检索结果-南通市图书馆

新疆细毛羊eIF3l基因的克隆、原核表达及蛋白检测

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畜牧与兽医 2017年第8期49卷 16-20页

作者：于常江沈敏杨华杨永林祁成年张云生塔里木大学动物科学学院新疆阿拉尔843300 绵羊遗传改良与健康养殖国家重点实验室新疆石河子832000

为了探究新疆细毛羊真核生物翻译起始因子(eukaryotic translation initiation factors,eIFs)基因eIF3l序列和原核表达蛋白特征,采用RTPCR法从新疆细毛羊成纤维细胞中克隆eIF3l基因mRNA的CDS区编码序列,构建其原核表达载体,并进行原核... 详细信息

为了探究新疆细毛羊真核生物翻译起始因子(eukaryotic translation initiation factors,eIFs)基因eIF3l序列和原核表达蛋白特征,采用RTPCR法从新疆细毛羊成纤维细胞中克隆eIF3l基因mRNA的CDS区编码序列,构建其原核表达载体,并进行原核表达和蛋白检测。结果显示:完整获得eIF3l基因1 695 bp,共编码564个氨基酸残基;37℃,1 mmol/L异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导3.5 h可形成大量包涵体蛋白,其分子量约为69 ku;Western blot鉴定目的蛋白表达正确。结果表明:新疆细毛羊eIF3l基因原核表达成功,为进一步研究其功能和应用提供了科学数据。

关键词：新疆细毛羊 eIF3l基因载体构建原核表达

新疆细毛羊KAP6.1基因的克隆及序列分析

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黑龙江畜牧兽医 2013年第3期 31-34页

作者：沈文孙延鸣崔茹鹏鲁海富肖林晋石国庆石河子大学动物科技学院新疆石河子832003 新疆农垦科学院畜牧所新疆石河子832000

根据绵羊毛囊角蛋白关联蛋白(KAP)6.1(登录号为AY483218.1)基因序列设计合成2个特异性引物,以新疆细毛羊为研究对象,从采集的皮肤组织中提取RNA进行RT-PCR反应,扩增出长度为320 bp的特异性片段,回收目的片段并连接至pMD18-T载体后转化... 详细信息

根据绵羊毛囊角蛋白关联蛋白(KAP)6.1(登录号为AY483218.1)基因序列设计合成2个特异性引物,以新疆细毛羊为研究对象,从采集的皮肤组织中提取RNA进行RT-PCR反应,扩增出长度为320 bp的特异性片段,回收目的片段并连接至pMD18-T载体后转化大肠杆菌DH5α感受态细胞,检测阳性克隆、测序并进行分析。结果表明:试验成功克隆了新疆细毛羊KAP6.1基因,得到的长度为320 bp序列中包含252 bp的编码区序列。新疆细毛羊与绵羊亲缘关系最近,同源性为99.2%,与山羊同源性为94.8%,有13处核苷酸差异与人和兔的同源性分别为80.8%、75.1%。

关键词：新疆细毛羊角蛋白关联蛋白(KAP)6 1基因序列分析

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新疆细毛羊超数排卵效果研究

南方农业学报 2012年第4期43卷 532-535页

作者：汪立芹林嘉鹏陈童唐森黄俊成黄锡霞新疆农业大学乌鲁木齐830004 农业部草食家畜繁育生物技术重点开放实验室乌鲁木齐830000

【目的】提高并稳定新疆细毛羊超数排卵效率,为以生产2～8-细胞期胚胎的转基因研究提供素材。【方法】分别从激素生产厂家、供体年龄、激素处理方案等3个方面探讨新疆细毛羊的超数排卵效果,确定新疆细毛羊超数排卵供体羊的最佳年龄及其... 详细信息

【目的】提高并稳定新疆细毛羊超数排卵效率,为以生产2～8-细胞期胚胎的转基因研究提供素材。【方法】分别从激素生产厂家、供体年龄、激素处理方案等3个方面探讨新疆细毛羊的超数排卵效果,确定新疆细毛羊超数排卵供体羊的最佳年龄及其有效处理方案。【结果】不同生产厂家的激素对新疆细毛羊黄体数和可用胚胎数均存在极显著影响(P新疆细毛羊超排后,其黄体数(6.17个/只)和可用胚胎数(1.50枚/只)均极显著低于2.0周岁以上的新疆细毛羊(黄体数12.24个/只,可用胚胎数8.30枚/只)(P0.05);FSH+PMSG超排处理的新疆细毛羊黄体数(6.05个/只)和可用胚胎数(1.76枚/只)则显著低于FSH+PG超排处理(黄体数17.11个/只,可用胚胎数10.38枚/只)(P新疆细毛羊超数排卵时宜选用2.0周岁以上的供体羊,FSH剂量控制在150～200U/只,若能与PG联合使用其超排效果更好,但不宜与PMSG联合使用。

关键词：新疆细毛羊超数排卵黄体数可用胚胎数效果

新疆细毛羊2倍基因组BAC文库PCR筛选系统的构建与使用

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分子细胞生物学报 2006年第6期39卷 489-494页

作者：李谨杨公社陈创夫刘海波马润林王金富石河子大学动物科技学院新疆石河子832003 西北农林科技大学动物科技学院陕西杨凌712100 中国科学院遗传与发育研究所北京100101

本研究所构建的BAC文库覆盖了8倍新疆细毛羊的基因组，平均插入片段的大小为133kb．同时文库92．5％的克隆插入片段大于100kb，而且有部分克隆甚至大于300kb，假定绵羊的基因组含有3×10^6kb，根据文库的平均插入片段大小为133kb，从文... 详细信息

本研究所构建的BAC文库覆盖了8倍新疆细毛羊的基因组，平均插入片段的大小为133kb．同时文库92．5％的克隆插入片段大于100kb，而且有部分克隆甚至大于300kb，假定绵羊的基因组含有3×10^6kb，根据文库的平均插入片段大小为133kb，从文库筛选到目的片段的概率为98．208％。为了验证文库有较好的覆盖率．构建了2倍基因组文库PCR筛选系统，并对位于新疆细毛羊20号染色体MHC基因邻近区段的DMB_EX2、MCMA36、CP73和BM12584个分子标记进行了筛选．得到的平均阳性克隆数为1．5个，从筛选结果来看，这与文库插入片段估计的8倍基因组覆盖率相当接近并且没有偏向，这使得本文库成为研究绵羊的功能基因、位置克隆和完善基因组物理图谱的极为有用的资源。

关键词：新疆细毛羊基因组 BAC文库插入片段 PCR筛选系统

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新疆细毛羊

新疆农业科学 1991年第2期28卷 85-86页

作者：杨尔济新疆畜牧科学院

新疆细毛羊是我国育成的第一个细毛羊品种。它于1934年开始选育,以从当时苏联引进的高加索细毛羊和泊列考斯细毛羊为父本,以哈萨克和蒙古粗毛羊为母本,但育种全过程中则以高加索羊和哈萨克羊为主,经过级进杂交、横交固定、自群繁育阶段... 详细信息

新疆细毛羊是我国育成的第一个细毛羊品种。它于1934年开始选育,以从当时苏联引进的高加索细毛羊和泊列考斯细毛羊为父本,以哈萨克和蒙古粗毛羊为母本,但育种全过程中则以高加索羊和哈萨克羊为主,经过级进杂交、横交固定、自群繁育阶段,终于在新疆伊犁巩乃斯种羊场育成,1954年被农业部批准并命名为新疆毛肉兼用细毛羊(简称新疆细毛羊),1990年全疆共有400×10~4余只。

关键词：新疆细毛羊羊选育品种细毛羊

新疆细毛羊抑制素α亚基cDNA的克隆、序列分析与表达

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畜牧兽医学报 2009年第1期40卷 15-19页

作者：张成云吴志焕曾宪垠四川农业大学原子能农业应用研究室雅安625014

根据GenBank上登录的绵羊抑制素α亚基基因序列,设计合成2对引物,以新疆细毛羊卵巢提取的总RNA为模板,采用RT-PCR方法扩增获得了约812 bp片段,经pMD18-T载体克隆和测序分析证实为新疆细毛羊抑制素α亚基前体基因。进一步通过PCR反应扩... 详细信息

根据GenBank上登录的绵羊抑制素α亚基基因序列,设计合成2对引物,以新疆细毛羊卵巢提取的总RNA为模板,采用RT-PCR方法扩增获得了约812 bp片段,经pMD18-T载体克隆和测序分析证实为新疆细毛羊抑制素α亚基前体基因。进一步通过PCR反应扩增新疆细毛羊INHα亚基基因片段,经过NcoⅠ和HindⅢ双酶切后定向克隆于pET32a原核表达载体,获得pET-INH重组表达载体。将携带有重组表达载体的大肠杆菌BL21(DE3)通过1 mmol.L-1IPTG进行诱导表达,经过SDS-PAGE电泳检测,显示诱导表达蛋白大约为32 ku,与预期表达蛋白大小一致。Western blot检测表明重组原核表达载体在大肠杆菌中成功表达出了目的融合蛋白。新疆细毛羊抑制素α亚基基因的克隆、表达为进一步研究其功能和应用奠定了基础。

关键词：新疆细毛羊抑制素α亚基基因克隆表达

新疆细毛羊leptin基因第二、三外显子扩增片段的多态性分析

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草食家畜 2014年第2期 19-23页

作者：李辉万鹏程代蓉石国庆石河子大学动物科技学院新疆石河子832003 新疆农垦科学院畜牧兽医研究所新疆石河子832000 新疆兵团绵羊繁育生物技术重点实验室新疆石河子832000

根据leptin基因在GenBank中的已知序列设计两对引物,采用PCR-SSCP和DNA测序技术在新疆细毛羊群体中进行单核苷酸多态性(SNPs)检测分析。结果表明,新疆细毛羊leptin基因第二、三外显子都具有多态性。其中,第二外显子扩增片段上有AA和AB... 详细信息

根据leptin基因在GenBank中的已知序列设计两对引物,采用PCR-SSCP和DNA测序技术在新疆细毛羊群体中进行单核苷酸多态性(SNPs)检测分析。结果表明,新疆细毛羊leptin基因第二、三外显子都具有多态性。其中,第二外显子扩增片段上有AA和AB两种基因型,AA基因型为优势基因型;而在第三外显子有CC、CD两种基因型,以CC基因型为优势基因型。并且经过DNA测序发现,在leptin第一内含子上有两处突变,即TTG三个连续碱基的插入和C→T的碱基替换;而在第三外显子上发生了G→T替换突变。

关键词：新疆细毛羊 leptin PCR—SSCP

新疆细毛羊INHα亚基基因的克隆、序列分析与表达

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新疆细毛羊INHα亚基基因的克隆、序列分析与表达

作者：张成云四川农业大学

学位级别：硕士

抑制素(inhibin,INH)是一种主要由性腺产生的,由α和β亚基通过二硫键构成的异二聚体糖蛋白质激素,是转化生长因子β(transforming growth factorsβ,TGF-β)超家族成员。在体内,INH主要抑制促卵泡激素(follicle-stimulatinghormone,FSH... 详细信息

抑制素(inhibin,INH)是一种主要由性腺产生的,由α和β亚基通过二硫键构成的异二聚体糖蛋白质激素,是转化生长因子β(transforming growth factorsβ,TGF-β)超家族成员。在体内,INH主要抑制促卵泡激素(follicle-stimulatinghormone,FSH)的合成和分泌。本研究研究了新疆细毛羊INHα亚基基因的克隆及其成熟区在表达菌株BL21(DE3)中的融合表达,以期为今后开展INH免疫对动物繁殖率影响的研究提供资料。根据GenBank上登录的新西兰绵羊抑制素α亚基基因序列(L28815),设计合成了2对引物,以新疆细毛羊卵巢提取的总RNA为模板,采用RT-PCR方法扩增获得了约800bp片段,克隆到pMD18-T载体,经测序和序列分析证实为新疆细毛羊抑制素α亚基基因。测序结果表明扩增出一条长812bp的DNA片段,编码265个氨基酸残基的INHα亚基前体。新疆细毛羊与新西兰绵羊INHα亚基cDNA的同源性为98.6%,氨基酸的同源性为98.1%;成熟区核苷酸序列仅有1个碱基的差异,为同义变异。生物信息学分析表明:该序列与牛INHαcDNA的亲缘关系最近,为96.0%;其次与猪、马和人INHα的cDNA亲缘关系较近,分别有88.1%、87.8%和85.8%;而与小鼠和大鼠INHα的cDNA同源性较远,分别为84.2%和82.0%。新疆细毛羊INHα亚基成熟区包括134个氨基酸,分子量约为14.7ku,含1个糖基化位点、2个蛋白激酶C磷酸化位点、3个酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点和7个半胱氨酸,氨基酸序列1-32区域存在抗原决定簇。以本研究构建的pMD-INH克隆载体为模板,采用PCR技术,扩增出新疆细毛羊INHα亚基成熟区的编码基因(411bp),将纯化的PCR产物和表达质粒pET-32a(+)分别用限制性内切酶NcoⅠ和HindⅢ进行双酶切,回收目的片段,用T4 DNA连接酶将两者连接后转化到大肠杆菌DH5α中,筛选到INHα亚基重组原核表达质粒(pET-INH),经测序证实插入的DNA序列阅读框正确,无突变。在低温条件下(30℃),将携带有重组表达载体的大肠杆菌BL21(DE3)通过IPTG进行诱导表达,经SDS-PAGE电泳检测,显示诱导表达蛋白大小约为32ku,与预期表达蛋白大小一致。Western blotting检测表明重组原核表达载体在大肠杆菌中成功表达出目的融合蛋白,并用渗透压休克法获得了融合表达产物,表明使用这种方法获取INH免疫原的途径是可行的。

关键词：新疆细毛羊抑制素α亚基序列分析原核表达

同方学位论文库评论

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新疆细毛羊螨虫病特点解析及防治

畜牧兽医科技信息 2016年第10期32卷 65-66页

作者：苏布赛新疆和静县畜牧兽医站新疆和静841300

新疆细毛羊是绒肉兼用的优良绵羊品种之一，其绒毛属毛纺织业首选的优质原材料。螨虫病（疥螨病，俗称疥癣病）对新疆细毛羊的致死率不高，但严重影响羊的毛皮品质和综合生产性能，轻症者局部脱毛、产生灰白色癞斑块，重者全身痒感明显... 详细信息

新疆细毛羊是绒肉兼用的优良绵羊品种之一，其绒毛属毛纺织业首选的优质原材料。螨虫病（疥螨病，俗称疥癣病）对新疆细毛羊的致死率不高，但严重影响羊的毛皮品质和综合生产性能，轻症者局部脱毛、产生灰白色癞斑块，重者全身痒感明显、经常摩擦止痒导致被毛大量脱落、体表皮肤严重皮炎（化脓结痂）、生长发育明显抑制，以致完全失去产毛功能和折损养殖效益。

关键词：新疆细毛羊螨虫病流行病学特点临床症状综合防治防治效果