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一种适用于骨髓瘤细胞、淋巴细胞杂交瘤细胞生长的无血清培养液CBSF

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生物工程学报 1987年第1期 38-45页

作者：江子卿季永镛中国科学院上海细胞生物学研究所

本文报道CBSF是一种适用于骨髓瘤细胞、淋巴细胞杂交瘤细胞的无血清培养液。我们成功地培养了几株骨髓瘤和杂交瘤细胞,它们能长期在其中生长繁殖传代,并保持杂交瘤细胞能持续分泌抗原特异的抗体。

关键词：无血清培养液

人牙周膜成纤维细胞在无血清培养液中的生长特性

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牙体牙髓牙周病学杂志 2002年第2期12卷 68-71页

作者：张云飞段银钟冯雪刘源赵宇第四军医大学口腔医学院陕西西安710032

目的 :探讨人牙周膜成纤维细胞在无血清培养液中的生长特性。方法 :用倒置显微镜和MTT法观察人牙周膜成纤维细胞在无血清培养液中的生长和增殖变化。结果 :人牙周膜成纤维细胞在无血清培养液条件下可以生长和增殖 ,但与含血清培养液相... 详细信息

目的 :探讨人牙周膜成纤维细胞在无血清培养液中的生长特性。方法 :用倒置显微镜和MTT法观察人牙周膜成纤维细胞在无血清培养液中的生长和增殖变化。结果 :人牙周膜成纤维细胞在无血清培养液条件下可以生长和增殖 ,但与含血清培养液相比 ,其增殖速率变缓 ,分化明显。结论 :无血清培养液可应用于人牙周膜成纤维细胞的体外培养和实验研究中。

关键词：人牙周膜成纤维细胞无血清培养液体外培养细胞增殖

Marc-145细胞无血清培养液组分的优化筛选

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生物技术通讯 2012年第6期23卷 790-799页

作者：冯磊吴培培褚轩王伟峰侯继波江苏省农科院国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014

目的:对Marc-145细胞无血清培养液组分及浓度进行优化筛选。方法:采用Plackett-Burman设计和中心组合旋转设计对不同的营养成分进行优化筛选。结果:经Plackett-Burman设计,利用20组实验对14种不同营养成分进行考察,发现孕酮、抗氧化试... 详细信息

目的:对Marc-145细胞无血清培养液组分及浓度进行优化筛选。方法:采用Plackett-Burman设计和中心组合旋转设计对不同的营养成分进行优化筛选。结果:经Plackett-Burman设计,利用20组实验对14种不同营养成分进行考察,发现孕酮、抗氧化试剂、乙醇胺、维生素B6、维生素B12和脂肪酸复合剂对Marc-145细胞无血清悬浮生长的比生长速率有显著影响;针对该6种因素进行中心组合旋转实验设计,利用53组实验筛选出它们的最优使用浓度分别为孕酮5.5 mg/L、抗氧化试剂250μL/L、乙醇胺2.1 mL/L、维生素B122.86 mg/L、维生素B644μg/L和脂肪酸复合剂215μL/L。结论:经2种实验设计方法优化,确定了Marc-145细胞无血清培养液组分及最适浓度,为无血清悬浮培养Marc-145细胞及增殖猪繁殖及呼吸综合征病毒提供了实验基础。

关键词： Marc-145细胞 Plackett-Burman设计中心组合旋转设计悬浮培养无血清培养液

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无血清培养液流感病毒分离效果分析

江苏预防医学 2019年第5期30卷 576-577页

作者：史文凤刘海波北京市房山区疾病预防控制中心北京102400

目的对比分析有无血清培养液流感病毒分离效果。方法收集流感哨点医院发病3天内流感样病例咽拭子720份,采用荧光定量PCR法检测流感病毒核酸及分型,犬肾细胞(MDCK)培养法进行病毒分离,细胞病变观察和微量血凝实验(HA)检测病毒是否分离成... 详细信息

目的对比分析有无血清培养液流感病毒分离效果。方法收集流感哨点医院发病3天内流感样病例咽拭子720份,采用荧光定量PCR法检测流感病毒核酸及分型,犬肾细胞(MDCK)培养法进行病毒分离,细胞病变观察和微量血凝实验(HA)检测病毒是否分离成功并测定HA价。结果720份标本中病毒核酸阳性130份,阳性率为18.06%。130份阳性标本,采用含血清培养液病毒分离阳性68份,阳性率为52.31%(68/130),其中H1N1亚型6份,H3N2亚型2份,BV亚型58份,BY亚型2份;无血清培养液病毒分离阳性100份,阳性率为76.92%(100/130),其中H1N1亚型12份,H3N2亚型21份,BV亚型63份,BY亚型4份。两种方法分离差异有统计学意义(χ2=17.23,P血清培养液培养后无血凝滴度标本32份,用无血清培养液培养后血凝滴度在1 1~1 256,且BV和BY亚型血凝滴度较高。结论无血清培养液较有血清培养液流感病毒分离效果更好。

关键词：流感病毒流感样病例无血清培养液病毒分离

人生长素基因工程细胞C-4系的无血清培液培养

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细胞生物学杂志 1994年第2期16卷 89-91页

作者：李云宝孙燮均姚曾序中国科学院上海细胞生物学研究所 200031

C-4工程细胞系是整合有hGH和mMT启动子融合基因的CHO dhfr^-细胞,在cd^(++)作用下能够表达并分泌hGH。该细胞系经过驯化,可适应在CBSF-Ⅱ无血清培液中长期生长、传代,同时仍接受cd^(++)的诱导作用,分泌hGH。CBSF-Ⅱ培液中蛋白含量很低(2... 详细信息

C-4工程细胞系是整合有hGH和mMT启动子融合基因的CHO dhfr^-细胞,在cd^(++)作用下能够表达并分泌hGH。该细胞系经过驯化,可适应在CBSF-Ⅱ无血清培液中长期生长、传代,同时仍接受cd^(++)的诱导作用,分泌hGH。CBSF-Ⅱ培液中蛋白含量很低(20μg/ml),为了易于获得高纯度产品和降低费用,用于必须以哺乳动物细胞作为转基因靶细胞生产的生物制品,是值得尝试的。

关键词：生长素基因工程细胞无血清培养液

一种新的胰岛素及生长因子促生长活性测定系统

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生物化学与生物物理学报 1995年第5期27卷 487-492页

作者：张新夏曙莉友冈康弘坂仓照妤景乃禾中国科学院上海生物化学研究所日本理化学研究所筑波生命科学中心

ＧＲ２Ｈ６细胞是从小鼠乳腺癌细胞衍生来的成纤维细胞样细胞株．该细胞能在特定的无血清培养液生长，我们发现在此无血清培养条件下，ＧＲ２Ｈ６细胞生长情况与胰岛素、表皮生长因子和类胰岛素生长因子－Ｉ的浓度有较好的相关性，根据... 详细信息

ＧＲ２Ｈ６细胞是从小鼠乳腺癌细胞衍生来的成纤维细胞样细胞株．该细胞能在特定的无血清培养液生长，我们发现在此无血清培养条件下，ＧＲ２Ｈ６细胞生长情况与胰岛素、表皮生长因子和类胰岛素生长因子－Ｉ的浓度有较好的相关性，根据细胞数目和ＤＮＡ总量的变化可定量测定胰岛素和上述生长因子对该细胞林的促生长作用。据此，本实验室建立了一种新的胰岛素与生长因子促生长活性测定系统。与已知的胰岛素和生长因子测活系统比较，具有功能多、灵敏度高、重复性好的优点。它的建立为进一步研究胰岛素促细胞生长的功能提供了一个良好的模型，并为生长因子的生物活性测定开辟了新的途径．

关键词：胰岛素表皮生长因子类胰岛素生长因子-I 生物测活系统无血清培养液

以肝素和抗CD16抗体为基础的扩增人脐血NK细胞无血清培养体系的建立

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中国实验血液学杂志 2018年第2期26卷 552-556页

作者：王翘楚郑亮南京中医药大学第二临床医学院江苏南京210023 江苏省第二中医院消化内科江苏南京210017

目的:建立一种新方法以用于体外培养扩增人脐血来源的NK细胞,从而为NK细胞的治疗奠定基础。方法:收集人脐血单个核细胞,将细胞按1.5×10~6/ml悬浮于含5%自体血浆、重组人IL-15(50 ng/ml)和氢化考的松琥珀酸钠(5×10^(-8)mol/L)组成的无... 详细信息

目的:建立一种新方法以用于体外培养扩增人脐血来源的NK细胞,从而为NK细胞的治疗奠定基础。方法:收集人脐血单个核细胞,将细胞按1.5×10~6/ml悬浮于含5%自体血浆、重组人IL-15(50 ng/ml)和氢化考的松琥珀酸钠(5×10^(-8)mol/L)组成的无血清培养液中,接种于含肝素钠或/和重组抗人CD16单克隆抗体铺板(预先铺板)的培养瓶中,其剂量分别为100 U/cm^2和1μg/cm^2底面积。培养2周后收集细胞,计细胞总数,应用流式细胞术检测细胞中CD3^-/CD56^+比例。以K562细胞为靶细胞,应用MTT实验观察不同效靶比条件下的NK的细胞毒作用。结果:与未铺板培养体系比较,抗CD16抗体及肝素钠铺板体系培养的细胞,在培养1周内易见贴壁的集落。培养2周后,预先铺板组细胞扩增倍数明显高于未铺板组,且CD3^-/CD56^+比例显著升高,尤以抗体和肝素混合铺板组为显著(P培养组所获得细胞对K562细胞的杀伤活性更强。结论:利用肝素和抗CD16抗体铺板,在培养体系中加入IL-15和氢化考的松,可使NK细胞优势扩增,从而获得纯度较高、细胞毒活性较强的NK细胞。

关键词：肝素 NK细胞抗CD16抗体无血清培养液

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无血清培养脐带间充质干细胞的研究

中国实验血液学杂志 2013年第5期21卷 1256-1260页

作者：周平李丹陈广华王易苏州大学附属儿童医院血液肿瘤科江苏苏州215003 苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室江苏苏州215002

本研究观察无血清培养液培养的人脐带间充质干细胞(UC-MSC),并比较与含10%胎牛血清培养液培养的人脐带间充质干细胞的异同。采集正常足月剖宫产胎儿脐带,用MesenCult-XF无血清培养液或含10%胎牛血清培养液培养。观察不同培养液培养的间... 详细信息

本研究观察无血清培养液培养的人脐带间充质干细胞(UC-MSC),并比较与含10%胎牛血清培养液培养的人脐带间充质干细胞的异同。采集正常足月剖宫产胎儿脐带,用MesenCult-XF无血清培养液或含10%胎牛血清培养液培养。观察不同培养液培养的间充质干细胞细胞的形态、免疫表型、细胞周期、增殖分化潜能及对混合淋巴细胞反应的抑制作用。结果表明,采用无血清MesenCult-XF培养液培养的MSC平均传代倍增6.57±0.7倍,含血清培养液培养的MSC平均传代倍增4,59±0.45倍(P培养液培养的MSC均表达CD44、CD90、CD73、CD105抗原,不表达CD31、CD45、HLA-DR及CD34等抗原,表达程度无明显统计学差异;无血清培养液培养的MSC(65±5.2)%均为G o/G1期细胞,含血清培养液培养的MSC(62±3.1)%为G o/G1期细胞(P>0.05);两种培养液培养的人脐带MSC均可向成脂细胞、成骨细胞分化;无血清培养液培养的脐带MSC按1 000、5 000、10 000、20 000个细胞/孔接种密度与反应细胞和刺激细胞共培养的每分钟闪烁值(CPM)分别为(6.43±0.47)×104、(4.30±0.38)×104、(1.97±0.13)×104和(0.24±0.03)×104,含血清培养液培养的MSC与不同密度的混合淋巴细胞共培养的CPM值分别为(7.85±0.07)×104、(5.64±0.12)×104、(3.09±0.18)×104和(1.73±0.05)×104。结论:无血清培养液培养的细胞均为MSC,有传代增殖潜能,传代可达临床治疗MSC细胞量,并可避免异种蛋白致敏。

关键词：脐带间充质干细胞无血清培养液 MesenCult-XF无血清培养液细胞治疗

硒和B-27添加剂在神经干细胞存活与分化中的作用

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中华预防医学杂志 2005年第5期39卷 324-327,F0003页

作者：田东萍苏敏吴贤英张舸汕头大学医学院病理学教研室广东515031

目的观察微量元素硒和神经细胞培养添加剂B-27对神经干细胞存活与分化的影响。方法采用新生Wistar大鼠神经干细胞体外分离培养技术,应用盖玻片培养法和免疫细胞化学法来观察在无血清培养液中加入添加剂B-27和不含B-27时,硒对神经干细胞... 详细信息

目的观察微量元素硒和神经细胞培养添加剂B-27对神经干细胞存活与分化的影响。方法采用新生Wistar大鼠神经干细胞体外分离培养技术,应用盖玻片培养法和免疫细胞化学法来观察在无血清培养液中加入添加剂B-27和不含B-27时,硒对神经干细胞存活以及神经元分化标记蛋白β-微管蛋白、星形胶质细胞标记蛋白抗胶质细胞醋酸纤维蛋白(GFAP)和少突胶质细胞标记蛋白抗环核苷酸磷酸二酯酶(CNP酶)表达的影响。结果在培养液中加入B-27添加剂同时加入硒时,神经干细胞能够存活并且分化成熟良好。在不含B-27添加剂同时也不含硒的培养液中神经干细胞不能够存活。在不含B-27添加剂而含有硒时,神经干细胞则能够存活并且能分化成神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞,各种细胞的形态典型。显微镜下计数发现神经干细胞在含硒的培养液中向神经胶质细胞方向分化比例较高。其中神经元分化β-微管蛋白阳性细胞每高倍视野为11.2个。胶质细胞分化方向GFAP阳性和CNP酶阳性细胞计数平均每高倍视野分别为16.1个和9.3个。结论硒对于神经干细胞体外存活和分化是必需的营养成分。在不含B-27,但有硒存在时,神经干细胞能够存活并分化成熟。

关键词：硒干细胞细胞存活细胞分化神经干细胞神经元分化微量元素硒添加剂环核苷酸磷酸二酯酶无血清培养液