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桂花种子环烯醚萜苷的提取工艺与抗血栓活性研究

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中草药 2018年第13期49卷 3033-3041页

作者：李桂华王苗苗贺魏刘洁张蝶刘嘉琪唐伟卓长沙学院生物与环境工程学院湖南长沙410022

目的优选桂花4大品种种子中2种主要环烯醚萜苷类成分(特女贞苷和女贞苷G13)的提取工艺并对桂花种子进行抗血栓活性评价。方法采用L_9(3~4)正交设计,从乙醇体积分数、料液比和提取时间3个方面考察超声、回流、微波不同提取方法对桂花种子... 详细信息

目的优选桂花4大品种种子中2种主要环烯醚萜苷类成分(特女贞苷和女贞苷G13)的提取工艺并对桂花种子进行抗血栓活性评价。方法采用L_9(3~4)正交设计,从乙醇体积分数、料液比和提取时间3个方面考察超声、回流、微波不同提取方法对桂花种子中2种成分的提取效果。以提取率、成分质量及总峰面积为指标进行综合加权分析,确定最佳的提取方法和提取工艺。建立斑马鱼抗血栓模型评价桂花种子的抗血栓活性。结果 3种提取方法中,微波提取效果最好,最佳提取工艺为乙醇体积分数55%、料液比1∶10、提取时间15 min。HPLC分析表明桂花4大品种种子的化学成分组成基本一致。斑马鱼抗血栓活性结果显示,桂花种子提取物的血栓抑制作用不明显,在高浓度剂量下易导致心包水肿。结论考察了桂花4大品种种子中2种环烯醚萜苷的提取工艺,同时初步研究了银桂品种种子水提物的抗血栓活性,为桂花子这种废弃资源的二次开发和利用提供了参考。

关键词：桂花种子特女贞苷女贞苷G13 提取工艺抗血栓活性正交设计斑马鱼抗血栓模型

通俗环毛蚓抗血栓活性蛋白成分的快速富集及活性考察

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中国实验方剂学杂志 2021年第22期27卷 166-171页

作者：张经纬杨万青马韫楠汪文杰钟宛凌毕嘉谣杜守颖北京中医药大学中药学院北京100029

目的:以地龙品种中的通俗环毛蚓为研究对象,对其蛋白总提物进行纯化富集以获得抗血栓活性蛋白成分(PvQ),对PvQ进行抗血栓活性研究,以期为地龙的抗血栓物质基础研究提供参考。方法:采用AKTA-Pure型蛋白纯化系统,以体外活性为导向,富集通... 详细信息

目的:以地龙品种中的通俗环毛蚓为研究对象,对其蛋白总提物进行纯化富集以获得抗血栓活性蛋白成分(PvQ),对PvQ进行抗血栓活性研究,以期为地龙的抗血栓物质基础研究提供参考。方法:采用AKTA-Pure型蛋白纯化系统,以体外活性为导向,富集通俗环毛蚓PvQ;采用纤维蛋白平板法、纤维蛋白原-凝血酶时间法(Fibg-TT法)对PvQ的纤溶及抗凝活性进行测定;利用体外血栓溶解试验评价PvQ对体外血栓的溶解能力,同时,考察了不同温度及pH对PvQ活性的影响。结果:成功富集得到通俗环毛蚓PvQ,活性测定表明其具有显著的纤溶及抗凝活性。体外血栓试验结果显示,37℃孵育5 h后PvQ可水解超过80%的血栓块。此外,温度和pH对于PvQ活性影响显著,在≥60℃或酸性条件(pH活性显著降低或失活,而在≤50℃和碱性条件下PvQ活性则不受影响或受较少影响。结论:建立了可行的通俗环毛蚓PvQ制备方法,PvQ可同时作用于纤维蛋白和纤维蛋白原,从而发挥双重纤溶作用,表现出良好的纤溶及抗凝活性,为其用于治疗血栓性疾病提供了科学阐释,并可为地龙抗血栓蛋白类产品的开发提供参考。

关键词：地龙通俗环毛蚓抗凝活性纤溶活性蛋白纯化温度抗血栓活性

毛冬青中三萜皂苷ilexoside O的制备及抗血栓活性研究

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中草药 2014年第13期45卷 1834-1837页

作者：金晶秦聪怡周园曾瑞鑫赵钟祥中山大学药学院广东广州510006 广州中医药大学中药学院广东广州510006

目的从毛冬青Ilex pubescens中分离制备三萜皂苷ilexoside O,并探讨其抗血栓活性。方法综合运用大孔树脂、硅胶和重结晶等分离方法制备化合物,采用核磁、质谱等技术鉴定结构;小鼠和大鼠分别ig给予不同剂量的ilexoside O,通过考察其对小... 详细信息

目的从毛冬青Ilex pubescens中分离制备三萜皂苷ilexoside O,并探讨其抗血栓活性。方法综合运用大孔树脂、硅胶和重结晶等分离方法制备化合物,采用核磁、质谱等技术鉴定结构;小鼠和大鼠分别ig给予不同剂量的ilexoside O,通过考察其对小鼠的凝血时间、出血时间和大鼠在三氯化铁诱导下腹主动脉血栓形成量的影响评价其药理活性。结果ilexoside O各剂量组与对照组相比,对小鼠出血时间均有明显影响(P0.05),但中(50 mg/kg)、高(100 mg/kg)剂量组可以明显延长小鼠的凝血时间(P血栓形成量(P血栓形成,有明显的活血作用。

关键词：毛冬青三萜皂苷 ilexoside O 抗血栓活性凝血时间

基于分子对接的鸡血藤抗血栓活性成分的筛选研究

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中国现代应用药学 2021年第15期38卷 1803-1812页

作者：毕艺鸣殷贝范冠杰王献哲广州中医药大学第二临床医学院广州510405 广东省中医院/广州中医药大学第二附属医院广州510120

目的采用分子对接技术筛选鸡血藤中抗血栓形成的活性成分。方法检索TCMSP得到鸡血藤所有化学成分,结合口服生物利用度(oral bioavailability,OB)≥30%以及类药性(drug likeness,DL)≥0.18,筛选出活性化合物,利用PharmMapper初步预测鸡... 详细信息

目的采用分子对接技术筛选鸡血藤中抗血栓形成的活性成分。方法检索TCMSP得到鸡血藤所有化学成分,结合口服生物利用度(oral bioavailability,OB)≥30%以及类药性(drug likeness,DL)≥0.18,筛选出活性化合物,利用PharmMapper初步预测鸡血藤的活性成分的对应靶点,选择与抗血栓形成相关的靶点,以Drug Bank中对血栓形成有抑制作用并已上市或者正在进行临床试验的小分子药物为阳性对照,再以AutoDock Vina进行分子对接。结果共筛选出鸡血藤活性化合物23个,抗血栓相关靶点4个,以低于活性化合物最低结合能平均值的化合物为最终阳性结果,对比分析原配体、阳性对照和鸡血藤活性化合物作用于各靶点的主要活性位点,阐明鸡血藤抗血栓的机制可能与其抑制内外凝血途径有关。结论分子对接技术不仅为鸡血藤活血作用的机制研究提供了参考,也为进一步开发安全有效的抗血栓类单体提供了研究方向。

关键词：鸡血藤抗血栓活性分子对接虚拟筛选

桐花树内生和根际细菌多样性及抗血栓活性研究

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广西植物 2020年第3期40卷 335-344页

作者：李菲黄庶识胡文进李喆黄媛林王巧贞潘信利广西科学院广西近海海洋环境科学重点实验室南宁530007 广西科学院广西海洋天然产物与组合生物合成化学重点实验室南宁530007 广西科学院国家非粮生物质能源工程技术研究中心非粮生物质酶解国家重点实验室广西生物炼制重点实验室广西生物质工程技术研究中心南宁530007

红树植物内生菌在红树共生体的物质循环、能量传递和健康维护等方面起着重要作用。为探究红树植物内生菌的多样性,进一步揭示内生菌在红树共生体的功能多样性提供菌种资源,该研究选择6种分离培养基和采用传统稀释涂布法对从广西北海滩... 详细信息

红树植物内生菌在红树共生体的物质循环、能量传递和健康维护等方面起着重要作用。为探究红树植物内生菌的多样性,进一步揭示内生菌在红树共生体的功能多样性提供菌种资源,该研究选择6种分离培养基和采用传统稀释涂布法对从广西北海滩涂上采集的桐花树组织和根际土壤样品进行分离,对获得的可培养细菌进行多样性分析,并通过体外溶栓实验筛选出具有抗血栓活性的菌株。结果表明:(1)基于16S rRNA基因序列系统进化分析,从桐花树组织和根际土壤中共获得125株细菌;分布于变形菌门(Proteobacteria)、放线菌门(Actinobacteria)和厚壁菌门(Firmicutes)3个门27个科39个属74个种中,芽孢杆菌属为优势菌属,菌株数量占13.5%。(2)抗血栓活性实验表明,初筛获得18株具有抗血栓活性细菌,总阳性率为24.32%;将初筛有活性的菌株进行复筛和重复验证实验,进一步验证其活性,结果复筛出3株细菌B1850、B1989和B2632具有很强抗血栓活性。综上所述,广西北海滩涂上红树植物桐花树中存在丰富的可培养细菌资源,具有从中挖掘新的纤溶酶和开发溶血栓药物的潜力。

关键词：桐花树内生细菌根际细菌多样性抗血栓活性

几种云南代表性黄芪属植物品质评价及抗血栓活性比较

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几种云南代表性黄芪属植物品质评价及抗血栓活性比较

作者：付姿大理大学

学位级别：硕士

目的:以蒙古黄芪(正品黄芪)为对照,比较几种云南代表性黄芪属植物主要活性成分含量和指纹图谱相似度。从体外和体内水平比较云南黄芪、梭果黄芪和蒙古黄芪的抗血栓活性差异。本文的两部分研究结果为云南黄芪属植物资源的开发利用提供数... 详细信息

目的:以蒙古黄芪(正品黄芪)为对照,比较几种云南代表性黄芪属植物主要活性成分含量和指纹图谱相似度。从体外和体内水平比较云南黄芪、梭果黄芪和蒙古黄芪的抗血栓活性差异。本文的两部分研究结果为云南黄芪属植物资源的开发利用提供数据支持。方法:1.主要活性成分含量测定:(1)毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量测定。采用Aglient 1260HPLC,DAD检测器,Aglient SB-C色谱柱(4.6 mm×150 mm,3.5μm),以乙腈(A)-水为流动相进行梯度洗脱,检测波长254 nm。(2)总皂苷含量测定。以黄芪甲苷为对照品,采用香草醛-高氯酸比色法,于540 nm处测定吸光度。2.指纹图谱相似度比较:采用高效液相色谱(HPLC)法,以乙腈和水为流动相对样品进行梯度洗脱,构建几种黄芪属植物粗提物和粗提物不同有机试剂萃取部位的指纹图谱,运用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》(2012版)计算相似度,比较:(1)云南黄芪属植物与蒙古黄芪地下部分的相似度;(2)云南黄芪属植物地下部分之间的相似度;(3)云南黄芪属植物自身地上部分与地下部分的相似度。3.抗血栓作用比较:(1)体外实验。大鼠腹主动脉取血后,37℃自然凝固制成体外血栓。加入高、中、低浓度的蒙古黄芪、云南黄芪和梭果黄芪提取物孵育24 h。称取剩余血凝块重量后计算血栓溶解率以比较三种黄芪体外抗凝作用。(2)体内实验。连续灌胃给予大鼠高、低剂量的蒙古黄芪、云南黄芪和梭果黄芪提取物7 d后,Fe Cl环孵大鼠颈总动脉制备体内血栓模型。20 min后取血,Elisa法测定血浆中血栓素B(TXB)、6-酮-前列腺素F(6-K-PGF)水平,然后称取Fe Cl孵育血管段中的血栓重量以比较三种黄芪体内抗凝作用。4.出血风险比较:连续灌胃给予小鼠高、低剂量的蒙古黄芪、云南黄芪和梭果黄芪提取物4 d后,剪断鼠尾测定尾出血时间以评价三种黄芪的出血风险。结果:1.主要活性成分含量:(1)毛蕊异黄酮葡萄糖苷:蒙古黄芪中含量为0.035%,云南黄芪属植物中仅梭果黄芪含有毛蕊异黄酮葡萄糖苷,含量为0.017%。(2)总皂苷:蒙古黄芪中的含量为3.84%,云南黄芪属植物中总皂苷含量由高到低为:黑毛多枝黄芪(6.51%)、梭果黄芪(4.38%)、中甸黄芪(4.30%)、无茎黄芪(2.87%)、黑毛黄芪(2.79%)、肾形子黄芪(2.50%)、地八角(2.25%)、云南黄芪(1.84%)、长果颈黄芪(1.82%)。2.指纹图谱相似度:(1)云南黄芪属植物与蒙古黄芪地下部分的相似度。粗提物与蒙古黄芪的相似度在0.103～0.906之间,其中黑毛黄芪与蒙古黄芪的相似度最高;粗提物石油醚萃取部位与蒙古黄芪的相似度在0.041～0.810之间,其中梭果黄芪与蒙古黄芪的相似度最高;粗提物乙酸乙酯萃取部位与蒙古黄芪的相似度在0.002～0.302之间,其中云南黄芪与蒙古黄芪的相似度最高;粗提物正丁醇萃取部位与蒙古黄芪的相似度在0.025～0.193之间,其中黑毛多枝黄芪与蒙古黄芪的相似度最高;粗提物水萃取部位与蒙古黄芪的相似度在0.565～0.984之间,其中长果颈黄芪与蒙古黄芪的相似度最高。(2)云南黄芪属植物地下部分之间的相似度。各植物粗提物之间的相似度在0.059～0.888之间,平均相似度为0.404,其中长果颈黄芪与黑毛黄芪的相似度最高;石油醚部位之间的相似度在0.046～0.962之间,平均相似度为0.469,其中长果颈黄芪与地八角的相似度最高;各植物乙酸乙酯萃取部位之间的相似度在0～0.506之间,平均相似度为0.071,其中肾形子黄芪与黑毛黄芪的相似度最高;各植物正丁醇萃取部位之间的相似度在0.010～0.417之间,平均相似度为0.176,其中长果颈黄芪与地八角的相似度最高;各植物水萃取部位之间的相似度在0.092～0.980之间,平均相似度为0.666,其中地八角与黑毛多枝黄芪的相似度最高。(3)云南黄芪属植物自身的地上部分与地下部分相似度。各云南黄芪属植物自身的地上部分和地下部分具有一定的相似度,相似度在0.143～0.703之间,其中黑毛多枝黄芪的地上部分和地下部分相似度最高。3.抗血栓活性比较:(1)体外实验。高浓度(30 mg/m L)时溶解体外血栓的能力为云南黄芪>梭果黄芪>蒙古黄芪;中浓度(15 mg/m L)时溶解体外血栓的能力为梭果黄芪>云南黄芪>蒙古黄芪;低浓度(7.5 mg/m L)时三种黄芪均无明显溶解体外血栓的能力。(2)体内实验。高剂量(300 mg/kg)时溶解体内血栓的能力为梭果黄芪>蒙古黄芪>云南黄芪;低剂量(150 mg/kg)时溶解体内血栓的能力为梭果黄芪>云南黄芪>蒙古黄芪。与假手术组比较,血栓模型组TXB/6-K-PGF的比值升高,三种黄芪均能降低该比值,两个剂量的降低

关键词：云南黄芪属植物指纹图谱相似度活性成分含量测定抗血栓活性

分子硫酸皮肤素的制备、理化性质及抗血栓活性的研究

同方学位论文库评论

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分子硫酸皮肤素的制备、理化性质及抗血栓活性的研究

水提法和仿生提取法研究菲牛蛭及其炮制品的抗血栓活性

中国资源生物技术与糖工程学术研讨会

作者：谢继青姬胜利王凤山崔慧斐曹吉超山东大学药学院生化与生物技术药物研究所山东大学药学院生化与生物技术药物研究所山东大学药学院生化与生物技术药物研究所山东大学药学院生化与生物技术药物研究所山东大学药学院生化与生物技术药物研究所

＜正＞硫酸皮肤素（dermatan sulfate,DS）属于一类结构复杂、硫酸化的糖胺聚糖。其分子结构主要是由（1—4）-O-a-L-艾杜糖醛酸-（1→3）-2-乙酰氨基-2-脱氧-4-O-硫酸-β-O-半乳糖构成的多聚体。天然产物的分子量一般在15kD-45kD之间... 详细信息

＜正＞硫酸皮肤素（dermatan sulfate,DS）属于一类结构复杂、硫酸化的糖胺聚糖。其分子结构主要是由（1—4）-O-a-L-艾杜糖醛酸-（1→3）-2-乙酰氨基-2-脱氧-4-O-硫酸-β-O-半乳糖构成的多聚体。天然产物的分子量一般在15kD-45kD之间。DS已成为一种新型的抗血栓药物。但DS有两个主要的药动学问题:一个是体内消除半衰期短;另一个是与UFH相比,在皮下和肌肉注射两途径,其生物利用度较低,且DS分子量越高,其生物利用度就越低。因此,制备低分子硫酸皮肤素（low molecular weight dermatan sulfate,LMWDS）以进一步提高DS的生物利用度并改善其药动学特性成为近年来国内外研究的热点。

关键词：硫酸皮肤素低分子硫酸皮肤素制备抗血栓活性

来源： cnki会议评论

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cnki会议

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中国药师 2019年第5期22卷 814-818页

作者：谭赫侯觉文单宇王雄飞钟苗雷艳谢海林袁瑞娟北京中医药大学中药学院北京102488 中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所广西复鑫益生物科技有限公司

目的:确定菲牛蛭传统炮制的科学性。方法:分别采用水提取法和仿生提取法提取菲牛蛭清水吊干品、活体冻干品、滑石粉烫制品、酒浸闷烘品中的抗血栓活性成分,以纤维蛋白平板法和纤维蛋白原平板法的透明圈面积为活性指标进行纤溶活性测定,... 详细信息

目的:确定菲牛蛭传统炮制的科学性。方法:分别采用水提取法和仿生提取法提取菲牛蛭清水吊干品、活体冻干品、滑石粉烫制品、酒浸闷烘品中的抗血栓活性成分,以纤维蛋白平板法和纤维蛋白原平板法的透明圈面积为活性指标进行纤溶活性测定,并建立体外血栓模型,通过血凝块的失重比进一步测定抗血栓活性。结果:各炮制品均能使纤维蛋白平板产生透明圈。采用水提取法时,滑石粉烫制和酒浸闷烘后的菲牛蛭溶圈面积减小,纤溶活性降低,活性顺序为:清水吊干品>活体冻干品>酒浸闷烘品>滑石粉烫制品,此结果与体外溶解血凝块的失重比结果一致;而采用仿生提取法时,结果均显示炮制使菲牛蛭纤溶活性及溶栓率升高,且活性顺序为:滑石粉烫制品>酒浸闷烘品>清水吊干品>活体冻干品。仿生提取法较水提取法更符合菲牛蛭经口服后在人体内的吸收过程,结果更有说服力。结论:传统的炮制方法不仅可以矫味矫臭,还可增强菲牛蛭的抗血栓活性作用。

关键词：菲牛蛭炮制仿生提取抗血栓活性

从Egleles viscosa分得的一个四甲氧基黄酮—ternatin具有抗血栓活性

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现代药物与临床 1996年第2期 80-81页

前曾报道从 Egletes viscosa Less.花顶部分分离得到一个黄酮类化合物 ternatin(5,4′-二羟基-3,7,8,3′-四甲氧基黄酮)具有抗过敏、抗炎症的活性。本文通过体外由ADP 诱导产生的血小板聚集和体内由 KC(kappa-carrageenan)诱导产生的小... 详细信息

前曾报道从 Egletes viscosa Less.花顶部分分离得到一个黄酮类化合物 ternatin(5,4′-二羟基-3,7,8,3′-四甲氧基黄酮)具有抗过敏、抗炎症的活性。本文通过体外由ADP 诱导产生的血小板聚集和体内由 KC(kappa-carrageenan)诱导产生的小鼠尾部血栓为模型来评价 ternatin 对于血小板功能的效果。药材粉末4kg 用冷的正己烷脱脂后,用冷乙醇提取。回收溶剂后得到棕色粘稠状物246g。用720g 硅胶柱层析,分别用正己烷、氯仿、乙酸乙酯,最后用甲醇洗脱。乙酸乙酯洗脱部分再用硅胶柱层析,得一黄色固体,用甲

关键词：甲氧基抗血栓活性鼠尾烷氧基黄酮类化合物色酮硅胶柱层析 Egleles viscosa ternatin