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昆虫知识 2003年第5期40卷 385-391页

作者：艾颖邱星辉何凤琴中国科学院动物研究所

棉蚜的抗药性涉及到代谢酶活力的提高、靶标部位的不敏感以及表皮穿透作用的降低。该文重点概述了棉蚜代谢抗性和靶标抗性方面的研究进展 ;介绍了棉蚜抗性中存在的交互抗性、负交互抗性 ,讨论了抗性稳定性以及寄主植物和转基因棉对棉蚜... 详细信息

棉蚜的抗药性涉及到代谢酶活力的提高、靶标部位的不敏感以及表皮穿透作用的降低。该文重点概述了棉蚜代谢抗性和靶标抗性方面的研究进展 ;介绍了棉蚜抗性中存在的交互抗性、负交互抗性 ,讨论了抗性稳定性以及寄主植物和转基因棉对棉蚜抗药性的影响。

关键词：棉蚜抗药性机理稳定性寄主植物转基因棉花

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论淡色库蚊敌百虫抗性品系的抗药性机理

昆虫学报 1989年第1期32卷 44-51页

作者：黄刚黄品篯中国科学院上海昆虫研究所

分别测定了淡色库蚊(Culex pipiens pallens)敏感品系(SEN)及敌百虫抗性品系(RD)雌成蚊的乙酰胆碱酯酶(AchE)对硫代乙酰胆碱(ATch)的米氏常数(K_m)和最大反应速度(V_(max))。SEN雌成蚊头部AchE的K_m=1.2×10^(-4)mol/L,V_(max)=7.7×10^(-3)mol/L(产物);胸部的K_m=0.8×10^(-4)mol/L,V_(max)=6.5×10^(-3)mol/L(产物)。RD雌成蚊头部AchE的K_m=5.7×10^(-4)mol/L,V_(max)=25×10^(-3)mol/L(产物);胸部的K_m=0.8×10^(-4)mol/L,V_(max)=9.5×10^(-3)mol/L(产物)。结果表明:***和RD二者的雌成蚊,它们自身头、胸间AchE是不同质的,是以同工酶的形式存在,因此RD雌成蚊头部AchE的性质与SEN雌成蚊的头部有显著差异也是由AchE同工酶的变异所造成。***雌成蚊头部AchE在量上与SEN间也存在明显的差异。因此可以认为RD雌成蚊对有机磷产生抗性的主要机理是头部AchE在质和量上产生了变异。由于羧酸酯酶不是对具有磷酸酯键的有机磷制剂作用的靶子酶,因而不是敌百虫抗性产生的主要原因。

关键词：淡色库蚊敌百虫抗药性机理

土耳其斯坦叶螨对阿维菌素和哒螨灵抗药性机理及抗性适合度研究

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新疆农业科学 2011年第2期48卷 229-235页

作者：陈文博孙磊杨涛谷清义王利军张建萍石河子大学农学院新疆石河子832002

【目的】明确土耳其斯坦叶螨对阿维菌素和哒螨灵的抗药性机理和抗性适合度。【方法】在28℃条件下对土耳其斯坦叶螨敏感品系进行室内抗药性选育,选育出对阿维菌素和哒螨灵的抗性品系,组建生命表进行抗性适合度研究。并比较抗性品系和敏... 详细信息

【目的】明确土耳其斯坦叶螨对阿维菌素和哒螨灵的抗药性机理和抗性适合度。【方法】在28℃条件下对土耳其斯坦叶螨敏感品系进行室内抗药性选育,选育出对阿维菌素和哒螨灵的抗性品系,组建生命表进行抗性适合度研究。并比较抗性品系和敏感品系的几种常见解毒酶的活性测定来进行抗性机理研究。【结果】土耳其斯坦叶螨对阿维菌素的抗性发展比较慢。在抗性适合度的研究中发现土耳其斯坦叶螨的两种抗性品系在发育历期、产卵量等指标跟敏感品系相比均存在不利性。并发现羧酸酯酶在两种抗性品系和敏感品系中比活力表现不明显,在抗阿维菌品系和敏感系中碱性磷酸酯酶存在差异性,这说明这种酶在解毒阿维菌素过程中起作用。谷胱甘肽S-转移酶、多功能氧化酶、酸性磷酸酯酶和碱性磷酸酯酶在抗哒螨灵品系和敏感品系中均表现差异。说明这些酶在解毒哒螨灵的过程中起作用。【结论】阿维菌素和哒螨灵的抗性与解毒酶活性的变化有关,并且在产生抗性后存在适合度不利性。

关键词：土耳其斯坦叶螨抗药性机理抗性适合度解毒酶

重庆市草莓灰霉病菌抗药性监测及抗药性机理研究

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重庆市草莓灰霉病菌抗药性监测及抗药性机理研究

作者：李鹏飞西南大学

学位级别：硕士

由灰葡萄孢菌(Botrytis cinerea)侵染所致的灰霉病是草莓生产和储藏过程中发生最为普遍的病害之一,严重影响草莓的产量与质量。由于目前生产中草莓灰霉病抗病品种相对较少,生物防治又因自然环境的多变存在一定局限性,因此化学防治仍然... 详细信息

由灰葡萄孢菌(Botrytis cinerea)侵染所致的灰霉病是草莓生产和储藏过程中发生最为普遍的病害之一,严重影响草莓的产量与质量。由于目前生产中草莓灰霉病抗病品种相对较少,生物防治又因自然环境的多变存在一定局限性,因此化学防治仍然是目前主要防治手段。但随着长期大面积使用杀菌剂加之灰葡萄孢菌寄主广泛、繁殖速度快、基因可塑性强等特点,灰葡萄孢菌已对多种不同作用机理的杀菌剂产生了抗药性,因此本文对2021-2022年从重庆市分离得到的142株草莓灰霉病菌进行了抗药性监测,明确了草莓灰霉病菌的抗药性发生情况,并对抗药性菌株的抗性分子机理和生物学特性进行了研究,最后对嘧菌环胺抗性菌株的抗性机理进行了探索,主要研究结果如下:1.为明确重庆市草莓灰霉病菌对常用杀菌剂的抗性发生情况,采用最低抑制浓度(MIC)法对2021-2022年从重庆市北碚区、长寿区、沙坪坝区分离得到的142株草莓灰霉病菌进行了杀菌剂抗性监测,结果显示草莓灰霉病菌对啶酰菌胺(Bos)、多菌灵(Car)、甲氧基丙烯酸酯类(Qo Is,吡唑醚菌酯和嘧菌酯)、二甲酰亚胺类(DCFs,腐霉利和异菌脲)的抗性频率分别达到了92.25%、88.03%、78.17%、51.41%,没有检测到咯菌腈抗性菌株;从不同地区分离得到的草莓灰霉病菌抗药性情况存在差异,从北碚和沙坪坝分离得到的菌株对多菌灵抗性频率较高,而长寿的菌株对甲氧基丙烯酸酯类药剂抗性频率较高,但三个地区的菌株均对啶酰菌胺表现出较高抗性频率;同时还对草莓灰霉病菌的抗性表型进行了分类,共有8种抗性表型,其中Car Qo Is DCFs Bos 、Car Qo Is Bos 、Car Bos 是占比最多的3种抗性表型,频率分别为40.85%、21.13%、17.61%。以上结果表明重庆市草莓灰霉病菌对常用杀菌剂已产生较为严重的抗药性,且存在多重抗药性现象。2.为明确重庆市草莓灰霉病菌抗药性菌株的抗性分子机理,随机选取每类杀菌剂的抗性菌株对其杀菌剂靶标位点进行测序比对,结果显示在多菌灵抗性菌株β-微管蛋白上共检测到两种突变方式E198V和E198A,其中E198A为主要突变类型,占比达75.0%;二甲酰亚胺类抗性菌株,在双组分组氨酸激酶上共检测到三种突变方式I365S、I365N、Q369P+N373S,其中I365N为主要突变类型,占比达52.1%;甲氧基丙烯酸酯类抗性菌株在细胞色素b上仅检测到一种突变方式G143A;在啶酰菌胺抗性菌株中,有45株在琥珀酸脱氢酶B亚基上检测到氨基酸突变,共有三种突变方式P225F、N230I、H272R,其中P225F为主要突变类型,占比达53.3%,分子对接结果表明B亚基P225F和H272R两种突变会改变琥珀酸脱氢酶结合口袋结构从而减弱啶酰菌胺与结合口袋内氨基酸的相互作用力,导致草莓灰霉病菌对啶酰菌胺产生抗药性;此外还有8株在B亚基上未检测到突变位点,继续对其C、D亚基进行测序,有5株仅在C亚基检测到氨基酸突变,并且仅有一种突变方式G85A+I93V+M158V+V168I,分子对接结果表明在C亚基发生突变的4个氨基酸中仅有第85位氨基酸靠近结合位点,但该氨基酸突变不会对啶酰菌胺的结合产生直接影响,而另外3个氨基酸距离结合位点相对较远,发生突变后不会对啶酰菌胺的结合产生影响。针对以上8株在B亚基未检测到突变位点的菌株对其ABC转运蛋白Bcatr B编码基因的表达量进行了测定,结果显示经啶酰菌胺处理后,8株抗性菌株中有7株Bcatr B基因表达量显著的上升。以上结果表明杀菌剂靶标位点上氨基酸的突变是导致草莓灰霉病菌对多菌灵、甲氧基丙烯酸酯类、二甲酰亚胺类杀菌剂产生抗药性的主要原因,而草莓灰霉病菌对啶酰菌胺的抗药性除了与靶标位点氨基酸突变有关外,还与ABC转运蛋白Bcatr B表达量升高存在密切关联。3.为明确草莓灰霉病菌抗药性菌株生物学特性变化,对3类抗性表型(Car Bos ,Car Qo Is Bos ,Car Qo Is DCFs Bos )的抗药性菌株及敏感菌株的生物学特性进行了测定,结果显示在渗透压为10-20 g/L以及p H为7-8的范围内Car Qo Is Bos 和Car Qo Is DCFs Bos 类抗性菌株的菌落直径和产孢量均显著高于敏感菌株,Car Bos 类菌株与敏感菌株无显著差异;在孢子萌发和致病力方面抗药性菌株与敏感菌株无显著差异,以上结果表明草莓灰霉病菌Car Qo Is Bos 和Car Qo Is DCFs Bos 类抗性菌株相较于敏感菌株对渗透压及p H的敏感性下降。4.为了进一步探究草莓灰霉病菌对嘧菌环胺的抗性机理,通过药剂驯化获得了10株嘧菌环胺抗性菌株,并对甲硫氨酸合成通路中两个关键酶胱硫醚γ合成酶(CGS)和胱硫醚β裂解酶(CBL)的基因序列

关键词：草莓灰霉病菌抗药性监测抗药性机理生物学特性嘧菌环胺

病原菌对Strobilurin类杀菌剂抗药性机理的研究进展

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农药学学报 2008年第1期10卷 1-9页

作者：贾俊超马琳范志金夏倩刘秀峰南开大学元素有机化学国家重点实验室天津300071

结合strobilurin类杀菌剂作用机制的特点,通过室内和田间研究的结果总结了病原菌对该类杀菌剂产生抗药性的主导机制。Strobilurin类杀菌剂主要结合于病原菌细胞色素bc1复合物中细胞色素b部分的Qo位点,而细胞色素b由突变率很高的线粒体... 详细信息

结合strobilurin类杀菌剂作用机制的特点,通过室内和田间研究的结果总结了病原菌对该类杀菌剂产生抗药性的主导机制。Strobilurin类杀菌剂主要结合于病原菌细胞色素bc1复合物中细胞色素b部分的Qo位点,而细胞色素b由突变率很高的线粒体基因组编码,所以病原菌很容易因该基因的突变而导致抗药性发生。至今已至少有14种寄主植物上的25种病原菌在田间表现出了对strobilurin类杀菌剂的抗药性。抗药性产生的主要机理是病原菌细胞色素b的氨基酸残基发生了单点取代。田间抗性菌株的主要取代位点是G143A、F129L和G143R。一些非靶标生物细胞色素b的143位为丙氨酸,这可能是strobilurin类杀菌剂对其表现安全性的原因之一。由于锈病病菌Pucciniaspp.中内含子剪切位点恰好出现在编码G143的GGT之后,G143A的突变会导致突变菌株的死亡,因而它们在田间不会表现出抗药性。此外,Qo抑制剂阻断电子传递后会导致胞内活性氧(ROS)的增加,而ROS可以诱导细胞交替氧化酶(AOX)的表达,进而启动线粒体的旁路氧化途径,使病原菌表现出抗药性。因此,病原菌氨基酸残基的单点取代和交替氧化途径是导致病原菌对strobilurin杀菌剂产生抗药性的主导机制。

关键词： strobilurin类杀菌剂抗药性机理田间抗药性交替氧化酶

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锥虫抗药性机理的新发现

畜牧兽医科技信息 1999年第24期1卷 9-9页

作者：方元

病原体的抗药性是一个日益严重的问题。其机制尚不完全了解。一般认为细胞摄入抗布氏锥虫药大部分是通过一种至今还未识别的腺苷运输者发生的。瑞士热带研究所的Maser等用酿酒酵母以功能筛过的方法克隆了布氏锥虫指名亚种编码一种核苷... 详细信息

病原体的抗药性是一个日益严重的问题。其机制尚不完全了解。一般认为细胞摄入抗布氏锥虫药大部分是通过一种至今还未识别的腺苷运输者发生的。瑞士热带研究所的Maser等用酿酒酵母以功能筛过的方法克隆了布氏锥虫指名亚种编码一种核苷酸运输者的基因—TbAT1。实验证明。

关键词：抗药性机理布氏锥虫酿酒酵母运输者指名亚种分子识别三聚氰胺未识别杀锥虫药诊断和治疗

水稻恶苗病菌对苯并咪唑类杀菌剂抗药性分子机理研究初探

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菌物系统 1997年第3期16卷 235-240页

作者：陆悦健周明国叶钟音 D.W.Hollomon J.A.Butters 南京农业大学植保系南京210095 英国布里斯托尔大学LongAshton研究站

用真菌β-微管蛋白基因的丰余寡聚核着酸引物B1和B3,扩增了一段871bp的水稻恶苗病菌Fusariummoniliforme的β微管蛋白基因片段,进行了克隆和DNA序列测定,并根据该序列设计了Fmoniliformeβ-微管蛋白基因的特异性测序引物。经过对恶苗病... 详细信息

用真菌β-微管蛋白基因的丰余寡聚核着酸引物B1和B3,扩增了一段871bp的水稻恶苗病菌Fusariummoniliforme的β微管蛋白基因片段,进行了克隆和DNA序列测定,并根据该序列设计了Fmoniliformeβ-微管蛋白基因的特异性测序引物。经过对恶苗病菌对多菌灵具有不同抗性水平菌株的β-微管蛋白基因核着酸序的比较研究,表明Fmoniliforme的β微管蛋白的165,198,200和257位置氨基酸末发生突变,在克隆的片段内也未发现能引起氨基酸改变的核着酸突变。说明该菌对多菌灵产生抗性的分子机理与目前已知的其他真菌有所不同,有待进～步研究。

关键词：水稻恶苗病恶苗病菌苯并咪唑抗药性机理

棉铃虫对甲氧虫酰肼的抗药性遗传力及机理研究

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棉铃虫对甲氧虫酰肼的抗药性遗传力及机理研究

作者：刘娟中国农业科学院

学位级别：硕士

棉铃虫Helicoverpa armigera （Hübner）属鳞翅目、夜蛾科,是世界上重要农业害虫之一,广泛分布于世界各地。其寄主范围十分广泛,且容易对药剂产生抗药性,一旦环境条件适宜即可大面积暴发成灾,可对农作物的生产造成严重的威胁。由于长... 详细信息

棉铃虫Helicoverpa armigera （Hübner）属鳞翅目、夜蛾科,是世界上重要农业害虫之一,广泛分布于世界各地。其寄主范围十分广泛,且容易对药剂产生抗药性,一旦环境条件适宜即可大面积暴发成灾,可对农作物的生产造成严重的威胁。由于长期依赖化学农药防治棉铃虫,导致其对有机氯、有机磷、氨基甲酸酯、拟除虫菊酯类杀虫剂都已产生了不同程度的抗药性。甲氧虫酰肼是一种对棉铃虫具有较好防治效果的昆虫生长调节剂类杀虫剂,目前已得到广泛应用。本文以棉铃虫作为研究对象,研究其对甲氧虫酰肼的交互抗性、抗性现实遗传力以及抗性机理,旨在评价棉铃虫对该药剂的抗药性风险和抗药性治理策略的制定提供理论依据。1.棉铃虫对甲氧虫酰肼的抗药性选育以及对不同杀虫剂的交互抗性在室内,抗性种群（R2）共被饲养35代,用甲氧虫酰肼处理了31代。LC50值由13.61μg/mL上升到416.07μg/mL,抗性倍数达到30.57倍。敏感种群经过4代反汰选,其余31代自然饲养,LC50值从13.61μg/mL下降到5.73μg/mL。通过抗性汰选和敏感性反汰选,获得了对甲氧虫酰肼抗性指数相差72.61倍的棉铃虫抗性种群（R2）和敏感种群（S）。采用浸叶法测定了棉铃虫对12种常用杀虫剂的交互抗性。结果表明抗性种群对虫酰肼产生了13.57倍的中等水平交互抗性;对茚虫威的抗性倍数为3.05倍,具有低等水平交互抗性;而对辛硫磷、毒死蜱、灭多威、高效氯氰菊酯、溴氰菊酯、溴虫腈、虱螨脲、氟啶脲、氟铃脲和甲氨基阿维菌素苯甲酸盐的抗性倍数在0.50倍.36倍之间,无交互抗性。试验结果提示,在棉铃虫的抗药性治理中,轮换使用与甲氧虫酰肼没有交互抗性的杀虫剂将可有效延缓其抗药性发展。2.棉铃虫对甲氧虫酰肼的抗药性遗传力采用阈性状分析方法,估算了棉铃虫抗性选育种群（R1, 32.99倍）对甲氧虫酰肼的抗性现实遗传力,并通过不同致死率下抗性发展速率的变化,评估了棉铃虫对该药剂的抗药性风险。结果表明,在整个抗性选育期间,棉铃虫对甲氧虫酰肼的抗性现实遗传力（h2）为0.0830,在筛选的前、中、后期,h2分别为0.0715、0.0768和0.0947。在室内筛选条件下,假设斜率=2.0 （δp=0.5）,现实遗传力为室内估计值的一半,当杀死率为80%和90%时,棉铃虫对甲氧虫酰肼的抗性增加10倍,分别需要34.48代和27.40代。在田间条件下,由于等位基因频率变化、环境变异等因素的影响,抗性增加10倍则需要更长的时间。在田间恰当地控制甲氧虫酰肼的使用次数,有利于该药剂长期有效地防治棉铃虫。3.棉铃虫对甲氧虫酰肼的抗药性机理利用抗性种群（R2）和敏感种群（S）进行的增效剂活体增效试验结果表明:在抗性种群中,增效醚（PBO）、脱叶磷（DEF）和顺丁烯二酸二乙酯（DEM）均对甲氧虫酰肼具有显著的增效作用,增效比分别为2.76、3.15和6.14,而在敏感种群中均无增效作用。离体酶比活性测定结果发现,与敏感种群相比,多功能氧化酶、全酯酶和谷胱甘肽-S-转移酶的比活力都显著增强,而乙酰胆碱酯酶的比活力在两个种群间无显著性差异。上述结果表明,棉铃虫对甲氧虫酰肼产生抗药性与多功能氧化酶、全酯酶和谷胱甘肽-S-转移酶的活性提高有关,与乙酰胆碱酯酶的活性变化关系不大。

关键词：棉铃虫甲氧虫酰肼交互抗性现实遗传力抗药性机理

高通量测序技术在害虫和害螨抗药性研究中的应用

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植物保护学报 2022年第1期49卷 383-388页

作者：杨静张愉英高越刘中芳张鹏九史高川周序国范仁俊山西农业大学植物保护学院农业有害生物综合治理山西省重点实验室太原030031 湖南农业大学植物保护学院长沙410125 山西农业大学果树研究所太谷030815 肯塔基大学昆虫系美国肯塔基州40546

螨类是陆生动物中仅次于昆虫的第2大类群。长期以来,对害螨抗药性的研究都落后于害虫。近年来,随着高通量测序技术的出现,开辟了害虫和害螨抗性机理研究和抗性监测的新局面。本文概述了高通量测序技术应用于害虫和害螨抗药性机理研究已... 详细信息

螨类是陆生动物中仅次于昆虫的第2大类群。长期以来,对害螨抗药性的研究都落后于害虫。近年来,随着高通量测序技术的出现,开辟了害虫和害螨抗性机理研究和抗性监测的新局面。本文概述了高通量测序技术应用于害虫和害螨抗药性机理研究已取得的进展,介绍了利用高通量测序技术开发的抗药性监测新方法,并提出了害虫和害螨抗药性机理研究和田间种群抗性水平监测的发展方向。

关键词：高通量测序技术抗药性机理抗药性监测害虫害螨

磷酸酯酶与乙酰胆碱酯酶在棉铃虫对辛硫磷抗药性中的作用(英文)

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Insect Science 2001年第1期8卷 55-62页

作者：汤锋岳永德花日茂安徽农业大学植物保护系!合肥230036

利用人工选育的方法 ,获得了棉铃虫对辛硫磷的抗药性品系和相对敏感品系 ,其对辛硫磷的LD50分别为 1 1 .0 574μg/虫和 0 .9790 μg/虫。以生物测定与生化测定的方法 ,比较了两品系的差异。增效剂活体试验测定结果表明 ,磷酸三苯酯、增... 详细信息

利用人工选育的方法 ,获得了棉铃虫对辛硫磷的抗药性品系和相对敏感品系 ,其对辛硫磷的LD50分别为 1 1 .0 574μg/虫和 0 .9790 μg/虫。以生物测定与生化测定的方法 ,比较了两品系的差异。增效剂活体试验测定结果表明 ,磷酸三苯酯、增效磷对棉铃虫三龄幼虫均表现出一定的增效作用 ,但在两品系间的增效作用存在差异 ,对相对敏感品系的增效倍数分别为 2 .2 7倍、2 .1 3倍 ,对抗性品系的增效倍数分别为 6.93倍和 6.43倍。磷酸酯酶活性测定结果表明 ,抗性品系的酶活力分别是相对敏感品系的1 6.67倍 (碱性 )和 1 .89倍 (酸性 ) ,Km 和Vmax则分别为 0 .76倍、2 .64倍 (碱性 )和 1 .38倍、1 .78倍 (酸性 ) ;而羧酸酯酶的活性则差异不大。对靶标酶乙酰胆碱酯酶的活性测定表明 ,与相对敏感品系相比 ,抗性品系酶活性显著增强 ,并且对杀虫剂的亲和力降低 ,说明乙酰胆碱酯酶在棉铃虫对辛硫磷的抗药性中也有着重要的作用

关键词：棉铃虫辛硫磷抗药性机理磷酸酯酶乙酰胆碱酯酶