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斯氏线虫对枸杞红瘿蚊幼虫侵染能力及存活能力研究

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安徽农业科学 2023年第2期51卷 150-151,163页

作者：刘晓丽李锋宁夏农林科学院植物保护研究所宁夏银川750002

以枸杞红瘿蚊(Jaapiella sp.)幼虫为研究对象,室内开展了不同浓度斯氏线虫对枸杞红瘿蚊幼虫侵染能力及存活能力试验,以期为枸杞红瘿蚊的生物防治提供理论依据。结果表明,15 g/20 mL浓度的斯氏线虫对枸杞红瘿蚊侵染能力较强,致死效果明显... 详细信息

以枸杞红瘿蚊(Jaapiella sp.)幼虫为研究对象,室内开展了不同浓度斯氏线虫对枸杞红瘿蚊幼虫侵染能力及存活能力试验,以期为枸杞红瘿蚊的生物防治提供理论依据。结果表明,15 g/20 mL浓度的斯氏线虫对枸杞红瘿蚊侵染能力较强,致死效果明显;以枸杞红瘿蚊虫体及体液为培养基的斯氏线虫存活率显著高于清水对照。

关键词：枸杞红瘿蚊幼虫斯氏线虫侵染能力存活能力

斯氏线虫低温驯化及其共生菌的杀虫抑菌活性研究

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斯氏线虫低温驯化及其共生菌的杀虫抑菌活性研究

作者：张旭霞东北农业大学

学位级别：硕士

昆虫病原线虫(Entomopathogenic nematodes,EPN)是一种携带共生菌、以昆虫为寄主的致病性线虫,被视为最具潜力的生防因子之一。为了开发利用高寒地区昆虫病原线虫及其共生菌,提高线虫冷冻存活率与贮存稳定性,将线虫及其共生菌应用于防... 详细信息

昆虫病原线虫(Entomopathogenic nematodes,EPN)是一种携带共生菌、以昆虫为寄主的致病性线虫,被视为最具潜力的生防因子之一。为了开发利用高寒地区昆虫病原线虫及其共生菌,提高线虫冷冻存活率与贮存稳定性,将线虫及其共生菌应用于防治当地农业重要病虫害,本研究结合室内模拟非生物胁迫条件,探究了从哈尔滨市分离到的海滨斯氏线虫Steinernema litorale的适低温特性,不同低温处理对该线虫冷冻存活率、贮存稳定性以及体内生化物质—可溶性糖、糖原、海藻糖、脂肪与蛋白质含量的影响,进而明确海滨斯氏线虫开发应用的潜能和价值;并检测了哈尔滨当地昆虫病原线虫共生菌Xenorhabdus bovineii(分离于海滨斯氏线虫Steinernema litorale)和Xenorhabdus budapestensis(分离于拟双角斯氏线虫Steinernema ceratophorum)发酵液的杀虫活性及其致病机理,针对黑龙江冬小麦雪腐病病菌Fusarium nivale Ba218进行抑菌活性的分析。取得的主要研究结果如下:(1)本研究首次探讨了不同低温驯化方式25℃(6 d)、10℃(6 d)、4℃(6 d)和25℃(2 d)0℃(2 d)℃(2 d)对高寒地区海滨斯氏线虫的影响。1)海滨斯氏线虫经低温驯化,于﹣20℃冷冻36 h后的存活率分别为0.9%、23.6%、20.0%和49.2%,阶段性降温驯化能显著提高线虫的冷冻存活率,对海滨斯氏线虫的侵染力无显著影响。适当的低温驯化可提高海滨斯氏线虫的耐寒能力。2)海滨斯氏线虫经低温驯化后,体内可溶性糖、脂肪和海藻糖含量增加,蛋白质、糖原含量无显著变化。阶段性降温驯化的海滨斯氏线虫体内蛋白质、可溶性糖、糖原、脂肪和海藻糖含量高于直接降温驯化的含量,但无显著差异。3)海滨斯氏线虫经低温驯化后贮存稳定性无显著变化,7个月后存活率均在65%以上,经10℃(6 d)、4℃(6 d)和25℃(2 d)0℃(2 d)℃(2 d)低温驯化的线虫4℃贮存7个月后杀虫活性显著高于25℃(6 d)驯化的线虫杀虫活性,其中10℃(6 d)驯化的线虫贮存能力和杀虫活性最强。(2)两种哈尔滨当地斯氏线虫共生菌X.bovineii和X.budapestensis发酵物杀虫抑菌活性的研究。1)对玉米螟(Ostrinia furnacalis)和小菜蛾(Plutella xylostella)通过喂食法来进行杀虫活性测定,X.bovineii菌株发酵液对小菜蛾的生物活性最高,处理48 h后校正死亡率为100%,明显高于X.budapestensis菌株发酵液对小菜蛾的校正死亡率71.65%;X.bovineii和X.budapestensis菌株发酵液对玉米螟的校正死亡率较低,分别为52.18%和55.28%。2)X.bovineii和X.budapestensis菌株发酵液对大蜡螟(Galleria mellonell)处理48 h后的校正死亡率均达100%。处理1 h后取血淋巴观察,注射X.bovineii和X.budapestensis菌株发酵液的大蜡螟血淋巴分别为浅灰色和深灰色,健康虫体血淋巴为浅黄色;血淋巴在空气中暴露30 min后,健康血淋巴变为黑色,X.bovineii和X.budapestensis菌株发酵液处理的血淋巴仍保持浅灰色和深灰色。3)用X.bovineii和X.budapestensis菌株发酵液注射大蜡螟,血淋巴蛋白含量无显著变化,血糖含量急剧下降,显著低于CK对照组。在注射后4-20 h,两株菌株发酵液对大蜡螟体内羧酸酯酶和乙酰胆碱酯酶的激活作用显著,酶活性随注射时间增加而增高;对多酚氧化酶显示出较高的抑制作用。4)X.bovineii和X.budapestensis菌株发酵液对雪腐病菌Ba218的菌丝生长有抑制作用,不同温度处理X.bovineii菌株发酵液对小麦雪腐病病Ba218的抑制率为56.92%1.22%,X.budapestensis菌株发酵液对小麦雪腐病病菌Ba218的抑制率为57.01%3.73%。不同温度处理共生菌发酵液后对其抑菌活性无显著影响,紫外线照射后其抑菌活性显著降低。X.budapestensis菌株发酵液抑制雪腐病Ba218过程中进行光暗交替处理,后者菌丝颜色由红色变为橙色,X.budapestensis菌株发酵液抑菌过程中进行全黑暗处理,致使雪腐病病菌Ba218菌丝颜色由红色变为浅黄色,菌丝生长量下降。本研究结果表明,本地线虫及其共生菌资源在当地气候条件下具有防治玉米螟和小菜蛾这2种主要农业害虫的应用潜力,对于小麦雪腐病病源菌具有一定抑菌活性。

关键词：斯氏线虫低温驯化共生菌杀虫活性抑菌活性

哈尔滨两种斯氏线虫及其共生菌的分离鉴定和低温侵染力分析

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中国生物防治学报 2014年第4期30卷 558-563页

作者：吕洋韩岚岚赵奎军宋捷朱明贺东北农业大学农学院哈尔滨150030

从哈尔滨当地土壤中分离出2个斯氏线虫品系。并通过分子生物学技术对这2种斯氏线虫的内转录间隔区(ITS)进行PCR扩增和序列分析,明确这2种哈尔滨斯氏线虫分别是海滨斯氏线虫Steinernema litorale和拟双角斯氏线虫Steinernema ceratophor... 详细信息

从哈尔滨当地土壤中分离出2个斯氏线虫品系。并通过分子生物学技术对这2种斯氏线虫的内转录间隔区(ITS)进行PCR扩增和序列分析,明确这2种哈尔滨斯氏线虫分别是海滨斯氏线虫Steinernema litorale和拟双角斯氏线虫Steinernema ceratophorum,其扩增的DNA片段长度分别为913和1000 bp。关于海滨斯氏线虫的共生菌研究目前尚未见报道,进而对其共生菌进行了分离鉴定,通过扩增核糖体16S rDNA片段,确定海滨斯氏线虫携带的共生菌为伯氏杆菌Xenorhabdus bovienii,其扩增片段大小为1388 bp;拟双角斯氏线虫携带的共生菌为Xenorhabdus budapestensis,其扩增片段大小为1517 bp。为了验证海滨斯氏线虫及拟双角斯氏线虫在高寒地区的活力,在低温条件下对大蜡螟的侵染力进行了测定。结果表明,5℃条件下侵染144 h,4种线虫处理的大蜡螟幼虫均未死亡;10℃条件下,海滨斯氏线虫表现出明显较高的侵染力,在处理96 h大蜡螟幼虫的校正死亡率为85.83%,其他3个处理校正死亡率都为0;15℃条件下,拟双角斯氏线虫表现出明显较高的侵染力,在处理72 h大蜡螟的校正死亡率为89.17%,海滨斯氏线虫在处理72 h大蜡螟未出现死亡,处理96 h开始出现死亡,且校正死亡率为87.5%,而拟双角斯氏线虫在处理96 h后校正死亡率为96.67%,拟双角斯氏线虫表现出较高的侵染力显著高于其他2种处理,但与海滨斯氏线虫相比,二者无显著差异。

关键词：斯氏线虫分离鉴定低温侵染力

昆虫致病性斯氏线虫亲环素基因的克隆、特征及表达分析(英文)

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重庆师范大学学报（自然科学版） 2014年第1期31卷 25-29,135页

作者：郝友进付丹影何正波陈斌重庆师范大学生命科学学院昆虫与分子生物学研究所重庆401331

亲环蛋白(Cyclophilin)广泛存在于原核和真核生物中,在进化过程中结构保守,多数具有肽基脯氨酰基顺反异构酶活性。本文在斯氏线虫(Steinernema carpocapsae)差减杂交分析的基础上,克隆一个亲环蛋白基因(Sca-CYN)。该胞质蛋白有171个氨... 详细信息

亲环蛋白(Cyclophilin)广泛存在于原核和真核生物中,在进化过程中结构保守,多数具有肽基脯氨酰基顺反异构酶活性。本文在斯氏线虫(Steinernema carpocapsae)差减杂交分析的基础上,克隆一个亲环蛋白基因(Sca-CYN)。该胞质蛋白有171个氨基酸组成,分子量约为16.2kD,等电点约为6.89。BLAST分析表明,Sca-CYN蛋白与线虫、昆虫及其它生物亲环蛋白的序列一致性达75%~89%。基因表达分析显示该基因在寄生初期就上调表达。序列比较及进化标记分析发现Sca-CYN为秀丽隐杆线虫亲环蛋白3的直系同源蛋白。同源建模分析显示该蛋白具有亲环蛋白的经典三维结构。系统发育分析结果表明该蛋白在进化早期与其同源基因分离。研究结果为进一步研究该基因功能及探讨线虫亲环蛋白基因家族的分子进化提供基础。

关键词：昆虫致病性线虫亲环蛋白生物信息学斯氏线虫

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斯氏线虫对斜纹夜蛾幼虫致死率的影响

浙江农业科学 2015年第3期56卷 374-376页

作者：姚红燕王丽丽汪峰宁波市农业科学研究院浙江宁波315040

研究不同的侵染比、龄期和温度条件下斯氏线虫对斜纹夜蛾幼虫致死率的影响。结果表明,斯氏线虫与斜纹夜蛾幼虫最佳侵染比为30∶1,该条件下,48和72 h斜纹夜蛾幼虫的死亡率分别达到86.67%和93.33%;龄期越小,斜纹夜蛾幼虫的死亡率越高,当... 详细信息

研究不同的侵染比、龄期和温度条件下斯氏线虫对斜纹夜蛾幼虫致死率的影响。结果表明,斯氏线虫与斜纹夜蛾幼虫最佳侵染比为30∶1,该条件下,48和72 h斜纹夜蛾幼虫的死亡率分别达到86.67%和93.33%;龄期越小,斜纹夜蛾幼虫的死亡率越高,当斯氏线虫与斜纹夜蛾幼虫比为50∶1时,斜纹夜蛾1龄和4龄幼虫24 h死亡率分别为100.00%和40.00%;25℃时斯氏线虫对4龄斜纹夜蛾幼虫的致死率最高,72 h死亡率达到53.33%,与其他不同温度处理间存在显著性差异。

关键词：斯氏线虫斜纹夜蛾幼虫致死率

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斯氏线虫对有机茶园角胸叶甲的田间控制效应

植物保护学报 2007年第4期34卷 447-448页

作者：廖冬晴梁广文岑伊静华南农业大学昆虫生态研究室

角胸叶甲Basilepta.melanopus Lefevre是危害凤凰单丛茶的重要害虫,该虫以成虫危害茶叶,幼虫取食茶树的幼根,导致茶叶产量减少,品质下降.斯氏线虫Steinernema carpocapsae是控制角胸叶甲幼虫的重要天敌.作者于2004年10月在广东省潮州市... 详细信息

角胸叶甲Basilepta.melanopus Lefevre是危害凤凰单丛茶的重要害虫,该虫以成虫危害茶叶,幼虫取食茶树的幼根,导致茶叶产量减少,品质下降.斯氏线虫Steinernema carpocapsae是控制角胸叶甲幼虫的重要天敌.作者于2004年10月在广东省潮州市凤凰山凤凰单丛茶园就该天敌在有机茶园对角胸叶甲幼虫的田间控制效果进行了研究.

关键词：有机茶园斯氏线虫叶甲控制效应田间凤凰单丛茶茶叶产量控制效果

昆虫病原斯氏线虫SY-5对重组Cip晶体蛋白的营养利用(英文)

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微生物学通报 2012年第10期39卷 1407-1417页

作者：游娟黄建林曹莉韩日畴广东药学院生物化学与分子生物学系广东广州510006 广州计量检测技术研究院广东广州510530 广东省昆虫研究所广东广州510260

【目的】初生型Photorhabdus luminescens细菌产生两种胞内晶体蛋白CipA和CipB,为其共生的昆虫病原异小杆线虫提供营养。探索非共生的斯氏线虫对Cip蛋白的营养利用情况。【方法】在已构建重组Cip蛋白大肠杆菌表达体系的基础上,建立重组... 详细信息

【目的】初生型Photorhabdus luminescens细菌产生两种胞内晶体蛋白CipA和CipB,为其共生的昆虫病原异小杆线虫提供营养。探索非共生的斯氏线虫对Cip蛋白的营养利用情况。【方法】在已构建重组Cip蛋白大肠杆菌表达体系的基础上,建立重组菌细胞与无菌斯氏SY-5线虫共培养系统,检测线虫的生长发育情况。【结果】Cip蛋白对目标线虫生长有显著支持作用:发育为成虫的比例达到65%-82%,雌虫的怀卵率为80%-95%,平均怀卵量为30-50粒,并显著降低各虫态的死亡率。【结论】Cip蛋白不仅为共生的异小杆线虫提供营养,亦能为斯氏线虫所利用。

关键词：胞内晶体蛋白斯氏线虫营养利用

斯氏线虫感染双钩异翅长蠹的致死中量与致死中时间

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江西农业大学学报 2005年第2期27卷 238-241页

作者：胡学难梁广勤吴佳教梁帆钟国强莫仁浩赵菊鹏赵立荣冯黎霞广州出入境检验检疫局植检实验室广东广州510623

在室内测定了斯氏线虫对进境原木上的检疫性害虫———双钩异翅长蠹的致死中量和致死中时间,旨在为大规模应用斯氏线虫检疫处理双钩异翅长蠹提供理论依据。将TDM模型引入试验结果的分析中,得出了双钩异翅长蠹幼虫和蛹的TDM模型以及LD50... 详细信息

在室内测定了斯氏线虫对进境原木上的检疫性害虫———双钩异翅长蠹的致死中量和致死中时间,旨在为大规模应用斯氏线虫检疫处理双钩异翅长蠹提供理论依据。将TDM模型引入试验结果的分析中,得出了双钩异翅长蠹幼虫和蛹的TDM模型以及LD50与LT50。72h后双钩异翅长蠹老幼虫的TDM模型为:Pij=1-exp[ -3. 051 4+2. 027 2lg(di)],LD50为1. 324 4(条线虫/头),LT50为1. 238 5d。试验结果表明:随着时间的延长,LD50都逐渐减少,这是因为随着时间的延长,增加了斯氏线虫与双钩异翅长蠹接触的机会;随着线虫剂量的增加,LT50逐渐减少,即线虫剂量增加,幼虫死亡50%所需的时间就少。

关键词：致死中量双钩异翅长蠹时间线虫感染斯氏线虫 LT50 LD50 试验结果检疫性害虫 TDM 进境原木室内测定检疫处理模型幼虫延长剂量蛹

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斯氏线虫对进境原木额毛小蠹的生物防治研究

广东农业科学 2007年第4期34卷 57-59页

作者：胡学难陈小帆荣晓东谭惠如林莉谢伟烈李惠河广东出入境检验检疫局技术中心广东广州510623 广州市白云区农业局广东广州510405

斯氏线虫对额毛小蠹的毒力测定结果表明,斯氏线虫对每头额毛小蠹老龄幼虫侵染后48h的LD50值和LD90值分别为18条、94条,对蛹的LD50值和LD90值分别为28条、186条。在寄生强度测定中,每头额毛小蠹老龄幼虫与斯氏线虫仅接触0.5h后,就可被侵... 详细信息

斯氏线虫对额毛小蠹的毒力测定结果表明,斯氏线虫对每头额毛小蠹老龄幼虫侵染后48h的LD50值和LD90值分别为18条、94条,对蛹的LD50值和LD90值分别为28条、186条。在寄生强度测定中,每头额毛小蠹老龄幼虫与斯氏线虫仅接触0.5h后,就可被侵入1.2条线虫;侵染后12h额毛小蠹老龄幼虫的死亡率达到93.3%;侵染后24h额毛小蠹老龄幼虫的死亡率为100%。结果表明,斯氏线虫对额毛小蠹表现出较高的致病性和寄生性,是防治额毛小蠹较好的生物因子,在室内以浸泡法和淋施法防治额毛小蠹的效果较好,喷施法的效果较差。

关键词：斯氏线虫额毛小蠹生物防治