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金线莲多糖结构分析及抗糖尿病活性研究

金线莲多糖结构分析及抗糖尿病活性研究

作者：张晓辉汕头大学

学位级别：硕士

糖尿病（MD）是一种内分泌代谢性疾病,因病程长且无特效药,已成为当今威胁人类健康的主要疾病之一。抗糖尿病活性金线莲多糖的研究可为糖尿病的防治提供一种安全、可靠的途径。目前关于金线莲防治糖尿病活性成分的探讨及防治机理的研究... 详细信息

糖尿病（MD）是一种内分泌代谢性疾病,因病程长且无特效药,已成为当今威胁人类健康的主要疾病之一。抗糖尿病活性金线莲多糖的研究可为糖尿病的防治提供一种安全、可靠的途径。目前关于金线莲防治糖尿病活性成分的探讨及防治机理的研究还处于起步阶段,有关活性成分的分子结构及作用机理尚鲜见报道。本论文提取分离了金线莲多糖,对该多糖的结构特征进行了初步分析;体外实验检测了金线莲多糖的抗氧化能力和对α-葡萄糖苷酶抑制作用;体内实验考察了金线莲多糖抗糖尿病活性,初步探讨其作用机制。本论文分为四部分: （1）金线莲多糖的提取和分离纯化用超声波辅助水提取醇沉法获得金线莲多糖（PSA）,采用离子交换柱层析和葡聚糖凝胶柱层析纯化后获得PSA-1和PSA-2两组分。分析表明,PSA-1是一种蛋白多糖,分子量为14208Da,蛋白含量为0.44%;PSA-2中不含有蛋白质,分子量为17787 Da。（2）多糖结构分析经红外光谱分析可知,PSA-1和PSA-2的官能团区具有一致的吸收峰,指纹区存在一定差异;GC法检测分析PSA-1由6种单糖组成,分别是鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、半乳糖和葡萄糖;PSA-2由半乳糖和葡萄糖两种单糖组成;应用高碘酸氧化、碘-碘化钾反应等化学方法和紫外光谱法分析表明:PSA-1和PSA-2均含有1→2、1→2,6、1→4、1→4,6等键型,不存在三股螺旋构象,存在较长的侧链及较多的分支,PSA-1中蛋白部分与糖链以-O-连接。（3）体外试验PSA,PSA-1和PSA-2均具有较强清除DPPH·、·OH和O2-·自由基作用和还原能力;体外抑制α-葡萄糖苷酶活性试验表明PSA具有抑制α-葡萄糖苷酶活性的作用,IC50值为27.01μg/mL。（4）采用四氧嘧啶诱导糖尿病小鼠模型,灌胃不同剂量PSA,通过测定实验小鼠血糖及各生化指标分析PSA治疗糖尿病的功效。试验14 d后,灌胃PSA的DM小鼠,血糖明显下降（p＜0.05）,血清TC、TG和LDL-C含量均明显降低（p＜0.05）,HDL-C含量明显升高,血清及组织中MDA含量明显降低,抗氧化酶（SOD、GSH-Px和T-AOC）活性明显增强（p＜0.05）;血糖和血脂水平变化及抗氧化酶活性变化与PSA存在量效关系;小鼠组织（胰脏,肝脏,肾脏,心脏）病理学切片结果显示,小鼠组织损伤减少或被修复。以上结果提示,金线莲多糖可从提高机体的抗氧化能力、降低血脂水平、减少胰脏和肝肾等组织的损伤或促进受损组织修复等多途径发挥其抗糖尿病作用,表明金线莲对防治糖尿病有良好的应用价值。

关键词：金线莲多糖结构分析抗糖尿病作用组织病理学抗氧化

厚朴酚对高脂饲料-STZ 诱导的糖尿病大鼠血糖血脂及肝脏氧化应激损伤的影响 (英文)

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药学学报 2014年第4期49卷 476-481页

作者：王俊俊赵容梁继超陈勇湖北大学中药生物技术省重点实验室湖北武汉430062

本文研究了厚朴酚对高脂饲料-链脲佐菌素诱导的2型糖尿病大鼠高血糖、高血脂、肝脏氧化应激和CYP2E1活性的影响。与糖尿病模型组相比,连续给予厚朴酚(25、50和100 mg·kg-1·d-1,灌胃)10周后,其血糖、血脂(TC、TG和LDL-C)及肝脏CYP2E1... 详细信息

本文研究了厚朴酚对高脂饲料-链脲佐菌素诱导的2型糖尿病大鼠高血糖、高血脂、肝脏氧化应激和CYP2E1活性的影响。与糖尿病模型组相比,连续给予厚朴酚(25、50和100 mg·kg-1·d-1,灌胃)10周后,其血糖、血脂(TC、TG和LDL-C)及肝脏CYP2E1活性和MDA含量显著降低,口服糖耐量和肝脏抗氧化酶(CAT和GSH-Px)活性显著增加。研究结果不仅证明厚朴酚对高脂饲料-链脲佐菌素诱导的2型糖尿病大鼠的高血糖、高血脂、肝脏氧化应激损伤有明显治疗作用,而且厚朴酚对糖尿病大鼠肝脏CYP2E1活性的抑制作用可能是其拮抗糖尿病所致肝脏氧化损伤及胰岛素抵抗的重要机制之一。

关键词：厚朴酚高脂-STZ诱导的糖尿病大鼠抗糖尿病作用氧化应激 CYP2E1活性

Fuscoporiaoblique对糖尿病小鼠的作用

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国外医学（中医中药分册） 2005年第2期27卷 107-107页

作者：赵瑞

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甘薯的化学成分研究

中草药 2007年第4期38卷 508-510页

作者：尹永芹罗建光孔令义中国药科大学天然药物化学教研室江苏南京210038

甘薯Ipomoea batatas Lam.为旋花科甘薯属植物,在我国大部分地区均有种植,资源丰富。甘薯性微凉,味甘、涩,有补中、生津、止血、排脓之功效。近年来的一些实验研究证明,甘薯具有一定的抗糖尿病作用,同时还有抗肿瘤、增强免疫功能等作用... 详细信息

甘薯Ipomoea batatas Lam.为旋花科甘薯属植物,在我国大部分地区均有种植,资源丰富。甘薯性微凉,味甘、涩,有补中、生津、止血、排脓之功效。近年来的一些实验研究证明,甘薯具有一定的抗糖尿病作用,同时还有抗肿瘤、增强免疫功能等作用,具有广阔的开发前景。本课题组对巴西甘薯的化学成分进行了研究,为比较国产甘薯和巴西甘薯化学成分的差异,寻找巴西甘薯的替代资源提供依据,本实验对国产甘薯进行了化学成分研究。国产甘薯块茎乙醇提取物的氯仿和醋酸乙酯萃取部位经反复硅胶等柱色谱分离,得到8个化合物,经理化性质和波谱分析鉴定为木栓酮(friedelin,Ⅰ)、胡萝卜苷(daucosterol,Ⅱ)、β-谷甾醇(B-sistosterol,Ⅲ)、东莨菪素(scopoletin,Ⅳ)、咖啡酸十八烷酯(octadecyl caffeate,Ⅴ)、枸橼苦素(citrusin C,Ⅵ)、2,3,4,9-四氢β-咔啉-3-羧酸(2,3,4,9-tetrahydro-1H-pyrodo[3,4-b]indole-3-carboylicacid,Ⅶ)和2,4-二羟基苯丙烯酸(2,4-dihydroxy cinnamic acid,Ⅷ)。此8个化合物均首次从该植物中分离得到。[第一段]

关键词：化学成分甘薯柱色谱分离抗糖尿病作用增强免疫功能醋酸乙酯萃取实验研究替代资源

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天花粉降血糖活性成分的分离和活性观察

中成药 2011年第12期33卷 2175-2178页

作者：李晓芳叶小利李平王小华冯平汪运何凤玲蒲东李学刚西南大学药学院重庆400716 西南大学生命科学学院重庆400715 重庆北碚区中医院重庆400700

目的对天花粉降血糖的活性成分进行分离和活性观察。方法用醇超声、醇回流、水超声提取方法制备3种天花粉提取物,以四氧嘧啶糖尿病小鼠模型对其降血糖的活性进行考察,对其中活性较强者进一步通过大孔吸附树脂和硅胶柱色谱进行活性成分分... 详细信息

目的对天花粉降血糖的活性成分进行分离和活性观察。方法用醇超声、醇回流、水超声提取方法制备3种天花粉提取物,以四氧嘧啶糖尿病小鼠模型对其降血糖的活性进行考察,对其中活性较强者进一步通过大孔吸附树脂和硅胶柱色谱进行活性成分分离,并通过细胞模型计算和比较其对细胞葡萄糖的消耗量。结果醇超声提取方法具有良好的降血糖功效及改善糖尿病"三多一少"症状,其中80%洗脱组分对细胞葡萄糖消耗量相对较大,与模型组及其它洗脱组分比较具有显著差异(P<0.001);进一步分离得到化合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ,其中化合物Ⅰ对细胞葡萄糖消耗量与模型组比较具有显著差异(P<0.05)。结论醇超声提取物80%洗脱组分为天花粉降血糖的活性成分,其中化合物Ⅰ可能为天花粉降血糖的一个活性化合物,具体结构有待进一步深入探讨。

关键词：天花粉抗糖尿病作用活性组分成分

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金芪降糖片对初发2型糖尿病胰岛功能的影响

天津医药 2005年第5期33卷 294-296页

作者：裴玉梅田金莉张雅中张禾伟河北省唐山市工人医院内分泌科 063000

目的:探讨金芪降糖片与盐酸吡格列酮对初发2型糖尿病患者胰岛功能的影响。方法:120例入选患者随机分为金芪降糖片组(A组)、盐酸吡格列酮组(B组)和金芪降糖片联合盐酸吡格列酮组(C组),疗程为12周。分别测定3组治疗前后空腹血糖(FPG)及餐... 详细信息

目的:探讨金芪降糖片与盐酸吡格列酮对初发2型糖尿病患者胰岛功能的影响。方法:120例入选患者随机分为金芪降糖片组(A组)、盐酸吡格列酮组(B组)和金芪降糖片联合盐酸吡格列酮组(C组),疗程为12周。分别测定3组治疗前后空腹血糖(FPG)及餐后2h血糖(2hPG)、空腹胰岛素水平(FINS),比较胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)及β细胞功能指数(HOMA-IS)。结果:3组治疗后FPG、2hPG和HOMA-IR治疗后低于治疗前,HOMA-IS高于治疗前,A组与B组比较差别无统计学意义(P>0.05),C组与A组和B组比较差别有统计学意义(P抗可能是金芪降糖片抗糖尿病作用的主要机制之一。

关键词：金芪降糖片胰岛功能初发盐酸吡格列酮 2型糖尿病患者胰岛素抵抗指数餐后2h血糖抗糖尿病作用 HOMA 胰岛素水平空腹血糖治疗前后功能指数 2hPG 治疗后统计学 B组 12周 B细胞 FPG c组差别

茶叶中活性物质对小麦淀粉消化性的影响及机理研究

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茶叶中活性物质对小麦淀粉消化性的影响及机理研究

作者：李柳静天津科技大学

学位级别：硕士

大量研究表明,儿茶素可以降低淀粉的消化性,从而对2型糖尿病有着预防的作用,而对于系统地比较并研究绿茶、红茶、乌龙茶和白茶四种茶叶对淀粉消化性和α-淀粉酶的影响及其具体机制的研究较少,本课题采用水提方式提取茶叶中的活性物质,... 详细信息

大量研究表明,儿茶素可以降低淀粉的消化性,从而对2型糖尿病有着预防的作用,而对于系统地比较并研究绿茶、红茶、乌龙茶和白茶四种茶叶对淀粉消化性和α-淀粉酶的影响及其具体机制的研究较少,本课题采用水提方式提取茶叶中的活性物质,通过测定淀粉消化性、酶活、酶动力学以及活性物质与α-淀粉酶的结合与解离一系列实验对其中的机理进行了探索,详细实验结果如下:四种茶叶提取物的添加都会抑制淀粉消化,降低淀粉体外消化的一阶动力学参数C∞和k值,红茶提取物（BTE）的抑制作用最强,C∞由75.5%降至49.5%,其次是乌龙茶（OTE）、白茶（WTE）、绿茶提取物（GTE）,在酶活实验中,空白样品的酶活0.46 units,BTE存在时酶活降至0.27 units,GTE、OTE和WTE相差不大,分别为0.38 units,0.38 units和0.40 units。研究表明BTE以竞争性和非竞争性混合的方式抑制α-淀粉酶。BTE对α-淀粉酶的猝灭常数KFQ和结合常数Ka均最大,分别为3 0.2 mL/mg和281.8 mg/mL,四种茶叶提取物与酶的结合位点n均为1,说明茶叶提取物能与α-淀粉酶的活性位点结合,改变酶的结构,导致酶活的降低,进而抑制淀粉的消化,BTE的抑制效果最强。表面等离子共振实验结果表明,BTE虽与α-淀粉酶的结合速率较慢,但结合得强,导致二者解离速度更加慢,相比GTE与酶的结合快,解离更快,BTE与酶的亲和力则更强于GTE,导致了更强的抑制效果。皮尔逊相关性分析表明α-淀粉酶与茶叶提取物的亲和力越大,酶活越低,可水解的淀粉比例就越小。为了能够更加清楚四种茶叶提取物对淀粉消化性抑制的机理,利用高效液相色谱仪（HPLC）分析了四种茶叶提取物中的活性物质,通过查阅文献确定了起作用的几种活性物质单体,分别是表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）、表儿茶素没食子酸酯（ECG）、咖啡因（CF）、茶黄素（TF）、茶黄素-3-没食子酸酯（TF3G）、茶黄素-3’-没食子酸酯（TF3’G）、茶黄素-3,3’-没食子酸酯（TFDG）,继续探讨了活性物质单体与α-淀粉酶的相互作用机理。酶活试验表明,茶黄素类比儿茶素类对酶活的抑制更强,抑制顺序为TFDG＞TF3’G＞TF3G＞TF＞ECG＞EGCG,而 CF（咖啡因）促进了酶活,由 0.47 units 增至 0.62 units,酶动力学和荧光猝灭实验也有相类似的结果,TFDG的抑制作用最强,其对α-淀粉酶的猝灭常数KFQ和结合常数Ka均最大,分别为51.0mL/mg和15625.0mg/mL,综合表面等离子体共振研究表明,没食子酰基的存在会使酚类的结构更复杂,致使其与酶的亲和力更强,抑制效果更强。HPLC结果以及大量文献表明相比于其他两种茶叶,红茶和乌龙茶中含有更多的茶黄素类活性物质,红茶多于乌龙茶,这可能是导致BTE对小麦淀粉的消化性和α-淀粉酶的酶活有较强抑制效果的原因。

关键词：茶叶活性物质淀粉消化酶抑制作用亲和力抗糖尿病作用

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植物多糖的研究

植物多糖的研究

作者：田卫兰州大学

学位级别：硕士

本学位论文首先综述了几种植物多糖结构及其抗糖尿病作用的研究概况，并总结和讨论了四种植物(茶叶、香菇、知母、苦瓜)多糖的系统实验研究。实验部分包括以下工作：1．四种植物多糖的提取、分离与纯化;2．四种植物多糖的理化性质及其... 详细信息

本学位论文首先综述了几种植物多糖结构及其抗糖尿病作用的研究概况，并总结和讨论了四种植物(茶叶、香菇、知母、苦瓜)多糖的系统实验研究。实验部分包括以下工作：1．四种植物多糖的提取、分离与纯化;2．四种植物多糖的理化性质及其结构研究;3．四种植物多糖的生物活性：通过对四种植物粗多糖对胰岛素分泌的体外实验，发现只有茶叶多糖对葡萄糖诱导的胰岛素分泌具有统计上的差异。茶叶多糖对胰岛素具有调节作用，当低糖时，茶叶多糖可以提高胰岛素的分泌，而高糖时可以降低胰岛素的分泌。其它多糖对胰岛素分泌没有直接调节作用。考察了三种植物粗多糖(茶叶，香菇，知母)对糖尿病大鼠的影响，结果表明茶叶、香菇治疗组，对照组的胰岛素含量、血糖都没有显著性差异，但知母治疗组的最终血清中的胰岛素相对增加，达到正常组水平，可能存在缓解糖尿病症状的作用。对苦瓜粗多糖体外抗肿瘤作用进行了研究，结果发现苦瓜多糖各剂量组对MGC-803，HEP-G2，S180三种肿瘤细胞株均有一定的抑制作用，但对MGC-803效果最好。在这个基础上，又对苦瓜多糖通过诱导MGC-803肿瘤细胞凋亡和形态学观察作了相关研究。实验结果表明苦瓜粗多糖通过诱导MGC-803肿瘤细胞凋亡，抑制肿瘤细胞生长增殖。苦瓜粗多糖可作为抗MGC-803肿瘤细胞的辅助药物。

关键词：植物多糖糖尿病大鼠粗多糖葡萄糖残基香菇多糖细胞凋亡粉防己碱苦瓜属胰岛素分泌抗糖尿病作用

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玉米须活性成分的提取分离及其生物活性研究

玉米须活性成分的提取分离及其生物活性研究

作者： Yuxiang Pan 天津大学

学位级别：硕士

玉米须,又名玉蜀黍须,是禾本科植物玉蜀黍Zea mays L.的花柱和柱头。全国大部分地区均产,夏、秋果实成孰时收集,除去杂质,鲜用或晒干生用。玉米在我国大江南北广为栽培,因此玉米须资源十分丰富。玉米须是我国一种传统的中草药,被1985版... 详细信息

玉米须,又名玉蜀黍须,是禾本科植物玉蜀黍Zea mays L.的花柱和柱头。全国大部分地区均产,夏、秋果实成孰时收集,除去杂质,鲜用或晒干生用。玉米在我国大江南北广为栽培,因此玉米须资源十分丰富。玉米须是我国一种传统的中草药,被1985版(一部)的《中华人民共和国卫生部药材标准》收录为常用药材品种,作为我国的传统中药材,民间常用于治疗高血压和糖尿病。玉米须最早的入药记载是在《滇南本草》,谓其性微温,味甜,入阳明胃经,宽肠下气,治疗妇人乳汁不通、乳结红肿、睡卧压着、小儿吹着、头痛体困、怕冷发热等。医家认为玉米须味甘与淡,性平。不仅入阳明胃经,而且还归肝、胆、肾经,功能清肝利胆、利水消肿。现代药理研究也证实玉米须具有多种药理活性,如降血糖、降血压、降血脂、抗肿瘤、保肝、清热利胆、免疫调节等。玉米须化学成分复杂多样,主要含有黄酮类化合物、甾体类化合物、多糖、皂苷类化合物、有机酸、生物碱、氨基酸、维生素等。研究表明玉米须中的主要活性成分包括多糖、多酚类、黄酮类、皂苷等。为了明确玉米须中的化学成分及其生物活性,本文对玉米须的化学成分与其抗氧化、降血糖活性进行了系统的研究。银纳米颗粒在电学、光学、生物医学和催化等领域展现出了十分优异的性能,尤其在生物医学方面,具有广阔的应用空间。银纳米颗粒由于其生物兼容性、表面易修饰、小尺寸效应和极大的比表面积等特性,容易与病原微生物接触,从而发挥更大的生物效应,因此具有抗菌范围广和持续杀菌时间长的优点。然而,在对银纳米颗粒的利用过程中,人们逐渐发现银纳米颗粒的表面必须做到无化学试剂残留方可对其进行进一步的生物应用,从而达到预期的效果,而其中银纳米颗粒的品质直接取决于制备方法。生物还原法是近年来兴起的一种新的银纳米颗粒的合成方法,分为微生物法和植物取液法,生物还原法条件温和、安全、环保、能耗低。其中,植物取液法相比于微生物法更具优势,它不需要复杂的过程,如微生物细胞培养和多个净化步骤。植物取液的来源广泛,取便利,用植物取液合成的银纳米颗粒无毒、无污染,更利于银纳米颗粒在医学上的应用。目前,采用的植物主要包括西袖皮、红枣、橙子和称猴桃等。尚未见用玉米须取液来合成得到银纳米颗粒的报道。玉米须在中国的分布广泛,价格低廉,无毒,便于储存,不会造成环境污染,并且有药用价值,以玉米须取液来制备银纳米颗粒具有合成效果好和绿色安全无毒的优势。本文首先对玉米须中的多糖进行了结构表征和抗氧化、降血糖等生物活性的研究。采用80%乙醇取干燥玉米须粉末得到玉米须醇物和滤渣,滤渣再采用水醇沉法得到玉米须粗多糖,Savage法除去蛋白,反复醇沉除去小分子,得到的粗多糖再经过超滤得到分子量小于30000、30000-80000、大于80000道尔顿的多糖,通过体外抗氧化实验(DPPH自由基清除实验、铁还原力实验)和α淀粉酶抑制实验发现,分子量为30000-80000道尔顿间的多糖(PCS2)活性最好,故对其进行结构表征及进一步活性研究。采用GPC分子排阻色谱法确定PCS2的平均分子量为45500 Da左右,FT-IR红外数据表明了多糖的特征峰,扫电镜观察得到了多糖多孔且光滑的表面结构,气相色谱法确定了多糖的单糖组成及比例为半乳糖:甘露糖:葡萄糖:木糖:阿拉伯糖:鼠李糖=1.00:0.67:0.63:0.42:0.16:0.08。对于PCS2的降血糖活性研究,采用了高糖高脂饲料配合链脲佐菌素注射诱导的二型糖尿病小鼠模型,实验结果显示PCS2可以显著改善糖尿病小鼠的饮食摄水,显著降低了糖尿病小鼠的空腹血糖值。葡萄糖耐受实验结果表明PCS2显著改善了小鼠的葡萄糖耐受。通过测定血清指标发现游离脂肪酸、低密度脂肪酸、糖化血清蛋白等的水平较糖尿病小鼠阴性对照组都有了显著降低,同时体内抗氧化酶如谷胱甘肽过氧化物酶、过氧化氢酶、超氧化物歧化酶的活性都有了显著的增高。这些结果说明了PCS2作为一种天然的功能食品有用于治疗糖尿病的潜力。其次是对玉米须醇溶性成分进行分级(石油醚,乙酸乙酯,正定醇)萃取,对比不同极性部分的化学成分和生物活性,再采用活性追踪的方法对正丁醇层进行分离纯化。首先为了明确玉米须的活性部位,本文首先对比研究了玉米须不同极性部位(石油醚,乙酸乙酯,正定醇)的化学成分与抗氧化活性。实验结果表明玉米须石油醚层具有最高的总甾醇含量但是体外抗氧化活性和消化酶抑制活性(α-淀粉酶抑制实验、α-葡萄糖苷酶抑制实验)最低,而乙酸乙酯层和正丁醇层的总多酚、总黄酮含量及体外抗氧化活性(DPPH自由基清除实验,铁还原力实验)、消化酶抑制活性(α-淀粉酶抑制实验、α-葡萄糖苷酶抑制实验)相对较高,这说明了多酚和黄酮类物质可能是玉米须中起到抗氧化和消化酶抑制作用的主要成分。同样采用高糖高脂饲料配合链脲佐菌素注射诱导的二型糖尿病小鼠模型对正丁醇层萃取物进行体内降血

关键词：玉米须多糖正丁醇层萃取物抗糖尿病作用银纳米颗粒