽变异株进行纯化和鉴定，再对两... 详细信息

目的鉴别日本脑炎疫苗株ML-17的两个大宽变异株（ML-17L2和ML-17L4）的存在，并通过全基因组序列测定分析引起斑形和毒力改变的基因突变。方法首先对疫苗株ML-17在传代过程中出现的多斑ML-17sh的两个大宽变异株进行纯化和鉴定，再对两个大斑变异株进行全基因组序列测定和全编码氨基酸序列推导。并与小斑疫苗株ML-17及其大斑亲代野毒株JaOH0566的全核苷酸序列和全编码氨基酸序列进行比较，分析引起宽形改变的基因突变。并应用小白鼠试验检查ML-17变异前后的神经侵袭力和毒力变化。结果全基因组序列分析显示两个大斑变异株的核苷酸总数均为10977个，与ML-17和JaOH0566相比较，分剐有33和34个核苷酸变异散在分布于ML-17L2和ML-17L4的全基因组中，其中又分别有12和13个核苷酸导致了氨基酸的改变。在ML-17L2和ML-17L4的衣壳蛋白区没有氨基酸变异，但在包膜蛋白区各有一个氨基酸变异；在5’端非编码区没有核苷酸变异，但在3’端非编码区有3～4个核苷酸变异，且各增加了一个额外的10699核苷酸。ML-17和ML-17sh的小鼠LD50分别为大于1×10^6FFU和481FFU。变异后毒力明显增强。结论发生在两个大斑变异株的第5非结构蛋白区和其它区的氨基酸返祖变异（变回与JaOH0566相同）和新变异，可能引起了宽彤的改变；而全部5个氨基酸返祖变异和2—3个氨基酸新变异可能与其毒力改变有关。本次研究为ML-17L2和ML-17L4的斑形和毒力改变提供了分子遗传学基础。

关键词：日本脑炎 ML-17减毒活疫苗株全核苷酸序列测定突变

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猪日本脑炎DNA疫苗的构建与鉴定

中国动物检疫 2008年第3期25卷 26-28页

作者：唐青海董志强乔宪凤郑新民华文君何维明西北农林科技大学动物科技学院陕西杨凌712100 中国科学院广州生物医药与健康研究院广东广州510620 湖北省畜牧兽医研究所武汉430064

为开发猪日本脑炎新型疫苗,采用PCR方法扩增日本脑炎病毒WHe株prME和NS1基因,并将其分别克隆至DNA疫苗载体pVAX1,分别用酶切和测序分析进行鉴定。结果表明prME和NS1基因大小分别为2.1kb和1.1kb,酶切和测序结果表明,猪日本脑炎DNA疫苗pVA... 详细信息

为开发猪日本脑炎新型疫苗,采用PCR方法扩增日本脑炎病毒WHe株prME和NS1基因,并将其分别克隆至DNA疫苗载体pVAX1,分别用酶切和测序分析进行鉴定。结果表明prME和NS1基因大小分别为2.1kb和1.1kb,酶切和测序结果表明,猪日本脑炎DNA疫苗pVAX1-prME和pVAX1-NS1构建成功,为进一步免疫试验奠定了基础。

关键词：日本脑炎 DNA疫苗构建鉴定