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抗酶的研究进展

生理科学进展 2007年第2期38卷 106-110页

作者：马建敏和俊涛宁黔冀河南师范大学生命科学学院河南新乡453007

抗酶(antizyme)是当细胞内多胺水平升高时刺激机体合成的一种小分子量调节蛋白,能特异性地与鸟氨酸脱羧酶(ornithine decarboxylase,ODC)结合,经泛素非依赖途径被26S蛋白酶体降解,从而使多胺合成减少;抗酶还可以调节多胺转运,以稳定细... 详细信息

抗酶(antizyme)是当细胞内多胺水平升高时刺激机体合成的一种小分子量调节蛋白,能特异性地与鸟氨酸脱羧酶(ornithine decarboxylase,ODC)结合,经泛素非依赖途径被26S蛋白酶体降解,从而使多胺合成减少;抗酶还可以调节多胺转运,以稳定细胞内多胺水平。近年来随着生物技术的不断发展,对抗酶的认识也逐步深入,本文综述了抗酶家族、合成、作用及定位等方面的研究进展。

关键词：抗酶鸟氨酸脱羧酶多胺

抗酶1基因转染对HeLa细胞增殖及细胞周期的抑制作用

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中国生物化学与分子生物学报 2007年第12期23卷 1006-1011页

作者：姜立马文丽李晋彭翼飞徐兵郑文岭南方医科大学基因工程研究所广州510515 南方医科大学人体解剖学教研室广州510515 南方医科大学附属南方医院广州510515

研究抗酶(antizyme)1对人宫颈癌HeLa细胞增殖与细胞周期的影响,并分析抗酶1对细胞周期蛋白D1(cyclin D1)的表达影响.采用定点突变技术,将抗酶1的frameshift位点缺失,随后将突变基因重组至真核表达载体pEGFP-N1中,鉴定后转染HeLa细胞.通... 详细信息

研究抗酶(antizyme)1对人宫颈癌HeLa细胞增殖与细胞周期的影响,并分析抗酶1对细胞周期蛋白D1(cyclin D1)的表达影响.采用定点突变技术,将抗酶1的frameshift位点缺失,随后将突变基因重组至真核表达载体pEGFP-N1中,鉴定后转染HeLa细胞.通过MTT法检测细胞增殖变化,流式细胞术分析抗酶1对细胞周期的影响.RT-PCR和Western印迹检测抗酶1转染对细胞周期蛋白D1基因表达的影响.酶切结果显示,抗酶1突变基因成功克隆至pEGFP-N1中.成功转染HeLa细胞后,检测结果显示,抗酶1能够减慢HeLa细胞增殖速度,并使细胞停滞于G0/G1期,细胞周期蛋白D1基因的表达同时受到抑制.实验说明,抗酶1基因能够抑制HeLa细胞增殖,通过降低细胞周期蛋白D1的表达阻滞细胞周期.

关键词：抗酶细胞增殖细胞周期细胞周期素D1

外源精脒和精胺可诱导大鼠早期再生肝抗酶的表达

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解剖学报 2010年第3期41卷 387-390页

作者：李恩中陈燕芳索世英宁黔冀黄淮学院农林科学院河南驻马店463000 郑州澍青医学高等专科学校临床医学系郑州450064 河南师范大学生命科学学院生理室河南新乡453002

目的探讨精脒和精胺对大鼠早期再生肝抗酶(AZ)表达的影响,及在肝再生中的作用。方法外源多胺(溶于0.9%NaCl)皮下注射雄性SD大鼠(180～200g),进行部分肝切除(PH)诱导。采用RT-PCR和Western blotting方法进行PH后大鼠再生肝中AZ基因转录... 详细信息

目的探讨精脒和精胺对大鼠早期再生肝抗酶(AZ)表达的影响,及在肝再生中的作用。方法外源多胺(溶于0.9%NaCl)皮下注射雄性SD大鼠(180～200g),进行部分肝切除(PH)诱导。采用RT-PCR和Western blotting方法进行PH后大鼠再生肝中AZ基因转录量和蛋白表达量的分析。结果对照组完整肝脏(PH后0h)中,AZ基因转录量、蛋白表达量较低,PH后均快速升高,3h达到峰值,5h出现明显下降,7h再次升高并达到峰值,之后缓慢下降。外源多胺处理后,两种剂量精脒(0.03mg/kg和0.15mg/kg)和精胺(0.06mg/kg和6mg/kg)处理组AZ mRNA及蛋白表达水平变化趋势与对照组相似,但低剂量处理组远远低于相应时间点高剂量处理组。精胺的作用效果更明显,作用时间更持久。结论外源多胺对大鼠早期再生肝AZ mRNA及蛋白表达具有剂量依赖性促进作用,而精胺的作用较强,精脒较弱。

关键词：精脒精胺抗酶再生肝反转录-聚合酶连法免疫印迹法大鼠

皮质酮对大鼠早期再生肝抗酶mRNA及蛋白表达的影响

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解剖学报 2009年第3期40卷 405-408页

作者：马建敏宁黔冀李文娟索世英徐存拴河南师范大学生命科学学院河南新乡453007 省部共建细胞分化调控国家重点实验室河南新乡453007

目的研究外源皮质酮对部分肝切除（PH）诱导的大鼠早期再生肝抗酶mRNA及蛋白水平的影响。方法PH前3d对成年雄性SD大鼠进行双侧肾上腺切除术,皮质酮悬浮于芝麻油中皮下注射去肾上腺鼠,抗酶mRNA及其蛋白水平的测定采用RT-PCR和Western blo... 详细信息

目的研究外源皮质酮对部分肝切除（PH）诱导的大鼠早期再生肝抗酶mRNA及蛋白水平的影响。方法PH前3d对成年雄性SD大鼠进行双侧肾上腺切除术,皮质酮悬浮于芝麻油中皮下注射去肾上腺鼠,抗酶mRNA及其蛋白水平的测定采用RT-PCR和Western blotting法。结果与对照组（n=6,以下相同）相比,去肾上腺组及10mg/kg、20mg/kg体重皮质酮处理组抗酶mRNA水平变化不明显,而40mg/kg体重皮质酮处理能显著刺激其转录。在PH后5、7、9h,去肾上腺术鼠抗酶蛋白水平显著低于相应时间点的对照组;皮质酮处理后,蛋白水平在所观察的整个实验过程中均显著上升,且剂量越高,蛋白含量越多,尤其在PH后5h,10、20和40mg/kg体重皮质酮处理组分别比同时间点对照组高43%、79%和93%。结论皮质酮对大鼠早期再生肝抗酶蛋白的合成具有剂量依赖性促进作用。

关键词：皮质酮再生肝抗酶反转录-聚合酶连反应免疫印迹法大鼠

皮质酮对大鼠再生肝鸟氨酸脱羧酶及抗酶基因表达的影响

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四川动物 2008年第5期27卷 937-938页

作者：索世英曹兰菊马建敏宁黔冀河南师范大学生命科学学院河南新乡453007 河南师范大学体育学院

以部分肝切除诱导的雄性SD大鼠(180～200g)早期再生肝为材料,用RT-PCR法分析皮质酮处理后再生肝鸟氨酸脱羧酶及抗酶mRNA水平变化。结果表明,皮质酮对鸟氨酸脱羧酶mRNA水平具有剂量依赖性抑制作用;10、20mg/kg体重皮质酮对抗酶mRNA水平... 详细信息

以部分肝切除诱导的雄性SD大鼠(180～200g)早期再生肝为材料,用RT-PCR法分析皮质酮处理后再生肝鸟氨酸脱羧酶及抗酶mRNA水平变化。结果表明,皮质酮对鸟氨酸脱羧酶mRNA水平具有剂量依赖性抑制作用;10、20mg/kg体重皮质酮对抗酶mRNA水平影响不大,40mg/kg处理可促进其转录。

关键词：皮质酮鸟氨酸脱羧酶抗酶再生肝

皮质酮对大鼠早期再生肝抗酶mRNA及蛋白表达的影响

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皮质酮对大鼠早期再生肝抗酶mRNA及蛋白表达的影响

作者：马建敏河南师范大学

学位级别：硕士

糖皮质激素对肝再生具有重要而复杂的影响,但其作用机理目前还没有完全弄清楚。本文以成年雄性Sprague-Dawley大鼠(体重180-200g)为材料,研究了大鼠体内主要的糖皮质激素——皮质酮对部分肝切除(partial hepatectomy,PH)诱导的早期再生... 详细信息

糖皮质激素对肝再生具有重要而复杂的影响,但其作用机理目前还没有完全弄清楚。本文以成年雄性Sprague-Dawley大鼠(体重180-200g)为材料,研究了大鼠体内主要的糖皮质激素——皮质酮对部分肝切除(partial hepatectomy,PH)诱导的早期再生肝抗酶mRNA及其蛋白表达的影响,旨在为探讨糖皮质激素在肝再生中的作用和地位提供资料。大鼠随机分为5组:对照组(去肾上腺假手术组)、去肾上腺手术组、10、20和40 mg/kg体重外源皮质酮处理的去肾上腺手术组。PH前3天对大鼠进行双侧肾上腺切除手术,皮质酮悬浮于芝麻油中形成不同浓度,于PH前12 h皮下注射去肾上腺鼠,12 h后再注射一次。再生肝抗酶mRNA及其蛋白水平的测定分别采用RT-PCR和Western blotting法。结果如下:(1)对照组完整肝脏中(PH 0 h)抗酶mRNA水平相对较低,PH后升高,3 h达到峰值,5 h出现明显下降,7 h再次升高并达到峰值,之后缓慢下降,12 h回到基础水平。(2)PH后,去肾上腺手术组及10或20 mg/kg体重皮质酮处理组抗酶mRNA水平的变化趋势与对照组相似,与各相应时间点对照组相比,mRNA含量无显著性变化(P﹥0.05)。(3)与对照组相比,40 mg/kg体重皮质酮处理组抗酶mRNA水平显著升高(PH后7 h除外)(P﹤0.05或P﹤0.01),峰值出现在PH后5 h,之后下降。(4)对照组抗酶蛋白水平的变化趋势与其相应的mRNA水平变化趋势相一致。而与之相比,去肾上腺手术组的抗酶蛋白含量在PH后5、7、9 h则出现显著下降(P﹤0.05)。(5)不同剂量外源皮质酮处理后,抗酶蛋白水平的变化趋势发生明显改变,PH后持续升高,5 h达到高峰,之后缓慢下降。与对照组相比,各皮质酮处理组抗酶蛋白含量在所观察的整个实验过程中均显著升高(P﹤0.01),如在PH后5 h,10、20和40 mg/kg体重皮质酮处理组抗酶蛋白水平分别比同时间点对照组高43%、79%和95%。上述结果表明,外源皮质酮对大鼠早期再生肝抗酶蛋白的合成具有剂量依赖性促进作用;10、20 mg/kg体重的外源皮质酮对抗酶mRNA水平影响不大,而高剂量(40 mg/kg)皮质酮处理可刺激抗酶基因转录。

关键词：皮质酮抗酶再生肝大鼠