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飞扬草抗腹泻有效成分的筛选及其机制的初步研究

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飞扬草抗腹泻有效成分的筛选及其机制的初步研究

作者：张晓萌东北农业大学

学位级别：硕士

随着畜牧业的集约化和规模化发展,腹泻作为多种疾病的伴随症状,越来越多发,通常会阻碍畜禽生长发育,甚至引起死亡,因此,腹泻的防治已成为畜牧养殖业亟需解决的难题。日前治疗腹泻主要借助于抗菌药物,但使用这类药物有很多隐患,因此从更... 详细信息

随着畜牧业的集约化和规模化发展,腹泻作为多种疾病的伴随症状,越来越多发,通常会阻碍畜禽生长发育,甚至引起死亡,因此,腹泻的防治已成为畜牧养殖业亟需解决的难题。日前治疗腹泻主要借助于抗菌药物,但使用这类药物有很多隐患,因此从更健康的天然中药中寻找抗腹泻药为重中之重。飞扬草为大戟科大戟属植物飞扬草(Euphorbia hirta L.)的干燥全草,在民间医药中被广泛用于抗菌、抗癌、抗炎和抗腹泻等。此前有研究发现槲皮苷是飞扬草抗腹泻的有效成分之一,但未通过生物活性导向分离出其它有效成分。因此,本实验在对飞扬草中总黄酮的提取工艺优化的基础上,利用生物活性导向追踪抗腹泻作用的主要活性成分,并对其抗腹泻活性与离子通道的关系进行了初步探究,为飞扬草在抗腹泻方面的临床应用奠定了理论基础。具体研究内容如下:(1)飞扬草总黄酮提取工艺的优化。以总黄酮提取率为考察指标,在单因素实验基础上,采用三水平四变量的Box-Benken设计的响应面法对飞扬草的总黄酮提取工艺进行了优化。优化得到最佳提取工艺条件为提取温度91℃、乙醇浓度55%、料液比1:30、提取时间184min,提取2次。在此条件下,总黄酮测定含量为6.32±0.47%,与预测值6.26%接近。(2)飞扬草抗腹泻药效物质基础的研究。建立蓖麻油腹泻模型,以腹泻抑制率为考察指标,对飞扬草总黄酮进行活性成分追踪。先依次用乙酸乙酯、正丁醇进行萃取,腹泻抑制率表明乙酸乙酯部位活性最强(腹泻抑制率44.9%)。再用D101大孔吸附树脂进一步富集有效部位,发现30%乙醇洗脱部位的抗腹泻效果最显著(P抗腹泻活性及机制的初步研究。采用三个不同剂量的槲皮苷和异槲皮苷对其抗腹泻活性、炎性活性和对离子通道的作用进行了评价,结果显示,与腹泻模型组相比,槲皮苷和异槲皮苷各剂量组都可以减少稀便数、抑制炭粉的推进距离、减少小肠积液量,并且异槲皮苷的抗腹泻作用优于槲皮苷。通过q RT-PCR检测发现,相比腹泻模型组,槲皮苷和异槲皮苷组的抗炎因子TNF-α、IL-1β和IL-6 m RNA水平都降低,而离子通道中NHE1、NHE2、NHE3、AQP4、SGLT1的表达都上调,而CFTR的表达下调且程度最大。因此,用Autodock 4.2软件进一步对槲皮苷和异槲皮苷与CFTR结合能力进行预测,结果显示槲皮苷和异槲皮苷都与NBD1和NBD2位点有一定的结合力,但异槲皮苷与NBD2的结合力更强,从而初步推断槲皮苷和异槲皮苷主要通过结合到CFTR上的NBD1和NBD2来发挥抗腹泻作用。本研究不仅确定了飞扬草抗腹泻的主要有效成分,还对其抗腹泻机制进行了探讨,为飞扬草有效成分体内药动学、药代学研究提供了前提,也为飞扬草质量控制方法的建立奠定了基础,为中药现代化做了有意义的探索。

关键词：飞扬草提取工艺抗腹泻异槲皮苷 CFTR

利用兔离体肠模型研究山莓叶的抗腹泻作用机理

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现代食品科技 2015年第8期31卷 18-24页

作者：张瑞莲刘晓娟张苗熊平陈雪香曹庸华南农业大学食品学院广东广州510642 华南农业大学资源与环境学院广东广州510642

以山莓叶醇提物(RE)和对羟基肉桂酸乙酯(EC,活性跟踪分离到的山莓叶中活性较强的物质)为材料,以兔离体肠运动为模型,研究了RE和EC抑制肠管运动的剂量效应,同时考察了RE和EC分别与抗腹泻相关的4个关键通道的4种致痉剂(乙酰胆碱、酚妥拉... 详细信息

以山莓叶醇提物(RE)和对羟基肉桂酸乙酯(EC,活性跟踪分离到的山莓叶中活性较强的物质)为材料,以兔离体肠运动为模型,研究了RE和EC抑制肠管运动的剂量效应,同时考察了RE和EC分别与抗腹泻相关的4个关键通道的4种致痉剂(乙酰胆碱、酚妥拉明、组胺和氯化钡)对肠管运动的影响。结果表明:RE浓度为1~10 mg/m L范围内,肠管的张力增量变化率(TVP)均为30%以上,且RE浓度为4 mg/m L时,TVP达到45.37%;浓度10~800μg/m L范围内,EC对肠管运动的抑制作用均极显著高于阿托品(P抗腹泻的高效的多靶点药物,且RE中的EC的抗腹泻效果极显著优于阿托品。

关键词：山莓叶兔离体肠抗腹泻作用机理

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复方白黄散胶囊的抗炎和抗腹泻作用研究

当代畜禽养殖业 2022年第4期 7-9页

作者：崔潇婷洪伟鸣王榕许瑞江苏农牧科技职业学院动物药学院江苏泰州225300

为了研究复方白黄散胶囊的抗炎和抗腹泻作用,本试验通过采用大鼠炎症和腹泻模型,对复方白黄散胶囊进行初步药效学研究。在抗炎试验中,复方白头翁胶囊能显著抑制二甲苯所致的小鼠耳肿胀和蛋清所致的大鼠足趾肿胀,但对棉球导致的肉芽肿作... 详细信息

为了研究复方白黄散胶囊的抗炎和抗腹泻作用,本试验通过采用大鼠炎症和腹泻模型,对复方白黄散胶囊进行初步药效学研究。在抗炎试验中,复方白头翁胶囊能显著抑制二甲苯所致的小鼠耳肿胀和蛋清所致的大鼠足趾肿胀,但对棉球导致的肉芽肿作用不强。在抗腹泻试验中,能显著抑制小鼠由蓖麻油和番泻叶引起的腹泻,且腹泻指数明显下降。综上所述,复方白黄散胶囊对实验动物的炎症和腹泻都有较好的治疗作用。

关键词：复方白黄散胶囊抗炎抗腹泻

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葛根多糖提取工艺及抗腹泻小鼠活性研究

中国食品工业 2023年第12期 95-99页

作者：王高峰贵州工程职业学院铜仁德江565200

通过响应面法优化葛根多糖提取工艺,并对抗小鼠腹泻活性进行研究。采用苯酚-硫酸法对葛根多糖进行定量分析,以多糖得率为指标,分别考察料液比、提取时间、提取温度和提取次数对葛根多糖提取效果的影响,在单因素试验的基础上,运用响应面... 详细信息

通过响应面法优化葛根多糖提取工艺,并对抗小鼠腹泻活性进行研究。采用苯酚-硫酸法对葛根多糖进行定量分析,以多糖得率为指标,分别考察料液比、提取时间、提取温度和提取次数对葛根多糖提取效果的影响,在单因素试验的基础上,运用响应面法进行4因素3水平设计,得到葛根多糖的最佳提取工艺。采用番泻叶灌胃法建立小鼠腹泻模型。试验分为空白组、模型组、葛根多糖低(1g/kg)、中(2g/kg)、高剂量组(4g/kg)和盐酸哌洛丁胺胶囊阳性药对照组(32 mg/kg)。以1-6h的腹泻次数、肠推进率来评价葛根多糖的抗腹泻作用。结果显示,响应面法优化所得的最佳提取条件为料液比1∶29.76(mL/g),提取温度79.80℃,提取时间60.54 min,提取功率179.24W,在此条件下多糖提取率为16.16%。番泻叶显著增加小鼠腹泻次数,葛根多糖高、中剂量组和阳性药对照组小鼠在用药后4-6h的腹泻次数明显少于生理盐水组(P抗腹泻作用。葛根多糖高、中剂量组和阳性药对照组显著抑制肠推进率(P0.05)。结论:单因素考察结合响应面法对葛根多糖的提取条件优化合理,葛根多糖可显著改善番泻叶所致腹泻,对正常小鼠的肠推进具有明显的抑制作用,葛根多糖具有良好的抗腹泻作用,该研究为后续葛根多糖的开发利用奠定了良好的基础。

关键词：葛根多糖响应面法抗腹泻

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三叶木通果皮粗提物的抗腹泻效用研究

现代畜牧科技 2023年第11期 57-59页

作者：田明湖南省湘西民族职业技术学院湖南吉首416000

目的:研究三叶木通果皮采用不同粗提方法得到的粗提物对腹泻的效用研究。方法:三叶木通成熟果实去果肉后将果皮切碎,在80℃条件下烘干至质量达初始质量的10%。将烘干物进行粉碎处理,将粉碎粒度大小控制在40目以下。步骤1:粉料与蒸馏水按... 详细信息

目的:研究三叶木通果皮采用不同粗提方法得到的粗提物对腹泻的效用研究。方法:三叶木通成熟果实去果肉后将果皮切碎,在80℃条件下烘干至质量达初始质量的10%。将烘干物进行粉碎处理,将粉碎粒度大小控制在40目以下。步骤1:粉料与蒸馏水按1∶10(m/v)100℃提取2 h后过滤,重复3次。将部分滤液60℃脱水处理得到样品1;处理步骤2:将步骤1中滤液进行适度脱水后,加入无水乙醇,直至乙醇终浓度为80%,60℃回流搅拌提取4 h,过滤除渣,将上清液回收,并真空干燥至含水量10%以下,得到样品2;处理步骤3:取步骤1所述的水提溶液1∶1加入正丁醇进行萃取12 h处理,连续萃取3次,将萃取得到的正丁醇溶液真空干燥除去溶剂,得到样品3。将得到的样品1、样品2、样品3进行以动物模型为基础的药学检测。结果:与腹泻模型组相比,阳性对照组、Y1组、Y2组、Y3组湿便数量都显著低于腹泻模型组(P腹泻时间都显著延后(P腹泻情况,减少排泄湿便的数量,并且推迟其腹泻发生的时间。由此看,Y1、Y2、Y3均有明显的止泻效果。

关键词：三叶木通果皮粗提物抗腹泻效用

苏淮猪抗腹泻MUC13基因rs319699771位点多态性及其与经济性状的关联

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中国农业科学 2019年第8期52卷 1449-1457页

作者：刘晨曦王彬彬蒲广张倩曹旸王欢高琛牛培培李平华黄瑞华南京农业大学养猪研究所/动物科技学院淮安市南农大新农村发展研究有限公司南京农业大学淮安研究院

【背景】MUC13基因是调控致使仔猪断奶前腹泻的产肠毒素大肠杆菌F4ac感染的主效基因,该基因上rs319699771位点(G/A突变)能准确鉴别易感和抗性个体,其中GG型是抗腹泻基因型,苏淮猪抗腹泻性能分子选育是通过选留GG型个体来实现。但在选留... 详细信息

【背景】MUC13基因是调控致使仔猪断奶前腹泻的产肠毒素大肠杆菌F4ac感染的主效基因,该基因上rs319699771位点(G/A突变)能准确鉴别易感和抗性个体,其中GG型是抗腹泻基因型,苏淮猪抗腹泻性能分子选育是通过选留GG型个体来实现。但在选留抗腹泻GG型个体时是否会对苏淮猪其它重要经济性状如生长、胴体、肉质产生不利影响尚未明晰。【目的】旨在分析该位点是否与其它性状关联,以确定基于MUC13基因rs319699771位点抗腹泻性能的分子选育是否会对苏淮猪其它经济性状产生不利影响。【方法】以313头体重为87.61±0.54 kg的苏淮育肥猪为试验动物,屠宰测定其胴体和肉质性状,以261头日龄为161.1±0.5 d苏淮后备猪为试验动物,测定其生长、体尺性状,同时采集相应苏淮育肥猪和后备猪群耳组织样提取组织DNA,经过多重PCR反应进行MUC13基因rs319699771位点多态性检测,采用SAS软件中一般线性模型分析MUC13基因rs319699771位点多态性基因型和苏淮猪肉质、胴体和生长性状的关联性。【结果】MUC13基因rs319699771位点多态性检测结果显示,苏淮猪育肥群公、母猪群体MUC13基因rs319699771位点的抗腹泻G等位基因频率分别为0.695和0.634,抗腹泻优势GG型频率在苏淮猪育肥群公、母群体中分别为0.467和0.373;该位点抗腹泻G等位基因频率在苏淮后备群公、母猪群体分别为0.690和0.705,抗腹泻优势GG型频率在后备群公、母猪群体中分别为0.508和0.480,说明苏淮猪抗腹泻等位基因频率较高,通过分子选育提升苏淮猪抗腹泻GG型频率的可行性强。MUC13基因rs319699771位点多态性与苏淮猪经济性状关联分析结果显示:育肥猪群体该位点多态性与胴体、肉质性状均无显著关联(P>0.05),可见在苏淮猪育肥猪群体内加大对抗腹泻MUC13基因rs319699771位点的选育不会影响到苏淮育肥猪的胴体和肉质性状;苏淮后备猪群体该位点多态性与腿臀围指标存在极显著关联(P抗腹泻选育的同时还可以提升苏淮后备猪生长相关性状。【结论】据此,苏淮猪群体MUC13基因rs319699771位点抗腹泻等位基因频率较高,进行抗腹泻选育的可行性强,同时对于苏淮猪群体,不仅可通过选留提升MUC13基因rs319699771位点GG型频率来提高抗腹泻能力,还能同时实现对苏淮猪群腿臀围、日增重的选育提升。

关键词：苏淮猪 MUC13基因抗腹泻经济性状关联性分析

抗小儿腹泻中药复方宝泻宁提取工艺的优化研究

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中山大学学报（自然科学版） 2015年第2期54卷 101-105页

作者：刘静周盈利王婵娟徐月红张克坚王冬梅中山大学药学院广东广州510006 广东华南新药创制中心广东广州510663 广东省现代中药工程技术研究开发中心广东广州510006

为优化并建立抗小儿腹泻中药复方宝泻宁(BXN)的提取工艺,采用回流提取法,以吴茱萸碱、吴茱萸次碱、丁香酚、桂皮醛的转移率为考察指标,选择不同浓度乙醇为提取溶媒,选定溶媒含醇量、料液比、提取时间、提取次数为考察因素,采用L9(34)正... 详细信息

为优化并建立抗小儿腹泻中药复方宝泻宁(BXN)的提取工艺,采用回流提取法,以吴茱萸碱、吴茱萸次碱、丁香酚、桂皮醛的转移率为考察指标,选择不同浓度乙醇为提取溶媒,选定溶媒含醇量、料液比、提取时间、提取次数为考察因素,采用L9(34)正交表进行BXN的提取工艺的优化。综合考虑各指标成分转移率及工业应用的方便、经济,经工艺验证,选定采用10倍量的φ=95%乙醇回流提取2次,每次提取2 h为优选工艺,该方法可有效提取BXN中的有效成分,4个指标成分的转移率均在80%以上,并具有稳定、经济、便捷的优点。

关键词：中药复方BXN 抗腹泻提取正交试验

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运脾止泻颗粒抗腹泻主要药效学研究

北京中医药大学学报 2005年第5期28卷 60-62页

作者：郭健杨燕赵淑英席时芳北京中医药大学基础医学院北京100029

目的观察运脾止泻颗粒抗腹泻的主要药效。方法小鼠随机分为4组,运脾小、大剂量组,空白组,阳性对照组(脾可欣)。各组预防性给药,连续灌胃6d;观察运脾止泻颗粒对正常小鼠胃排空、小肠推进的影响,对新斯的明导致小鼠小肠运动亢进的影响,对... 详细信息

目的观察运脾止泻颗粒抗腹泻的主要药效。方法小鼠随机分为4组,运脾小、大剂量组,空白组,阳性对照组(脾可欣)。各组预防性给药,连续灌胃6d;观察运脾止泻颗粒对正常小鼠胃排空、小肠推进的影响,对新斯的明导致小鼠小肠运动亢进的影响,对番泻叶所致腹泻的影响。结果运脾止泻颗粒对正常胃排空没有影响,运脾大、小剂量组能抑制正常小肠和新斯的明所致亢进小肠的推进速度,运脾小剂量组对番泻叶引起腹泻有明显对抗作用。结论运脾止泻颗粒具有抗腹泻作用。

关键词：运脾止泻颗粒抗腹泻胃排空小肠推进肠运动亢进

鸡源益生菌JM-11菌株的胃肠道耐受及其抗腹泻的研究

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中国农学通报 2011年第7期27卷 338-342页

作者：郝庆红郭云霞吴国江王世英朱宝成河北农业大学生命科学学院河北保定071001

试验从健康的鸡盲肠内容物中筛选出具有较高抑菌活性的病源拮抗菌JM-11菌株,经形态、生理生化及16S rDNA序列鉴定此菌为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis subsp.subtilis)。经耐受胃肠道环境及胆盐试验,结果表明,JM-11菌株能耐受0.3%的... 详细信息

试验从健康的鸡盲肠内容物中筛选出具有较高抑菌活性的病源拮抗菌JM-11菌株,经形态、生理生化及16S rDNA序列鉴定此菌为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis subsp.subtilis)。经耐受胃肠道环境及胆盐试验,结果表明,JM-11菌株能耐受0.3%的胆盐环境,在pH为3.0的人工胃液中能够很好的存活。利用抗生素打乱雏鸡肠道菌群后,饲喂致病性大肠杆菌来制作腹泻模型。经益生菌JM-11对腹泻雏鸡的治疗试验结果显示,JM-11能显著降低腹泻雏鸡粪便中的大肠杆菌的数量(P<0.01),增加乳酸菌的数量(P<0.01),提高雏鸡免疫器官指数(P<0.05),对雏鸡具有安全无毒的作用。

关键词：鸡抗腹泻益生菌耐受性