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重型再生障碍性贫血患者CD8+效应t细胞损伤骨髓造血途径的研究

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中华血液学杂志 2011年第9期32卷 597-601页

作者：冯乐付蓉王化泉王珺刘春燕李丽娟刘惠王红蕾张田阮二宝梁勇瞿文王国锦吴玉红刘鸿王晓明宋嘉关晶邢莉民邵宗鸿天津医科大学总医院血液肿瘤科

目的研究重型再生障碍性贫血（SAA）患者外周血CD8CD25和CD8HLA-DRt细胞数量及其杀伤靶细胞的途径,探讨SAA的免疫发病机制。方法应用流式细胞术检测29例SAA（初治14例、缓解15例）患者及12名健康对照者外周血CD8CD25和CD8HLA-DRt细胞的... 详细信息

目的研究重型再生障碍性贫血（SAA）患者外周血CD8CD25和CD8HLA-DRt细胞数量及其杀伤靶细胞的途径,探讨SAA的免疫发病机制。方法应用流式细胞术检测29例SAA（初治14例、缓解15例）患者及12名健康对照者外周血CD8CD25和CD8HLA-DRt细胞的数量及其胞质内穿孔素、颗粒酶B、肿瘤坏死因子β（tNF-β）、胞膜FasL表达。结果 SAA初治组患者CD8CD25t细胞占CD8和CD3t细胞的比例分别为（3.67±2.58）%和（2.25±1.35）%,缓解组为（5.19±4.29）%和（2.98±1.35）%,正常对照组为（4.84±2.31）%和（2.11±1.88）%,CD8CD25t细胞占CD8和CD3t细胞的比例三组间比较差异无统计学意义（P值均>0.05）。初治组CD8HLA-DRt细胞占CD8t细胞比例为（39.30±8.13）%,缓解组为（20.65±5.38）%,正常对照组为（18.34±6.68）%,初治组明显高于缓解组及正常对照组（P0.05）。SAA初治组CD8HLA-DRt细胞占CD3t细胞比例为（27.81±7.10）%,缓解组为（12.02±3.03）%,正常对照组为（8.50±2.33）%,初治组明显高于缓解组及正常对照组（Pt细胞穿孔素、颗粒酶、tNF-β、FasL中位表达比例分别为8.51%、96.08%、72.1 1%、94.25%,均明显高于缓解组（1.78%、85.20%、34.38%、51.20%）及正常对照组（1.86%、82.09%、17.92%、32.91%）(P值均0.05）。结论 SAA患者外周血CD8HLA-DR效应t细胞比例增加,CD8效应t细胞影响靶细胞的穿孔素-颗粒酶途径、细胞因子（tNF-β）途径、Fas/FasL途径均参与了骨髓造血细胞损伤的过程。

关键词：贫血,再生障碍性效应t细胞穿孔素颗粒酶B Fas配体

效应t细胞过继输注子宫内膜异位症大鼠模型抑制异位病灶的实验研究

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效应T细胞过继输注子宫内膜异位症大鼠模型抑制异位病灶的实验研究

作者：冯地路华中科技大学

学位级别：硕士

子宫内膜异位症是目前常见的妇科疾病之一,在育龄妇女的患病率高达10-15%,引起不孕,痛经,慢性盆腔痛,性交不适和月经异常等症状,给患者工作和生活质量带来严重影响。内异症的发病机制尚未完全阐明,但免疫因素在其发生发展过程中具有重... 详细信息

子宫内膜异位症是目前常见的妇科疾病之一,在育龄妇女的患病率高达10-15%,引起不孕,痛经,慢性盆腔痛,性交不适和月经异常等症状,给患者工作和生活质量带来严重影响。内异症的发病机制尚未完全阐明,但免疫因素在其发生发展过程中具有重要的病理生理学意义,免疫监视的缺陷为异位子宫内膜的存活蔓延提供了先决条件。为了利用机体免疫系统本身的监视能力,阻断异位子宫内膜细胞逃脱免疫监视机制,增强其对异位子宫内膜细胞的杀伤清除能力,我们在体外诱导培养大鼠骨髓来源的树突状细胞(BMDC),并在近交系大鼠体内建立内异症模型;然后将未成熟BMDC与原代培养的异位病灶组织细胞共培养,刺激t淋巴细胞增殖;将效应t细胞分离提纯后,腹腔输注过继到内异症大鼠模型,并设对照组(n=8), 10天后,测量分析病灶大小,并取标本切片,HE染色,通过观察分析病灶萎缩程度,分析其异位病灶生长抑制情况。结果发现:3只大鼠异位病灶大小与对照组比较存在显著性差异(P效应t细胞过继输注子宫内膜异位症大鼠模型,可明显抑制其异位病灶的发生发展。增强免疫系统对于异位病灶的杀伤清除的能力,阻断免疫逃逸机制,对异位症的治疗可起到了良好的效果,为自体疫苗的研制打下了基础。

关键词：子宫内膜异位症效应t细胞树突状细胞大鼠模型自体疫苗

二甲双胍调节系统性效应t细胞/调节性t细胞平衡对博来霉素诱导系统性硬化病小鼠模型的影响

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中华风湿病学杂志 2021年第7期25卷 461-466,I0003页

作者：梁朝王艳林赵向聪范春雪罗静山西医科大学第二医院风湿免疫科太原030001

目的研究不同浓度二甲双胍对博来霉素(BLM)诱导SSc小鼠模型的影响及机制。方法C57BL/6小鼠按照随机分配原则分为正常组、模型组、高、中、低剂量二甲双胍治疗组,经博来霉素、二甲双胍干预4周末处死小鼠。局部皮肤采用组织病理染色法测... 详细信息

目的研究不同浓度二甲双胍对博来霉素(BLM)诱导SSc小鼠模型的影响及机制。方法C57BL/6小鼠按照随机分配原则分为正常组、模型组、高、中、低剂量二甲双胍治疗组,经博来霉素、二甲双胍干预4周末处死小鼠。局部皮肤采用组织病理染色法测量真皮和胶原厚度,免疫组织化学法和实时荧光定量PCR(Rt-qPCR)检测IL-17、叉头框蛋白P3(Foxp3)、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达情况和mRNA水平。采用流式细胞术检测脾单个核细胞中系统性效应t细胞(teff)和调节性t细胞(treg)相对数目。对真皮胶原厚度、α-SMA、IL-17、Foxp3、teff和treg水平等数据均采用单因素方差分析进行统计分析,两两比较采用LSD-t检验或Kruskal-wallis检验。结果与正常组相比,模型组小鼠出现明显的皮肤病变,th1、th2、th17、tfh细胞水平明显升高,同时伴有treg水平明显下降。经高剂量二甲双胍治疗后,小鼠真皮厚度[(131±25)μm]、胶原厚度[(119±18)μm]、α-SMA[(3.0±0.5)个/高倍视野]明显减少(F=14.390,Pth1[(27.00±6.68)%]、th17[(0.56±0.20)%]、tfh[(6.4±1.6)%]细胞水平明显降低(F=32.390,Ptreg[(11.23±1.52)%]水平明显升高(F=10.171,Pteff/treg平衡达到免疫调节和抗纤维化作用。

关键词：二甲双胍 t淋巴细胞,调节性免疫调节硬化病,系统性效应t细胞

血必净注射液对脂多糖刺激大鼠调节性t细胞凋亡及其介导效应t细胞免疫功能的影响

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中华急诊医学杂志 2009年第9期18卷 932-936页

作者：戴新贵姚咏明艾宇航中南大学湘雅医院JCU 长沙410008 解放军总医院第一附属医院全军烧伤研究所

目的探讨中药血必净注射液对体外脂多糖（LPS）刺激CD4^＋CD25^＋调节性t细胞（treg）凋亡及其介导效应t细胞（teff）增殖反应、分泌白细胞介素-2（IL-2）功能的影响。方法40只雄性清洁级Wistar大鼠，实验前禁食12h。免疫磁珠法分选大... 详细信息

目的探讨中药血必净注射液对体外脂多糖（LPS）刺激CD4^＋CD25^＋调节性t细胞（treg）凋亡及其介导效应t细胞（teff）增殖反应、分泌白细胞介素-2（IL-2）功能的影响。方法40只雄性清洁级Wistar大鼠，实验前禁食12h。免疫磁珠法分选大鼠脾脏CD4^＋CD25^＋treg，分为对照组（n=8）、抗CD3／CD28组（n=8）、抗CD3／CD28＋12S组（n=8）、抗CD3／CD28＋血必净组（n=8）和抗CD3／CD28＋LPS＋血必净组（n=8）。培养3d后流式细胞术检测CD4^＋CD25^＋treg凋亡率、叉头翼状螺旋转录因子（Foxp3）和t淋巴细胞毒性相关抗原4（CtLA-4）表达，酶联免疫吸附试验检测IL-10分泌。同时，CD4^＋CD25^＋treg与CD4^＋CD25^-t细胞1：1培养，刀豆素A刺激68h后分析treg对teff增殖的抑制效应，并检测上清中IL-2／可溶性IL-2受体水平。结果抗CD3／CD28诱导treg凋亡率为（33．70±3．06％），显著高于对照组（12．84±0．84）％；抗CD3／CD28＋LPS＋血必净组45．13±2．70）％凋亡率明显高于抗CD3／CD28＋LPS组[（29．41±1．63）％，P〈0．01]。同时，CD4^＋CD25^＋treg Foxp3和CtLA-4表达及IL-10分泌随凋亡增加而降低。抗CD3／CD28＋血必净组（31．26％）teff增殖反应平均抑制率显著低于对照组（54．48％，P〈0．05），抗CD3／CD28＋LPS＋血必净组抑制率与抗CD3／CD28＋LPS组比较亦明显下降（P〈0．01）。此外，抗CD3／CD28＋血必净组和抗CD3／CD28＋LPS＋血必净组IL-2分泌水平均显著高于抗CD3／CD28＋LPS组（P〈0．01）。结论LPS刺激可明显上调大鼠treg对teff的抑制功能，血必净注射液能通过促进treg凋亡而有效改善其对teff的抑制效应。

关键词：脓毒症调节性t细胞效应t细胞凋亡血必净注射液

吡格列酮对尿毒症 ApoE－／－小鼠调节性和效应t 细胞平衡的影响

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中国病理生理杂志 2015年第5期31卷 802-807页

作者：申燕肖嫣王丽君赵艳田雨灵梁潇尹爱萍西安交通大学医学院第一附属医院肾病中心肾内科陕西西安710061 西安交通大学医学院第一附属医院心内科陕西西安710061 西安交通大学医学院第一附属医院西安交通大学环境与疾病相关基因教育部重点实验室陕西西安710061

目的:观察吡格列酮对体外培养的有或无斑块特异性抗原氧化低密度脂蛋白(ox LDL)刺激的尿毒症Apo E-/-小鼠调节性和效应t细胞(treg/teff)水平和功能相关因子的影响及可能机制。方法:通过两步外科手术法建立尿毒症Apo E-/-小鼠的动物模型... 详细信息

目的:观察吡格列酮对体外培养的有或无斑块特异性抗原氧化低密度脂蛋白(ox LDL)刺激的尿毒症Apo E-/-小鼠调节性和效应t细胞(treg/teff)水平和功能相关因子的影响及可能机制。方法:通过两步外科手术法建立尿毒症Apo E-/-小鼠的动物模型,以不同浓度吡格列酮(2μmol/L和20μmol/L)及PPARγ拮抗剂GW9662(5μmol/L)对有或无ox LDL(2 mg/L)刺激的尿毒症模型鼠脾细胞作用12 h后,流式细胞术检测CD4+CD25+Foxp3+treg及IFN-γ+CD4+teff细胞水平,实时荧光定量PCR检测Foxp3及IFNγ的mRNA表达。结果:ox LDL体外诱导尿毒症Apo E-/-小鼠脾细胞treg/teff失衡。吡格列酮上调ox LDL抑制下的treg及Foxp3的表达,此作用不能被GW9662拮抗;下调有或无ox LDL刺激下teff及IFNγ的表达,此作用可被GW9662拮抗。结论:oxLDL体外诱导尿毒症模型鼠treg/teff失衡,吡格列酮通过PPARγ非依赖/依赖机制调整treg/teff失衡。

关键词：吡格列酮过氧化物酶体增殖物激活受体γ 尿毒症调节性t细胞效应t细胞

肿瘤坏死因子-β对重型再生障碍性贫血患者效应t细胞损伤骨髓造血的影响

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中国免疫学杂志 2012年第6期28卷 544-547页

作者：刘晓付蓉王珺王化泉刘春燕阮二宝瞿文梁勇王国锦王晓明刘鸿吴玉红宋嘉邢莉民关晶李丽娟邵宗鸿天津医科大学总医院血液肿瘤科天津300052

目的:研究肿瘤坏死因子-β(tNF-β)对重型再生障碍性贫血(SAA)患者效应t细胞(CD8+HLA-DR+t细胞)损伤骨髓造血的影响,探讨tNF-β在SAA免疫发病中的作用。方法:以免疫磁珠阳性分选15例SAA患者骨髓CD8+HLA-DR+t细胞作为效应细胞,以阴性分... 详细信息

目的:研究肿瘤坏死因子-β(tNF-β)对重型再生障碍性贫血(SAA)患者效应t细胞(CD8+HLA-DR+t细胞)损伤骨髓造血的影响,探讨tNF-β在SAA免疫发病中的作用。方法:以免疫磁珠阳性分选15例SAA患者骨髓CD8+HLA-DR+t细胞作为效应细胞,以阴性分选去除15名正常人骨髓单个核细胞中CD3+t细胞后作为靶细胞,两者混合培养,于体系中分别加入不同浓度tNF-β(终浓度分别为0、15、25、50 ng/ml)为实验组,并设空白对照组,孵育72小时后,通过流式细胞术以Annexin V检测靶细胞凋亡状况,采用ELISA法测定培养上清液IL-10、IFN-γ水平。结果:空白对照组及3个实验组细胞凋亡比例分别为(49.85±20.33)%、(51.65±20.34)%、(55.94±20.19)%、(57.72±19.45)%,tNF-β终浓度为50 ng/ml组及25 ng/ml组均明显高于空白组和15 ng/ml组细胞凋亡比例(P细胞凋亡比例无显著差异(P>0.05)。空白对照组及各实验组培养上清IL-10浓度分别为(217.99±29.47)ng/ml、(216.47±29.00)ng/ml、(212.15±13.19)ng/ml、(218.01±28.61)ng/ml,各组差异无统计学意义(P>0.05)。tNF-β终浓度50 ng/ml组培养上清IFN-γ水平[(593.50±48.18)ng/ml]明显高于空白对照组[(544.85±69.77)ng/ml],15 ng/ml组[(567.38±74.51)ng/ml]、25 ng/ml组[(544.05±79.69)ng/ml](PtNF-β能增强SAA患者效应t细胞诱导骨髓造血细胞凋亡,并呈浓度依赖性;高水平的tNF-β可能还促进SAA患者CD8+HLA-DR+t细胞分泌IFN-γ,两者具有协同细胞毒作用。

关键词：贫血,再生障碍性效应t细胞 tNF-β

t-bet对CD8^＋记忆及效应t细胞抗肿瘤作用的机制

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中华实验外科杂志 2015年第1期32卷 212-214页

作者：徐云郭彩霞蒋敬庭苏州大学附属第三医院妇科常州213003 苏州大学附属第三医院肿瘤生物诊疗中心常州213003

肿瘤免疫治疗已成为继手术、放疗及化疗之后治疗肿瘤的重要手段,也是目前最受关注和最具潜力的治疗方法,其中细胞免疫治疗发挥着重要的作用[1].在细胞免疫机制中起主要效应的为CD8^＋细胞毒性t淋巴细胞（CtLs）及CD4^＋Ⅰ型辅助性t细胞... 详细信息

肿瘤免疫治疗已成为继手术、放疗及化疗之后治疗肿瘤的重要手段,也是目前最受关注和最具潜力的治疗方法,其中细胞免疫治疗发挥着重要的作用[1].在细胞免疫机制中起主要效应的为CD8^＋细胞毒性t淋巴细胞（CtLs）及CD4^＋Ⅰ型辅助性t细胞（th1）介导的Ⅰ型免疫应答反应[2].

关键词：抗肿瘤作用 CD8^+ 效应t细胞 t-bet 细胞毒性t淋巴细胞肿瘤免疫治疗记忆免疫应答反应

重型再生障碍性贫血患者CD8＋效应t细胞损伤骨髓造血途径的研究

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中华血液学杂志 2011年第9期32卷 597-601页

作者：冯乐付蓉王化泉王珺刘春燕刘惠王红蕾张田阮二宝梁勇瞿文王国锦吴玉红刘鸿王晓明宋嘉关晶邢莉民邵宗鸿天津医科大学总医院血液肿瘤科 300052

目的研究重型再生障碍性贫血（SAA）患者外周血CD8＋CD25＋和CD8＋HLA—DR＋t细胞数量及其杀伤靶细胞的途径，探讨SAA的免疫发病机制。方法应用流式细胞术检测29例SAA（初治14例、缓解15例）患者及12名健康对照者外周血CD8＋CD25＋和CD8... 详细信息

目的研究重型再生障碍性贫血（SAA）患者外周血CD8＋CD25＋和CD8＋HLA—DR＋t细胞数量及其杀伤靶细胞的途径，探讨SAA的免疫发病机制。方法应用流式细胞术检测29例SAA（初治14例、缓解15例）患者及12名健康对照者外周血CD8＋CD25＋和CD8＋HLA—DR＋t细胞的数量及其胞质内穿孔素、颗粒酶B、肿瘤坏死因子B（tNF—β）、胞膜FasL表达。结果SAA初治组患者CD8＋CD25＋t细胞占CD8＋和CD3＋t细胞的比例分别为（3．67±2．58）％和（2．25±1．35）％，缓解组为（5．19±4．29）％和（2．98±1．35）％，正常对照组为（4．84±2．31）％和（2．11±1．88）％，CD8＋CD25＋t细胞占CD8＋和CD3＋t细胞的比例三组间比较差异无统计学意义（P值均〉0．05）。初治组CD8＋HLA-DR＋t细胞占CD8＋t细胞比例为（39．30-4-8．13）％，缓解组为（20．65±5．38）％，正常对照组为（18．34±6．68）％，初治组明显高于缓解组及正常对照组（P〈0．01），缓解组与正常对照组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。SAA初治组CD8＋HLA-DR＋t细胞占CD3＋t细胞比例为（27．81±7．10）％，缓解组为（12．02±3．03）％，正常对照组为（8．50±2．33）％，初治组明显高于缓解组及正常对照组（P〈0．01），缓解组明显高于正常对照组（P〈0．05）。SAA初治组CD8＋HLA—DR＋t细胞穿孔素、颗粒酶、tNF—β、FasL中位表达比例分别为8．51％、96．08％、72．11％、94．25％，均明显高于缓解组（1．78％、85．20％、34．38％、51．20％）及正常对照组（1．86％、82．09％、17．92％、32．91％）（P值均〈0．05），缓解组与正常对照组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。结论SAA患者外周血CD8＋HLA—DR＋效应t细胞比例增加，CD8＋效应t细胞影响靶细胞的穿孔素-颗粒酶途径、细胞因子（tNF—β）途径、Fas／FasL途径均参与了骨髓造血细胞损伤的过程。

关键词：贫血再生障碍性效应t细胞穿孔素颗粒酶B Fas配体

活动期强直性脊柱炎患者外周血效应性t细胞的比例增加且程序性死亡蛋白配体1(PD-L1)水平降低

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细胞与分子免疫学杂志 2016年第5期32卷 676-679页

作者：杨丰钒张欣朱平第四军医大学西京医院临床免疫科全军风湿免疫专科研究所陕西西安710032

目的分析强直性脊柱炎(AS)患者外周血CD4+CD25-效应性t细胞(teff)和CD4+CD25+Foxp3+调节性t细胞(treg)的比例以及两群细胞表面程序性死亡蛋白配体1(PD-L1)的表达情况。方法流式细胞术检测49例AS患者和31例健康对照者外周血中teff和treg... 详细信息

目的分析强直性脊柱炎(AS)患者外周血CD4+CD25-效应性t细胞(teff)和CD4+CD25+Foxp3+调节性t细胞(treg)的比例以及两群细胞表面程序性死亡蛋白配体1(PD-L1)的表达情况。方法流式细胞术检测49例AS患者和31例健康对照者外周血中teff和treg的比例以及PD-L1在这两种细胞表面的表达水平。结果与健康对照组相比,活动期AS患者外周血中teff的比例显著增加,treg比例无明显变化;活动期AS患者外周血PD-L1+teff的比例显著降低,且低于稳定期AS患者;活动期AS患者外周血teff膜表面PD-L1的相对表达量也显著低于稳定期AS患者和健康对照组;AS患者外周血PD-L1+treg的比例和treg膜表面PD-L1的相对水平均显著低于健康对照组。结论活动期AS患者外周血中teff比例增加,PD-L1水平降低。

关键词：程序性死亡蛋白/程序性死亡蛋白配体-1(PD-1/PD-L1) 强直性脊柱炎效应t细胞调节性t细胞