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非索非那定对映体柱前手性衍生化反相高效液相色谱分析方法的建立

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浙江大学学报（医学版） 2014年第2期43卷 155-159页

作者：姚青青屈伯宣周权曾苏浙江大学药学院药物分析与药物代谢研究室浙江省抗肿瘤药物临床前研究重点实验室

目的：建立适用于体外细胞模型的OATP1 B1手性底物非索非那定柱前手性衍生化分析方法，为测定细胞中非索非那定对映体提供分析手段。方法：选择R-（＋）-苯乙基异氰酸酯作为手性衍生化试剂，与非索非那定生成氨基甲酸酯衍生物，应用液... 详细信息

目的：建立适用于体外细胞模型的OATP1 B1手性底物非索非那定柱前手性衍生化分析方法，为测定细胞中非索非那定对映体提供分析手段。方法：选择R-（＋）-苯乙基异氰酸酯作为手性衍生化试剂，与非索非那定生成氨基甲酸酯衍生物，应用液相色谱-串联质谱法确定对映体衍生物色谱峰，通过反相高效液相色谱法实现对映体的分离分析。结果：在建立的手性分离条件下，成功实现非索非那定对映体分离分析，非索非那定两个对映体衍生物在25～100 ng/ml浓度范围内线性关系良好（R2＝0．9992，0．9989），日内、日间精密度均小于10％。结论：本实验建立的非索非那定对映体柱前手性衍生化反相高效液相色谱分析方法灵敏、准确，可用于体外细胞模型中盐酸非索非那定立体选择性分析。

关键词：特非那定化学异氰酸盐类立体异构现象色谱法,高压液相方法指示剂和试剂

4种脂蛋白相关磷脂酶A2活性测定试剂的性能评价

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中华检验医学杂志 2018年第3期41卷 208-213页

作者：王丹晨侯立安邱玲国秀芝夏良裕无琼尹逸丛李洪雷李丹丹刘茜高学慧林立言中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院检验科 100730 内蒙古赤峰学院附属医院检验科北京大学医学部医学检验学系

目的评价4种脂蛋白相关磷脂酶A2 （Lp－PLA2）活性试剂在Beckman AU5800自动生化分析仪上的分析性能。方法试剂性能验证。收集2017年3至7月北京协和医院214例患者和140名表观健康人剩余血清，分别用于Lp－PLA2方法学比对及参考区间验证... 详细信息

目的评价4种脂蛋白相关磷脂酶A2 （Lp－PLA2）活性试剂在Beckman AU5800自动生化分析仪上的分析性能。方法试剂性能验证。收集2017年3至7月北京协和医院214例患者和140名表观健康人剩余血清，分别用于Lp－PLA2方法学比对及参考区间验证。参考美国临床和实验室标准化协会（CLSI） EP15－A、EP6－A、EP17－A和EP7－P文件，评价精密度、线性范围、灵敏度及常见干扰（胆红素、血红蛋白、乳糜）。参考EP9－A2方案，比较4种试剂（A博源、B德赛、C恒晓、D中元）检测患者样本的一致性，并计算其在医学决定水平（328、391、485 U/L）处的预期偏差。结果A～D各水平重复性（CV%）分别为：0.5%～1.7%、0.7%～3.0%、0.9%～2.0%和0.5%～3.3%，实验室内不精密度（CV%）分别为：0.7%～2.9%、1.4%～3.2%、1.3%～1.9%和0.8%～4.1%，均小于实验室5%的质量目标；A～D线性范围分别为：44 ～1 992 U/L、39 ～1 798 U/L、13～540 U/L、75 ～1 717 U/L，回归决定系数R2在0.997～1.000之间，相关系数（r）在0.998～1.000之间；4种试剂抗乳糜干扰能力均达到制造商标注或满足临床需求，胆红素在低Lp－PLA2水平对C试剂干扰明显；B、C在血红蛋白4.5 g/L时受明显负干扰，而D在血红蛋白2.45 g/L时呈现正干扰。A、C、D与B测定结果的回归决定系数R2在0.978～0.995之间，相关系数（r）在0.989～0.998之间，在医学决定水平处的预期偏差在－240～113 U/L间。A～D分别有131（93.6%）、140（100%）、82（58.6%）、128例（91.4%）Lp－PLA2活性检测结果落在制造商标注参考区间内。结论4种应用于自动生化分析仪的Lp－PLA2活性检测试剂精密度、线性均良好，但抗干扰能力有待提高。（中华检验医学杂志，2018, 41：208－213）

关键词： 1-烷基-2-乙酰甘油磷酸胆碱酯酶指示剂和试剂动脉粥样硬化评价研究

Relative Expression of Indicators for Wound Age Estimation in Forensic Pathology

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法医学杂志 2015年第2期31卷 81-84页

作者： DU Qiu-xiang WANG Xiao-wei ZHANG Lei LI San-qiang GAO Cai-rong WANG Ying-yuan SUN Jun-hong Department of Forensic Pathology Shanxi Medical University Taiyuan 030001 China Criminal Police Department of Chongqing Public Security Bureau Chongqing 400021 China

Objective In order to understand which kind of function genes play an important role for es-timating wound age, the variation of difference genes' mRNA expression were compared after injury. Methods T he mRNA expression levels of seven candidate genes (ICAM-1, NF-κB, MX2, MT1, MT2, sTnI, and Cox6c) were analyzed in contused rat skeletal muscle at different time points using real-time fluorescent quantitative PCR (RT-qPCR ). T he rawCt values were normalized relative to that of RPL32mRNA , and converted to standard C t values. A t each time point after injury, the standard deviations (SD ) of the standard C t values were calculated by SPSS. Results T he expression trends of the seven genes were all found to be related to wound age, but there were lower variation coefficients and greater reliability of sTnI and Cox6c when compared with other genes. Conclusion The genes encoding struc-tural proteins or proteins that performbasic functions can be suitable for wound age estimation.

关键词： RNA 信使蛋白质类法医病理学钙调蛋白结合蛋白质类基因血气分析指示剂和试剂铍动物

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人尿中百草枯的检测试剂管研制

中华劳动卫生职业病杂志 2015年第12期33卷 927-929页

作者：陈姿如吴名马新华杜书明武警后勤学院附属医院天津300620 军事医学科学院卫生学环境医学研究所

目的研制操作简便、结果准确、不易被氧化的百草枯检测试剂管。方法采用无色毛细管填充碳酸氢钠（60±2）mg／支，棕色毛细管填充连二亚硫酸钠（60±2）mg／支，用酒精喷灯密封毛细管柱（长度15mm，外径2mm，内径1．5mm）两端，塞进特... 详细信息

目的研制操作简便、结果准确、不易被氧化的百草枯检测试剂管。方法采用无色毛细管填充碳酸氢钠（60±2）mg／支，棕色毛细管填充连二亚硫酸钠（60±2）mg／支，用酒精喷灯密封毛细管柱（长度15mm，外径2mm，内径1．5mm）两端，塞进特制的塑料滴管中，用绿帽堵住吸头。使用时取百草枯检测试剂管1支，压碎滴管内无色、棕色2根毛细玻璃管，去帽后用手指压紧挤出滴管内空气，将管口浸入被测液中，放松手指吸样品至半管以上（吸取1．0m1），盖帽摇30s充分混匀，5min后与标准色板比色半定量，可用紫外分光光度法扫描准确定量。用百草枯检测试剂管检测不同浓度的百草枯标准应用液并进行比较。结果用百草枯检测试剂管检测3种不同浓度的百草枯标准应用液，第360天测定的结果与第1天比较，差异无统计学意义（P〉0．05）；百草枯检测试剂管可以检测尿液和胃液中的百草枯，不适合测定血清中的百草枯。结论百草枯检测试剂管可以纠正连二亚硫酸钠易被氧化、有效期短、容易出现假阴性的缺点，具有方便快捷、检测结果准确、保存较长时间的特点。

关键词：百草枯指示剂和试剂生物检材半定量

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胆固醇和甘油环糊精水溶液标准物质的研制

中华检验医学杂志 2017年第7期40卷 520-525页

作者：周伟燕禹松林曾洁王冬环张天娇闫颖张江涛孟庆慧王玉飞陈文祥张传宝北京医院国家老年医学中心卫生部临床检验中心 100730 中国医学科学院北京协和医院检验科

目的研制胆固醇和甘油水溶液基质的标准物质.方法标准物质研究.以胆固醇标准物质GBW09203b和甘油标准物质GBW09149为原料,溶解到20%甲基环糊精溶液中,称量配制法制备6个浓度水平的候选标准物质.用常规方法进行均匀性和同步稳定性研究... 详细信息

目的研制胆固醇和甘油水溶液基质的标准物质.方法标准物质研究.以胆固醇标准物质GBW09203b和甘油标准物质GBW09149为原料,溶解到20%甲基环糊精溶液中,称量配制法制备6个浓度水平的候选标准物质.用常规方法进行均匀性和同步稳定性研究.用参考方法-同位素稀释液相色谱串联质谱（ID-LC/MS/MS）测定候选标准物质以评价定值的准确性,同时进行空白验证试验.评价不均匀性、不稳定性和定值引入的不确定度,并计算总不确定度.结果 6个浓度水平标准物质的研究结果显示均匀性良好,在-70 ℃和-20 ℃保存至少可稳定1年.定值结果（＂标准值±扩展不确定度＂,单位：mmol/L）如下,胆固醇：0.65±0.01,1.31 ±0.01,2.57±0.02,5.21±0.06,7.71±0.08,10.24±0.06;甘油：0.29±0.01,0.58±0.01,1.22±0.02,2.24±0.02,3.46±0.04,4.52 ±0.04.参考方法测定结果与定值结果一致.空白验证结果显示试剂、空白基质不会对待测物的浓度产生影响.结论成功研制了胆固醇和甘油水溶液基质的候选标准物质.物质均匀、稳定,定值可靠,已被批准为国家一级标准物质（GBW 09823、GBW 09824、GBW 09825、GBW09826、GBW09827和GBW 09828）.

关键词：胆固醇甘油三酯类环糊精类溶液指示剂和试剂参考标准串联质谱法

不同抗HCV化学发光标记免疫分析法试剂S／CO值与重组免疫印迹确证实验的相关性研究

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中华检验医学杂志 2016年第2期39卷 90-94页

作者：王立水徐明杰江长林王佳颖杨燕欧兰香山东大学齐鲁医院检验科济南250012 山东大学附属济南市中心医院检验科山东省济南市体外诊断试剂工程技术研究中心

目的分析不同厂家丙型肝炎病毒抗体（抗HCV）化学发光法（CLIA）筛查试剂S／CO值与重组免疫印迹（RIBA）确证实验阳性结果的相关性。方法采用病例对照研究。应用3种国产试剂（山东莱博、北京源德、北京科美）和1种进口试剂（美国雅培）... 详细信息

目的分析不同厂家丙型肝炎病毒抗体（抗HCV）化学发光法（CLIA）筛查试剂S／CO值与重组免疫印迹（RIBA）确证实验阳性结果的相关性。方法采用病例对照研究。应用3种国产试剂（山东莱博、北京源德、北京科美）和1种进口试剂（美国雅培）对2014年3月至2015年3月山东大学齐鲁医院检验科收集的2616例血清样本进行抗HCV筛查，反应性标本再通过RIBA进一步确证。对阳性预测值与抗HCVS／CO值的相关性分析比较。不同试剂间差异比较采用×2检验方法。结果山东莱博1≤S／CO〈26．8时，阳性预测值为33．3％，S／CO〉／26．8时，阳性预测值为97．8％；北京源德1≤S／CO〈16．6时，阳性预测值为20％，S／CO≥16．6时，阳性预测值为96．7％；北京科美1≤S／CO〈16．7时，阳性预测值为9．8％，S／CO≥16．7时，阳性预测值为97．O％；美国雅培1≤S／CO〈5时，阳性预测值为12．8％，S／CO≥5时，阳性预测值为96．9％。结论抗HCVCLIA筛查试剂盒检测S／CO值与RIBA确证实验阳性结果有一定相关性，国产试剂可参考进口试剂确定S／CO值与阳性预测值的关系。不同试剂相同阳性预测值对应不同S／CO值、提示厂家可根据情况设定产品特定S／CO值，为临床实验结果判定提供参考。

关键词：肝炎抗体丙型指示剂和试剂发光测定法免疫印迹法

同位素稀释液相色谱串联质谱法测定血清甲状腺素

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中华检验医学杂志 2015年第2期38卷 91-97页

作者：周伟燕张江涛李铭张天娇曾洁赵海舰马嵘王冬环葛梦蕾孟庆慧张传宝陈文祥北京医院卫生部临床检验中心 100730 北京医院内分泌科北京协和医学院研究生院

目的建立同位素稀释液相色谱串联质谱法（ID—LC／MS／MS）测定血清甲状腺素的候选参考方法。方法实验性基础研究。重量法准确地称取血清或校准溶液，稀释器加入^13C6-甲状腺素，混合，除去蛋白后经过阳离子交换固相萃取柱，收集洗脱液... 详细信息

目的建立同位素稀释液相色谱串联质谱法（ID—LC／MS／MS）测定血清甲状腺素的候选参考方法。方法实验性基础研究。重量法准确地称取血清或校准溶液，稀释器加入^13C6-甲状腺素，混合，除去蛋白后经过阳离子交换固相萃取柱，收集洗脱液氮气吹干，复溶后用LC／MS／MS测定甲状腺素和内标。用7种混合血清评价方法的精密度；以其中一种血清为样本，分别向样本中加入原样本浓度50％、100％和200％的标准物质评价方法的加样回收率；分别以信噪比（S／N）〉3和（S／N）〉10作为标准，评价方法的检测限和定量限。分析德国临床化学会参考物质CRM21201和CRM21202，评价方法的正确度。结果血清甲状腺素测定的批内CV和总CV分别为0．64％（0．35％～0．89％）和0．83％（0．57％-1．37％）。加样回收率为99．6％～100．7％。检测限和定量限分别为0．12和0．41nmol／L。分析CRM21201和CRM21202，测定结果与认定值的平均偏差为-0．30％（范围-0．13％～0．73％）。结论建立了ID-LC／MS／MS测定血清甲状腺素的方法，方法取样量少，测定结果正确、精密，可望作为血清甲状腺素测定的参考方法。

关键词：甲状腺素同位素指示剂和试剂色谱法液相串联质谱法

固相萃取Folin-Ciocalteu比色法测定尿液中总酚含量

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中华检验医学杂志 2015年第3期38卷 178-182页

作者：修赫璐杨睿悦曾洁李红霞王默王思明王抒董军陈文祥卫生部北京老年医学研究所北京医院100730 卫生部老年医学重点实验室卫生部临床检验中心

目的建立Folin-Cioca｜teu比色法测定尿液中总酚的方法。方法方法学建立。2013年12月至2014年4月选取北京医院123名健康志愿者，年龄18-81岁，男52名，女71名。尿液样本收集后加入终浓度0．5％HCl，分装，-80℃保存；尿样用PlexaPAX固... 详细信息

目的建立Folin-Cioca｜teu比色法测定尿液中总酚的方法。方法方法学建立。2013年12月至2014年4月选取北京医院123名健康志愿者，年龄18-81岁，男52名，女71名。尿液样本收集后加入终浓度0．5％HCl，分装，-80℃保存；尿样用PlexaPAX固相萃取柱进行提取纯化、洗脱液用氮气吹干后重组；Folin-Ciocaheu试剂显色，紫外分光光度计测定吸光度；没食子酸标准曲线计算尿总酚浓度，结果用尿肌酐进行校正。测定尿总酚浓度，分析总酚与血脂等心血管病危险因素的关系。相关性比较采用Spearman相关性分析。结果没食子酸标准溶液和尿液样本在0．5％HCl、避光条件下在室温可稳定48h、4℃稳定7d。PlexaPAX固相萃取柱对主要的多酚类物质有较好的回收率，并能有效去除维生素C、有机酸等物质的干扰。PAX抽提、Folin．Ciocalteu比色法测定尿液中总酚的平均批内变异和总变异分别为2．7％～3．8％和2．4％～4．6％。123名健康志愿者尿液中总酚浓度为114．13（82．97-146．70）mgGAE／gCrea。尿总酚与HDL-C（r=0．194，P=0．032）和apoAI（r=0．312，P〈0．001）呈正相关，与血尿酸（r=-0．220，P=0．014）呈负相关。结论成功建立了Folin-Ciocalteu比色法测定尿液中总酚的方法，方法精密、可靠，可用于评价多酚类物质的摄入水平，

关键词：尿分析酚类指示剂和试剂比色法

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定量与定性粪隐血试剂在结直肠癌筛查中的效果评价

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中华消化杂志 2014年第2期34卷 114-117页

作者：沈永洲黄彦钦朱云峰马浩清浙江省海宁市中医院海宁市肿瘤研究所 314400 浙江大学肿瘤研究所

【摘要】目的探讨定量与定性粪隐血试剂在结直肠癌筛查中的应用效果。方法以结直肠癌早诊早治筛查为平台，不改变原有筛查方法和流程，抽取浙江省海宁市的4个村40～74岁结直肠癌筛查应检人员为研究对象，初筛包括病史问卷和粪隐血试验... 详细信息

【摘要】目的探讨定量与定性粪隐血试剂在结直肠癌筛查中的应用效果。方法以结直肠癌早诊早治筛查为平台，不改变原有筛查方法和流程，抽取浙江省海宁市的4个村40～74岁结直肠癌筛查应检人员为研究对象，初筛包括病史问卷和粪隐血试验，首次粪便采样分别用定量与定性试剂检测，间隔1周后第2次采样用粪隐血定性检测。病史问卷阳性或任意试剂出现1次阳性即为初筛阳性；初筛阳性者进行精筛（电子结肠镜检查）。效果评价包括粪隐血阳性率、肠道病变检出率、试剂敏感度、特异度、约登指数等，并进行卫生经济学分析。组间率的比较采用卡方检验。结果4个村共完成8427份病史问卷调查，阳性715例（8．48％）；粪隐血定量试剂检测6644份，阳性295例（4．44％）；定性试剂检测12633份，324例阳性（2．56％），定量检测与定性检测比较，差异有统计学意义（x2=49．27，P〈0．01）。共有854例初筛阳性者行电子结肠镜检查，总体肠道病变检出率为22．72%（194／854）；其中定量组病变检出率为34．55％（66／191），定性组为17．73％（36／203），两组比较差异有统计学意义（x2=14．53，P〈0．01），定量与定性双阳性者中病变检出率为43．75%（14／32）。定量与定性粪隐血试剂结直肠癌检出率分别为3．66％（7／191）和0．99％（2／203）；进展期腺瘤检出率分别为8．38％（16／191）和5．91%（12／203），但差异均无统计学意义（x2=2．08和0．96，P均〉O．05）；定量和定性粪隐血诊断进展期腺瘤以上病变（癌）的敏感度分别为45．10％和27．45％；定量与定性粪隐血试剂肠道病变平均检出成本分别为每例5874．50和1432．14元。结论粪隐血定量试剂对结直肠癌筛查效果优于定性试剂，但筛查成本前者是后者的4．10倍。

关键词：结直肠肿瘤普查粪便潜血指示剂和试剂费用效益分析