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紫外分光光度法测定链霉菌NG-715抗真菌组分的含量

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中国生化药物杂志 2014年第4期34卷 168-170,174页

作者：袁敏罗建成侯俊然李晶陈志国南阳理工学院医学实验中心河南南阳473004 南阳理工学院生物与化学工程学院河南南阳473004

目的运用紫外分光光度法测定链霉菌NG-715抗真菌组分的含量。方法以链霉菌NG-715抗真菌组分为指标性成分,在339 nm波长处进行含量测定。结果紫外分光光度法测定链霉菌NG-715抗真菌组分浓度在8μg/mL^20μg/mL的范围内具有良好的线性关系... 详细信息

目的运用紫外分光光度法测定链霉菌NG-715抗真菌组分的含量。方法以链霉菌NG-715抗真菌组分为指标性成分,在339 nm波长处进行含量测定。结果紫外分光光度法测定链霉菌NG-715抗真菌组分浓度在8μg/mL^20μg/mL的范围内具有良好的线性关系,平均回收率为99.98%(n=6),RSD=0.11%。结论本法快速准确,重现性好,简便易行,可用于链霉菌NG-715抗真菌组分含量的测定。

关键词：链霉菌NG-715 抗真菌组分紫外分光光度法

嘧肽霉素发酵液抗真菌组分的高效液相色谱分析

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农药 2011年第7期50卷 508-509,519页

作者：穆凌霄伏颖吴元华沈阳农业大学沈阳110866

[目的]采用反相高效液相色谱法分析嘧肽霉素发酵液,外标法测定其中抗真菌组分的含量。[方法]使用DIKMA DiamonsilⅡC18反相柱和紫外可变波长检测器,以甲醇-水(体积比为20∶80)为流动相,流速为1 mL/min,检测波长为278 nm。[结果]嘧肽霉... 详细信息

[目的]采用反相高效液相色谱法分析嘧肽霉素发酵液,外标法测定其中抗真菌组分的含量。[方法]使用DIKMA DiamonsilⅡC18反相柱和紫外可变波长检测器,以甲醇-水(体积比为20∶80)为流动相,流速为1 mL/min,检测波长为278 nm。[结果]嘧肽霉素抗真菌组分保留时间为10.2 min,方法的线性相关系数为0.999 8,样品平均回收率为99.4%,变异系数为0.25%。[结论]该方法是用于发酵控制和用药指导的理想分析方法。

关键词：嘧肽霉素高效液相色谱分析抗真菌组分

固相萃取-超高效液相色谱-串联质谱法同时测定化妆品中24种抗真菌组分

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香料香精化妆品 2023年第5期 158-165页

作者：贺丽英重庆市食品药品检验检测研究院重庆401121

采用固相萃取(SPE)技术和超高效液相色谱-串联质谱建立了同时测定化妆品中24种抗真菌组分的检测方法。样品经乙腈提取,PSA固相萃取小柱净化,用Thermo Hypersil Gold C18(100 mm×2.1 mm×1.9μm)色谱柱分离,以体积分数0.1%乙酸水-0.1%... 详细信息

采用固相萃取(SPE)技术和超高效液相色谱-串联质谱建立了同时测定化妆品中24种抗真菌组分的检测方法。样品经乙腈提取,PSA固相萃取小柱净化,用Thermo Hypersil Gold C18(100 mm×2.1 mm×1.9μm)色谱柱分离,以体积分数0.1%乙酸水-0.1%乙酸乙腈溶液为流动相梯度洗脱,在电喷雾正离子模式下以多反应监测(MRM)方式对化妆品中的24种抗真菌类组分进行定量测定。这24种待测组分在各自的质量浓度范围内线性关系良好,相关系数均大于0.99,在3个不同添加水平下,平均回收率为77.9%~115.9%,相对标准偏差(RSD)为1.1%~9.4%(n=6),方法的检出限和定量限分别为0.015~0.15μg/g和0.05~0.5μg/g。该方法简单快速,灵敏可靠,适用于化妆品中24种抗真菌组分的同时定性定量筛查分析。

关键词：化妆品抗真菌组分固相萃取超高效液相色谱-串联质谱

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嘧肽霉素又一种抗真菌组分分离纯化研究

嘧肽霉素又一种抗真菌组分分离纯化研究

赖氨酸芽孢杆菌He14发酵产物抗真菌活性的初步研究

中国植物病理学会2012年学术年会

作者：穆凌霄陈建光赵艳琴赵秀香吴元华沈阳农业大学植物保护学院

嘧肽霉素是沈阳农业大学自主研发的具有高效、低毒、低残留等优点的新型生物农药,已获得国家发明专利,其产生菌是由土壤中分离筛选出来的不吸水链霉菌辽宁变种(Streptomycesachygroscopicus ***)。嘧肽霉素具有多种生物活性,既可以用于... 详细信息

嘧肽霉素是沈阳农业大学自主研发的具有高效、低毒、低残留等优点的新型生物农药,已获得国家发明专利,其产生菌是由土壤中分离筛选出来的不吸水链霉菌辽宁变种(Streptomycesachygroscopicus ***)。嘧肽霉素具有多种生物活性,既可以用于防治烟草、辣椒、番茄等作物病毒病害,同时对烟草赤星病菌(Aternatia alternata)、番茄灰霉病菌(Botrytiscinerea)和茄子黄萎病菌(Verticlilium dahliae)等31种真菌病害均有较好的防治效果。该菌株发酵液中抗菌物质对温度变化、光照、紫外光以及碱性条件都比较稳定,且有较好的耐储藏性,纸层析和纸电泳试验结果表明抗真菌组分为碱性水溶性抗生素。为了明确抗真菌组分的分离纯化工艺、获得纯品并确定纯品的理化性质和抗真菌机理,本研究以烟草赤星病菌为生物活性检测靶标,利用多种色谱方法对嘧肽霉素抗烟草赤星病菌物质的分离纯化工艺进行研究,在获得纯品的基础之上对其理化性质进行了测定,同时通过波谱法对该组分进行了结构解析,并对其高效液相色谱定性和定量分析方法进行了探索。此外,对活性组分抗真菌机理进行了初步研究。实验结果表明,发酵液在4 000r/min常温条件下离心15min后获得上清液,将上清液草酸酸化到pH值≈3,60℃水浴6h,可以充分沉淀蛋白质等杂质;然后依次经过大孔吸附树脂SP825L吸附,50%甲醇洗脱、TOSOH SP650M离子交换柱吸附,0～1 mol/L。NaCI梯度洗脱、Daisogel ODS-B反相柱纯化,20%甲醇洗脱,最终得到纯度达96%以上的纯品;该活性物质为白色粉末状,易溶解于DMSO,溶解于甲醇,难溶解于水、丙酮、丁醇,不溶于氯仿、乙酸乙酯等溶剂;对热、酸、碱均稳定(极酸条件下活性降低),熔点为232～240℃;经紫外光谱、红外光谱、质谱和核磁共振试验得到了该组分的分子式为CHNO;活性组分高效液相色谱分析方法研究表明,最佳色谱条件为:色谱柱选用C18柱(200mm×4.6mm,5μm),检测波长为278nm,以甲醇:水(体积比为20:80),柱温30℃。在此色谱条件下,峰的分离度良好,活性组分保留时间约为10.2min,方法的线性相关系数为0.9998,样品平均回收率为99.4%,变异系数为0.25%;该活性组分抗真菌机理主要是通过抑制细胞膜上麦角固醇的合成以及引发脂质过氧化而使烟草赤星病菌细胞膜受损、菌丝生长受阻,从而直接导致病菌致病力降低;另外,还能够干扰菌丝体内蛋白合成,使菌丝体内可溶性蛋白含量降低。

关键词：嘧肽霉素抗真菌组分高效液相色谱分离纯化

来源： cnki会议评论

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食品与发酵工业 2019年第18期45卷 22-26页

作者：郑雯杨兴变康冀川李洪庆贵州大学药学院贵州贵阳550025 贵州大学西南特色药用生物资源开发利用教育部工程研究中心贵州贵阳550025 贵州民族大学化学工程学院贵州贵阳550025

初步研究赖氨酸芽孢杆菌(Lysinibacillus fusiformis)He14发酵产物的抗真菌活性。采用生长速率法研究He14发酵液对8株病原真菌的拮抗作用。对抑真菌活性成分进行稳定性试验。考察萃取、沉淀和大孔吸附树脂对发酵液活性成分的富集情况。... 详细信息

初步研究赖氨酸芽孢杆菌(Lysinibacillus fusiformis)He14发酵产物的抗真菌活性。采用生长速率法研究He14发酵液对8株病原真菌的拮抗作用。对抑真菌活性成分进行稳定性试验。考察萃取、沉淀和大孔吸附树脂对发酵液活性成分的富集情况。采用硅胶柱层析对活性成分进行初步纯化。菌株He14发酵液对8株病原真菌的生长均有抑制作用。抑真菌活性成分对高温、强酸强碱及紫外有一定稳定性。筛选到LX-60大孔吸附树脂对活性物质的富集效果最好。活性粗产物经硅胶柱层析得到3个混合组分,对辣椒灰霉病菌、马铃薯晚疫病菌、马铃薯早疫病菌、水稻纹枯病菌和须毛癣菌有不同程度的抑制作用,其中组分Ⅱ对马铃薯晚疫病菌抑制效果较好。赖氨酸芽孢杆菌He14在拮抗病原真菌方面有许多优良性状,研究结果为该菌在生物防治及医药方面的应用提供了实验基础。

关键词：赖氨酸芽孢杆菌抗真菌组分稳定性活性富集活性组分

链霉菌NG-715的抗真菌活性及稳定性研究

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中国生化药物杂志 2014年第2期34卷 37-39页

作者：袁敏卞华李晶张雪鹏程琳南阳理工学院医学实验中心河南南阳473004

目的研究链霉菌NG-715的抗真菌活性及稳定性,建立其生物活性的检测方法。方法以链霉菌NG-715所产抗真菌组分为材料,测试其对啤酒酵母、桔青霉、黑曲霉、黑根霉的最低抑制浓度和最低杀灭浓度。以黑曲霉为指示菌,测其生物检测法和稳定性... 详细信息

目的研究链霉菌NG-715的抗真菌活性及稳定性,建立其生物活性的检测方法。方法以链霉菌NG-715所产抗真菌组分为材料,测试其对啤酒酵母、桔青霉、黑曲霉、黑根霉的最低抑制浓度和最低杀灭浓度。以黑曲霉为指示菌,测其生物检测法和稳定性。结果链霉菌NG-715所产抗真菌组分对啤酒酵母、桔青霉、黑曲霉、黑根霉的最低抑制浓度和最低杀灭浓度分别为1.25、2.5、3.75、3.75μg/mL和2.5、10、17.5、17.5μg/mL。生物检测法求得抑菌圈直径(mm)-浓度(μg/mL)的对数值之间的线性回归方程为y=26.963x-27.6,R2=0.9991。该抗真菌组分耐热和酸碱,对紫外线较敏感。结论本研究为下一步对该抗真菌活性成分的分离提取提供了有益的试验数据。

关键词：链霉菌抗真菌组分最低抑制浓度最低杀灭浓度稳定性