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田基黄化学成分及其抗骨质疏松活性

中成药 2023年第7期45卷 2234-2238页

作者：程丽娟王凯宜春职业技术学院江西宜春336000 江西中医药大学药学院江西南昌330004

目的研究田基黄Hypericum japonicum *** Murray化学成分及其抗骨质疏松活性。方法田基黄提取物采用硅胶、Sephadex LH-20、半制备HPLC进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构。采用RANKL诱导小鼠骨髓单核巨噬细胞BM... 详细信息

目的研究田基黄Hypericum japonicum *** Murray化学成分及其抗骨质疏松活性。方法田基黄提取物采用硅胶、Sephadex LH-20、半制备HPLC进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构。采用RANKL诱导小鼠骨髓单核巨噬细胞BMM形成的成熟破骨细胞模型,筛选各化合物抗骨质疏松活性。结果从中分离得到7个化合物,分别鉴定为田基黄素A(1)、(R,Z)-2-(4,8-dimethylnona-3,7-dien-1-yl)-2,7-dimethyl-2 H-chromen-5-ol(2)、benzyl 1-O-β-D-glucopyranoside(3)、染料木黄酮(4)、杨梅素-3-O-β-D-半乳糖苷(5)、(E)-4-[5-(hydroxymethyl)furan-2-yl]but-3-en-2-one(6)、5-羟甲基糠醛(7)。化合物1、4~5的破骨细胞存活率分别为(15.34±0.05)%、(26.75±0.18)%、(21.93±0.14)%。结论化合物1为新化合物,化合物2为新天然产物,化合物3~7为首次从该植物中分离得到。化合物1、4~5具有良好的破骨细胞抑制活性。

关键词：田基黄化学成分分离鉴定抗骨质疏松活性

从天然提取物或分离部位中以碳酸酐酶II为靶点的抗骨质疏松活性筛选(英文)

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云南植物研究 2003年第6期25卷 724-729页

作者：付祥谭宁华姜立花贾锐锐嵇长久 LANDRO James FEKETE Alexander MUELLER Hartwig HENKEL Thomas 中国科学院昆明植物研究所植物化学与西部植物资源持续利用国家重点实验室云南昆明650204 Bayer Corporation IRT Bayer AG PH-R-EU

目的是以碳酸酐酶II (CAII)为靶点筛选其抑制剂 ,以期寻找抗骨质疏松活性样品。实验是在 96孔酶标板上对来源于 1 78个科、 60 8个属、 1 0 2 0种动植物 2 91 9个提取物或分离部位样品在CA II模型上进行了批量筛选。结果表明在 1 0 μg... 详细信息

目的是以碳酸酐酶II (CAII)为靶点筛选其抑制剂 ,以期寻找抗骨质疏松活性样品。实验是在 96孔酶标板上对来源于 1 78个科、 60 8个属、 1 0 2 0种动植物 2 91 9个提取物或分离部位样品在CA II模型上进行了批量筛选。结果表明在 1 0 μg ml浓度下发现了来源于 40个科、61个属、72个种的 1 0 0个样品有活性 ,其中 5个样品的IC50 小于 2 50 μg ml,2 2个样品的IC50 在 2 51～ 5 0 0 μg ml范围 ,73个样品的IC50 在 5 0 1～1 0 0 0 μg ml范围。通过以上工作我们认为以碳酸酐酶II为分子靶点的体外筛选方法稳定、方便、快速、微量、有效 ,特别适用于天然产物的抗骨质疏松活性筛选。

关键词：抗骨质疏松活性筛选碳酸酐酶Ⅱ 天然产物提取物分离部位

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朝鲜淫羊藿黄酮类成分及抗骨质疏松活性研究

昆明理工大学学报（自然科学版） 2013年第2期38卷 88-92页

作者：周成李艳平李蓉涛昆明理工大学生命科学与技术学院云南昆明650500

利用硅胶柱色谱、羟丙基葡聚糖凝胶层析柱Sephadex LH-20,ODS反相柱色谱及HPLC(高效液相色谱)从干燥朝鲜淫羊藿(Epimedium koreanum Nakai.)叶的70%丙酮/水提取物中分离得到7个黄酮类化合物,分别鉴定为:chrysin(1),morelosin(2),quercitrin(3),afzelin(4),apigenin(5),luteolin(6)和quercetin(7),化合物1-5为首次从该植物中分离得到。此外,抗骨质疏松活性药理研究表明,淫羊藿乙酸乙酯相对小鼠前成骨细胞具有明显地抑制作用,还可增强碱性磷酸酶(ALP)的活性。

关键词：小檗科朝鲜淫羊藿黄酮抗骨质疏松活性

狗脊糖聚物的分离纯化、结构鉴定及抗骨质疏松活性研究

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狗脊糖聚物的分离纯化、结构鉴定及抗骨质疏松活性研究

作者：黄冬广东药科大学

学位级别：硕士

本论文对狗脊(Cibotium barometz)粗糖聚物的体内抗骨质疏松活性进行深入研究。同时对狗脊粗糖聚物进行分离纯化,对获得的均一糖聚物进行结构鉴定。狗脊中的水溶性糖聚物采用经典水提分级醇沉法进行提取,获得三个部位的粗糖聚物分别命名... 详细信息

本论文对狗脊(Cibotium barometz)粗糖聚物的体内抗骨质疏松活性进行深入研究。同时对狗脊粗糖聚物进行分离纯化,对获得的均一糖聚物进行结构鉴定。狗脊中的水溶性糖聚物采用经典水提分级醇沉法进行提取,获得三个部位的粗糖聚物分别命名为CB50、CB70和CB90,而水提残渣则用稀碱液浸提,醇沉,得到碱溶性粗糖聚物CBB。本课题组前期体内抗骨质疏松实验结果表明四个部位狗脊粗糖聚物均展现了良好的抗骨质疏松效果。由于CBB的抗骨质疏松效果尤为显著,因此本实验对CBB组大鼠股骨干骺端和腰椎骨进行进一步Micro-CT扫描和三维重建分析,结果显示CBB能够显著增加骨质疏松大鼠股骨骨小梁数量和厚度,降低骨小梁分离度,改善结构模型指数使其由棒状向板状结构转变,说明狗脊碱提粗糖聚物可以显著改善去卵巢骨质疏松模型大鼠股骨干骺端松质骨的骨微结构。基于狗脊粗糖聚物良好的体内抗骨质疏松活性,本实验对狗脊四个部位粗糖聚物CBB、CB50、CB70和CB90进行分离纯化、结构鉴定,并明确其具有抗骨质疏松活性的均一糖聚物成分。首先对各部位糖聚物分别进行脱蛋白、透析和冻干,然后分别经DEAE-Cellulose 52层析柱进行初步分离,再分别经Sephadex G-75凝胶柱进一步纯化,得到五个糖聚物样品CBBP-1、CBBP-2、CBBP-3、CBP70-1-1和CBP70-1-2。经紫外可见光谱扫描表明其均不含有蛋白质和核酸;经比旋光度法和高效凝胶渗透色谱法测定其均为均一糖聚物,分子量分别为1445 Da、10662 Da、122975 Da、12724 Da、3611 Da。采用PMP柱前衍生化-高效液相法分析其单糖组成,完全甲基化-GC-MS分析其糖残基组成,并结合核磁共振波谱分析其糖残基连接位点,获得其一级结构特征。其中CBBP-1为葡甘低聚糖,而CBBP-2、CBBP-3、CBP70-1-1和CBP70-1-2均为杂多糖。此外,这些均一多糖的高级结构则采用刚果红实验、圆二色谱和扫描电镜进行初步研究,刚果红实验和圆二色谱分析结果显示这些均一糖聚物均不含有三股螺旋结构。扫描电镜结果表明:CBBP-1为不规则的片状结构,其表面光滑且有球状突起;CBBP-2为交织在一起的木屑样薄片状,表面粗糙;CBBP-3呈现神经细胞样形态,且树突状分支末端有光滑的球状突起;CBP70-1-1为大小和形状都不规则的片状,其表面呈现尖锐的突起;CBP70-1-2也显示为不规则片状结构,其表面呈现平滑的起伏。这五个均一糖聚物均未见文献报道。

关键词：狗脊糖聚物分离纯化结构鉴定抗骨质疏松活性

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中药海马的鉴定及抗骨质疏松活性研究

中药海马的鉴定及抗骨质疏松活性研究

作者：王晓钰福建中医药大学

学位级别：硕士

Hippocampus, belonging to Syngnathidae family,which distributed widely in the shallow waters of tropical or subtropical, is an important small marine bony fish. Modern medical research have proved that hippocampus has anti-tumor, analgesic, anti-aging, anti-fatigue, anti-thrombotic and sex hormone-like effects and so *** is found by our survey that the market circulation of hippocampal medicinal market is relatively chaos and their quality is *** phenomena of shoddy and varieties ignorance are existd. Hippocampus histris and hippocampus spines is a confusing situation, most of the literature hardly make a clear distinction between them. Based on this, it is necessary to establish a scientific identification method of traditional Chinese medicine （TCM） hippocampus by their chemical or molecular biological information. Accurate identification, quality evaluation and control are of great *** is considered that hippocampus possess effects of warming impotence, scattered quarter swelling in Chinese medicine. Hippocampus folk usage was to treat injury or flutter Warming impotence,suggesting that the hippocampus may be related to *** previous experiments and literature confirms that, so we focused on HPTLC identification based on small molecule sterol compounds of traditional Chinese medicine （TCM） hippocampus and molecular identification research based on mitochondrial COI and Cytb gene, as well as activity of anti-osteoporosis study based on cytology in vitro experiment.1. Identification of the TCM Hippocampus by HPTLCWith 10 different regions of hippocampal medicinal materials as the research object, TLC identified by different extraction methods, extraction solvent, spotting amount, chromogenic agent, developing solvent, TLC plates and other conditions, we finally chose Cholest-4-en-3-one, cholesterol for reference, as wellas five hippocampus for reference drug, we chose HPTLC Silcon Gel 60 TLC plate, developing solvent system pet

关键词：中药海马分子鉴定抗骨质疏松活性质量评价高效薄层色谱动物模型

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大果榕根的化学成分及其抗骨质疏松活性研究

大果榕根的化学成分及其抗骨质疏松活性研究

作者：祁翠翠海南师范大学

学位级别：硕士

大果榕（Ficus auriculata lour）为桑科（Moraceae）榕属（Ficus）植物。榕属植物资源丰富，主要分布在海南、广东和其他地方，在民间已广泛用作药用植物，主要用于癌症、肺炎、扁桃体炎和风湿疼痛等疾病的治疗。《南药园植物名录》记... 详细信息

大果榕（Ficus auriculata lour）为桑科（Moraceae）榕属（Ficus）植物。榕属植物资源丰富，主要分布在海南、广东和其他地方，在民间已广泛用作药用植物，主要用于癌症、肺炎、扁桃体炎和风湿疼痛等疾病的治疗。《南药园植物名录》记载大果榕还具有祛风宣肺、补肾益精等功效，可用于治疗遗精、吐血。经系统查阅国内外文献，截至目前为止，仅本课题组的邵泰明对大果榕茎的化学成分进行过一定的研究，未见对大果榕根的化学成分及药理活性的研究报道。本研究，对大果榕根的95%乙醇粗提物进行抗骨质疏松活性研究，结果发现其具有较好的抗骨质疏松活性。因此，本研究在抗骨质疏松活性筛选结果指导下，对大果榕根的化学成分进行了系统研究，寻找具有潜在抗骨质疏松活性的化合物，研究成果可为南药大果榕的开发与利用提供一定的理论依据。大果榕根用95%的乙醇室温浸泡提取，将提取液浓缩得乙醇浸膏，用水分散后，分别选用石油醚和乙酸乙酯萃取，得不同的萃取部位。对各部位运用多种层析手段及重结晶等分离手段进行分离和纯化。利用现代波谱技术（HRESI-MS、NMR、IR、UV）结合化合物的理化性质以及与文献的对照，确定了化合物的结构。从大果榕根中分离鉴定了36个化合物（1–36），其中包括新化合物10个和新天然产物1个。涉及5种结构类型，包括异黄酮类（22个），甾体类（6个），大环内脂类（4个），香豆素类（1个），简单苯衍生物类（3个）。化合物分别鉴定为：Ficaurisoflavone I (1), Ficaurisoflavone II (2), Ficaurisoflavone III (3),Ficaurisoflavone IV (4), Ficaurisoflavone V (5), Ficaurisoflavone VI (6),Ficaurisoflavone VII (7), Ficaurisoflavone VIII (8),5,7,4′-trihydroxy-3′-[7-hydroxyl-3,7-dimethyl-2(E)-octenyl] isoflavone (9), Dihydroalpinumisoflavone(10)，Alpinumisoflavone (11), Alpinumisoflavone4′-O-glucopyranoside (12),Myrsininone A (13), Derrone (14),5,7,4′,2″-tetrahydroxy-6-(3″-methyl-3″-butenyl) isoflavone (15), Wighteone (16), Lupiwighteone (17),3′-isoprenylgenistein (18), Erycibenins A (19), Ficuisoflavone (20),Hydroxyalpinumisoflavone (21),5,7,3′,4′-四羟基异黄酮(22)，豆甾-7,22-二烯-3β,5α,6α-三醇(23)，熊果烷(24)，豆甾烷-3,6-二酮(25)，6-羟基-豆甾-4-烯–3-酮(26)，[24S]-豆甾-4-烯-3-酮(27)，stigmast–4–ene-3,6-dione (28),(6S,8R,11R)-Ficaurmacrolide I (29), Des-O-methyllasiodiplodin (30),(6S,8R)-Ficaurmacrolide II (31),(6S,8R,10ξ)-Ficaurmacrolide III (32),(-)-反式凯林内酯(33)，3,4-二羟基苯甲酸(34)，1,2,4-苯三酚(35)，3ξ-(1ξ-羟乙基)-7-羟基-1-异苯并呋喃酮(36)。其中化合物1-4，6-8，29，31-32为新化合物，化合物5为新天然产物。化合物9-10、12、18、22-23、25、33-35首次从榕属植物分得，化合物19、20、24为首次从大果榕中分得。采用体外促小鼠成骨细胞增殖模型，对大果榕根的各萃取部位及部分单体化合物进行活性筛选。结果显示，乙酸乙酯部位具有很好的促进成骨细胞增殖活性;异黄酮类化合物7和8、11、22具有很好的促进成骨细胞增殖活性，异黄酮类化合物9、13、16-18、21-22、甾体类化合物24、27和大环内酯类化合物30具有较好的促进成骨细胞增殖活性。

关键词：榕属化学成分异黄酮抗骨质疏松活性

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大果榕茎的化学成分及抗骨质疏松活性研究

大果榕茎的化学成分及抗骨质疏松活性研究

作者：邵泰明海南师范大学

学位级别：硕士

大果榕（Ficus auriculata lour）为桑科（Moraceae）榕属（Ficus）植物。《南药园植物名录》记载大果榕的果实具有祛风宣肺、补肾益精作用，主治肺热咳嗽、遗精、吐血。目前尚未见大果榕的化学成分及药理活性的研究报道。本研究在抗骨... 详细信息

大果榕（Ficus auriculata lour）为桑科（Moraceae）榕属（Ficus）植物。《南药园植物名录》记载大果榕的果实具有祛风宣肺、补肾益精作用，主治肺热咳嗽、遗精、吐血。目前尚未见大果榕的化学成分及药理活性的研究报道。本研究在抗骨质疏松活性模型指导下，对大果榕茎的有效成分进行提取、分离、纯化和结构表征，以确认大果榕的化学成分;同时对粗提物及获得的单体化合物进行抗骨质疏松活性评价，寻找具有强的抗骨质疏松活性的化合物，为南药植物大果榕的开发利用提供理论依据与基础材料。以大果榕茎为研究对象，在抗骨质疏松活性模型指导下，综合运用硅胶柱层析、薄层层析、Sephadex LH-20凝胶柱层析和重结晶法等分离手段对粗提物的石油醚、氯仿和乙酸乙酯部位进行分离纯化;利用理化性质和NMR、UV、IR、MS等波谱方法并结合文献数据，从大果榕茎中分离鉴定了40个单体化合物（1–40）的结构，并通过单晶衍射仪确定了化合物6的绝对构型，其中4个为新化合物。涉及7种结构类型，包括大环内酯（7个），异黄酮（10个），甾体（6个），异香豆素（4个），简单苯衍生物（4个），生物碱（3个）和其他类化合物（6个）。化合物4–7，16，20，22，24–39为首次从榕属中分离得到，所有化合物均为首次从大果榕中分离得到。采用体外抗骨质疏松活性模型，对大果榕茎的各极性部位及单体化合物进行筛选评价。结果显示，石油醚、氯仿、乙酸乙酯部位都具有很好的促进成骨细胞增殖作用;单体化合物中大环内酯类化合物4和异黄酮类化合物11具有很好的促进成骨细胞增殖作用，异黄酮类化合物12、14和生物碱类化合物25具有较好的促进成骨细胞增殖作用。

关键词：榕属大果榕化学成分异黄酮抗骨质疏松活性

骨质疏松防治药物研究（3）：喹啉酮类衍生物的合成及其抗骨质疏松活性

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药学学报 1995年第10期30卷 792-795页

作者：徐鸣夏段文虎郑虎成都华西医科大学药化教研室上海药物所

骨质疏松防治药物研究（３）：喹啉酮类衍生物的合成及其抗骨质疏松活性徐鸣夏，段文虎，郑虎（成都华西医科大学药化教研室６１００４１）雌激素可预防和治疗绝经后的骨质疏松症，其中雌二醇最常用。但长期使用雌激素有诱发乳腺癌及子... 详细信息

骨质疏松防治药物研究（３）：喹啉酮类衍生物的合成及其抗骨质疏松活性徐鸣夏，段文虎，郑虎（成都华西医科大学药化教研室６１００４１）雌激素可预防和治疗绝经后的骨质疏松症，其中雌二醇最常用。但长期使用雌激素有诱发乳腺癌及子宫内膜癌的危险，因此，需有既具抗骨...

关键词：骨质疏松喹啉酮类衍生物抗骨质疏松活性合成

碱性蛋白酶的固定化及其制备抗骨质疏松鱼皮胶原活性肽的研究

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碱性蛋白酶的固定化及其制备抗骨质疏松鱼皮胶原活性肽的研究

作者：叶芊芊华南理工大学

学位级别：硕士

鱼皮胶原多肽是以鱼皮为原料,经过蛋白酶水解工艺制备的小分子肽类物质,具有多种生理活性功能。本文选用枯草杆菌碱性蛋白酶（Bacillus Subtilis Alkaline Protease,BAP）水解罗非鱼皮胶原蛋白,分别制备了BAP交联酶聚集体（BAPcrosslink... 详细信息

鱼皮胶原多肽是以鱼皮为原料,经过蛋白酶水解工艺制备的小分子肽类物质,具有多种生理活性功能。本文选用枯草杆菌碱性蛋白酶（Bacillus Subtilis Alkaline Protease,BAP）水解罗非鱼皮胶原蛋白,分别制备了BAP交联酶聚集体（BAPcrosslinked enzyme aggregates,BAP-CLEAs）,高分子膜载体固定化BAP和天然生物蛋壳膜（Eggshell membrane,ESM）载体固定化BAP（ESM-BAP）,对比此三种固定化酶酶解鱼皮胶原蛋白多肽的酶解效率,选择ESM-BAP进行后续鱼皮胶原多肽的制备。用超滤膜进行抗骨质疏松鱼皮胶原活性肽的分离,通过体外成骨分化诱导细胞实验和斑马鱼的骨质疏松活性实验,筛选最适分子量范围的抗骨质疏松鱼皮胶原活性肽。本论文的主要研究内容和结果如下:（1）无载体自交联法制备BAP-CLEAs的研究。利用交联剂京尼平成功制备了BAP-CLEAs,在交联温度为35℃,交联剂浓度为0.50%,交联时间为12 h时,BAP-CLEAs获得最大酶活回收率为55.04%;通过SEM、FTIR和酶学性能的表征,证明京尼平成功实现对BAP的交联,形成BAP-CLEAs,游离酶和BAPCLEAs的最适催化温度均为45℃,BAP-CLEAs的最适催化p H比游离酶提高了1.0,其酸碱稳定性和热稳定性均高于游离酶;BAP-CLEAs对底物的亲和力降低,重复使用稳定性增强,重复使用5次后仍保留了86.42%的相对酶活性。（2）高分子膜载体固定化BAP的研究。以醋酸纤维素（Cellulose acetate,CA）膜为载体,并进行固定化酶制备条件的优化。在交联剂戊二醛浓度为2.5%,交联温度为35℃,酶浓度为8 mg/m L,交联时间为2 h的条件下制备的CA膜固定化酶（CA-BAP）的酶活回收率达最大值57.08%;固定化酶的SEM、FTIR和酶学特性的研究结果表明,酶分子被成功固定化在CA膜上,形成CA-BAP,其最适催化p H向碱性偏移,最适催化温度升高至55℃,且酸碱稳定性和热稳定性均优于游离酶;酶动力学结果表明,CA-BAP对底物的亲和力降低,重复使用稳定性提高,重复使用5次后仍保留了93.20%的相对酶活性。（3）天然生物材料蛋壳膜固定化BAP（ESM-BAP）的研究。利用ESM对酶进行固定化,选择京尼平作为交联剂进行进一步的制备条件优化,在京尼平浓度为0.75%,交联温度为45℃,酶浓度为5 mg/m L,交联时间为2 h时,ESM-BAP的酶活回收率高达64.87%;通过SEM、FTIR证明了BAP成功被固定在ESM上;ESM-BAP的酶学性能结果表明,ESM-BAP的最适催化p H与游离酶相同,最适催化温度升高至55℃,且酸碱稳定性和热稳定性均在一定程度上优于游离酶;ESM-BAP对底物的亲和力和催化效率变化不大,可提高酶的重复使用性,重复使用5次后仍保留了89.14%的相对酶活性。（4）抗骨质疏松鱼皮胶原多肽的制备及其活性研究。比较BAP-CLEAs、CA-BAP、ESM-BAP的酶解效率,结果表明ESM-BAP的酶解效率最高;将ESM-BAP应用于抗骨质疏松鱼皮胶原多肽的制备,利用超滤膜对水解液进行超滤处理,得到分子量范围分别为3 k Da～5 k Da（P5）,1 k Da～3 k Da（P3）和＜1k Da（P1）的罗非鱼皮胶原多肽;三种不同分子量鱼皮胶原多肽的成骨细胞分化诱导实验证实了鱼皮胶原多肽的抗骨质疏松活性,选择了效果较好的P1和P3进行后续的斑马鱼体内实验;通过斑马鱼体内实验表明,P1和P3样品组均拥有对斑马鱼骨形成抑制的恢复作用,即具有抗骨质疏松活性,且P1样品组抗骨质疏松活性优于P3样品组。

关键词：鱼皮胶原多肽碱性蛋白酶固定化酶抗骨质疏松活性