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Viperin介导细胞抗病毒效应研究进展

中国动物传染病学报 2021年第4期29卷 68-73页

作者：余影影钟自富朱启运徐帅中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室兰州730046

先天性免疫是宿主抵抗外来病原入侵的第一道防线,是免疫系统的重要组成成分。Viperin是受干扰素(interferon,IFN)等多种因素诱导的抗病毒蛋白。Viperin可以通过介导信号转导、控制细胞代谢、调控IFN水平等多种途径来抑制DNA病毒、RNA病... 详细信息

先天性免疫是宿主抵抗外来病原入侵的第一道防线,是免疫系统的重要组成成分。Viperin是受干扰素(interferon,IFN)等多种因素诱导的抗病毒蛋白。Viperin可以通过介导信号转导、控制细胞代谢、调控IFN水平等多种途径来抑制DNA病毒、RNA病毒以及细菌等多种病原微生物的增殖,同时参与调节温度并影响巨噬细胞的极化及细胞因子的分泌等。由于Viperin是一种新近发现的信号蛋白,其具体的抗病毒机制尚未明确。近年来随着分子生物学技术的发展,对该蛋白的研究引起了广泛关注并取得了较大进展。本文仅就Viperin的结构功能、抗病毒机制、调控机制等几个方面进行阐述,为Viperin的深入研究提供参考。

关键词： Viperin 先天性免疫抗病毒效应信号转导

恩替卡韦治疗HBeAg阳性慢性乙型肝炎抗病毒效应评估

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中华医院感染学杂志 2023年第5期33卷 652-656页

作者：王健吴东洋郑建兴张金凤王利民唐山中心医院介入手术室河北唐山063000 唐山中心医院肝胆外科河北唐山063000

目的探讨恩替卡韦治疗乙型肝炎e抗原(HBeAg)阳性慢性乙型肝炎(CHB)的抗病毒效应。方法回顾性选取2020年1月-2021年12月在唐山中心医院确诊的90例CHB患者,所有患者均予以恩替卡韦口服,持续治疗4周后,根据抗病毒效应分为完全应答组62例和... 详细信息

目的探讨恩替卡韦治疗乙型肝炎e抗原(HBeAg)阳性慢性乙型肝炎(CHB)的抗病毒效应。方法回顾性选取2020年1月-2021年12月在唐山中心医院确诊的90例CHB患者,所有患者均予以恩替卡韦口服,持续治疗4周后,根据抗病毒效应分为完全应答组62例和未完全应答组28例。比较两组基线资料,检测治疗前、治疗4周后HBeAg、乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸(HBV-DNA)水平、炎症因子[白细胞介素(IL)-17、IL-10、IL-21与IL-6]与Toll样受体4(TLR4)/IL-6信号通路表达。结果治疗后,完全应答组HBeAg、HBV-DNA水平降低程度均高于未完全应答组(P抗病毒效应机制可能与下调了TLR4/IL-6信号通路有关。

关键词：乙型肝炎e抗原慢性乙型肝炎乙型肝炎病毒乙肝病毒DNA Toll样受体4/白细胞介素-6 抗病毒效应恩替卡韦

青蒿琥酯体外分次给药对人巨细胞病毒的抗病毒效应

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中华实用儿科临床杂志 2014年第22期29卷 1703-1707页

作者：曾爱红欧阳颖郭明明戴瑄邹德志方建培中山大学附属第一医院急诊科广州510080 中山大学附属孙逸仙纪念医院儿科

目的研究青蒿琥酯（ART）体外对人巨细胞病毒（HCMV）实验室标准株及耐药株的抗病毒作用，了解分次给药法是否能增强ART抗病毒效应。方法 1.采用四甲基偶氮唑盐（MTT）法测定ART的细胞毒性，计算ART对人胚肺成纤维细胞（HEL）的最大无... 详细信息

目的研究青蒿琥酯（ART）体外对人巨细胞病毒（HCMV）实验室标准株及耐药株的抗病毒作用，了解分次给药法是否能增强ART抗病毒效应。方法 1.采用四甲基偶氮唑盐（MTT）法测定ART的细胞毒性，计算ART对人胚肺成纤维细胞（HEL）的最大无毒浓度（TC0）与半数中毒浓度（TC50）。***抗 HCMV 作用检测：以HCMV标准株及耐药株感染HEL后，再加入含有不同浓度 ART的新鲜培养基，设更昔洛韦（GCV）对照、细胞对照和病毒对照，培养7～10 d，待病毒对照组病变达＋＋＋～＋＋＋＋时，采用 MTT比色法测定OD490值，计算受试药物病毒抑制率，Probit回归法计算药物对HCMV的半数抑制浓度（IC50）。3.测定ART分次给药对HCMV AD169株的抗病毒效应：实验分3组，1组：药物总量一次性给予；2组：药物总量分3次，每天给药1次；3组：药物总量分6次，每天给药3次。以GCV组作为对照，MTT法测定各组OD490值，并计算各药物浓度组的病毒抑制率，采用SPSS18.0统计软件，对各组OD值进行单因素方差分析，比较各组间差异。结果 ***在62.5 μmol/L以内未见明显细胞毒性作用，TC0和 TC50分别为 62.5 μmol/L和 171.7 μmol/L。2.在5 μmol/L、15 μmol/L及30 μmol/L时，ART与GCV对 HCMV AD169株生长均有明显的抑制作用，二者比较差异无统计学意义，其中GCV IC50为3.49 μmol/L，而ART IC50为2.17 μmol/L，ART治疗指数为28.8，GCV 治疗指数为716.3。另外，ART对 HCMV耐药株生长仍有明显的抑制作用，而GCV抑制作用明显下降，二者比较差异有统计学意义，其中GCV IC50为44.4 μmol/L，ART IC50为2.5 μmol/L。3.在15 μmol/L 及30 μmol/L 浓度下，ART每天 2次给药较每天 1次给药及单次给药，对病毒的抑制率有显著提高，差异有统计学意义（P 〈0.01）；而GCV同样按上述方法给药，则对病毒抑制率影响不大（P 〉0.05）。结论 ***浓度在 62.5μmol/L以下时，对HEL无明显毒性。***对HCMV标准株及耐药株均有明显的抗病毒效应。***每天分次给药比单次给药及一次给药更能发挥其抗病毒作用。***不良反应轻微，加上其与现有抗HCMV 药物可能不同的独特的抗病毒作用机制，临床应用不易产生耐药性，因此非常有望成为新一代的抗 HCMV药物。

关键词：人巨细胞病毒青蒿琥酯抗病毒效应

人白细胞干扰素两种不同制剂对慢性乙型肝炎抗病毒效应的对比观察

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病毒学杂志 1989年第4期4卷 383-389页

作者：黄华芳熊开钧王心禾曾令兰李嫒贺永文杨泽川凌美霞范家珍吴章琦同济医科大学附属协和医院传染病教研室中国科学院武汉病毒研究所

本文报道了人白细胞干扰素两种不同制剂对44例慢性乙肝近,远期抗病毒效应的对比观察结果,其中Ⅰ组23例,Ⅱ组21例,Ⅰ组剂量为1×10~6u/次,im每周3次,共四周后改为1×10~6u/次,每周2次,共6周,总计10周为一疗程,Ⅱ组6×10~4u/次im,每周3次,... 详细信息

本文报道了人白细胞干扰素两种不同制剂对44例慢性乙肝近,远期抗病毒效应的对比观察结果,其中Ⅰ组23例,Ⅱ组21例,Ⅰ组剂量为1×10~6u/次,im每周3次,共四周后改为1×10~6u/次,每周2次,共6周,总计10周为一疗程,Ⅱ组6×10~4u/次im,每周3次,6个月一个疗程,治毕近期效应在HBeAg,HBcAg,DNA-P及HBV-DNA阴转率及总有效率方面,Ⅰ组分别为52.1％,30％,0％,7.1％及52.1％;Ⅱ组分别为72.2％,50％,60％,28.5％及68.3％。治后进行半年以上追踪观察,Ⅰ组20例,Ⅱ组21例,远期效应,在HBeAg,HBcAg,DNAP,HBV-DNA,阴转率及总有效率方面,Ⅰ组分别为40％,33.3%,66.6％,33.3％及40％;Ⅱ组分别为70％,66.6％,80%,60％及71.4％,经统计学处理,两组近、远期HBV复制指标阴转率及总有效率均无显著差异(HBeAg除外),Ⅰ组抗病毒效应并不优于Ⅱ组。扼要讨论两组疗效相近的因素,认为Ⅰ组适当调整剂量及疗程有可能提高疗效,并讨论了治程中肝功能改变的意义,两组均未出现明显的副反应,是较安全的。

关键词：干扰素乙型肝炎抗病毒效应

抗病毒新药17997抗病毒效应的细胞微量量热的研究

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中国临床药理学与治疗学 1999年第2期4卷 101-103页

作者：鲁建华谭安民陶佩珍兰州医学院第二附属医院兰州730030 北京医科大学天然药物及仿生药物国家重点实验室中国医科院医药生物技术研究所病毒室

目的研究抗病毒新药17997对细胞代谢的影响和抑制病毒复制时细胞热效应的变化。方法利用微量量热的方法。结果热代谢曲线表明 ,在有效抑制病毒复制浓度下 ,17997不影响宿主细胞的正常代谢 ,且能明显地降低病毒复制时的细胞热代谢。结论1... 详细信息

目的研究抗病毒新药17997对细胞代谢的影响和抑制病毒复制时细胞热效应的变化。方法利用微量量热的方法。结果热代谢曲线表明 ,在有效抑制病毒复制浓度下 ,17997不影响宿主细胞的正常代谢 ,且能明显地降低病毒复制时的细胞热代谢。结论17997能够抑制病毒复制 ,对宿主细胞的热代谢没有影响。

关键词：抗病毒新药17997 抗病毒效应细胞微量量热法单纯疱疹病毒I型

DMF对肠道病毒D68复制的调控及抗病毒效应研究

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DMF对肠道病毒D68复制的调控及抗病毒效应研究

作者：王静吉林大学

学位级别：硕士

研究目的:通过探究二甲基甲酰胺（Dimethylformamide,DMF）对肠道病毒EVD68在不同细胞系中的抑制作用和抗病毒阶段,为抗肠道病毒药物在临床研究中的开发与应用提供新思路。研究方法:（1）观察细胞病变效应（CPEs）:用相同MOI病毒感染不... 详细信息

研究目的:通过探究二甲基甲酰胺（Dimethylformamide,DMF）对肠道病毒EVD68在不同细胞系中的抑制作用和抗病毒阶段,为抗肠道病毒药物在临床研究中的开发与应用提供新思路。研究方法:（1）观察细胞病变效应（CPEs）:用相同MOI病毒感染不同剂量DMF处理组（25 mM,50 mM,75 mM,100 mM,125 mM,150 mM）和未用药处理的对照组细胞,于感染后48 h观察细胞病变情况。（2）对病毒复制情况的影响:用相同MOI病毒感染同一浓度DMF处理的细胞,于0 h、4 h、6 h、8 h、10 h在病毒一轮复制时收取细胞,提取总RNA后用Real-Time PCR检测病毒RNA复制水平。（3）对病毒蛋白VP1表达水平的影响:用相同MOI的病毒感染用DMF处理的实验组和未用药处理的对照组细胞,通过蛋白免疫印迹（Western blot）法检测病毒蛋白VP1的表达水平。（4）对子代病毒产生的影响:使用相同MOI的病毒感染用不同浓度DMF处理的实验组细胞和未用DMF处理的对照组细胞,48 h后收取上清于-80℃保存备用。将前一天96孔板铺的细胞弃掉培养基后用PBS清洗,将上清病毒用无血清DMEM进行10倍梯度稀释,然后加入96孔板中去感染细胞,每个稀释梯度四个复孔,每日观察细胞病变效应,72 h后用ReedMuench法计算病毒滴度。（5）DMF细胞毒性检测:细胞铺于96孔板,然后加入不同浓度（25 mM,50 mM,75 mM,100 mM,125 mM,150 mM,175 mM,200 mM,250 mM）DMF,48 h后用MTS法检测细胞活力。（6）DMF处理后对病毒吸附和进入阶段的影响:将A549细胞、BEAS-2B细胞及RD细胞分别用DMF处理,以未用药处理细胞作为对照,然后分别与EV-D68在4℃或37℃下孵育2 h,以促进病毒附着或进入。采用Real-Time PCR检测感染后病毒RNA水平。（7）对不同细胞系的影响:用EV-D68感染DMF组或未加DMF的对照组的RD和A549细胞48 h,观察CPE、病毒蛋白VP1表达及上清病毒滴度。（8）检测其他EV-D68毒株MO,KY感染后细胞及上清VP1的表达。结果:1、DMF抑制EV-D68的复制:1)DMF抑制A549细胞中EV-D68的细胞病变效应,且会使细胞上清中子代病毒滴度显著降低,使EV-D68的病毒蛋白VP1的表达呈剂量依赖性抑制。在使用MTS检测三种细胞中所用DMF药物浓度是否会对细胞有毒性,结果表明,在使用安全浓度范围内,DMF对EV-D68感染的细胞具有显著的抑制作用。2)在病毒对细胞的吸附与入侵实验中,以未用药处理组作为对照,发现相比于对照组,加药组的病毒RNA并没有被显著抑制。3)对EV-D68感染后的细胞在0 h、6 h、8 h、12 h、24 h、48 h各时间点收取细胞和上清,发现与对照组相比,在可检测到的时间点内,DMF处理的细胞裂解液和细胞上清的VP1表达都被显著抑制。在病毒一轮复制的时间点内,RNA的复制在加药处理组也被显著抑制。2、DMF对肠道病毒的流行株MO/KY同样具有显著的抑制效果,在细胞裂解液和上清中VP1的表达被抑制,同样子代病毒颗粒的产生也被抑制。结论:1、DMF能够抑制EV-D68病毒感染后细胞的病毒蛋白水平的表达以及子代病毒的产生;2、DMF能够在RNA水平抑制EV-D68;3、DMF对EV-D68病毒的吸附及进入细胞并没有显著的抑制作用;4、在A549、RD及BEAS-2B细胞的实验中,DMF对EV-D68的原型株（Fermon）和流行株（MO/KY）均有显著的抑制效果。

关键词： EV-D68 DMF 病毒复制抗病毒效应

慢性丙型肝炎中ISG分析确定蛇毒素为一种潜在的抗病毒效应物质

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世界核心医学期刊文摘（胃肠病学分册） 2006年第1期2卷 41-42页

作者： Helbig K.J. Lau D.T.-Y. Semendric L. M.R. Beard 郑世成 School of Molecular and Biomedical Science University of Adelaide North Terrace Adeleide SA 5005 Australia Dr.

Interferon (IFN) α inhibits hepatitis C virus (HCV) replication both clinically and in vitro; however, the complete spectrum of interferon-stimulated genes (ISGs) expressed in the HCV infected liver or the genes responsible for control of HCV replication have not been defined. To better define ISG expression in the chronically infected HCV liver, DNA microarray analysis was performed on 9 individuals with chronic hepatitis C (CHC). A total of 232 messenger RNAs were differentially regulated in CHC compared with nondiseased liver controls. A significant proportion of these were potential ISGs that were transcriptionally elevated, suggesting an ongoing response to endogenous IFN and/or double-stranded RNA. One ISG significantly elevated in all patients was viperin, an evolutionary conserved ISG that has antiviral activity against human cytomegalovirus. Stimulation of Huh-7 and HepG2 cells with IFN-α or -γ revealed viperin is predominantly a type I ISG. Furthermore, viperin expression could also be induced following transfection of Huh-7 cells with either poly(I:C) or HCV RNA. Transient expression of viperin in cells harboring the HCV genomic replicon resulted in a significant decrease in HCV replication, suggesting that viperin has anti-HCV activity. In conclusion, even in the face of a persistent HCV infection, there is an active ISG antiviral cellular response, highlighting the complexity of the host viral relationship. Furthermore, ISG viperin has anti-HCV activity in vitro; we postulate that viperin, along with other ISGs, acts to limit HCV replication.

关键词：慢性丙型肝炎 ISG 抗病毒效应体外试验细胞反应持续性感染人巨细胞病毒短暂表达转染保守

基因工程人干扰素α2b和α2a亚型抗病毒效应的实验研究

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生物学杂志 1998年第3期15卷 19-21页

作者：盛伟华杨吉成张云苏州医学院基因工程研究室

本文采用鸡胚接种法和微量细胞病变抑制法研究了不同亚型α干扰素（α２ａＩＦＮ和α２ｂＩＦＮ）抗流感病毒、脊髓灰质炎病毒以及麻疹病毒的作用。结果表明：两种亚型α干扰素均显示明显的抗病毒效应，其中（１）α２ｂＩＦＮ抗... 详细信息

本文采用鸡胚接种法和微量细胞病变抑制法研究了不同亚型α干扰素（α２ａＩＦＮ和α２ｂＩＦＮ）抗流感病毒、脊髓灰质炎病毒以及麻疹病毒的作用。结果表明：两种亚型α干扰素均显示明显的抗病毒效应，其中（１）α２ｂＩＦＮ抗流感病毒作用略强于α２ａＩＦＮ，（２）两亚型α干扰素抗脊髓灰质炎和麻疹病毒作用相似。

关键词： α2b α2a 抗病毒效应干扰素

rhIFNα_(2a)、IFNα_(2b)和IFNα_(1b)、IFNα_(1b)突变体的抗病毒效应的对比分析

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苏州医学院学报 2001年第6期21卷 629-631页

作者：吴妹英杨吉成盛伟华李丽娥谢宇锋苏州大学生命科学学院基因工程研究室苏州215007

目的　进一步研究不同亚型不同品牌基因工程干扰素的抗病毒效应。方法　采用微量细胞病变 (CPE)抑制法进行抗病毒试验。结果　不同品牌IFNα2a或IFNα2b5 0 0、5 0、5IU/ml在Vero细胞上分别可抗 10 0 0、10 0、10TCID50 的Ⅰ型和Ⅱ型单... 详细信息

目的　进一步研究不同亚型不同品牌基因工程干扰素的抗病毒效应。方法　采用微量细胞病变 (CPE)抑制法进行抗病毒试验。结果　不同品牌IFNα2a或IFNα2b5 0 0、5 0、5IU/ml在Vero细胞上分别可抗 10 0 0、10 0、10TCID50 的Ⅰ型和Ⅱ型单纯疱疹病毒感染细胞 ;5 0 0、5 0、5IU/mlIFNα1b或IFNα1b突变体 ,在Vero细胞上分别也可抗8、4、2TCID50 的Ⅰ型和Ⅱ型单纯疱疹病毒感染细胞。结论　进口和国产不同品牌的IFNα2a或IFNα2b对上述 2种病毒具有同等抗病毒作用。IFNα1b突变体抗病毒效果和IFNα1b无明显差别。

关键词： α-干扰素单纯疱疹病毒细胞病毒法抗病毒效应