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新生猪多器官功能障碍综合征模型建立的实验研究

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中国当代儿科杂志 2006年第1期8卷 49-53页

作者：黎刚周文良张费通黄东健邝丽影崔其亮广州市第二人民医院药剂科广东广州510150 中山大学生命科学学院广东广州510275 广州市第二人民医院新生儿科广州市第二人民医院中心ICU

目的探讨采用盲肠结扎加穿孔(CLP)建立新生猪多器官功能障碍综合征(MODS)模型的方法及实验与临床意义。方法选用健康长白新生猪14只,随机分成实验组(E组,n=9)和对照组(C组,n=5),实验组施行盲肠结扎加穿孔(CLP)制成MODS动物模型,对照组... 详细信息

目的探讨采用盲肠结扎加穿孔(CLP)建立新生猪多器官功能障碍综合征(MODS)模型的方法及实验与临床意义。方法选用健康长白新生猪14只,随机分成实验组(E组,n=9)和对照组(C组,n=5),实验组施行盲肠结扎加穿孔(CLP)制成MODS动物模型,对照组只行剖腹和盲肠探查术。动态观察两组血清生化指标(ALT,AST,ALB,BUN,Cr,CKMB,lac)及血小板、血气分析(PaO2,PaCO2)的变化,通过光镜观察动物各重要生命器官组织形态学变化。结果与对照组相比,实验组动物在CLP后血ALT,AST,BUN,Cr,CKMB,lac24h即已开始升高,48～96h明显升高,48h时ALT为83.0±9.3U/L、AST为348.8±132.9U/L、BUN为10.5±2.5mmol/L、Cr为79.2±9.0μmol/L、CKMB为5152.0±1857.8U/L、lac为12.3±4.0mmol/L(P新生猪多个器官的功能障碍,该实验可用于新生动物MODS模型的探讨。

关键词：多器官功能障碍综合征动物模型新生猪实验模型建立

促红细胞生成素对新生猪胰岛细胞增殖分化和凋亡的影响(英文)

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中南大学学报（医学版） 2010年第11期35卷 1115-1122页

作者：何红晖吴天慧熊静陈科莫朝晖中南大学湘雅三医院内分泌科长沙410013 湖南省儿童医院肾内科长沙410007

目的:研究促红细胞生成素在体外对新生猪胰岛细胞增殖分化和凋亡的影响。方法:采用胶原酶消化和组织培养方法分离纯化新生猪胰岛细胞,检测其纯度和活性,再分为实验组和对照组。实验组培养基中添加促红细胞生成素(10.0μmol/L),对照组不... 详细信息

目的:研究促红细胞生成素在体外对新生猪胰岛细胞增殖分化和凋亡的影响。方法:采用胶原酶消化和组织培养方法分离纯化新生猪胰岛细胞,检测其纯度和活性,再分为实验组和对照组。实验组培养基中添加促红细胞生成素(10.0μmol/L),对照组不添加促红细胞生成素,培养5d后行低糖和高糖刺激胰岛素释放试验;并行细胞计数及MTT比色法测细胞增殖活性;流式细胞仪和EB/AO染色荧光检测细胞凋亡百分率,流式细胞仪分析细胞周期,RT-PCR法检测胰岛细胞胰岛素促进因子-1(PDX-1),葡萄糖转运载体2(GlUT-2),bcl-2,bax,caspase-3 mRNA的表达。结果:促红细胞生成素干预后新生猪胰岛细胞不改变形态和功能,对葡萄糖刺激胰岛素分泌的反应正常;细胞计数示实验组新生猪胰岛细胞数目均比对照组增多(P新生猪胰岛细胞的增殖分化,对形态和功能无影响。促红细胞生成素对新生猪胰岛细胞有抗凋亡保护作用,可能是通过上调bcl-2 mRNA的表达,下调bax,caspase-3 mRNA的表达来实现的。

关键词：促红细胞生成素新生猪胰岛细胞增殖凋亡

最大长度序列脑干听觉诱发电位在头部低温治疗新生猪缺氧缺血性脑损伤中的动态变化

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中国当代儿科杂志 2013年第6期15卷 484-489页

作者：汪吉梅周文浩程国强王来栓蒋泽栋邵肖梅复旦大学附属妇产科医院新生儿科上海200011 复旦大学附属儿科医院新生儿科上海201102

目的探讨头部低温对缺氧缺血性脑损伤(hypoxic-ischemic brain damage,HIBD)新生猪最大长度序列脑干听觉诱发电位(MLS-BAEP)的影响。方法 16头5～7 d的新生猪随机分为3组:常温正常组(n=4)、缺氧缺血(HI)组(n=6)、HI低温组(n=6)。采用双... 详细信息

目的探讨头部低温对缺氧缺血性脑损伤(hypoxic-ischemic brain damage,HIBD)新生猪最大长度序列脑干听觉诱发电位(MLS-BAEP)的影响。方法 16头5～7 d的新生猪随机分为3组:常温正常组(n=4)、缺氧缺血(HI)组(n=6)、HI低温组(n=6)。采用双侧颈总动脉阻断和机械通气吸入6%的氧气制备HIBD模型。缺氧缺血后2 h低温组采用选择性头部低温治疗24 h。各组分别在HI前、HI后12 h、24 h、36 h、48 h、60 h、72 h、4 d、7 d、10 d、13 d、15 d进行MLS-BAEP测试。结果 HI组与正常组相比,从HI后72 h开始,各波潜伏期和峰间期明显延长,第7天达到高峰,第10天开始逐渐恢复,但除Ⅰ波潜伏期外,其他指标仍明显长于正常组,直至HI后15 d仍然没有恢复正常。HI低温组Ⅲ波潜伏期及Ⅰ～Ⅲ、Ⅰ～Ⅴ峰间期在HI后60 h至7 d,Ⅴ波潜伏期和Ⅲ～Ⅴ峰间期在HI后72 h至7 d均明显短于HI组(P新生猪HI后脑干听觉通路的外周部分和中枢部分均受累,表现为MLS-BAEP的各潜伏期和峰间期的明显延长,中枢损害在HI后第7天达到高峰,第15天仍然没恢复正常。HI低温治疗可明显减轻HIBD的脑干损伤。

关键词：低温缺氧缺血脑损伤最大长度序列脑干听觉诱发电位新生猪

近红外空间分辨光谱技术及其对新生猪脑缺氧缺血的检测

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光谱学与光谱分析 2008年第10期28卷 2263-2267页

作者：侯新琳腾轶超丁海曙丁海艳周丛乐清华大学医学院生物医学工程系北京100084 北京大学第一医院儿科北京100034

近红外光谱(NIRS)技术作为一种无创的组织氧检测手段,近年来在脑缺氧缺血的检测方面日益受到重视。文章介绍了自行研制的NIRS仪器(TSAH-100近红外组织血氧无损监测仪)的基本原理及用于新生猪脑氧检测时如何实现传感器与待测脑组织的最... 详细信息

近红外光谱(NIRS)技术作为一种无创的组织氧检测手段,近年来在脑缺氧缺血的检测方面日益受到重视。文章介绍了自行研制的NIRS仪器(TSAH-100近红外组织血氧无损监测仪)的基本原理及用于新生猪脑氧检测时如何实现传感器与待测脑组织的最佳耦合。检测了28例新生猪在不同氧合状态下的脑组织氧饱和度(regional cerebral oxygen saturation,rSO2),在缺氧结束后进行了有创的动脉氧饱和度及生理参数的检测。结果表明,NIRS无创测得的脑rSO2与血气分析有创测得的动脉血氧饱和度(SaO2)有很好的相关性(p<0.001),并且脑rSO2与缺氧程度及缺氧后生理参数的变化一致。因此NIRS无创测得的脑rSO2能直接判断脑氧合状态,可在一定情况下替代有创血气分析,帮助临床无创、简便地诊断脑缺氧缺血。

关键词：近红外光谱脑组织氧饱和度脑缺氧缺血新生猪

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新生猪缺氧缺血脑损伤后酰胺质子转移成像

中国医学影像技术 2017年第8期33卷 1153-1157页

作者：郑阳王晓明中国医科大学附属盛京医院放射科辽宁沈阳110004

目的探讨不同时间点新生猪缺氧缺血脑损伤(HIBI)模型酰胺质子转移(APT)成像基底核APT值的变化。方法选用出生后3~5天的健康新生猪35只,分为对照组(n=5)及模型组(n=30),分别进行假手术(对照组)及HIBI建模操作。其中模型组依据MR扫描和建... 详细信息

目的探讨不同时间点新生猪缺氧缺血脑损伤(HIBI)模型酰胺质子转移(APT)成像基底核APT值的变化。方法选用出生后3~5天的健康新生猪35只,分为对照组(n=5)及模型组(n=30),分别进行假手术(对照组)及HIBI建模操作。其中模型组依据MR扫描和建立HIBI模型的间隔时间分为0~新生猪HIBI后0~2h,APT值出现急剧下降,随后逐渐升高,24h左右基本恢复至对照组水平。对照组及模型组0~新生猪HIBI后呈现先下降后上升的变化趋势,有望为今后进一步临床研究HIBI患儿脑内病理生理变化提供参考依据。

关键词：脑损伤缺氧缺血,脑新生猪酰胺质子转移

肌动蛋白在新生猪RTE细胞ATP缺乏损伤机制中的作用

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四川大学学报（医学版） 2004年第4期35卷 503-505页

作者：陈大鹏姚裕家陈娟四川大学华西第二医院儿科成都610041

目的　研究肌动蛋白 (actin)在 ATP缺乏时新生猪肾小管上皮细胞 (RTE)损伤中的作用 ,探讨新生儿窒息时肾功能不全的发生机制。方法　建立四川白猪 I系新生猪 RTE细胞 ATP缺乏细胞模型后 ,以流式细胞仪检测正常以及 ATP缺乏不同时间段 RT... 详细信息

目的　研究肌动蛋白 (actin)在 ATP缺乏时新生猪肾小管上皮细胞 (RTE)损伤中的作用 ,探讨新生儿窒息时肾功能不全的发生机制。方法　建立四川白猪 I系新生猪 RTE细胞 ATP缺乏细胞模型后 ,以流式细胞仪检测正常以及 ATP缺乏不同时间段 RTE细胞中肌动蛋白含量的变化。结果　随着 ATP缺乏时间延长 ,G-actin和 F- actin含量在 ATP缺乏 1 min均出现变化 ,G- actin先下降后上升 ;F- actin则持续下降。结论　 ATP缺乏时 RTE细胞中 G- actin和 F- actin含量的变化导致细胞骨架蛋白破坏 ,使细胞骨架稳定性破坏 ,可能是窒息时肾功能损伤的机制之一。

关键词：新生猪 RTE细胞肌动蛋白

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新生猪肾近曲小管上皮细胞的体外培养与鉴定

华西医科大学学报 2002年第3期33卷 440-443页

作者：沈青姚裕家熊英王峥四川大学华西第二医院儿科成都610041

目的　分离新生猪肾小管上皮细胞进行体外培养 ,为研究围生期肾小管上皮细胞生物学行为特征提供理论基础。方法　采用机械分散结合型胶原酶 (0 .5 g/ L)消化的方法纯化肾小管片段 ,选择含 10 %的 FCS低糖DMEM培养基 ,置于 5 %CO2 ,37... 详细信息

目的　分离新生猪肾小管上皮细胞进行体外培养 ,为研究围生期肾小管上皮细胞生物学行为特征提供理论基础。方法　采用机械分散结合型胶原酶 (0 .5 g/ L)消化的方法纯化肾小管片段 ,选择含 10 %的 FCS低糖DMEM培养基 ,置于 5 %CO2 ,37℃孵箱培养。 0 .2 5 %胰蛋白酶用于肾小管上皮细胞纯化和传代培养。应用细胞形态学 (光镜和电镜 )、免疫细胞化学 (Pan CK和 CK18单抗 )和酶组织化学 (酸性磷酸酶和碱性磷酸酶 )方法进行肾近曲小管上皮细胞鉴定 ;用流式细胞术做细胞纯度鉴定。结果　出生 12～ 2 4小时的新生猪肾小球直径为 5 0～ 70 μm,出生5～ 6天的肾小球直径为 70～ 98μm。新生猪肾近曲小管上皮细胞体外培养对葡萄糖的需求量不高。培养成功并传 6～8代 ,肾小管上皮细胞纯度达 95 %～ 98%。综合形态学、免疫细胞化学和酶组织化学结果 ,支持细胞来源于肾单位的近曲小管。结论　采用机械分散 -酶消化纯化肾小管 ,0 .2 5 %胰蛋白酶纯化肾小管上皮细胞及低糖 DMEM培养新生猪肾近曲小管的方法是可行的。

关键词：新生猪肾近曲小管上皮细胞体外培养鉴定

新生猪缺氧缺血脑损伤后神经网络重建相关蛋白的表达

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中国医科大学学报 2020年第10期49卷 871-875页

作者：张志男郑阳王晓明中国医科大学附属盛京医院放射科沈阳110004

目的检测新生猪缺氧缺血(HI)脑损伤模型在损伤后不同时间点突触素(Syn)和神经蛋白聚糖(Neu)含量的变化,以期进一步阐明HI损伤后神经网络重建的机制。方法将28头3~5日龄的新生猪随机为对照组(n=4)和HI模型组(n=24)。HI模型组根据HI后的... 详细信息

目的检测新生猪缺氧缺血(HI)脑损伤模型在损伤后不同时间点突触素(Syn)和神经蛋白聚糖(Neu)含量的变化,以期进一步阐明HI损伤后神经网络重建的机制。方法将28头3~5日龄的新生猪随机为对照组(n=4)和HI模型组(n=24)。HI模型组根据HI后的存活时间分为6个亚组,分别是0~2 h亚组、2~6 h亚组、6~12 h亚组、12~24 h亚组、24~48 h亚组,48~72 h亚组,每个亚组4头。通过免疫组化染色检测对照组和HI模型组各亚组Syn和Neu含量的变化。结果HI后Syn的表达整体呈先升高后降低的趋势,6~12 h表达达到高峰,而后下降。与对照组相比,HI模型组0~2 h亚组、2~6 h亚组、6~12 h亚组Syn的表达均升高,差异均有统计学意义(P<0.05);与HI模型组6~12 h亚组相比,HI模型组12~24 h亚组、24~48 h亚组、48~72 h亚组Syn的表达均降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。HI后Neu的表达整体呈先降低后升高再降低的趋势,6~12 h表达最低,而后升高,24~48 h表达达到高峰,随后下降。与HI模型组6~12 h亚组相比,对照组及HI模型组0~2 h亚组、2~6 h亚组、12~24 h亚组、24~48 h亚组、48~72 h亚组Neu的表达均升高,差异均有统计学意义(P<0.05);与HI模型组24~48 h亚组相比,对照组及HI模型组0~2 h亚组、2~6 h亚组、6~12 h亚组、12~24 h亚组、48~72 h亚组Neu的表达均降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论HI损伤可影响脑组织Syn和Neu的表达,损伤后脑神经具有较强的自我修复能力。

关键词：脑缺氧缺血突触素神经蛋白聚糖新生猪

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新生猪缺氧缺血性脑病模型的建立

中华实验外科杂志 2009年第11期26卷 1560-1562页

作者：倪新莉吕金捍廖红宁夏医科大学附属医院麻醉科银川750004 宁夏人民医院骨科

目的建立一种新生猪缺氧缺血性脑病（HIE）模型。方法健康3～7d雄性新生猪随机分为假手术组（Sham n=5）和模型组（HI n=12），采用全身缺氧40min、空气5min、窒息7min后复氧、心肺复苏再灌注法制作新生猪HIE模型，于自主循环恢复（ROS... 详细信息

目的建立一种新生猪缺氧缺血性脑病（HIE）模型。方法健康3～7d雄性新生猪随机分为假手术组（Sham n=5）和模型组（HI n=12），采用全身缺氧40min、空气5min、窒息7min后复氧、心肺复苏再灌注法制作新生猪HIE模型，于自主循环恢复（ROSC）后第4天取脑，观察缺血缺氧后小猪体质量增长情况，神经功能障碍评分（NDS）以及脑组织病理形态学改变。结果两组各参数基础值差异无统计学意义，HI组在40min缺氧过程中，氧分压降至（22±3）mmHg，心率加快，平均动脉压升高，动脉氧饱和度降低，血糖升高；吸入空气时上述参数略有恢复；在7min窒息期间，表现更严重的低氧血症、代谢性酸中毒、高碳酸血症、高血糖以及显著的低血压和心动过缓，窒息5min时MABP降至（30±18）mmHg；HI组体质量增长明显慢于Sham组（P〈0．05）。Sham组除第1天因麻醉残留造成较高的NDS评分外，后期未见明显异常行为改变，HI组ROSC后第1、2和3天NDS评分明显升高（P〈0．05）。Sham组脑神经元形态正常，HI组壳核、尾状核和感觉运动皮层存活神经元密度分别降低至Sham组的（12．6±10．1）％、（51．5±8．4）％和（49．1±23．4）％（P〈0．01）。结论制作新生猪HIE模型成功，该模型符合新生儿围产期全身缺氧、窒息继发缺血，复氧、CPR后再灌注致HIE脑损伤病理生理变化过程。纹状体和感觉运动皮层HE染色可见以核固缩为典型特征的神经元缺血性改变.

关键词：缺氧缺血脑模型动物新生猪