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新吉细毛羊KAP13.1基因多态性及其对部分经济性状的影响

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中国兽医学报 2014年第12期34卷 2022-2026页

作者：孙福亮曹阳鲁承金海国张立春延边大学农学院吉林延吉133002 吉林省农业科学院畜牧分院吉林公主岭136100

本试验采用DNA测序和PCR-SSCP技术,对176只新吉细毛羊KAP13.1基因编码区序列进行多态性分析,并利用最小二乘模型对其多态性与其产毛量、细度、拉伸长度、体质量的关联性进行系统分析。测序表明KAP13.1基因在291bp处发生T→C的突变,在469... 详细信息

本试验采用DNA测序和PCR-SSCP技术,对176只新吉细毛羊KAP13.1基因编码区序列进行多态性分析,并利用最小二乘模型对其多态性与其产毛量、细度、拉伸长度、体质量的关联性进行系统分析。测序表明KAP13.1基因在291bp处发生T→C的突变,在469、528bp处发生C→T的突变,均属同义突变,在T291C位点,CC基因型拉伸长度显著高于TT基因型(P新吉细毛羊产毛量和拉伸长度性状的分子标记。

关键词：新吉细毛羊 KAP13.1基因多态性经济性状

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新吉细毛羊5个生殖激素受体基因多态性分析

中国畜牧杂志 2019年第12期55卷 63-69页

作者：吴翠玲谢平赵卓赵云辉翟博柴浩晨张明新王春昕吉林农业大学动物科学技术学院吉林长春130000 吉林省农业科学院吉林公主岭136100 西北农林科技大学动物科技学院陕西杨凌712100

本研究旨在检测新吉细毛羊促性腺激素释放激素(GnRHR)、促黄体素(LHR)、促卵泡素(FSHR)、催乳素受体(PRLR)、雌激素(ESR)5个生殖激素受体基因多态性,为绵羊繁殖力的标记辅助选择和育种提供理论依据。以119只新吉细毛羊个体为研究对象,利... 详细信息

本研究旨在检测新吉细毛羊促性腺激素释放激素(GnRHR)、促黄体素(LHR)、促卵泡素(FSHR)、催乳素受体(PRLR)、雌激素(ESR)5个生殖激素受体基因多态性,为绵羊繁殖力的标记辅助选择和育种提供理论依据。以119只新吉细毛羊个体为研究对象,利用ABI测序仪检测基因多态性;用DNASTAR软件与I-TASSER软件预测蛋白质三级结构;用Excel计算基因型频率;用GraphPad prism 6软件进行新吉细毛羊群体5个生殖激素受体基因多态性与产羔数的相关性分析。经测序分析发现,FSHR基因不存在突变位点,其余4个基因存在13个突变位点。GnRHR基因存在A505G、G720C突变,LHR基因存在T1262G、A1991G、C2012T、A2032T、T2041A的突变,PRLR基因存在A1263G、C1544G突变,ESR基因存在A106T、C181T、G612A、C735T突变。在新吉细毛羊群体4个基因多态性与产羔数相关性分析结果中,只有ESR基因A106T突变对新吉细毛羊产羔数影响显著。其中AA、AT、TT 3种基因型个体的平均产羔数分别为1.391、1.101、1.417。AA基因型、TT基因型平均产羔数比AT基因型分别多0.290、0.316个(P0.05)。

关键词：新吉细毛羊 GnRHR LHR FSH PRLR ESR 多态性

新吉细毛羊KAP24.1基因多态性及羊毛性状的相关性分析

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黑龙江畜牧兽医 2016年第1期 70-73,260页

作者：孙福亮金海国鲁承曹阳张明新张立春延边大学农学院吉林延吉133002 吉林省农业科学院畜牧分院吉林公主岭136100

为了解角蛋白关联蛋白(KAP)24.1基因在新吉细毛羊群体中的多态性与其毛用性状的关联性,试验采用DNA测序法对新吉细毛羊基因组编码区进行测序,找出基因突变位点,然后采用PCRSSCP技术对497只新吉细毛羊KAP24.1基因编码区序列进行多态性分... 详细信息

为了解角蛋白关联蛋白(KAP)24.1基因在新吉细毛羊群体中的多态性与其毛用性状的关联性,试验采用DNA测序法对新吉细毛羊基因组编码区进行测序,找出基因突变位点,然后采用PCRSSCP技术对497只新吉细毛羊KAP24.1基因编码区序列进行多态性分析,并利用最小二乘模型对其多态性与产毛量、纤维直径、拉伸长度进行关联性分析。结果表明:在编码区有两处突变点,一处在348 bp处发生C→T的突变,脯氨酸突变为亮氨酸;另一处在414 bp处发生T→C的突变,丝氨酸突变为脯氨酸,均属于错义突变,KAP24.1基因的AA、AB、BB和CC基因型与纤维直径不相关(P>0.05),BB基因型的产毛量和拉伸长度显著大于AB基因型、CC基因型(P新吉细毛羊产毛量和拉伸长度主要候选基因之一,BB基因型可以作为分子标记用于预测绵羊产毛量和拉伸长度。

关键词：新吉细毛羊角蛋白关联蛋白(KAP)24.1基因多态性经济性状羊毛性状

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新吉细毛羊多胎性状相关基因筛选与验证

新吉细毛羊多胎性状相关基因筛选与验证

作者：吴翠玲吉林农业大学

学位级别：硕士

养羊业是我国畜牧业的重要组成部分,我国存栏绵、山羊约3.8亿只。在草食家畜中,羊对饲料的转化率较高,采食范围和适应性较广,可以充分利用其他家畜无法利用的资源。提高我国农业资源的综合产出率,对促进畜牧业经济发展、维护产业平衡和... 详细信息

养羊业是我国畜牧业的重要组成部分,我国存栏绵、山羊约3.8亿只。在草食家畜中,羊对饲料的转化率较高,采食范围和适应性较广,可以充分利用其他家畜无法利用的资源。提高我国农业资源的综合产出率,对促进畜牧业经济发展、维护产业平衡和健康可持续发展具有重要的作用。繁殖性状是养羊业重要的经济性状。本实验检测了新吉细毛羊8个基因多态性,并对布鲁拉美利奴羊与新吉细毛羊杂交后代卵巢颗粒细胞上8个基因表达量研究。旨在为提高绵羊、山羊繁殖力,增加产羔数工作中提供理论依据。本研究主要获得以下结论:1、利用PCR-RFLP技术对126只新吉细毛羊BMPR-1B基因多态性分析,结果显示新吉细毛羊不存在BMPR-1B基因多态性。推测BMPR-1B基因不是新吉细毛羊群体多胎性状主效基因。2、利用PCR-SSCP技术对118只新吉细毛羊骨形态发生蛋白15基因（BMP15）、生长分化因子基因9（GDF9）的多态性研究。在BMP15基因研究中,发现P1引物扩增片段存在多态性,呈现三种基因型:AA型、AC型、CC型。该突变为BMP15基因外显子1上58-60位置CTT三个碱基缺失。新吉细毛羊?2值达到显著水平,Hardy-Weinberg不平衡。不同基因之间新吉细毛羊平均产羔数差异不显著（P＞0.05）。在GDF9基因研究中,新吉细毛羊不存在多态性。GDF9基因T477C突变不能作为新吉细毛羊多胎性状遗传标记位点。3、利用ABI测序仪对119只新吉细毛羊Gn RHR、LHR、FSHR、PRLR、ESR基因多态性分析。结果发现FSHR基因不存在突变位点。Gn RHR、LHR、PRLR、ESR四个基因存在13个突变位点。Gn RHR基因存在A505G、G720C突变,LHR基因存在T1262G、A1991G、C2012T、A2032T、T2041A的突变,PRLR基因存在A1263G、C1544G突变,ESR基因存在A106T、C181T、G612A、C735T突变。在新吉细毛羊群体四个基因多态性与产羔数相关性分析结果中,Gn RHR基因G720C突变对新吉细毛羊产羔数影响显著（P＜0.05）。其中CC型个体平均产羔数为2,比GG基因型、GC基因型分别多0.822、0.806个。ESR基因A106T突变对新吉细毛羊产羔数影响显著。其中AA、AT、TT 3种基因型个体的平均产羔数分别为1.391、1.101、1.417。AA基因型、TT基因型平均产羔数比AT基因型分别多0.290、0.316个（P＜0.05）。AA基因型、TT基因型平均产羔数之间差异不显著（P＞0.05）。4、利用实时荧光定量PCR分析了布鲁拉美利奴羊与新吉细毛羊杂交1代++型和B+型卵巢颗粒细胞上BMPR-1B、BMP15、GDF9、Gn RHR、LHR、FSHR、ESR、AMH八个基因表达情况。研究结果发现:++型和B+型卵巢颗粒细胞的BMPR-1B、Gn RHR、LHR、FSHR基因m RNA表达水平差异不显著（P＞0.05）;B+型卵巢颗粒细胞的BMP15、AMH基因m RNA表达水平显著高于++型（P＜0.05）;GDF9、ESR基因m RNA表达水平极显著低于++型（P＜0.01）;ESR基因m RNA表达水平显著高低于++型（P＜0.05）。实验结果表明BMPR-1B、BMP15、GDF9、LHR、FSHR、PRLR基因不存在与新吉细毛羊多胎性状相关的突变位点。而ESR的A106T突变推测可作为新吉细毛羊多胎性状遗传标记。同时,新吉细毛羊群体引入Fec B基因后,繁殖性状相关基因表达水平发生明显改变。其实验结果为Fec B基因提高绵羊产羔率的机理提供了实验依据。

关键词：新吉细毛羊多态性多胎基因生殖激素受体基因颗粒细胞

中国新吉细毛羊LHx2基因cDNA克隆与序列分析

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中国兽医学报 2015年第12期35卷 1979-1983,1990页

作者：王沙沙金海国曹阳鲁承张雪梅孙福亮张立春延边大学农学院吉林延吉133002 吉林省农业科学院畜牧分院吉林公主岭136100

以供试羊皮肤组织中提取的总RNA为模板,根据Gen Bank中登陆的绵羊LHx2基因序列设计引物,通过PCR方法扩增RT-PCR合成的LHx2基因编码区第一链c DNA,回收、纯化反应产物,将目的基因与p MD18-T载体连接、转化,获得阳性重组质粒,成功克隆新... 详细信息

以供试羊皮肤组织中提取的总RNA为模板,根据Gen Bank中登陆的绵羊LHx2基因序列设计引物,通过PCR方法扩增RT-PCR合成的LHx2基因编码区第一链c DNA,回收、纯化反应产物,将目的基因与p MD18-T载体连接、转化,获得阳性重组质粒,成功克隆新吉细毛羊LHx2基因c DNA序列,测序长为1 215 bp。基因同源性分析结果显示各物种间同源性均在80%以上。该基因编码405个氨基酸残基,蛋白同源性分析结果显示各物种间同源性差异较大;蛋白二级结构分析显示LHx2蛋白为疏水性蛋白、柔韧性较高;蛋白结构域分析结果表明克隆的基因较为完整。研究结果为深入研究新吉细毛羊LHx2基因提供理论基础。

关键词：新吉细毛羊 LHx2基因克隆

中国新吉细毛羊天然Toll样受体8基因(TLR8)克隆与序列分析

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中国兽医学报 2014年第3期34卷 505-510页

作者：郭振刚金海国曹阳孙福亮张明新杨震朱景良张立春吉林农业大学动物科学技术学院吉林长春130118 吉林省农业科学院畜牧分院吉林公主岭136100 延边大学农学院吉林延吉133002 吉林省前郭县查干花种畜场吉林松原138000

为了解绵羊Toll样受体8(TLR8)蛋白的结构特征和进化关系。本试验采用Trizol法提取新吉细毛羊肝脏组织总RNA,设计ORF区两端兼并引物,RT-PCR方法克隆新吉细毛羊TLR8并进行了系统的生物信息学分析。RT-PCR结果显示,试验获得了大小为3 102b... 详细信息

为了解绵羊Toll样受体8(TLR8)蛋白的结构特征和进化关系。本试验采用Trizol法提取新吉细毛羊肝脏组织总RNA,设计ORF区两端兼并引物,RT-PCR方法克隆新吉细毛羊TLR8并进行了系统的生物信息学分析。RT-PCR结果显示,试验获得了大小为3 102bp的片段,包括完整的ORF区2 982bp,编码993个氨基酸(GenBank序列号为:GU936186和GU936187),含15.7%的亮氨酸。同源分析结果显示,TLR8在进化过程中具有高度保守性,与人、家牛、山羊、猪、梅花鹿和小鼠的氨基酸序列同源性分别为79.9%、96.3%、97.6%、84.7%、96.5%和74.2%。蛋白分子功能结构域预测显示,该分子由胞外区(781个氨基酸)、跨膜区(52个氨基酸)和胞内区(160个氨基酸)组成,其中胞外区具有LRR结构域,胞内区具有TIR结构域,且绵羊较人类多了LRR3和LRR12结构域。进化分析显示TLR8分子与不同物种间的进化关系符合真实物种间的进化顺序。试验结果表明新吉细毛羊TLR8分子具有病原分子模式识别作用,为其结构和功能的研究奠定了基础。

关键词：新吉细毛羊 Toll样受体8 克隆序列分析

小尾寒羊与新吉细毛羊羊毛及毛囊性状比较研究

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中国畜牧杂志 2017年第9期53卷 52-56页

作者：张立春孙福亮金海国曹阳魏天朴庆林张明新吉林省农业科学院畜牧分院吉林公主岭136100 延边大学农学院吉林延吉130021

为进一步验证小尾寒羊与新吉细毛羊毛用性状与毛囊性状差异。本研究选择9月龄小尾寒羊与新吉细毛羊母羊各8只,在相同饲养环境下测定毛用性状及毛囊性状并分析两者间的差异,最后用定量PCR方法检测不同月份2个品种绵羊毛囊周期分子的表达... 详细信息

为进一步验证小尾寒羊与新吉细毛羊毛用性状与毛囊性状差异。本研究选择9月龄小尾寒羊与新吉细毛羊母羊各8只,在相同饲养环境下测定毛用性状及毛囊性状并分析两者间的差异,最后用定量PCR方法检测不同月份2个品种绵羊毛囊周期分子的表达变化趋势。结果表明:小尾寒羊在主要毛用性状,包括产毛量(GFW)、毛细度(FD)、拉伸长度(SL)、卷曲度及油脂率等大部分指标均极显著低于新吉细毛羊(P羊与新吉细毛羊毛囊制表显示,小尾寒羊毛囊密度、S/P值等极显著低于新吉细毛羊(P新吉细毛羊;毛囊周期标记分子定量PCR显示,不同季节小尾寒羊与新吉细毛羊LEF1和TGF-β1基因总体变化趋势相同,但小尾寒羊变化更为剧烈,说明气候等外界因素对小尾寒羊毛囊周期影响大于新吉细毛羊。本研究证明小尾寒羊与新吉细毛羊的毛用性状、毛囊性状存在极显著差异,TGF-β1为进一步探讨小尾寒羊与新吉细毛羊毛用性状表型差异分子遗传基础研究奠定基础。

关键词：新吉细毛羊小尾寒羊羊毛性状毛囊性状

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非遗传因素对新吉细毛羊主要经济性状的影响

中国畜牧杂志 2020年第8期56卷 104-107,110页

作者：关鸣轩李进龙杨存明魏趁陈雪艳杜桂琼徐新明付雪峰佀博学田可川黄锡霞新疆农业大学动物科学学院新疆乌鲁木齐830052 新疆畜牧科学院畜牧研究所新疆绒毛用羊遗传育种与繁殖实验室新疆乌鲁木齐830011

为研究非遗传因素对新吉细毛羊主要经济性状的影响,本文运用SAS9.2软件GLM程序分析非遗传因素对新疆塔城地区新吉细毛羊9个周岁鉴定性状的影响。结果表明:出生年份对体型评分、毛长、密度评分、细度支数、细度匀度评分、弯曲评分、油汗... 详细信息

为研究非遗传因素对新吉细毛羊主要经济性状的影响,本文运用SAS9.2软件GLM程序分析非遗传因素对新疆塔城地区新吉细毛羊9个周岁鉴定性状的影响。结果表明:出生年份对体型评分、毛长、密度评分、细度支数、细度匀度评分、弯曲评分、油汗评分、总评分有极显著影响,对头毛评分没有显著影响;群别对头毛评分、体型评分、毛长、密度评分、细度支数、细度匀度评分、弯曲评分、油汗评分、总评分均有极显著影响;性别对头毛评分、体型评分、毛长、密度评分、细度支数、细度匀度评分、弯曲评分、总评分有极显著影响,对油汗评分没有显著影响。由此可见,出生年份、群别及性别对新吉细毛羊的主要经济性状存在显著影响,因此在遗传参数估计中应综合考虑这3个因素。本研究为估计细毛羊遗传参数和育种值提供了参考依据。

关键词：新吉细毛羊被毛品质非遗传因素

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新吉细毛羊KAP1.4基因多态性分析

延边大学农学学报 2015年第4期37卷 281-285页

作者：李迎张立辉吴岩孙福亮张立春延边大学农学院吉林延吉133002 吉林省农业科学院畜牧分院吉林公主岭136100

为了进一步了解KAP1.4基因在新吉细毛羊群体中的多态性,采用DNA测序法对新吉细毛羊和小尾寒羊基因组编码区进行测序,找出基因突变位点,然后采用PCR-SSCP技术对新吉细毛羊KAP1.4基因编码区序列进行多态性分析。结果表明:与小尾寒羊基因... 详细信息

为了进一步了解KAP1.4基因在新吉细毛羊群体中的多态性,采用DNA测序法对新吉细毛羊和小尾寒羊基因组编码区进行测序,找出基因突变位点,然后采用PCR-SSCP技术对新吉细毛羊KAP1.4基因编码区序列进行多态性分析。结果表明:与小尾寒羊基因组比较,新吉细毛羊KAP1.4基因码区有4处突变点,分别在136bp处发生C→T的突变,在199bp处发生T→C的突变,在310bp处发生T→G的突变以及在322bp处发生A→T的突变。而且新吉细毛羊在KAP1.4基因座上检测到AA、AB、AC基因型,以A等位基因为主。因此,KAP1.4基因在新吉细毛羊群体中存在多态性,并且以AC型为主。

关键词：新吉细毛羊 KAP1,4基因多态性分析