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试验鸡感染H5N1亚型禽流感病毒后排毒规律的研究

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中国人兽共患病杂志 2004年第9期20卷 751-753页

作者：廖明罗开健程珏益姚旋苏湘文李琳辛朝安华南农业大学兽医学院广州510642

目的　为揭示H5N1亚型禽流感病毒感染试验鸡后体内各组织的排毒规律。方法　将 180只 2 8d非免疫石岐杂鸡随机分为两组 ,每组 90只 ,一组为攻毒组 ,用含H5N1亚型AIV(A/Goose/GD/ 2 / 96 ,对 2 8d非免疫石岐杂鸡LD50 为 10 -5 4× 0 2ml... 详细信息

目的　为揭示H5N1亚型禽流感病毒感染试验鸡后体内各组织的排毒规律。方法　将 180只 2 8d非免疫石岐杂鸡随机分为两组 ,每组 90只 ,一组为攻毒组 ,用含H5N1亚型AIV(A/Goose/GD/ 2 / 96 ,对 2 8d非免疫石岐杂鸡LD50 为 10 -5 4× 0 2ml)尿囊液 10 -4× 0 2ml/只经肌肉注射途径攻毒 ,一组接种 0 2ml/只灭菌生理盐水为对照。攻毒后前 4d ,每隔 6h观察试验组和对照组鸡的临床表现 ,每组随机抽取两只剖杀 ,收集脑、肝、脾、肾、胰腺、肌肉、喉头与泄殖腔拭子进行病毒分离 ;攻毒4d后改为每隔 12h取样 ,直至第 11d ,同时采集血清测定禽流感HI抗体效价。结果　试验鸡攻毒 18h后可从泄殖腔及喉头拭子中分离到病毒 ,持续到攻毒后第 7d左右 ;攻毒后 36h可以从脑、肝、脾、肾、胰腺的混合样品中分离到病毒 ,可持续到攻毒后第 10d左右 ;

关键词： H5N1亚型禽流感病毒排毒规律

鸭瘟病毒弱毒株在免疫雏鸭体内的分布和排毒规律

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中国兽医学报 2005年第3期25卷 231-233,258页

作者：程安春汪铭书刘菲宋涌袁桂萍韩晓英徐超廖永洪文明周伟光贾仁勇四川农业大学动物科技学院禽病防治研究中心动物疫病与食品安全评价四川省重点实验室四川雅安625014

鸭瘟病毒(DPV)弱毒Cha株经皮下、口服和滴鼻3种途径免疫1日龄雏鸭,应用聚合酶链反应(PCR)检测了病毒在体内分布和排毒规律。Cha株免疫雏鸭后,对血液、心、肝、脾、肺、肾、十二指肠、直肠、法氏囊、胸腺、胰腺、延脑、大脑、小脑、舌、... 详细信息

鸭瘟病毒(DPV)弱毒Cha株经皮下、口服和滴鼻3种途径免疫1日龄雏鸭,应用聚合酶链反应(PCR)检测了病毒在体内分布和排毒规律。Cha株免疫雏鸭后,对血液、心、肝、脾、肺、肾、十二指肠、直肠、法氏囊、胸腺、胰腺、延脑、大脑、小脑、舌、肌肉、骨髓、粪便和食道共19种组织PCR检测结果如下(1)皮下接种雏鸭后4h,即可在心、肝、脾、肾、法氏囊、胸腺、胰腺、延脑、大脑和小脑共10种组织中检出DPV的DNA;8h后,所有采取的组织器官均可检测到DPV的DNA。(2)口服接种雏鸭后4h,可在舌和食道中检测到DPV的DNA;8h后,可在心、肝、脾、肾、胸腺、胰腺、延脑、大脑、小脑、舌、食道和血液共12种组织器官中检出DPV的DNA。(3)滴鼻接种雏鸭后4h,未能在各种组织中检出DPV的DNA;8h后,可在心、肝、脾、肾、胸腺、延脑、大脑、小脑、舌、食道和血液共11种组织中检测到DPV的DNA。(4)在3种免疫途径中,检出时间最早和检出率最高的组织器官为肝脏、脑(大脑、小脑和延脑);3种途径免疫的鸭,从免疫后12h至21d均能从所有采集的组织中检测出DPVDNA。

关键词：排毒规律鸭瘟病毒弱毒株聚合酶链反应组织器官 DNA DPV 种雏鸭体内分布十二指肠检测结果免疫途径 Cha 法氏囊延脑大脑小脑胸腺食道血液胰腺皮下接 PCR 检出率滴鼻口服日龄粪便肝脏脾肾肺

鸡传染性支气管炎病毒M41株的致病性及排毒规律

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中国兽医学报 2019年第5期39卷 842-847页

作者：潘力林树乾于可响李桂明杨世发宋玲玲董雯雯李颖逯月王林王振勇山东农业大学动物科技学院山东泰安271018 山东省农业科学院家禽研究所山东济南250023

本试验针对鸡传染性支气管炎病毒(IBV)呼吸型M41标准株的S1基因设计并合成引物,构建了阳性质粒标准品;经过不断优化建立了检测IBV-M41 SYBR GreenⅠReal-Time PCR标准曲线。通过对8日龄SPF鸡人工感染IBV-M41发病,采用Real-Time PCR方法... 详细信息

本试验针对鸡传染性支气管炎病毒(IBV)呼吸型M41标准株的S1基因设计并合成引物,构建了阳性质粒标准品;经过不断优化建立了检测IBV-M41 SYBR GreenⅠReal-Time PCR标准曲线。通过对8日龄SPF鸡人工感染IBV-M41发病,采用Real-Time PCR方法跟踪检测其泄殖腔排毒情况;剖检并采集试验鸡的相关器官制作病理切片;在临床观察的基础上记录试验鸡的体质量、体温等指标。结果显示,所建立的检测方法重复性好,特异性高,最低可检测到28.3拷贝/μL的病毒核酸。人工感染病毒3～15 d后在鸡的排泄物中均检测到了病毒;攻毒组鸡临床症状明显,相关组织器官均呈现不同程度的病变。该病毒致病性试验、排毒规律和real-time PCR检测方法的建立,为IBV感染鸡作为实验动物模型进行相关药物的临床药效评价提供方法与依据。

关键词： real-time PCR 鸡传染性支气管炎病毒 IBV-M41 病理变化排毒规律

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鸭群感染禽副粘病毒后的排毒规律

中国动物检疫 2008年第9期25卷 39-40页

作者：张太翔张金玲田国宁张丽萍韩亮田国华潍坊出入境检验检疫局山东潍坊261041

为了了解鸭副粘病毒在鸭群排毒情况,取健康鸭25只。在15日龄时用副粘病毒经肌肉注射接种15只,另取5只不接种任何东西做空白对照,5只接种0.5ml生理盐水。24h后利用NDV强毒快速诊断试剂盒进行排毒的动态监测。结果表明试验第2天开始排毒,1... 详细信息

为了了解鸭副粘病毒在鸭群排毒情况,取健康鸭25只。在15日龄时用副粘病毒经肌肉注射接种15只,另取5只不接种任何东西做空白对照,5只接种0.5ml生理盐水。24h后利用NDV强毒快速诊断试剂盒进行排毒的动态监测。结果表明试验第2天开始排毒,16天结束,其间在6～7天出现排毒高峰.空白鸭通过接触攻毒鸭也能感染并排毒。我们的试验为以后制定对副粘病毒的防疫程序起一定的指导作用。

关键词：禽副粘病毒排毒规律诊断试剂盒

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短喙型鹅细小病毒感染雏鸭的排毒规律研究

福建农业学报 2018年第3期33卷 225-229页

作者：俞博林甦陈仕龙程晓霞陈秀琴陈少莺福建农林大学动物科学学院福建福州250002 福建省农业科学院畜牧兽医研究所福建福州350013 福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心福建福州350013

本研究以短喙型鹅细小病毒(SBDS-GPV,M15株)口服感染2日龄健康易感半番鸭,采集感染后(PI)3、5、7、10、12、14、21d的口咽和泄殖腔棉拭子,应用荧光定量PCR(qPCR)、病毒分离(VI)结合免疫荧光法(IFA)测定雏鸭感染后的排毒情况。结果显示:q... 详细信息

本研究以短喙型鹅细小病毒(SBDS-GPV,M15株)口服感染2日龄健康易感半番鸭,采集感染后(PI)3、5、7、10、12、14、21d的口咽和泄殖腔棉拭子,应用荧光定量PCR(qPCR)、病毒分离(VI)结合免疫荧光法(IFA)测定雏鸭感染后的排毒情况。结果显示:qPCR法检测SBDS-GPV感染雏鸭的口咽和泄殖腔排毒时间分别为PI 3~10d和PI 3~14d;病毒分离结合IFA检测SBDS-GPV感染雏鸭的泄殖腔排毒时间为PI5~10d。研究结果在国内外首次明确了雏鸭感染SBDS-GPV后可经口咽和泄殖腔向外界排毒,且泄殖腔排毒水平高于口咽。

关键词：半番鸭短喙矮小综合征(SBDS-GPV) 排毒规律荧光定量PCR 病毒分离

H9N2亚型AIV不同攻毒方式排毒规律的研究

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黑龙江畜牧兽医（下半月） 2017年第11期 126-128页

作者：余文兰梁柏刘郁夫刘传高马晓莉张俊俊刘永伦陈嘉华南农业大学广州510642

为了研究H9N2亚型禽流感目前的流行情况,从广东省某鸡场的发病鸡中分离到一株H9N2亚型禽流感病毒(A/Chicken/Guangdong/1104/2014),遗传进化分析显示该毒株属于BJ/94-like谱系h9.***.2.5分支,与经典疫苗株的HA基因相似性为89.3~90.7%,通... 详细信息

为了研究H9N2亚型禽流感目前的流行情况,从广东省某鸡场的发病鸡中分离到一株H9N2亚型禽流感病毒(A/Chicken/Guangdong/1104/2014),遗传进化分析显示该毒株属于BJ/94-like谱系h9.***.2.5分支,与经典疫苗株的HA基因相似性为89.3~90.7%,通过点眼滴鼻、静脉注射、肌肉注射的方式攻毒SPF鸡研究其攻毒后的排毒规律。结果表明:病毒通过点眼滴鼻和静脉注射方式攻毒能够很好地感染SPF鸡,并在攻毒后第3天排毒率达到100%,但是随后几天排毒率逐渐下降,点眼滴鼻组在攻毒后第7天排毒率下降为0;肌肉注射组则没能有效感染SPF鸡,攻毒后第3~9天的排毒率为16.7%~33.3%。说明静脉注射是较好的攻毒方式,能有效感染SPF鸡,SPF鸡攻毒后第3~5天的排毒率达到100%。

关键词：禽流感病毒(AIV)H9N2型攻毒方式排毒规律表面蛋白血凝素神经氨酸酶

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出口肉禽接种新城疫活疫苗后排毒规律的研究

中国家禽 2003年第23期25卷 14-15页

作者：孙泉云张苏华周锦萍沈悦鞠龚讷上海市畜牧兽医站 201103

选择上海某养禽公司不同新城疫免疫程序的出口肉鸡场的鸡群,分别于免疫后不同时期采集喉气管和泄殖腔棉拭样品及屠宰后胸肌组织样品,接种于SPF鸡胚进行病毒分离,并以HA和HI试验、ICPI试验及PCR试验进行鉴定。结果表明,鸡群免疫弱毒疫苗... 详细信息

选择上海某养禽公司不同新城疫免疫程序的出口肉鸡场的鸡群,分别于免疫后不同时期采集喉气管和泄殖腔棉拭样品及屠宰后胸肌组织样品,接种于SPF鸡胚进行病毒分离,并以HA和HI试验、ICPI试验及PCR试验进行鉴定。结果表明,鸡群免疫弱毒疫苗后至少排毒2周以上,不同免疫程序则鸡群排毒情况存在差异,因而出口肉鸡实施合理科学的免疫程序非常必要。

关键词：出口肉禽接种新城疫活疫苗排毒规律鸡新城疫弱毒疫苗

IBV广西分离株GX-YL5在鸡体内动态分布和排毒规律及组织嗜性研究

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中国家禽 2010年第15期32卷 11-14页

作者：磨美兰陈秋英韦英益朗亚辉黄柏成韦子才李孟韦平韦天超广西大学动物科学技术学院广西南宁530005

鸡传染性支气管炎病毒(IBV)广西分离株GX-YL5通过滴鼻点眼人工感染14日龄健康非免疫雏鸡,对接毒后1、3、5、7、10、14、21、28、35和42 d试验鸡的气管、肺脏、肾脏、胸腺、腺胃、盲肠扁桃体和肝脏等组织及泄殖腔棉拭子进行IBV的反转录巢... 详细信息

鸡传染性支气管炎病毒(IBV)广西分离株GX-YL5通过滴鼻点眼人工感染14日龄健康非免疫雏鸡,对接毒后1、3、5、7、10、14、21、28、35和42 d试验鸡的气管、肺脏、肾脏、胸腺、腺胃、盲肠扁桃体和肝脏等组织及泄殖腔棉拭子进行IBV的反转录巢式PCR检测,同时对接毒后不同时间的气管、肺脏、肾脏、胸腺、腺胃、法氏囊、脾脏和肝脏进行组织病理学观察。结果表明接毒后的3～21 d,气管、肺脏、肾脏、胸腺、腺胃、盲肠扁桃体和肝脏的病毒检测均为阳性,接毒后42 d肾脏和气管检测结果仍为阳性;接毒后3～42 d泄殖腔棉拭子检测结果为阳性。组织病理学观察见到气管黏液,气管和细支气管纤毛脱落,炎症细胞浸润,肺充血,淋巴细胞浸润,肾脏间质性肾炎以及法氏囊水肿。研究结果表明,GX-YL5株对雏鸡具有广泛的组织嗜性,主要脏器带毒时间21 d或更长,泄殖腔排毒持续至少39 d。

关键词：传染性支气管炎病毒动态分布排毒规律组织嗜性

传染性支气管炎病毒SD/04/18株感染鸡体内各组织中病毒的动态分布及排毒规律研究

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传染性支气管炎病毒SD/04/18株感染鸡体内各组织中病毒的动态分布...

作者：潘力山东农业大学

学位级别：硕士

禽传染性支气管炎(Avian Infectious Bronchitis,AIB)是由传染性支气管炎病毒(IBV)引起的一种高度接触性传染病。IBV可引起鸡呼吸道、肾脏和生殖道等部位病变,并造成死亡,给养鸡业造成巨大经济损失。IBV不同血清型之间交叉保护性低,新IB... 详细信息

禽传染性支气管炎(Avian Infectious Bronchitis,AIB)是由传染性支气管炎病毒(IBV)引起的一种高度接触性传染病。IBV可引起鸡呼吸道、肾脏和生殖道等部位病变,并造成死亡,给养鸡业造成巨大经济损失。IBV不同血清型之间交叉保护性低,新IBV血清型的不断出现给本病的防控带来困难。目前,国内外还没有制定统一的IBV分型标准,但众多学者多采用IBV的S1基因序列分型法。由于不同基因型的IBV在组织嗜性和致病性方面有着较大的差异,因此需要对新分离株进行系统研究,为该病的防控提供依据。本试验从山东某地疑似患鸡传染性支气管炎(IB)的送检病死鸡中分离到一株病毒,经RT-PCR鉴定及测序分析,确定为IBV并命名为SD/04/18株。根据测序结果,对其S1基因进行遗传分析,发现该毒株与我国主要流行的QX基因型IBV同源性最高。经胰蛋白酶消化液处理的SD/04/18株测得了血凝效价;将SD/04/18株接种8日龄SPF鸡,复制出了与自然感染病例相同的临床症状。为系统性研究IBV SD/04/18株,首先,根据GenBank中已发表的IBV的N基因序列设计引物,建立IBV Real-TimePCR检测方法,该方法最低能检测到39.7 copies/μL的病毒核酸;其次,将经典呼吸型IBV-M41标准株与分离的SD/04/18株先通过SPF鸡胚连续传代,再经鸡胚肾原代细胞(CEK)和非洲绿猴肾细胞(Vero)盲传至引起细胞明显病变,同时定量检测每一代次病毒。结果显示,IBV-M41株在CEK原代细胞和Vero细胞上分别传至第4代、第5代时出现明显病变;而SD/04/18株在上述两种细胞上分别传至第5代、第6代时出现明显病变;经连续传代,最终获得能稳定增殖的IBV-M41标准株和SD/04/18分离株。为探讨SD/04/18株在不同感染阶段对宿主相关器官的病理损伤、组织嗜性、动态分布、排毒规律及宿主抗体水平的影响,进行了下列试验。首先建立IBV SD/04/18株雏鸡感染模型,并在感染后的3 d、7 d、30 d采集气管、肺、肾、脾、胸腺、法氏囊制作病理切片及免疫组化分析;其次,在感染后不同时间点采集12种组织器官进行病毒动态分布检测,同时定期检测感染鸡只的呼吸道和泄殖腔的排毒情况、统计体重及抗体水平。结果显示,不同感染阶段的相同器官病理变化存在差异,感染发病30 d时,气管、肺、脾、胸腺得到了很好的恢复,但肾脏和法氏囊病变依然严重;免疫组化法检测到上述器官均有可见抗原聚集;感染后6 h,在气管、喉头、肺等部位首先检测到相应载量的病毒,整个过程中,脑、胰脏病毒载量较为稳定,其余各器官的病毒载量整体呈现先增多后减少的趋势;人工感染第1 d和第3 d分别在呼吸道和泄殖腔检测到病毒核酸,30 d时仍能从上述两个部位检出病毒核酸;5 d时在被感染鸡群中检测到IBV抗体阳性,抗体滴度峰值出现在感染后27 d;感染发病鸡临床症状明显,两组试验鸡体重差异显著。总之,通过对分离到的QX基因型IBV SD/04/18株的系统性研究,确定了SD/04/18株在临床分型上属肾型IBV。该毒株主要引起发病鸡肾脏病变,对宿主的免疫器官也具有不同程度的损伤,发病鸡排毒时间长,增重慢;靶器官带毒时间长、病毒载量高,各器官病毒载量与宿主抗体水平整体呈现负相关。经过鸡胚、细胞盲传后,SD/04/18株能在体外稳定增殖。以上实验结果,将为抗IBV药物的研究提供理想的动物模型并为后续IBV的相关机制研究提供理论依据和实验素材。

关键词：鸡传染性支气管炎病毒致病性动态分布排毒规律抗体水平