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改良法分离培养SD新生乳鼠原代心肌细胞

中国应用生理学杂志 2021年第6期37卷 699-704页

作者：孟香红曾斌陈慧玲李伟东李娜徐小勇宁波卫生职业技术学院医学技术学院浙江宁波315104 宁波市医疗中心李惠利医院心血管科浙江宁波315040

目的:建立一种稳定、快速的SD新生乳鼠原代心肌细胞分离培养改良方法。方法:取SD新生乳鼠心室,0.12%Ⅱ型胶原酶消化,Percoll密度梯度离心结合5-溴脱氧尿嘧啶(5-BrdU)化学抑制法纯化心肌细胞,体外培养于含5%马血清的改良DMEM/F12中,次日... 详细信息

目的:建立一种稳定、快速的SD新生乳鼠原代心肌细胞分离培养改良方法。方法:取SD新生乳鼠心室,0.12%Ⅱ型胶原酶消化,Percoll密度梯度离心结合5-溴脱氧尿嘧啶(5-BrdU)化学抑制法纯化心肌细胞,体外培养于含5%马血清的改良DMEM/F12中,次日更换为普通含10%胎牛血清的高糖DMEM继续培养,并比较此改良方法与传统差速贴壁法的差异。结果:改良法获得的心肌细胞生长良好,接种24 h后几乎全部贴壁生长,细胞呈三角形、梭形或不规则形,个别细胞出现自主搏动,频率为10~30 beats/min不等。48 h后心肌细胞变长伸出伪足,部分细胞呈现同步搏动,频率接近50~80 beats/min。72 h后心肌细胞成菊花样交织成网,自发搏动趋于同步,频率加快至80~100 beats/min;96 h后细胞聚集成簇,呈岛屿样,同步搏动频率在100~120 beats/min左右,一周内细胞状态良好。改良法纯化原代心肌细胞的得率((1.17±0.15)×10^(6) vs(1.21±0.22)×10^(6),P>0.05)和存活率与传统差速贴壁法相当(93.3%±1.4%vs 92.2%±0.7%,P>0.05),但是改良方法获得的原代心肌细胞纯度更高(94.7%±2.1%vs 89.5%±1.3%,P<0.05),且用时较短((3.1±0.4)h vs(4.3±0.3)h,P<0.01)。结论:改良法获得心肌细胞耗时短、纯度高、结构功能保存完整,且实验重复和稳定性好,是一种理想且简单易行的的原代心肌细胞分离培养方法。

关键词：新生乳鼠原代心肌细胞 Percoll密度梯度离心化学抑制

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杂色曲霉素对新生乳鼠致癌作用的实验研究

中华病理学杂志 2007年第4期36卷 265-266页

作者：邢凌霄张祥宏申海涛李月红刘静邢欣周丙娟严霞王俊灵河北医科大学病理学研究室石家庄050017

我们采用单次杂色曲霉素灌喂新生乳鼠，以观察其诱发肺癌的作用。

关键词：杂色曲霉素新生乳鼠实验研究致癌作用

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大蒜素对新生乳鼠肠道细菌移位的影响

中国生化药物杂志 2012年第4期33卷 411-413页

作者：牛志民徐自超河南省新乡市长垣县人民医院河南新乡453400 新乡医学院河南新乡453003

目的考察大蒜素对新生乳鼠肠道细菌移位的作用。方法乳鼠140只随机分为10组:0,1,7,14,28 d空白对照组和0,1,7,14,28 d大蒜素组,每组14只。空白对照组腹腔注射0.9%氯化钠注射液0.03 mL/g,1次/d;大蒜素组腹腔注射大蒜素注射液0.005 mg/g,1... 详细信息

目的考察大蒜素对新生乳鼠肠道细菌移位的作用。方法乳鼠140只随机分为10组:0,1,7,14,28 d空白对照组和0,1,7,14,28 d大蒜素组,每组14只。空白对照组腹腔注射0.9%氯化钠注射液0.03 mL/g,1次/d;大蒜素组腹腔注射大蒜素注射液0.005 mg/g,1次/d。0 d组在出生后即处死,其余各组均在各时间点末次给药后20 min处死乳鼠并收集指标。结果与对照组比较,大蒜素连续28 d后,新生乳鼠体重显著增加(P0.05),肠系膜淋巴结、肝和脾的细菌浓度显著降低(P新生乳鼠肠道细菌平衡。

关键词：大蒜素新生乳鼠肠道细菌移位

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新生乳鼠胸腺的超微结构研究

解剖学报 1987年第2期 191-194,239页

作者：杨惠彬王国华张贺秋张德芳陈德蕙军事医学科学院基础医学研究所军事医学科学院军队卫生研究所

本文研究新生乳鼠胸腺形态学特点,结果表明:1.胸腺小叶尚未完好形成,皮、髓质分界不甚清晰;2.髓质常可见由上皮细胞构成的囊性结构;3.内皮质有少数淋巴细胞胞浆含有糖原颗粒;4.胸腺小体少而小。本文描述了胸腺淋巴细胞、上皮性网状细胞... 详细信息

本文研究新生乳鼠胸腺形态学特点,结果表明:1.胸腺小叶尚未完好形成,皮、髓质分界不甚清晰;2.髓质常可见由上皮细胞构成的囊性结构;3.内皮质有少数淋巴细胞胞浆含有糖原颗粒;4.胸腺小体少而小。本文描述了胸腺淋巴细胞、上皮性网状细胞、巨噬细胞、指突细胞等细胞成分和血胸屏障等结构的超微结构特征。

关键词：胸腺超微结构新生乳鼠

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新生乳鼠脑瘫模型制作及评价

中华实验外科杂志 2008年第11期25卷 1525-1525页

作者：陈刚李江李建新迟广明杨小朋孙振柱新疆维吾尔自治区人民医院神经外科 830001 新疆维吾尔自治区人民医院神经内科 830001 新疆维吾尔自治区人民医院病理科 830001

小儿脑性瘫痪是目前小儿时期最主要的运动功能伤残疾病，且终生存在。细胞移植和基因治疗技术的飞速发展为治疗此类疾病带来了希望。建立一种稳定的脑瘫动物模型，将上述技术应用于实验研究是问题的关键。我们应用一侧颈总动脉结合缺氧... 详细信息

小儿脑性瘫痪是目前小儿时期最主要的运动功能伤残疾病，且终生存在。细胞移植和基因治疗技术的飞速发展为治疗此类疾病带来了希望。建立一种稳定的脑瘫动物模型，将上述技术应用于实验研究是问题的关键。我们应用一侧颈总动脉结合缺氧的方法制作乳鼠脑瘫模型，不同时间观察其行为学、神经电生理及脑组织病理变化，探讨和总结乳鼠缺血缺血模型的制作和评价方法。

关键词：模型制作新生乳鼠脑瘫小儿脑性瘫痪基因治疗技术组织病理变化伤残疾病缺血模型

柯萨奇B_(3m)病毒感染新生乳鼠致急性病毒性心肌炎模型的研究

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安徽医科大学学报 2001年第4期36卷 277-279页

作者：杨善志王明丽杨正修安徽医科大学第一附属医院儿科合肥230022 安徽医科大学微生物学教研室合肥230032

目的　探讨制备柯萨奇B3m病毒感染Balb/C新生乳鼠急性病毒性心肌炎模型的实验途径。方法　对柯萨奇B3m亲心肌株病毒进行增毒 ,滴定TCID5 0后感染Balb/C新生乳鼠。CVB3m病毒感染组 3窝共 2 1只 ,对照组 3窝共 2 0只。感染组每只乳鼠腹腔... 详细信息

目的　探讨制备柯萨奇B3m病毒感染Balb/C新生乳鼠急性病毒性心肌炎模型的实验途径。方法　对柯萨奇B3m亲心肌株病毒进行增毒 ,滴定TCID5 0后感染Balb/C新生乳鼠。CVB3m病毒感染组 3窝共 2 1只 ,对照组 3窝共 2 0只。感染组每只乳鼠腹腔内接种 10 0 0TCID5 0CVB3m病毒液 0 0 4ml,对照组每只乳鼠腹腔内接种 16 40维持液 0 0 4ml。观察感染乳鼠的发病及心肌病理变化。结果　感染组乳鼠在感染CVB3m后 48～ 72h发病 ,心肌病理变化以多形核细胞、单核细胞和巨噬细胞浸润为主要特征 ,心肌小血管壁内皮细胞受损 ,心肌细胞变性、肿胀 ;对照组乳鼠未见发病。结论　柯萨奇B3m病毒是急性心肌炎的重要病原体 ,其毒力及接种量与发病密切相关。

关键词：新生乳鼠急性病毒性心肌炎动物模型柯萨奇B3m病毒

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不同来源乳铁蛋白对幼鼠肠道发育的影响

生物化学与生物物理进展 2022年第8期49卷 1555-1563页

作者：程智美王文利李泽阳孟庆勇戴蕴平张雅丽中国农业大学食品科学与营养工程学院北京100083 中国农业大学生物学院北京100193

目的探究哺乳期乳铁蛋白(lactoferrin,LF)的缺失及不同来源LF补充后对幼鼠肠道发育的影响。方法以LF基因敲除型雌鼠作为哺乳母鼠造成幼鼠哺乳期无LF的摄入,且从幼鼠出生第3~21天每日人工饲喂100 mg/kg牛血清白蛋白(BSA)、牛源乳铁蛋白(b... 详细信息

目的探究哺乳期乳铁蛋白(lactoferrin,LF)的缺失及不同来源LF补充后对幼鼠肠道发育的影响。方法以LF基因敲除型雌鼠作为哺乳母鼠造成幼鼠哺乳期无LF的摄入,且从幼鼠出生第3~21天每日人工饲喂100 mg/kg牛血清白蛋白(BSA)、牛源乳铁蛋白(bovine Lactoferrin,bLF)及重组人源乳铁蛋白(recombinant human Lactoferrin,rhLF),于幼鼠21日龄取样,测定各组小鼠小肠发育指标。结果在本实验周期下,哺乳期rhLF的补充显著性增加小鼠回肠绒毛长度/隐窝深度值(P鼠十二指肠、空肠和回肠麦芽糖酶酶活/乳糖酶酶活比值(P鼠肠道消化吸收能力和肠屏障功能;哺乳期bLF的补充显著增加小鼠十二指肠及回肠麦芽糖酶活性/乳糖酶活性比值(P鼠来说,哺乳期间LF的补充能够增强乳鼠肠道对营养物质的消化吸收能力、促进肠道的发育成熟、增强肠道屏障功能,并且,本实验中rhLF表现出比bLF更加有效的作用。

关键词：牛乳铁蛋白重组人源乳铁蛋白肠道发育新生乳鼠

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柯萨奇病毒A16型灭活疫苗保护效果研究

药物分析杂志 2016年第6期36卷 986-990页

作者：贾双双刘悦越杜加亮赵荣荣刘艳国泰孙茂盛中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所昆明650118 中国食品药品检定研究院北京100050

目的:研究柯萨奇病毒A 16型候选疫苗株(CA 16-KM)经灭活后免疫小鼠,对病毒攻击的保护效果。方法:用Vero细胞进行CA 16-KM株培养,病毒收获后经浓缩、蔗糖密度梯度离心进行纯化及β-丙内酯灭活,用酶联免疫吸附法(ELISA法)对灭活后的CA 16... 详细信息

目的:研究柯萨奇病毒A 16型候选疫苗株(CA 16-KM)经灭活后免疫小鼠,对病毒攻击的保护效果。方法:用Vero细胞进行CA 16-KM株培养,病毒收获后经浓缩、蔗糖密度梯度离心进行纯化及β-丙内酯灭活,用酶联免疫吸附法(ELISA法)对灭活后的CA 16-KM病毒液进行抗原含量的测定并在Vero细胞上盲传3代对灭活后CA 16-KM毒株的残余毒力进行检测。灭活后的病毒加入氢氧化铝佐剂(质量浓度为1 mg·mL^(-1)),经离心及PBS重悬,制成实验性灭活疫苗。分别于第0天和第14天经肌肉注射免疫8周龄ICR母鼠,对照组用等体积PBS代替。分娩后24 h内的新生乳鼠用100 LD_(50)的CA 16强毒株(CA16-CC)经颅内注射进行攻毒,攻毒后连续21 d观察其临床症状,研究该灭活疫苗对新生乳鼠的保护效果。结果:经β-丙内酯灭活后的CA 16-KM在Vero细胞上盲传3代均无细胞病变效应(CPE)出现,灭活后的CA 16-KM抗原含量为320 EU·mL^(-1)。经注射实验性疫苗的乳鼠攻毒后全部存活,表明CA 16-KM株制备的灭活疫苗诱导的免疫反应可对新生乳鼠产生100%的保护作用。结论:β-丙内酯对CA 16-KM毒株的灭活效果较好;CA 16-KM疫苗候选株灭活后具有良好的免疫原性,可以保护新生乳鼠抵抗CA 16病毒的攻击,也许是研制CA 16灭活疫苗的理想毒株。

关键词：柯萨奇病毒A16型(CA 16) 肠道病毒71型(EV 71) 灭活疫苗保护效果新生乳鼠手足口病 β-丙内酯氢氧化铝佐剂半数致死量(LD_(50))

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心脏再生的研究进展

生理科学进展 2017年第2期48卷 122-127页

作者：王飞宇陈亮汤学超白元 Ching-Ling Lien 秦永文第二军医大学附属长海医院心血管内科上海200043 美国南加州大学Keck医学院 Saban研究中心发育与再生医学心脏课题组加利福尼亚州90027

冠心病及心肌梗死的发生率正呈逐年上升趋势,成人心肌细胞有限的再生能力限制了心肌梗死后心脏功能的恢复。斑马鱼及新生乳鼠心脏再生能力的发现给该领域带来了新的方向及希望。心脏再生动物模型种类日渐丰富,不同的生物模型对于不同的... 详细信息

冠心病及心肌梗死的发生率正呈逐年上升趋势,成人心肌细胞有限的再生能力限制了心肌梗死后心脏功能的恢复。斑马鱼及新生乳鼠心脏再生能力的发现给该领域带来了新的方向及希望。心脏再生动物模型种类日渐丰富,不同的生物模型对于不同的研究目的有着重要的作用。本文总结了近年来心脏再生动物模型的发展,并对心脏再生机制探索中所取得的重要研究进展进行论述。

关键词：心脏再生斑马鱼新生乳鼠动物模型