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鸡传染性支气管炎病毒（M41株）血凝抑制试验抗原的研制及应用

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鸡传染性支气管炎病毒（M41株）血凝抑制试验抗原的研制及应用

作者：张兵中国兽医药品监察所

学位级别：硕士

目前,我国鸡传染性支气管炎灭活疫苗产品的效力检验方法为血清学方法(HI试验),但国内尚无质量可靠的商品化血凝抑制试验抗原(以下称HI抗原),给该类产品的质量控制带来严重影响。为此,本课题开展了鸡传染性支气管炎病毒(M41株)HI抗原的... 详细信息

目前,我国鸡传染性支气管炎灭活疫苗产品的效力检验方法为血清学方法(HI试验),但国内尚无质量可靠的商品化血凝抑制试验抗原(以下称HI抗原),给该类产品的质量控制带来严重影响。为此,本课题开展了鸡传染性支气管炎病毒(M41株)HI抗原的研制及其在灭活疫苗效力评价上的应用研究。将鸡传染性支气管炎病毒(M41株)接种10日龄SPF鸡胚,37℃孵化36h后无菌收集尿囊液,经5000g离心40min,30000g离心2h进行100倍浓缩,浓缩病毒液用10%0%的A型产气荚膜梭菌培养液上清37℃处理2.5h后,成功制备了鸡传染性支气管炎病毒HI抗原。按筛选的工艺制备并冻干了3批HI抗原,3批冻干抗原的血凝效价达到8-10log2。使用荷兰GD公司进口HI抗原和自制抗原检测新城疫、禽流感、产蛋下降综合征阳性血清及鸡阴性血清HI抗体≤3log2,特异性良好。依据产品质量标准使用3批HI抗原对洛阳普莱柯公司生产的10批鸡新城疫(La Sota株)-传染性支气管炎(M41株)-禽流感(H9亚型HL株)三联灭活疫苗和4批鸡新城疫(La Sota株)-传染性支气管炎(M41株)-减蛋综合征(AV127株)三联灭活疫苗共计14批产品的传染性支气管炎成分进行了效力检验,结果表明使用灭活疫苗二免后血清HI抗体几何平均滴度较活疫苗首免后血清HI抗体平均几何滴度分别高9.4倍(2007001)、8.5倍(2007002)、9.8倍(2007003)。用荷兰GD公司HI抗原检测结果为10.5倍。3批冻干抗原于4℃保存一年HA效价不变。使用三批经2007003批HI抗原效力检验合格的鸡新城疫(La Sota株)-传染性支气管炎(M41株)-禽流感(H9 HL株)三联灭活疫苗进行了鸡传染性支气管炎灭活疫苗效力评价方法的研究。结果表明,仅使用活疫苗免疫的B组试验鸡在产蛋高峰期经IBV M41株攻毒后在4周内产蛋率下降可达17%,作为对照的C组试验鸡在产蛋高峰期经IBV M41株攻毒后在4周内产蛋率下降达34%。而使用活疫苗基础免疫后再使用灭活疫苗加强免疫的A组试验鸡在产蛋高峰期可以抵抗IBV M41株的攻击并可维持高峰期的产蛋量。使用2-4周龄SPF鸡按两步法效力检验合格的灭活疫苗应用于产蛋鸡可以对生产性能起到良好的保护作用,说明以血清学效力检验方法作为鸡传染性支气管炎灭活疫苗的效力检验标准是科学的。

关键词：鸡传染性支气管炎灭活疫苗血凝抑制试验抗原效力检验

新城疫中发型毒株疫苗的效力检验及大规模田间试验

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国外兽医学（畜禽传染病） 1989年第2期9卷 25-25页

作者： Sulo.,S. 骆志祥

口蹄疫疫苗效力检验替代方法研究会议在中监所召开

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兽医导刊 2008年第1期 62-62页

2007年12月19日，中国兽医药品监察所组织召开了口蹄疫疫苗效力检验替代方法研究会议。于康震所长出席了会议，谢庆阁研究员、口蹄疫疫苗生产企业的负责人和部分工作人员参加了会议。会议由业务管理处李慧姣处长主持。

关键词：口蹄疫疫苗效力检验中国兽医药品监察所工作人员生产企业业务管理研究员负责人

用低日龄SPF鸡进行新城疫灭活疫苗安全检验和效力检验

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上海畜牧兽医通讯 2007年第5期 46-46页

作者：肖长赏孙学强福建省生物药品厂 350014 南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室 210095

禽病一直是困扰养禽业发展的关键因素.近年来禽病的种类呈现多样化,对我国养禽业构成威胁和造成危害的疫病达80余种,涉及传染病、寄生虫病、营养代谢病等,其中以传染病最多,约占禽病种类的75%以上.

关键词： SPF鸡新城疫灭活疫苗 3日龄效力检验安全检验营养代谢病寄生虫病养禽业

兔病毒性出血症、巴氏杆菌病二联苗的研制——Ⅰ.二联苗的安全性和效力检验

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江苏农业科学 1988年第5期 36-36页

作者：董亚芳王启明江学余沈惠芬郭明章王平生江苏省农科院牧医所

兔病毒性出血症(兔瘟)和巴氏杆菌病是家兔的两种重要传染病,流行面广,传播迅速,发病率和死亡率均极高,通常均需免疫,以保安全。如用单苗免疫则要进行两次注射,费时费力,为了克服单一疫苗的这一弊病,我们进行了二联苗的研制工作,以期在... 详细信息

兔病毒性出血症(兔瘟)和巴氏杆菌病是家兔的两种重要传染病,流行面广,传播迅速,发病率和死亡率均极高,通常均需免疫,以保安全。如用单苗免疫则要进行两次注射,费时费力,为了克服单一疫苗的这一弊病,我们进行了二联苗的研制工作,以期在确保免疫效果的前提下达到简化免疫接种次数,既可一针防二病,又可降低成本,受益于用户。

关键词：兔病毒性出血症巴氏杆菌病出血性败血病二联苗效力检验

口蹄疫疫苗效力检验替代方法研究联合攻关协调会议在兰州召开

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北方牧业 2007年第12期 11-11页

近日，农业部兽医局在兰州召开了口蹄疫疫苗效力检验替代方法研究联合攻关协调会议。会议由中国兽医药品监察所于康震所长主持。联合攻关首席科学家谢庆阁研究员、口蹄疫疫苗生产企业领导和主要技术负责人、参研单位负责人和研究人员以... 详细信息

近日，农业部兽医局在兰州召开了口蹄疫疫苗效力检验替代方法研究联合攻关协调会议。会议由中国兽医药品监察所于康震所长主持。联合攻关首席科学家谢庆阁研究员、口蹄疫疫苗生产企业领导和主要技术负责人、参研单位负责人和研究人员以及联合攻关协调小组成员参加了会议。

关键词：口蹄疫疫苗效力检验兰州中国兽医药品监察所技术负责人农业部兽医局企业领导疫苗生产

猪口蹄疫O型、A型二价高效灭活疫苗制备及效力研究

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猪口蹄疫O型、A型二价高效灭活疫苗制备及效力研究

作者：武春芳内蒙古农业大学

学位级别：硕士

试验依据《猪口蹄疫O型、A型二价灭活疫苗制造及检验试行规程》制备了合格的猪水泡毒、乳鼠毒、基础细胞毒及配苗用病毒液,对病毒液灭活后进行纯化浓缩,使用检验合格的抗原与佐剂配制成三批疫苗,该三批疫苗每头份的内毒素含量均小于0.78... 详细信息

试验依据《猪口蹄疫O型、A型二价灭活疫苗制造及检验试行规程》制备了合格的猪水泡毒、乳鼠毒、基础细胞毒及配苗用病毒液,对病毒液灭活后进行纯化浓缩,使用检验合格的抗原与佐剂配制成三批疫苗,该三批疫苗每头份的内毒素含量均小于0.78EU,总蛋白含量每头份为48～56μg,146S含量每头份为14～18μg,产品各项质量指标均高于规程规定的质量标准,用豚鼠、小鼠、猪进行安全性检验的结果也是安全的。依据《猪口蹄疫O型、A型二价灭活疫苗制造及检验试行规程》1头份(2m L)、1/3头份(0.67m L)、1/9头份(0.22m L)3个剂量组进行效力检验,根据免疫猪的保护数,按Reed-Muench法计算被检三批疫苗的PD值均为15.59。继续选择1/2头份(1m L)、1/6头份(0.33m L)、1/12头份(0.17m L)3个剂量组和1/4头份(0.25m L)、1/12头份(0.17m L)、1/36头份(0.06m L)3个剂量组测定每头份高效疫苗最终的PD值,结果表明,根据免疫猪的保护数,按Reed-Muench法计算该疫苗每头份疫苗最终PD值可以达到31.18～50.05个PD。通过选择新的剂量组对制备的疫苗进行最终效力的测定,可以指导生产企业进行抗原量的加入与控制,也可以对口蹄疫疫苗免疫进行有效的指导。

关键词：口蹄疫效力检验每头份疫苗最终PD50值

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山羊痘疫苗荧光定量效检方法的建立及应用

山东农业大学学报（自然科学版） 2015年第6期46卷 865-869页

作者：张倩唐娜王金良苗立中胡琳琳孙翠萍沈志强山东绿都生物科技有限公司山东滨州256600 滨州畜牧兽医研究院山东滨州256600

为建立灵敏度高,特异性强的山羊痘(GPV)荧光定量PCR(FQ-PCR)检测方法,并以稳定的标准品替代定量测定山羊痘疫苗半成品中的核酸。针对山羊痘病毒基因组P32基因设计一对特异性引物,构建稳定的标准品,进行敏感性、特异性和稳定性试验,并对... 详细信息

为建立灵敏度高,特异性强的山羊痘(GPV)荧光定量PCR(FQ-PCR)检测方法,并以稳定的标准品替代定量测定山羊痘疫苗半成品中的核酸。针对山羊痘病毒基因组P32基因设计一对特异性引物,构建稳定的标准品,进行敏感性、特异性和稳定性试验,并对本单位的部分批次山羊痘疫苗半成品进行定量检验,与TCID50效检结果相比较寻求相关性。结果表明建立的标准曲线相关系数为0.9995,扩增效率为98%,该方法只扩增山羊痘病毒,不扩增其他病原,能检测到每微升体积中100个DNA模板拷贝数,比山羊痘普通PCR(GPV-n PCR)高一个数量级。制备三批标准品进行重复性试验,结果变异系数在0.43~1.9%之间,稳定性良好。对4批的山羊痘疫苗半成品进行效力检验,TCID_(50)≥10^(4.5)/m L时Ct值为14.51。建立的GPV-FQ-PCR方法能特异性的检测GPV核酸含量,与TCID_(50)测定的结果具有良好的相关性,可用于山羊痘半成品中核酸的定量测定。

关键词：山羊痘疫苗荧光定量效力检验

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猪细小病毒病油乳剂灭活疫苗保存期试验

上海农业学报 2005年第4期21卷 129-131页

作者：陈晓清潘饶霖赵本进叶向阳刘盛闻一上海佳牧生物制品有限公司上海201106

猪细小病毒病油乳剂灭活疫苗现行规定在2～8℃贮存期为7个月.为了探究该疫苗能否在2～8℃贮存1年仍符合中猪细小病毒病油乳剂灭活疫苗质量标准(以下简称质量标准),本试验将3批猪细小病毒病油乳剂灭活疫苗在2～8℃贮存至8、10、12、14个... 详细信息

猪细小病毒病油乳剂灭活疫苗现行规定在2～8℃贮存期为7个月.为了探究该疫苗能否在2～8℃贮存1年仍符合中猪细小病毒病油乳剂灭活疫苗质量标准(以下简称质量标准),本试验将3批猪细小病毒病油乳剂灭活疫苗在2～8℃贮存至8、10、12、14个月,然后按质量标准抽样做物理性状检验、无菌检验、安全检验和效力检验.结果表明,猪细小病毒病油乳剂灭活疫苗在2～8℃保存1年后,各项检测均符合质量标准.

关键词：猪细小病毒病油乳剂灭活疫苗物理性状无菌检验安全检验效力检验抗体测定