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黑龙江畜牧兽医 2013年第4期 1-5,173页

作者：刘晶王晓宇侯俊财姜成刚王玉堂佟慧丽高玉红东北农业大学乳品科学教育部重点实验室哈尔滨150030 东北农业大学食品学院哈尔滨150030 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所哈尔滨150001 黑龙江职业学院黑龙江双城150111

为了研究共轭亚油酸(CLA)对奶牛乳腺上皮细胞脂肪酸摄取与转运相关基因mRNA转录的影响,试验采用组织块法体外培养奶牛乳腺上皮细胞,外源添加不同浓度的c9,t11-CLA与t10,c12-CLA作用乳腺上皮细胞48 h,应用实时荧光定量PCR技术,测定相关基... 详细信息

为了研究共轭亚油酸(CLA)对奶牛乳腺上皮细胞脂肪酸摄取与转运相关基因mRNA转录的影响,试验采用组织块法体外培养奶牛乳腺上皮细胞,外源添加不同浓度的c9,t11-CLA与t10,c12-CLA作用乳腺上皮细胞48 h,应用实时荧光定量PCR技术,测定相关基因mRNA的转录。结果表明:1)与对照组相比,两种CLA均显著降低了脂蛋白脂肪酶(LPL)基因mRNA的表达丰度(P<0.05);2)150μmol/L c9,t11-CLA显著上调分化抗原簇36(CD36)基因mRNA的转录水平(P<0.05),其转录水平随t10,c12-CLA浓度增加显著上升(P<0.05);3)150μmol/L c9,t11-CLA和不同浓度的t10,c12-CLA均可显著上调乙酰辅酶A结合蛋白(ACBP)的转录(P<0.05);4)与对照组相比,两种CLA均显著下调脂肪酸结合蛋白3(FABP3)基因mRNA的转录水平(P<0.05)。说明两种CLA均显著下调LPL mRNA和FABP3 mRNA的转录水平,150μmol/L的两种CLA异构体上调CD36和ACBP的转录水平。

关键词：奶牛乳腺上皮细胞共轭亚油酸脂肪酸摄取与转运基因转录

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利用Caco-2细胞模拟羟基喜树碱在小肠内吸收的研究

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中成药 2012年第7期34卷 1203-1208页

作者：蒲晓辉杨浩孙进王永军何仲贵河南大学药学院河南开封475004 沈阳药科大学药学院辽宁沈阳110016

目的研究羟基喜树碱在小肠内的可能吸收机制。方法采用Caco-2细胞模型模拟小肠上皮细胞,研究质量浓度、表面活性剂和P-gp抑制剂对羟基喜树碱的跨膜吸收与转运的影响,总结羟基喜树碱的吸收与转运规律,通过数据分析推断出羟基喜树碱在小... 详细信息

目的研究羟基喜树碱在小肠内的可能吸收机制。方法采用Caco-2细胞模型模拟小肠上皮细胞,研究质量浓度、表面活性剂和P-gp抑制剂对羟基喜树碱的跨膜吸收与转运的影响,总结羟基喜树碱的吸收与转运规律,通过数据分析推断出羟基喜树碱在小肠内的可能吸收机制。结果药物摄取量随质量浓度的增加而非线性增加。表面活性剂和P-gp抑制剂的加入都能增加药物的跨膜吸收量与转运速率。结论羟基喜树碱的跨膜吸收可能受到P-gp的外排作用。

关键词：羟基喜树碱纳米混悬剂 Caco-2细胞摄取与转运

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游离亚麻酸对奶牛乳腺上皮细胞脂肪酸代谢相关基因mRNA转录的影响

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动物营养学报 2010年第5期22卷 1342-1349页

作者：胡菡王加启李发弟卜登攀李喜艳周凌云甘肃农业大学动物科学技术学院兰州730070 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所动物营养学国家重点实验室北京100193

本研究以体外培养的奶牛乳腺上皮细胞为模型,研究外源添加不同浓度游离α-亚麻酸(LNA)对细胞脂肪酸代谢相关靶基因mRNA转录水平的影响。体外培养的奶牛乳腺上皮细胞,以牛血清白蛋白(BSA)代替胎牛血清为对照组,BSA与不同浓度LNA为试验组... 详细信息

本研究以体外培养的奶牛乳腺上皮细胞为模型,研究外源添加不同浓度游离α-亚麻酸(LNA)对细胞脂肪酸代谢相关靶基因mRNA转录水平的影响。体外培养的奶牛乳腺上皮细胞,以牛血清白蛋白(BSA)代替胎牛血清为对照组,BSA与不同浓度LNA为试验组,试验培养36h,采用RT-qPCT对目的基因进行定量,检测其表达丰度。结果显示:1)0.625～5.000μmol/LLNA极显著上调了脂肪酸转运基因中CD36的表达(P转运蛋白,即长链酰基辅酶A合成酶-1基因(ACSL1)和脂肪酸结合蛋白-3(FABP3)基因的表达(P0.05),但所有浓度的LNA均极显著降低了固醇调节元件结合蛋白-1(SREBF1)基因的mRNA转录水平(P转运进入奶牛乳腺上皮细胞的过程中具有重要作用。

关键词：牛乳腺上皮细胞亚麻酸脂肪酸摄取与转运内源合成硬脂酰去饱和酶

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AEE在胃肠道的稳定性、转运规律及其对肝药酶作用的研究

AEE在胃肠道的稳定性、转运规律及其对肝药酶作用的研究

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作者：陶琦中国农业科学院

学位级别：硕士

前期研究发现,阿司匹林丁香酚酯(Aspirin Eugenol Ester,AEE)在碱性条件下降解较为迅速,在酸性条件也可发生降解;另外,大鼠及犬口服给药后,血浆中AEE及其前体药物Asp、Eug的浓度均极低,而代谢产物水杨酸(Salicylic acid,SA)的浓度较高... 详细信息

前期研究发现,阿司匹林丁香酚酯(Aspirin Eugenol Ester,AEE)在碱性条件下降解较为迅速,在酸性条件也可发生降解;另外,大鼠及犬口服给药后,血浆中AEE及其前体药物Asp、Eug的浓度均极低,而代谢产物水杨酸(Salicylic acid,SA)的浓度较高。论文拟通过体内外实验,明确AEE口服给药后在胃肠道的变化和吸收规律,以及其与肝脏药物代谢酶的相互作用。为AEE相关制剂的设计、开发,及合理用药和联合用药等提供科学依据。1.采用高效液相色谱法,分别检测AEE在空白人工胃液(p H 1.3,不含酶)、空白人工肠液(p H 6.8,不含酶)、人工胃液(p H 1.3,含胃蛋白酶)、人工肠液(p H 6.8,含胰蛋白酶)中孵育0、0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0 h,与SD大鼠(雄性)肠道菌群共孵育0、2、4、6、8、10、12 h。在生物样品中孵育0,0.5,1.0,2.0,3.0,4.0,5.0,6.0 h的含量变化。在人工胃液中的剩余百分比随着时间的增加而下降,从0 h的98%到6 h的65%。在空白人工肠液中孵育,剩余百分比随着时间延长,逐渐下降,从0 h的98%到6 h的75%;在人工肠液中孵育0～1h,有稍微下降,但1～3 h,剩余百分比迅速下降,从77%～22%,孵育到5 h时,剩余百分比降为0%。AEE在SD大鼠肠道菌群中孵育时发生了降解,随着时间的延长,AEE的剩余百分比逐渐下降,生成了两种主要代谢产物为水杨酸和丁香酚。而AEE在肝、胃、大肠、小肠等生物样品中发生明显降解,直接生成的两种主要代谢产物为水杨酸和丁香酚。2.考察了时间、浓度、温度对AEE转运和摄取的影响。结果表明:细胞裂解液和细胞培养液上清液中水杨酸含量较高,未检出AEE。因此,AEE的含量变化表示为其代谢产物SA的含量变化。在摄取实验中,考察时间、浓度、温度等因素时,SA的摄取在30 min内达到最大值,且存在浓度依赖性。此外,低温(4℃)可显著降低Caco-2细胞对SA的摄取。在转运实验中,考虑时间、浓度和温度,SA从AP-BL和BL-AP侧的跨上皮转运具有时间依赖性。Caco-2细胞中SA转运量随着浓度的增加而增加,跨膜转运速率与浓度无关。这种现象可能是由于高浓度的饱和现象造成的。流出比值(ER)小于1,说明其肠道转运机制为被动转运。此外,温度对AEE的运输也有显著影响。3.采用两种实验鼠研究AEE对肝脏药物代谢酶活性的影响。将SD大鼠随机分为2组,实验组灌喂54 mg/kg的AEE,空白组灌喂等量的0.5%的羧甲基纤维素钠溶液。连续3周后随机处死一半,采集样品;剩余一半的SD大鼠,停药2周处死,采集样品。C57小鼠的实验方案与SD大鼠实验方案相同。结果表明:SD大鼠给药后,AEE对CYP3A4、CYP2C19、CYP1A2的活性有一定的抑制作用(P0.05);停药后,发现只有CYP2C19的活性没有恢复。而其余药酶活性都有一定的恢复,与正常组无显著性差异(P>0.05)。C57小鼠给药后,AEE对CYP3A4、CYP2C19、CYP1A2、CYP2D6的活性有一定的抑制作用(P0.05);停药后,发现只有CYP2C19的活性没有恢复。而其余药酶活性都有一定的恢复,与正常组无显著性差异(P>0.05)。

关键词：阿司匹林丁香酚酯人工胃肠液 Caco-2cell 摄取与转运肝脏药物代谢酶

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