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新鱼腥草素钠抑制胰腺癌Panc-1细胞恶性生物学行为及其作用机制研究

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安徽医药 2024年第7期28卷 1302-1306页

作者：叶晓荣李修靖刘铭宇余跃安徽中医药大学第一附属医院脾胃科安徽合肥230031 中国科学技术大学附属第一医院(安徽省立医院)消化科安徽合肥230001

目的探究新鱼腥草素钠(SNH)对胰腺癌Panc-1细胞增殖、侵袭及迁移能力的影响及其潜在作用机制。方法自2023年3月至2024年2月,取对数期人胰腺癌Panc-1细胞,分为对照组(无菌双蒸水)、各不同梯度SNH处理组(100µmol/L组、200µmol/L组、400... 详细信息

目的探究新鱼腥草素钠(SNH)对胰腺癌Panc-1细胞增殖、侵袭及迁移能力的影响及其潜在作用机制。方法自2023年3月至2024年2月,取对数期人胰腺癌Panc-1细胞,分为对照组(无菌双蒸水)、各不同梯度SNH处理组(100µmol/L组、200µmol/L组、400µmol/L组、600µmol/L组及800µmol/L组)。细胞计数试剂(CCK-8)实验检测Panc-1细胞活率;细胞划痕及Transwell实验分别检测细胞迁移及侵袭能力;实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测细胞基因水平的变化。蛋白质印迹法检测凋亡蛋白胱天蛋白酶-3(caspase-3)、多聚二磷酸腺苷核糖聚合酶(PARP)及上皮间质转化(EMT)相关蛋白神经钙黏素(N-cadherin,CDH)、闭合蛋白(occludin,OCLN)的表达。结果CCK-8实验结果显示,24 h时,100、200及400µmol/L组细胞活率与对照组相比差异无统计学意义;600、800µmol/L组显著降低(P=0.002,P<0.001);48、72 h时,100、200µmol/L组细胞活率未见降低,400、600、800µmol/L组明显下降(P<0.001),各组48 h细胞活率分别为(62.51±9.59)%、(36.94±5.06)%及(17.94±0.56)%,72 h降至(46.00±3.04)%、(22.93±4.75)%及(5.80±0.42)%。细胞划痕结果显示,100µmol/L组24 h细胞迁移率即下降(P<0.05),48 h迁移率(4.37±1.92)%及72 h迁移率(3.75±2.47)%均明显低于对照组(P<0.01);200µmol/L组细胞迁移率同样下降,72 h迁移率为(6.25±5.16)%;Transwell实验结果显示,与对照组相比,24 h时200、400µmol/L组侵袭细胞数显著减少(均P<0.001);qRT-PCR结果显示,400µmol/L组CDH2基因表达下调(P<0.05),OCLN表达上调(P<0.05);蛋白质印迹法检测,400µmol/L组caspase-3、PARP表达降低(P<0.05),cleaved caspase-3升高(P<0.05)。200、400µmol/L组CDH表达降低(P<0.001),OCLN升高(P<0.001)。结论SNH抑制胰腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭,可能与SNH促进细胞凋亡,抑制EMT进程有关。

关键词：鱼腥草属细胞凋亡新鱼腥草素钠胰腺癌细胞增殖肿瘤侵润迁移上皮间质转化

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新鱼腥草素钠对柑橘指状青霉的抑菌作用

园艺学报 2023年第1期50卷 145-152页

作者：杜玉玲杨凡赵娟刘书琪龙超安果蔬园艺作物种质创新与利用全国重点实验室园艺植物生物学教育部重点实验室国家柑橘保鲜技术研发专业中心华中农业大学园艺林学学院武汉430070

通过离体和活体试验测试新鱼腥草素钠(SNH)对柑橘绿霉病的病原菌指状青霉(Penicillium digitatum)的抑菌效果,最小抑菌浓度和最小杀菌浓度分别为1和2 mmol·L^(-1);随SNH浓度升高,指状青霉孢子萌发率显著下降,相对电导率显著上升;透射... 详细信息

通过离体和活体试验测试新鱼腥草素钠(SNH)对柑橘绿霉病的病原菌指状青霉(Penicillium digitatum)的抑菌效果,最小抑菌浓度和最小杀菌浓度分别为1和2 mmol·L^(-1);随SNH浓度升高,指状青霉孢子萌发率显著下降,相对电导率显著上升;透射电镜结果表明,1 mmol·L^(-1) SNH处理可破坏指状青霉细胞结构,导致细胞质成分溶解,线粒体结构消失,发生质壁分离。同时,1 mmol·L^(-1) SNH可抑制多种柑橘真菌病害的生长,具有广谱抑菌性。采用5、10 mmol·L^(-1) SNH+指状青霉孢子混合液人工接种夏橙果实,其病斑直径显著小于对照。这些结果表明,SNH可显著抑制指状青霉的生长,具有成为柑橘绿霉病防控药剂的前景。

关键词：柑橘采后绿霉病生物防治新鱼腥草素钠指状青霉抑菌机制

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新鱼腥草素钠抑制乳腺癌细胞活性的机制研究

新鱼腥草素钠抑制乳腺癌细胞活性的机制研究

作者：贺丽欣华中农业大学

学位级别：硕士

乳腺癌一直是困扰女性健康的重要问题。根据国际癌症研究机构2020年12月的最新报告,乳腺癌的发病率高达11.7%,这一数字已经大大超过了肺癌的发病率。现有的乳腺癌治疗手段产生的副作用仍然是一个难题。中药以其毒性小、副作用小等优势,... 详细信息

乳腺癌一直是困扰女性健康的重要问题。根据国际癌症研究机构2020年12月的最新报告,乳腺癌的发病率高达11.7%,这一数字已经大大超过了肺癌的发病率。现有的乳腺癌治疗手段产生的副作用仍然是一个难题。中药以其毒性小、副作用小等优势,在乳腺癌的治疗中具有极大的潜力。因此,寻求新型具有抗癌疗效的中药是癌症领域的热门课题之一。通过鱼腥草素化学合成得到的新鱼腥草素钠(Sodium new houttuyfonate,SNH)具有治疗炎症、抑制真菌生长、抗肿瘤的功效。研究发现,SNH可通过促进活性氧(Reactive oxygen species,ROS)的过度积累发挥抗炎作用。ROS被视为细胞氧消耗和新陈代谢的产物。过量的ROS可能会引起线粒体功能障碍。内源性ROS的水平会维持在一个合适的范围,在正常范围内ROS的增加会导致疾病的发生和发展,而过量或极低量的ROS会表现为抗肿瘤作用。PI3K-AKT通路的异常激活在乳腺癌的发生、转移和药物抵抗方面起重要作用,使其成为治疗乳腺癌的潜在治疗靶点。PI3K-AKT通路的生物学功能可由ROS介导。研究表明,SNH在非小细胞肺癌中有显著的疗效,但目前尚未有关于SNH治疗乳腺癌的研究。因此,本试验旨在探究SNH促进乳腺癌细胞凋亡的作用机制,为乳腺癌的诊治和药物研发提供新策略。具体试验内容如下:1.生物信息学分析:在GEO Date Sets上筛选出两个与乳腺癌相关的基因表达谱(GSE139038和GSE109169),通过GEO2R法对这两个表达谱进行分析,通过Venn diagram在线软件找出共有的差异基因,并对这些共有的差异基因进行GO和KEGG富集分析。Cytoscape软件构建了这些差异基因的互作网络图,并着重分析一些重要的基因的蛋白互作网络关系。在Pub Chem查找SNH的分子结构,通过Swiss Target Prediction在线软件分析SNH的潜在靶基因。通过Venn diagram在线软件分析表达谱差异基因与SNH潜在靶基因的共有基因,并通过GEPIA和Kaplan-Meier Plotter分别预测共有基因的表达量和相关疾病预后。2.体外试验:试验选择人源乳腺癌细胞MCF-7及犬源乳腺癌细胞CMT-1211。运用CCK-8、细胞划痕实验、Transwell侵袭实验、Western blot、流式细胞术等方法检测SNH对乳腺癌细胞活性和凋亡的影响;通过流式细胞术检测乳腺癌细胞内ROS水平的变化;通过透射电镜检测了SNH对乳腺癌细胞线粒体形态的影响;通过Western blot和免疫荧光检测了SNH对PDK1-AKT-GSK3β通路的影响。3.体内试验:试验使用CMT-1211建立了Balb/C小鼠乳腺肿瘤模型,并于细胞接种10天后开始用药治疗。成功建模的小鼠被随机分为5组,分别为阴性对照组(HP-β-CD,0.1m L(30%w/v)/只小鼠,i.p)、多烯紫杉醇组(Docetaxel,8mg/kg,i.p)、SNH低剂量组(SNH,20mg/kg,i.p)、SNH高剂量组(SNH,40mg/kg,i.p)和空白对照组。治疗期间记录小鼠体征及肿瘤情况。治疗周期结束后,将小鼠安乐死,并摘除小鼠的肿瘤组织和主要脏器。将各器官组织进行H&E染色;免疫荧光染色和Western blot用于检测肿瘤组织中部分蛋白的表达。主要试验结果如下:1.通过生物信息学分析,在GSE139038和GSE109169基因表达谱中共发现137个共有的差异表达显著的基因(Differentially expressed genes,DEGs)。这137个DEGs主要涉及生物学调节包括PI3K信号、细胞增殖、血管生成的调节等;DEGs参与的细胞成分包括细胞外区、细胞外基质、内质网腔、细胞质核周区、细胞表面等;DEGs参与的分子功能含有锌离子结合、趋化因子活性、蛋白质同二聚化活性等。KEGG分析结果显示,这些DEGs主要涉及AMPK信号通路、PPAR信号通路、PI3K-AKT信号通路等。另外,这137个DEGs与SNH的潜在靶基因有重合,分别为MMP1和MMP13。***-8结果显示SNH对乳腺癌细胞的增殖有显著的影响。细胞划痕实验、Transwell侵袭试验和Western blot结果显示SNH能够抑制MCF-7和CMT-1211的迁移和侵袭。流式细胞术和Western blot结果均表明随着SNH用药浓度的增加,乳腺癌细胞的凋亡率也在增加。另外,试验通过流式细胞术检测了经SNH处理后,乳腺癌细胞中的ROS水平。结果表明,SNH能够引起细胞内ROS的过度积累,而NAC可部分清除过量的ROS。透射电子显微镜观察到SNH可引起乳腺癌细胞的线粒体损伤。Western blot和免疫荧光结果提示SNH可通过促

关键词：乳腺癌新鱼腥草素钠活性氧细胞凋亡 PDK1-AKT信号通路

新鱼腥草素钠与顺铂联用抗结肠癌活性及共载药pH敏感脂质体研究

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新鱼腥草素钠与顺铂联用抗结肠癌活性及共载药pH敏感脂质体研究

作者：高栗坤郑州大学

学位级别：硕士

目的:以新鱼腥草素钠(Sodium new houttuyfonate,SNH)及顺铂(Cisplatin,CDDP)为研究对象,探究两药联合在体外以及体内对结肠癌细胞的抑制作用,评价两药联合效果,探讨联合用药发挥抗结肠癌作用的可能机制,制备SNH、CDDP共载药pH敏感脂质... 详细信息

目的:以新鱼腥草素钠(Sodium new houttuyfonate,SNH)及顺铂(Cisplatin,CDDP)为研究对象,探究两药联合在体外以及体内对结肠癌细胞的抑制作用,评价两药联合效果,探讨联合用药发挥抗结肠癌作用的可能机制,制备SNH、CDDP共载药pH敏感脂质体,改善药效。为结肠癌的治疗提供新的思路及有价值的理论和数据支持。方法:MTT法分别检测SNH、CDDP单独用药及联合用药在体外抑制结肠癌细胞SW620增殖的情况,计算IC值及CI值,评价两药的联合效果。通过Annexin V-FITC/PI双染法检测单独用药组及联合用药组诱导SW620细胞凋亡的情况,于荧光显微镜下观察经AO/EB双荧光染色法处理后的不同给药组细胞凋亡情况。PI单染法检测不同给药组对细胞周期分布的影响。采用QPCR和Western blot技术从不同水平检测相应指标表达量,探究两药联合应用的抗结肠癌机制。建立荷瘤裸鼠模型,进行药物干预,考察单独及联合用药组体内抑瘤作用,给药结束后取小鼠肿瘤及其他器官进行病理检查,观察各肿瘤、器官病理情况,免疫组化法(immunohistochemistry,IHC)检测不同肿瘤组织中相关蛋白的表达,深入探究两药联合抗结肠癌机制。制备SNH、CDDP共载药pH敏感脂质体,并通过单因素实验对处方、工艺进行优化。采用高效液相色谱法,检测制剂中SNH和CDDP的包封率、载药量。同时,对脂质体进行表征,获得各项性质、参数,包括pH敏感性、外观形貌、粒径、电位,稳定性、累计释放率等。以SD大鼠为模型,检测血药浓度,分析药代动力学参数,考察脂质体的药代动力学性质。结果:MTT实验结果表明,SNH、CDDP分别作用于SW620细胞可以明显抑制其增殖,且具有时间、剂量依赖性。SNH作用于SW620细胞24、48、72 h的IC值分别为(77.59±1.58)、(56.32±1.34)、(37.00±0.66)μg/m L,CDDP作用于SW620细胞24、48、72 h的IC值分别为(25.26±0.98)、(8.16±0.26)、(5.65±0.31)μg/m L。SNH联合CDDP后,对SW620细胞的抑制作用显著增加,且仍具有时间、剂量依赖性,各联合给药组在24、48、72 h的CI值均小于1,表现为良好的协同作用。流式细胞实验结果表示,单药及联用组均可诱导SW620细胞凋亡,且SNH+CDDP组效果优于单独用药组,抑制率达到79.54%,荧光显微镜下观察到联合组细胞凋亡率明显高于单独用药组。与对照组相比,SNH及CDDP均可在S期发生细胞阻滞作用,两药联合后,S期的阻滞作用进一步增强。给药组可以上调凋亡通路BAX、Caspase3、P53基因和蛋白的表达水平,下调该通路内BCL-2的表达水平,且联合给药组效果更加显著。同时,联合给药组可以明显降低MAPK通路相关基因和蛋白的表达水平,包括ERK1/2、MEK-1。对于NF-κB的表达,SNH及CDDP均可以起到抑制作用,且联合用药组调控能力更强。裸鼠体内抗癌实验结果表示,SNH、CDDP联合用药组的抑瘤作用明显强于单独用药组,且呈现SNH剂量依赖性,其中,SNH+CDDP(50 mg/kg+1 mg/kg)组的抑瘤率最高,达67.72%。与生理盐水组相比,各给药组小鼠体重均有不同程度减轻,其中注射CDDP组下降较为明显。病理结果显示给药组肿瘤组织均出现大面积细胞坏死,且联合用药组坏死的细胞碎片更为广泛,证明两药联合后对肿瘤的抑制作用增强。IHC结果显示,与生理盐水组相比,SNH+CDDP(50mg/kg+1 mg/kg)组肿瘤组织中凋亡通路相关蛋白BAX、Caspase3表达量增加,BCL-2表达量减少。SNH、CDDP共载药pH敏感脂质体的最佳工艺处方如下,载体组成:DOPE/CHEMS/PEG=3:2:0.15(mol/mol);药物与载体比例:1:5.43(m/m);油相与水相比例:1:1(v/v);水化温度:37℃;超声功率:60%;超声时间:6 min。脂质体中SNH的包封率为(98.17±0.97)%,CDDP的包封率为(50.43±1.12)%,总载药量达到(12.28±0.54)%。该制剂pH敏感性明显,在自然光下呈均一乳状液体,透射电镜下呈类球形,分布均匀。平均粒径为(163.6±2.61)nm,PDI为0.18±0.005,Zeta电位为(-9.25±0.38)m V。于4℃避光条件下保存,10天内初步稳定。在pH 5.0环境中SNH及CDDP释放量均多于pH 7.4环境。药代动力学实验结果表明与原料药溶液相比,脂质体组SNH及CDDP药时曲线下面积AUC和半衰期T均有增加,清除率CL降低,表明该脂质体延长了药物在体内的作用时间。结论:该研究表明

关键词：新鱼腥草素钠顺铂联合用药 pH敏感脂质体结肠癌

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新鱼腥草素钠抑制黑素合成的作用和机制研究

新鱼腥草素钠抑制黑素合成的作用和机制研究

作者：马艺宁华东师范大学

学位级别：硕士

拥有一个健康、白皙细腻的皮肤是众人所望。然而,随着环境污染和生活压力的出现,粗糙、暗沉、长斑点等色素沉着问题常常随之而来。因此,近年来,皮肤美白剂的需求越来越大,开发安全、有效的天然植物单体成为皮肤美白剂研究的热点之一。... 详细信息

拥有一个健康、白皙细腻的皮肤是众人所望。然而,随着环境污染和生活压力的出现,粗糙、暗沉、长斑点等色素沉着问题常常随之而来。因此,近年来,皮肤美白剂的需求越来越大,开发安全、有效的天然植物单体成为皮肤美白剂研究的热点之一。鱼腥草为三白草科植物蕺菜干燥地上部分,为多年生草本植物,含有多种生物活性化合物,是中国药典收录的草药。鱼腥草素,又名癸酰乙醛,为鱼腥草挥发油的重要成分,具有抑菌抗炎的功效。新鱼腥草素钠是鱼腥草素的一种结构衍生物,在保留了相似化学性质的同时提高了稳定性。在本论文中,我们通过筛选,发现了新鱼腥草素钠具有新的生物学功能——抑制黑素合成。本文选择小鼠黑素瘤细胞B16F10和小鼠正常黑素细胞Melan-a两种细胞作为体外实验的研究对象,采用MTS法、上清液OD值测量法或Na OH裂解法和多巴氧化法,检测不同浓度新鱼腥草素钠对B16F10和Melan-a两种细胞的细胞活力、胞外胞内黑素含量和酪氨酸酶活性的影响。结果发现:浓度70μM以下和50μM以下的新鱼腥草素钠分别对B16F10细胞和Melan-a细胞的细胞活力没有产生影响,表明该植物单体的毒性小;另外,不同浓度梯度(12.5μM、25μM、50μM)的新鱼腥草素钠对两种细胞都表现出明显的黑素产生和酪氨酸酶活性的抑制效果。同时,本文还利用实时荧光定量PCR、Western blotting和免疫荧光技术检测新鱼腥草素钠对B16F10和Melan-a细胞中黑素合成相关基因表达的影响。结果证实:12.5μM、25μM、50μM的新鱼腥草素钠均能降低了B16F10细胞和Melan-a细胞中小眼畸形相关转录因子(MITF)以及酪氨酸酶(TYR)m RNA和蛋白的含量。这些结果表明:新鱼腥草素钠通过下调黑素合成的关键基因——酪氨酸酶的表达从而发挥其抑制黑素合成作用。同时,本文还利用Western blotting技术检测了新鱼腥草素钠对两种细胞中MAPK和NF-κB信号通路活性的影响,探究新鱼腥草素钠抑制黑素合成的分子机制。结果发现:新鱼腥草素钠显著降低了B16F10和Melan-a细胞中MAPK和NF-κB信号通路相关蛋白磷酸化水平,暗示了这两条信号通路活性被抑制;而且新鱼腥草素钠有效逆转p38/JNK MAPK激活剂Anisomycin预处理诱导的B16F10细胞胞外胞内黑素含量和酪氨酸酶活性的增加。这些结果证明了新鱼腥草素钠通过调节p38/JNK MAPK和NF-κB信号通路活性从而实现其抑制黑素合成作用。此外,我们还利用斑马鱼作为动物模型,从体内水平上验证了新鱼腥草素钠抗黑素合成的作用,而且同时证实了该作用也依赖于MITF和其下游TYR表达的抑制。总之,我们通过两种细胞的体外实验结合斑马鱼的体内实验,系统证实了新鱼腥草素钠能够有效抑制黑素合成,并且揭示了其通过抑制p38/JNK MAPK和NF-κB信号通路的活性来下调酪氨酸酶表达从而发挥美白作用的分子机制。因此,新鱼腥草素钠在将来有望成为治疗皮肤色素沉着过度或应用于化妆品的新的候选植物单体。

关键词：新鱼腥草素钠黑素合成酪氨酸酶小眼畸形相关转录因子 p38/JNK MAPK NF-κB

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新鱼腥草素钠对宫颈癌细胞生物学行为的影响

新鱼腥草素钠对宫颈癌细胞生物学行为的影响

作者：唐方祥川北医学院

学位级别：硕士

目的:探索新鱼腥草素钠(sodium new houttuyfonate,SNH)对宫颈癌HeLa和SiHa细胞生物学行为的影响以及潜在的作用机制。方法:(1)利用CCK-8实验检测不同浓度SNH对宫颈癌HeLa和SiHa 细胞作用 24h 后的半数抑制浓度(50%inhibitory concentra... 详细信息

目的:探索新鱼腥草素钠(sodium new houttuyfonate,SNH)对宫颈癌HeLa和SiHa细胞生物学行为的影响以及潜在的作用机制。方法:(1)利用CCK-8实验检测不同浓度SNH对宫颈癌HeLa和SiHa 细胞作用 24h 后的半数抑制浓度(50%inhibitory concentration,IC50)。(2)利用CCK-8实验检测不同浓度SNH对宫颈癌HeLa和SiHa细胞增殖的影响。(3)通过细胞划痕实验及Transwell实验检测SNH对宫颈癌HeLa和SiHa细胞迁移及侵袭能力的影响。(4)用不同浓度的SNH处理HeLa及SiHa细胞24h后,利用流式细胞仪检测细胞周期分布及凋亡情况。(5)用不同浓度的SNH处理HeLa及SiHa细胞24h后,采用Western Blot 检测细胞周期相关蛋白(Cyclin D1、CDK4、p16 INK4)、凋亡相关蛋白(Bax、Bcl-2、Cleaved-Caspase3)及 PI3K/AKT 信号通路相关蛋白(PI3K、AKT、p-AKT)表达水平的变化。(6)采用SPSS 25.0统计软件进行数据分析。计量资料用x±s表示,两组间比较采用独立样本t检验,多组间比较采用单因素方差分析,P<0.05表示差异具有统计学意义。结果:(1)CCK-8实验结果显示,宫颈癌HeLa及SiHa细胞经终浓度不同的SNH处理24h后,由GraphPhd Prism8.0作图及计算得到SNH对宫颈癌 HeLa 和 SiHa细胞作用24h 的 IC50分别为98.35±11.32 μmoL/L、98.11±6.42 μmoL/L,确定SNH对宫颈癌HeLa和SiHa细胞作用24h的IC50为0.1mmoL/L。(2)CCK-8实验结果显示,终浓度不同的SNH分别与HeLa和SiHa细胞共培养24h、48h、72h、96h后,细胞的增殖能力受到显著抑制(P<0.01),且呈浓度及时间依赖性。(3)细胞划痕实验结果显示HeLa及SiHa细胞的迁移率随着SNH浓度及作用时间的增加而显著降低(P<0.01)。(4)Transwell实验显示,随着SNH浓度增加,HeLa及SiHa细胞穿过Transwell小室的细胞数量显著减少(P<0.01)。(5)流式细胞仪检测结果显示,实验组中HeLa及SiHa细胞处于G0/G1期细胞比例显著升高,同时细胞凋亡率显著增加,差异均有统计学意义(P<0.01)。(6)Western Blot结果显示,周期相关蛋白Cyclin D1及p16 INK4表达水平上调,而CDK4表达下调,差异均有统计学意义(P<0.01)。(7)Western Blot结果显示,凋亡相关蛋白Bax、Cleaved-Caspse3表达水平上调,而Bcl-2表达水平下调,差异均有统计学意义(P<0.01)。(8)Western Blot结果显示,PI3K/AKT信号通路相关分子PI3K、p-AKT表达水平被显著下调(P<0.01),而总AKT表达水平被显著上调(P<0.01)。结论:(1)SNH呈浓度-时间依赖性抑制宫颈癌HeLa及SiHa细胞的增殖、迁移及侵袭能力。(2)SNH通过上调Cyclin D1、p16 INK4及下调CDK4蛋白表达水平,从而诱导宫颈癌细胞发生G0/G1期阻滞。(3)SNH通过上调Bax、Cleaved-Caspse3及下调Bcl-2表达水平,从而促进宫颈癌细胞凋亡进程。(4)SNH可能通过调控PI3K/AKT信号通路,从而对宫颈癌细胞发挥抗肿瘤作用。

关键词：新鱼腥草素钠宫颈癌增殖凋亡 PI3K/AKT信号通路

新鱼腥草素钠缩合反应机制探讨及聚合物结构鉴定

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药学学报 2009年第6期44卷 609-614页

作者：许瑞蒋玲敏贺玖明刘玉玲中国医学科学院、北京协和医学院药物研究所北京100050

为探讨新鱼腥草素钠缩合反应机制并鉴定稳定化缩合产物的化学结构,制备了二聚物并进行转化反应,采用LC-DAD-MS/MS联用技术分析转化产物的紫外吸收特征及质谱信息,采用紫外分光光度法考察转化动力学及转化半衰期。经有机溶剂萃取及柱层... 详细信息

为探讨新鱼腥草素钠缩合反应机制并鉴定稳定化缩合产物的化学结构,制备了二聚物并进行转化反应,采用LC-DAD-MS/MS联用技术分析转化产物的紫外吸收特征及质谱信息,采用紫外分光光度法考察转化动力学及转化半衰期。经有机溶剂萃取及柱层析分离纯化,制备了稳定化缩合产物对照品,采用红外、高分辨质谱和核磁共振技术进行结构鉴定,并将LC-MS/MS分析结果与二聚物转化产物进行比较。二聚物结构不稳定,在水溶液中易解离生成游离的十二酰乙醛,进而发生三分子环合加成?原位脱水缩合反应,生成含六元环稳定结构的1,3,5-三-(十二烷酰基)-苯(三聚物),转化反应符合二级动力学方程,25℃(298K)和100℃(373k)条件下转化半衰期分别为3.17h和6.39min。二聚物系缩合过程中的中间过渡状态,推测新鱼腥草素钠注射液中的缩合产物主要以三聚物的形式存在。

关键词：新鱼腥草素钠缩合反应二聚物三聚物结构鉴定

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新鱼腥草素钠对雏鸡免疫应答的影响

南京农业大学学报 2008年第3期31卷 121-124页

作者：朱善元王健蒋春茂江苏畜牧兽医职业技术学院江苏泰州225300

试验Ⅰ：将180羽11日龄非免疫健康三黄鸡随机分为5组。第Ⅰ～Ⅲ组分别注射高、中、低剂量（4、2、1mg·kg^-1）的新鱼腥草素钠（sodium new houtluyfonate，SNH）注射液；Ⅳ组和Ⅴ组分别为白细胞介素2（IL-2）和生理盐水对照。所有动物... 详细信息

试验Ⅰ：将180羽11日龄非免疫健康三黄鸡随机分为5组。第Ⅰ～Ⅲ组分别注射高、中、低剂量（4、2、1mg·kg^-1）的新鱼腥草素钠（sodium new houtluyfonate，SNH）注射液；Ⅳ组和Ⅴ组分别为白细胞介素2（IL-2）和生理盐水对照。所有动物于14日龄以新城疫病毒（NDV）LaSota株弱毒活疫苗滴鼻进行第1次免疫，2周后加强免疫1次。于第1次免疫后的7、14、21、28、35和42d测定各组动物的抗NDV血凝抑制抗体水平以及外周血CD4＋／CD8＋淋巴细胞比值。结果表明，SNH能显著提高鸡体抗NDV抗体水平和外周血CD4＋／CD8＋淋巴细胞比值（P〈0．05），并以中等剂量（2mg·kg^-1）效果最为明显。试验Ⅱ：将72羽7日龄非免疫健康三黄鸡随机分成3组，第1组口服氟苯尼考（Florfenicol，1．2g·kg^-1）并配合肌肉注射SNH（2mg·kg^-1）；同时设氟苯尼考（Ⅱ组）和生理盐水（Ⅲ组）对照。各组于14日龄以NDV LaSota株弱毒活疫苗进行第1次免疫，2周后进行第2次免疫；于首免后7、14、21和28d测定各组动物的抗NDV血凝抑制抗体水平。结果表明，中剂量的SNH对氟苯尼考引起的雏鸡免疫抑制具有一定的拮抗作用。结论：SNH注射液对雏鸡体液免疫和细胞免疫具有明显的增强功能，并能拮抗某些药物引致的免疫抑制作用。

关键词：新鱼腥草素钠雏鸡免疫应答拮抗

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新鱼腥草素钠水溶液的降解动力学研究

中国医药工业杂志 2008年第8期39卷 606-609页

作者：蒋玲敏许瑞刘玉玲中国医学科学院北京协和医学院药物研究所北京100050

采用HPLC法研究了新鱼腥草素钠在不同pH缓冲液中的降解动力学特征。动力学拟合线性分析表明,新鱼腥草素钠在pH4.0～11.0范围内的降解反应均符合二级动力学规律,降解速率K受pH影响显著,pH-K曲线呈钟罩形;在pH7.0～8.0的溶液中降解速率最... 详细信息

采用HPLC法研究了新鱼腥草素钠在不同pH缓冲液中的降解动力学特征。动力学拟合线性分析表明,新鱼腥草素钠在pH4.0～11.0范围内的降解反应均符合二级动力学规律,降解速率K受pH影响显著,pH-K曲线呈钟罩形;在pH7.0～8.0的溶液中降解速率最快,在pH4.0及pH11.0的溶液中新鱼腥草素钠相对较稳定。提示新鱼腥草素钠在水溶液中的降解并非简单的酸碱催化反应,在特定的pH范围内,存在控速的反应步骤。

关键词：新鱼腥草素钠降解动力学高效液相色谱