检索结果-南通市图书馆

中国癌症杂志 2023年第7期33卷 646-654页

作者：田高辉张琴星史江舟赵芬芳王宁赵家旋卢玉琳徐瑶武汉科技大学生命科学与健康学院生物医学研究院湖北武汉430081 天津科技大学生物工程学院天津300457

背景与目的:嵌合抗原受体t(chimeric antigen receptor t,CAR-t)细胞技术在血液肿瘤治疗领域已被广泛应用,慢病毒转导是CAR-t细胞制备的关键环节,与CAR-t细胞的质量密切相关,因此慢病毒转导过程涉及的各项参数仍需进一步优化。本研究旨... 详细信息

背景与目的:嵌合抗原受体t(chimeric antigen receptor t,CAR-t)细胞技术在血液肿瘤治疗领域已被广泛应用,慢病毒转导是CAR-t细胞制备的关键环节,与CAR-t细胞的质量密切相关,因此慢病毒转导过程涉及的各项参数仍需进一步优化。本研究旨在探讨携带cd30抗体序列的慢病毒转导t细胞的感染复数(multiplicity of infection,MOI)、温育密度、转导前活化时间和转导体系高度对抗cd30 CAR-t细胞的影响,优化CAR-t细胞的转导条件,提高转导效率和CAR-t细胞功能。方法:采用不同的MOI、温育密度、转导前活化时间和转导体系高度等对人外周血来源的t细胞进行转导优化,转导后分别检测抗cd30 CAR-t细胞的增殖能力、转导效率、细胞存活率和体外杀伤效率等,以确定最优的t细胞转导条件。结果:MOI为1.00、1.50和3.00时转导效率和有效细胞数显著高于0.00、0.25和0.50组。在温育密度大于1.0×10^(7)个/mL时,温育密度对t细胞转导效率无影响。活化时间为72 h组细胞存活率低于80%,显著低于其他组;24、48 h的转导效率显著高于0、8、16 h组;48 h组CAR-t细胞的增殖速率显著高于24 h组。转导体系高度为0.16 mm时转导效率和增殖倍数都显著高于0.53 mm组,但对CAR-t细胞的体外杀伤效率无影响。结论:通过对CAR-t细胞功能的综合评估,确定慢病毒的最佳转导条件为MOI=1、温育密度为1.0×10^(7)个/mL、转导前活化48h、转导体系高度为0.16mm。

关键词：慢病毒载体抗cd30嵌合抗原受体t细胞转导条件

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